小乌桂汤对胶原诱导性关节炎模型小鼠脾脏Th17/Treg平衡及血浆炎症因子的影响

目的 探讨小乌桂汤治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制.方法 60只雄性DBA/1小鼠随机分为正常组8只及造模组52只.造模组采用尾根部及背部分3点皮内注射鸡Ⅱ型胶原蛋白乳化液建立胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠模型.造模成功的40只小鼠随机分成模型组、甲氨蝶呤组、小乌桂汤低剂量组、小乌桂汤中剂量组、小乌桂汤高剂量组,每组...     

甘草附子汤对胶原诱导性关节炎小鼠Th17和Treg细胞的影响

目的 探讨甘草附子汤(Gancaofuzi decoction, GCFZ)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)小鼠辅助性T细胞17(T helper cell 17, Th17)和调节性T细胞(Regulatory T cell, Treg)失衡的调节作用。方法 该研究包括4组小鼠：正常对照组(Control组),模型对照组(CIA组),GCFZ 2.4 g·kg^-1组和GCFZ 4.8 g·kg^-1组。检测各组小鼠足肿胀度、关节炎指数;苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)观察小鼠踝关节组织病理学变化;流式细胞仪检测脾脏Th17和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清白介素17(interleukin-17,IL-17)、白介素6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)和白介素10(interleukin-10, IL-10)水平。结果 与正常组比较,CI...     

熊果酸对胶原诱导性关节炎大鼠外周血Th17/Treg细胞比例失衡的影响

目的:研究熊果酸(UA)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血淋巴细胞辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例失衡的影响。方法:雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,复制CIA模型,造模成功后CIA大鼠随机分为CIA模型组、UA低剂量组、UA高剂量组、甲氨喋呤(MTX)组、UA+MTX组并予以对应处理。于初次免疫21 d时,收集各组大鼠的外周血淋巴细胞,进行细胞染色,流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞比例,并分离CD~+_4T细胞,RT-PCR法检测RORr、FoxP3、SOCS3mRNA的表达。结果:(1)与空白组相比,模型组CIA大鼠外周血Th17细胞明显增高,与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Th17细胞比例明显下调;有显著统计学差异(P0.01)。(2)与空白组相比,模型组大鼠的外周血Treg细胞明显下调;与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Treg细胞比例增高,有统计学差异(P0.05);(3)与空白组相比,模型组RORr升高,FoxP3、SOCS3降低;与模型组相比,各治疗组RORr均降低,FoxP3(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)表达升高,SOCS3mRNA(UA低剂量组、UA高剂量组、UA+MTX组)表达升高。结论:UA高剂量组、UA+MTX组能抑制CD~+_4T细胞向Th17细胞分化,降低Th17细胞比例,升高Treg细胞比例,维持Th17/Treg细胞平衡,这是UA缓解实验性CIA关节炎症的可能机制。     

清热活血方对胶原诱导性关节炎大鼠肠道微生态及Th17/Treg平衡的影响

目的通过观察清热活血方对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠的肠道微生态和Th17/Treg平衡的影响,探讨其治疗类风湿关节炎(rhumatoid arthritis,RA)的机制。方法SD大鼠30只,采用随机数字表法分为与正常组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、清热活血方组、益生菌组,每组6只。除正常组外,其余组大鼠均以Ⅱ型胶原和完全弗式佐剂的混合乳化剂为抗原,尾根部注射制作CIA模型。MTX组每周给予MTX 1.0 mg/kg;清热活血方组和益生菌组每晨分别给予20 g/kg清热活血方和350mg/kg益生菌。连续灌胃4周后,采用16Sr DNA技术对大鼠肠道粪便菌群测序并分析;采用流式细胞术检测各组大鼠脾脏辅助性细胞亚群Th17(CD4~+IL-17~+)细胞和调节性T细胞Treg(CD4~+CD25~+Foxp3~+)的比例。结果与正常组比较,模型组菌群丰度降低(P0.05,P0.01),Th17水平升高,Treg水平降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,清热活血方组菌群丰度升高(P0.05,P0.01),Th17水平降低,Treg水平升高(P0.05);MTX组和益生菌组Treg水平均上调(P0.05),但下调Th17水平不明显(P0.05)。结论清热活血方缓解RA的关节症状可能与其改善肠道菌群失调,调节机体Th17/Treg免疫失衡有关。     

黄芪多糖对过敏性鼻炎大鼠Treg/Th17细胞免疫平衡和炎症因子的影响

目的:探讨黄芪多糖对过敏性鼻炎大鼠Treg/Th17细胞免疫平衡和炎症因子的影响。方法:将50只SD大鼠分为空白组、模型组、氯雷他定组和黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组,每组10只。应用卵白蛋白+氢氧化铝粉建立过敏性鼻炎基础致敏模型。观察大鼠基础行为学改变,观察HE染色的病理情况,采用ELISA法检测大鼠血清IgE、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)水平,流式细胞术检测血清Th17/Treg分布。结果:与模型组比较,氯雷他定组、黄芪多糖低剂量组、黄芪多糖高剂量组鼻黏膜组织上皮组织较为完整,有少量的炎性浸润;模型组行为学积分和血清IgE、IL-17、Th17水平显著升高(均P<0.05),IL-10、Treg水平显著降低(均P<0.05)。与模型组比较,黄芪多糖高剂量组大鼠IL-10、Treg水平显著升高(均P<0.05),行为学积分和血清IgE、IL-17、Th17水平显著降低(均P<0.05)。结论:黄芪多糖可有效缓解过敏性鼻炎大鼠模型的症状,机制可能与提高免疫功能、抑制炎症反应有关。     

防己黄芪汤对胶原诱导性关节炎小鼠的影响

目的:观察防己黄芪汤对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠的影响。方法:6~7周龄的DBA/1J小鼠适应性喂养1周后随机分为4组造模,对照组、模型组、甲氨喋呤组、防己黄芪汤组各10只小鼠。除对照组外,其余小鼠给予牛属Ⅱ型胶原+完全弗氏佐剂进行CIA小鼠第一次免疫,第21天给予牛属Ⅱ型胶原+不完全弗氏佐剂进行加强免疫,次日各组开始给药20d,每5d观察小鼠体质量、关节炎指数、足掌厚度、受累肢体数目。结果:与模型组相比,防己黄芪汤组和甲氨蝶呤组对CIA小鼠关节炎指数、足掌肿胀有显著改善作用,差异有统计学意义(P0.05);对CIA小鼠体质量及受累肢体数目的影响,差异无统计学意义(P0.05)。结论:防己黄芪汤对CIA小鼠的关节炎症和肿胀有显著改善作用,是治疗类风湿性关节炎的潜在有效方剂。     

黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠脾组织T-bet及GATA-3表达的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)小鼠特异性转录因子T-bet和GATA-3表达的影响,阐述黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机制。方法:建立牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,随机分为CIA模型组、氢化可的松阳性对照组、黄芪糖蛋白低剂量组、中剂量组、高剂量组;HE染色观察CIA小鼠脾组织损伤程度;采用流式细胞术检测CIA小鼠外周血IFN-γ和IL-4的水平;Western blot法检测CIA小鼠脾组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,黄芪糖蛋白改善了CIA小鼠脾组织损伤情况,减轻炎性反应细胞浸润,下调了外周血IFN-γ和IL-4水平(P0.05);同时,降低了T-bet和GATA-3蛋白的表达(P0.05)。结论:黄芪糖蛋白对CIA小鼠的治疗作用,可能是与降低T-bet、GATA-3表达,调整Th1/Th2功能失衡有关。     

维药神香草对COPD小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响

目的：研究维药神香草对COPD 小鼠Th1/Th2 和Th17/Treg 平衡的影响,探讨神香草治疗COPD 的免疫作用机制。方法：复制前期熏烟法建立COPD 小鼠模型,将小鼠随机分为正常组、生理盐水组、神香草高、中、低剂量组。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清中IFN-酌、IL-4、IL-17 及IL-10 的水平。结果：与正常组比较,COPD 模型组小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显升高（P<0.05）,IFN-γ、IL-10 的水平明显降低（P<0.05）;神香草治疗后,与模型组比较,小鼠血清IL-4、IL-17 水平明显降低,IFN-γ和IL-10 水平明显升高。相关性分析表明IFN-γ与IL-4,IL-17 与IL-10 都呈负相关。结论：神香草在纠正Th1/Th2 和Th17/Treg 失衡方面发挥了一定的作用。     

高乌甲素对脓毒症患者Treg/Th17平衡的影响

目的:探讨高乌甲素对脓毒症患者平衡状态及细胞免疫功能的影响。方法:选择2012年10月至2014年8月入住兰州大学第一医院医院重症医学科的脓毒症患者80例,随机分为两组,常规治疗组36例,给予常规集束化治疗,治疗组44例,在常规集束化治疗基础上加用肌肉注射氢溴酸高乌甲素注射液一次4mg,一日2次,连续3天。治疗当日和第3天、第7天天取患者外周血,检测Treg(调节性T细胞)、Th17及CD14单核细胞HLA-DR的表达情况。结果:高乌甲素治疗组Treg和Th17的表达明显低于常规治疗组,Treg/Th17比值降低趋于正常化,HLA-DR的表达显著升高。高乌甲素组,机械通气、抗生素治疗、血管活性药物使用时间及住院时间均比常规治疗组短,死亡率降低。结论:脓毒症患者中Treg及Th17表达升高,Treg/Th17失衡,HLA-DR表达降低,提示患者体内存在免疫麻痹。高乌甲素可降低重症脓毒症患者Treg及Th17表达,逆转失衡,提高HLA-DR表达,改善细胞免疫,有望改善重症脓毒症患者预后。     

艾灸对类风湿关节炎小鼠Treg/Th17细胞及其信号通路的影响

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞(Th17)失衡及相关信号通路的影响,探讨艾灸治疗类风湿关节炎的作用机制。方法:24只雄性DBA/1J小鼠随机分为正常组、模型组、假治疗组和艾灸组,每组6只。将正常组之外的小鼠用Ⅱ型胶原加佐剂于尾部皮下注射,建立类风湿关节炎模型。艾灸组小鼠在"足三里""肾俞"穴予以1 mg/壮的艾灸治疗,每只小鼠每穴灸6壮,连续治疗6 d为一疗程,共治疗2个疗程,疗程间休息2 d。假治疗组仅进行与艾灸组一样的抓取。采用胶原诱导的关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA)多发性关节炎指数评分标准观察艾灸对关节肿胀的影响,病变关节矢状面切片苏木素伊红(HE)染色观察关节炎症病理表现,流式细胞术分析小鼠脾脏Th17、Treg细胞数量,酶联免疫分析(ELISA)检测相关细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子-β(TGF-β)及半乳糖凝集素9(Galectin-9)的含量,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)及Western blotting方法分析基因Foxp3、Galectin-9、RORγt、CARMA1、核转录因子(NF-κB)mRNA及蛋白表达。结果:二次免疫后10~12d,小鼠1~2个后足踝关节及脚掌、足趾关节出现红肿,类风湿关节炎模型成功建立。艾灸治疗开始后第15天,艾灸组和假治疗组小鼠关节肿胀均有所好转,艾灸组疗效优于假治疗组(P0.05)。病理形态上,RA模型小鼠关节面较正常小鼠粗糙,滑膜层变薄,假治疗组小鼠上述变化有一定程度的自行恢复,而艾灸组小鼠关节面恢复平整,滑膜层较治疗前变厚,与正常组表现较为接近。流式细胞术检测显示,RA模型小鼠脾脏中Treg细胞数量较正常组下降、Th17数量细胞上升(均P0.01);艾灸治疗能使Treg细胞数量显著上升(P0.05),而对Th17细胞数无显著影响(P0.05)。ELISA检测发现艾灸治疗与假治疗对RA小鼠脾脏中含量增加的IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23、TGF-β及含量减少的IL-10的影响差异无统计学意义(均P0.05),但艾灸能使RA小鼠减少的Galectin-9升高(P0.05)。RT-PCR及Western blotting结果显示,模型小鼠Foxp3、Galectin-9 mRNA及蛋白表达下降(均P0.01),艾灸能使之上调(P0.05,P0.01);RORγt、CARMA1、NF-κB mRNA及蛋白明显上升(均P0.01),艾灸能使之下调(P0.05,P0.01)。结论:艾灸能改善RA小鼠关节肿胀及关节滑膜炎性反应,其机制可能与影响Treg细胞的数量,调节Foxp3、Galectin-9、RORγt、CARMA1、NF-κB mRNA及蛋白表达有关。     

针对Th17/Treg平衡的中医药抗类风湿关节炎研究进展

目的:总结针对靶点Th17/Treg细胞平衡影响的中医药抗类风湿关节炎研究进展。方法:以Th17/Treg、中医、中药、类风湿关节炎等为关键词,通过中国知网(CNKI)、万方数据库(WF)、重庆维普数据库(VIP)三大中文数据库及Pub Med数据库检索近20年相关文献,并对其进行总结分析。结果:Th17/Treg细胞平衡在类风湿关节炎疾病的发生发展中发挥关键作用,针对Th17/Treg细胞靶点的抗类风湿关节炎药物研发为当前研究热点,较多医学研究文献报道中医药对其平衡具有调节作用。结论:Th17/Treg细胞平衡是类风湿关节炎发病机制的核心,是中医药治疗类风湿关节炎新药开发的新思路、新方向。     

黄芩汤对溃疡性结肠炎小鼠Th17/Treg、Th1/Th2细胞平衡的影响

目的：研究黄芩汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)、Th1/Th2细胞平衡的影响。方法：60只雄性C57BL/6J小鼠,按体质量随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.2 g·kg^-1),黄芩汤低、中、高剂量组(4.55、9.1、18.2 g·kg^-1),除正常组外均予以2.5%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮水5 d诱导UC,连续灌胃给药7 d后处死小鼠,取肠系膜淋巴结(MLNs)和结肠组织,流式细胞术检测小鼠肠系膜淋巴结Th17/Treg、Th1/Th2,流式细胞微球芯片捕获技术检测结肠组织白细胞介素(IL)-2、IL-17A、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-10等细胞因子含量,对结肠组织样本进行病理切片观察,并采用免疫组化法检测结肠组织中T细胞表达的T-box(T-bet)、GATA结合蛋白-3(GATA-3)、IL-17A、叉头蛋白P3(FoxP3)的表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠结肠组织中转化生长因子-β(TGF-...     

洗心汤对快速老化模型小鼠Th17/Treg细胞免疫平衡及相关转录因子表达的影响

探讨洗心汤对快速老化模型(SAMP8)小鼠肠黏膜辅助性T细胞17(T helper 17 cell, Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)免疫平衡及相关转录因子表达的影响。50只14周龄的雄性SAMP8小鼠按随机数字表法分为模型组,益生菌组,洗心汤高、中、低剂量组,每组10只。10只14周龄的雄性抗快速老化(SAMR1)小鼠作为对照组。喂养10周后开始连续灌胃10周。Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠肠黏膜SIgA(secretory immunoglobulin A)含量;流式细胞术检测小鼠肠黏膜Th17、Treg含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠结肠组织视黄酸相关孤儿受体γt(retinoic acid related orphan receptor-γt, RORγt)、叉头盒蛋白p3(forkhead box p3,Foxp3)蛋白的表达。结果显示,与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0...     

飞龙掌血提取物对风寒湿佐剂性关节炎大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨飞龙掌血提取物对辅助性T细胞/调节性T细胞(Th17/Treg细胞)平衡的调节而抑制大鼠风寒湿佐剂性关节炎。方法:取SD雄性大鼠,采用物理方法模拟风寒湿环境造模结合弗氏完全佐剂注射造模,将大鼠随机分为空白对照组、模型组、雷公藤多苷片10mg/kg剂量组、飞龙掌血280、70mg/kg剂量组,每组10只。检测大鼠足跖容积、脾、胸腺指数;苏木素-伊红(HE)染色观察足跖关节及膝关节滑膜病理形态;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白介素-6、10、17(IL-6、IL-10、IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果:与空白对照组相比,模型组大鼠体重明显减轻,足跖容积显著增加,脾、胸腺指数明显升高、关节滑膜增生及炎性细胞浸润,血清IL-6和IL-17水平显著升高,血清IL-10和TGF-β含量明显降低。与模型组相比,飞龙掌血280mg/kg剂量组能显著增加大鼠体重,改善大鼠足跖关节及膝关节滑膜病理损伤;飞龙掌血280、70mg/kg剂量组能明显降低大鼠足跖容积,抑制脾、胸腺指数;同时显著降低血清IL-6和IL-17水平,升高血清IL-10和TGF-β含量。结论:飞龙掌血具有良好的抗风寒湿佐剂性关节炎作用,其作用机制可能涉及Th17和Treg细胞之间的平衡。     

艾灸对实验性RA家兔Th17/Treg平衡的影响

目的:观察艾灸对类风湿关节炎(RA)的抗炎作用,探索艾灸对Th17/Treg平衡的影响。方法:将日本大耳白兔按随机数字表法分为空白组、模型组、治疗组,分别于造模前后以及治疗第1、2、3周测量膝关节周长,用ELISA法测滑膜液的IL-10、IL-17含量,用RT-PCR法测滑膜组织中Foxp3、RORγt基因表达量。结果:与模型组比较,治疗组膝关节周长明显偏低。与空白组比较,模型组IL-10量偏低,IL-17量明显偏高,IL-10/IL-17值明显偏低;与模型组比较,治疗组IL-10量偏高,IL-17含量偏低,IL-10/IL-17值偏高。与空白组比较,模型组Foxp3mRNA表达存在下降趋势,但差异无统计学意义,RORγtmRNA表达升高,Foxp3/RORγt值降低;与模型组比较,治疗组Foxp3mRNA表达存在升高趋势,但差异无统计学意义,RORγmRNA表达降低,Foxp3/RORγt值存在升高趋势,但差异无统计学意义。结论:对于RA艾灸具有明显的抗炎效应,艾灸可显著调节RA家兔滑膜液IL-10、IL-17的含量,可调节滑膜组织中Foxp3、RORγt基因的表达,表明艾灸具有调节Th17/Treg平衡的作用,可能是艾灸治疗RA抗炎效应的重要机制之一。     

复方生地合剂对MRL/lpr小鼠脾脏组织Th17/Treg平衡的影响

目的探讨复方生地合剂治疗系统性红斑狼疮(SLE)的可能作用机制。方法将30只MRL/lpr小鼠(狼疮模型鼠)随机分组为模型组、复方生地合剂组、强的松组,每组10只,另以10只C57BL/6小鼠为空白组。复方生地合剂组给予浓度为2.8g/ml的复方生地合剂人临床等效剂量18.495ml/(kg·d)灌胃,强的松组给予浓度为1.23g/ml强的松片混悬液10ml/(kg·d)灌胃,模型组和空白组给予生理盐水10ml/(kg·d)灌胃,各组均每日1次。连续灌胃8周后检测血清白细胞介素17A(IL-17A)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平,检测脾脏淋巴细胞中辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)水平和脾脏组织维甲酸相关孤核受体(RORγt)和叉头状转录因子p3(Foxp3) mRNA表达。试验期间观察各组小鼠死亡情况。结果复方生地合剂组死亡2只,强的松组死亡1只,模型组死亡3只,空白组无死亡。与空白组比较,模型组小鼠血清IL-17A水平、脾脏组织RORγt mRNA表达升高,脾脏淋巴细胞Th17/CD4⁺、Th17/Treg值亦升高,血清TGF-β1...     

儿茶素对变应性鼻炎小鼠Th17/Treg表达的影响

目的观察儿茶素(Catechin)对变应性鼻炎小鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法将48只雌性Balb/c小鼠随机分为6组,即正常对照组,模型组,儿茶素低、中、高剂量组(75,150,300 mg·kg~(-1))和氯雷他定组(2.05 mg·kg~(-1)),每组8只。采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发构建变应性鼻炎小鼠模型。记录小鼠打喷嚏、挠鼻等鼻部症状积分;采用HE染色观察鼻黏膜组织病理改变;采用流式细胞微球芯片捕获技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测肺组织匀浆液中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、调节正常T细胞表达和分泌的细胞因子(RANTES)的含量;采用q PCR法检测鼻黏膜中Th17、Treg特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、Forkhead家族转录因子3(Foxp3)m RNA表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠挠鼻、打喷嚏次数明显增加(P0.05),MCP-1、RANTES及RORγt m RNA表达量明显升高(P0.05),Foxp3 m RNA表达量明显降低(P0.05)。与模型组比较,儿茶素高剂量组可显著减少挠鼻次数,降低RANTES表达量(P0.05);儿茶素各剂量组均可明显减少打喷嚏次数和降低MCP-1表达量(P0.05);儿茶素中、高剂量组可显著降低鼻黏膜RORγt m RNA表达水平(P0.05),提高Foxp3 m RNA表达水平(P0.05)。结论儿茶素可有效缓解变应性鼻炎小鼠鼻黏膜炎性症状,可能与恢复Th17/Treg平衡有关。     

宣肺平喘方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨宣肺平喘方对卵清蛋白(OVA)致敏哮喘小鼠模型气道炎症及Th17/Treg平衡的影响。方法:55只6~8周雌性Balb/C小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组(7.5 mg·kg-1·d-1)、宣肺平喘方低、高剂量组(16.72,66.88 g·kg-1·d-1),每组11只。除正常组用生理盐水注射及气道雾化外,其余各组小鼠均采用OVA致敏及激发的方法建立哮喘模型,各干预组于哮喘激发后给予相应的药物灌胃,正常组、模型组用生理盐水,连续15 d,末次给药后处死小鼠,取肺组织进行病理切片及苏木素-伊红(HE)染色,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测小鼠血清白细胞介素(IL-4),转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测血液中Th17细胞和Treg细胞的比例。结果:与模型组比较,各治疗组的肺组织损伤均有减轻,IL-4,TNF-α水平均低于模型组(P0.05),TGF-β水平均高于模型组(P0.05),血液中Th17细胞水平低于模型组,Treg细胞水平高于模型组。宣肺平喘方低、高剂量组在降低IL-4,TNF-α水平,升高TGF-β水平方面与泼尼松组比较无统计学差异,在降低血液Th17细胞比例,升高血液Treg细胞比例方面优于泼尼松组。结论:宣肺平喘方对哮喘小鼠的肺组织黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与下调Th17细胞水平,上调Treg细胞水平,恢复Th17/Treg细胞平衡,从而使得血清中炎症因子IL-4,TNF-α的含量降低,抑炎因子TGF-β的含量增加有关。     

二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响

目的 观察古代经典名方二妙散（EMS）对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）中辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）分化的影响。方法 按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS（5.4 g·kg^-1）组及甲氨蝶呤（MTX,0.5 mg·kg^-1）组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型（此为第2次免疫）,并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光（IF）双标法检测CIA小鼠关节中CD4⁺T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17（IL-17）和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3（FoxP3）在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果 与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重（P<0.01）;小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高（P<0.01）,Treg细胞表达比例显著减少（P<0.01）;与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低（P<0.01）;小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低（P<0.01）,Treg细胞的表达比例显著增加（P<0.01）。结论 EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。