丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠血管新生及对Ang-1蛋白表达的影响

目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠血管新生及血管生成素-1(Ang-1)的影响。方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注(MCAO)模型,2 h后开放血流再灌注。大鼠造模成功后被分为6组(丹龙醒脑方14.76,7.38,3.69 g·kg-1剂量组,尼莫地平10.8 mg·kg-1组,模型组,假手术组),ig 7 d后处死大鼠取脑,用免疫组化法测定缺血海马区的内皮细胞数和微血管密度(MVD)及Ang-1的蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠内皮细胞计数及MVD,Ang-1蛋白表达均明显增强(P0.05);与模型组相比,丹龙醒脑方组内皮细胞数、MVD及Ang-1蛋白表达均有明显升高(P0.05,P0.01)。结论:丹龙醒脑方能够促进脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织血管新生,对缺血脑组织具有保护作用,其作用机制可能与上调Ang-1蛋白表达有关。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠神经功能和脑梗死面积的影响

目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠神经功能和脑梗死面积的影响。方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型。造模成功后将48只SD雄性大鼠随机分为模型组,假手术组,尼莫地平组,丹龙醒脑方大、中、小剂量组,每组各8只。分别灌胃等体积蒸溜水、尼莫地平片与不同剂量的丹龙醒脑方。连续灌胃7d后观察神经功能症状评分与脑梗死面积。结果:神经功能评分、脑梗死面积方面,模型组,尼莫地平组及丹龙醒脑方大、中、小剂量组与假手术组比较,差异均有统计学意义(P0.01);尼莫地平组及丹龙醒脑方大中小剂量组与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.05);丹龙醒脑方各剂量组组间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。丹龙醒脑方大中小剂量组神经功能评分与尼莫地平组比较,差异均无统计学意义(P0.05);丹龙醒脑方大中剂量组与尼莫地平组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:丹龙醒脑方能改善脑缺血再灌注大鼠神经症状,减少脑缺血再灌注脑梗死面积。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区VEGF及其受体Flk-1的影响

目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑海马区血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体血管内皮生长因子受体(Fetal liver kinase-1,Flk-1)的影响。方法:用改良Longa栓线法复制大脑中动脉闭塞模型,2h后开放血流再灌注。大鼠造模成功后被分为6组;丹龙醒脑方14.76g/kg、7.38g/kg、3.69g/kg剂量组,尼莫地平10.8mg/kg组,模型组,假手术组,灌胃7天后处死大鼠取脑,采用免疫组化方法测定海马区内皮细胞计数及微血管密度、VEGF、Flk-1的表达。结果:模型组与假手术组相比,大鼠脑海马区内皮细胞计数及微血管密度、VEGF、Flk-1蛋白表达均增强;丹龙醒脑方14.76g/kg、7.38g/kg、3.69g/kg剂量组与模型组相比表达明显增强。结论:丹龙醒脑方可以促进脑缺血区VEGF及其受体Flk-1的表达,其抗脑缺血再灌注损伤的机制可能与增强血管新生因子的表达有关。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖与c-myc、c-jun表达的影响

目的探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖与c-myc、c-jun表达的关系。方法采用线栓法制备大脑中动脉栓塞局灶性脑缺血再灌注模型。150只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丹龙醒脑方小、中、大剂量组。于再灌注24 h后,丹龙醒脑方各剂量组予相应剂量药液灌胃,模型组和假手术组予等体积蒸馏水灌胃。1次/d,连续7 d。再灌注1、3、7 d采用m-NSS法进行神经功能缺损评分,再灌注7 d取缺血侧SVZ脑组织,采用Brdu免疫组化检测NSCs增殖,RT-q PCR、Western blot分别检测c-jun、c-myc m RNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分明显升高(P0.01);再灌注3、7 d,与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组神经功能缺损评分明显降低(P0.01)。与假手术组比较,其余各组Brdu阳性细胞率明显升高;与模型组比较,丹龙醒脑方各剂量组Brdu阳性细胞率亦明显升高(P0.01)。丹龙醒脑方各剂量组较假手术组、模型组c-jun、c-myc蛋白及m RNA表达均明显增强(P0.05,P0.01)。结论丹龙醒脑方能改善脑缺血后神经功能,促进SVZ NSCs增殖,其机制可能与增强c-jun和c-myc表达及延长表达持续时间有关。     

头皮针对脑缺血大鼠模型碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的 :研究头皮针对脑缺血大鼠模型碱性成纤维细胞生长因子的影响 ,并与电针组比较。方法 :线栓法制备大鼠脑缺血模型 ,甲醛固定脑组织切片 ,运用免疫组化方法检测各组碱性成纤维细胞生长因子的变化情况。结果 :术后 6hr与术后 1 5天组内神经功能评分比较 ,模型组无明显差异 (P >0 .0 5) ,电针组与针刺组有显著性差异 (P <0 .0 1 )。组间 1 5天时比较 ,电针组与针刺组无明显差异 (P >0 .0 5) ,两组与模型组比较均有显著性差异 (P <0 .0 1 )。在第 1 5天时碱性成纤维细胞生长因子免疫组化染色比较 ,电针组与模型组有明显差异 (P <0 .0 5) ,针刺组与模型组有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,针刺组与电针组有明显差异 (P <0 .0 5)。结论 :头皮针可促进碱性成纤维细胞生长因子产生并延长碱性成纤维细胞生长因子产生时限 ,这可能是头皮针减轻脑缺血损伤并促使肢体功能恢复的机理之一     

丹龙醒脑片对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响

目的:研究丹龙醒脑片对局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑梗死体积和神经功能的影响。方法:用大脑中动脉栓塞1h再灌注47h法建立模型,以图像分析法检测脑梗死体积。结果:局灶性脑缺血再灌注后,模型组脑梗死体积显著增大(P<0.01),神经功能症状计分显著升高(P<0.01);丹龙醒脑大、中剂量片组脑梗死体积较模型组显著缩小(P<0.05),同时,大鼠神经功能症状计分下降(P<0.05)。结论:局灶性脑缺血再灌注后,大鼠脑组织梗死体积增大,丹龙醒脑片能减少脑梗死体积、改善脑缺血后神经症状。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠侧脑室室管膜下区神经干细胞增殖及Hes1、Hes5表达的影响

目的观察丹龙醒脑方对脑缺血再灌注模型大鼠侧脑室室管膜下区(SVZ)神经干细胞(NSCs)增殖与Hes1、Hes5表达的影响,探讨其促进内源性NSCs增殖的作用机制。方法将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(依达组)、丹龙醒脑方组(丹龙组)。采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注7 d后取缺血侧SVZ脑组织。Brdu免疫荧光法检测SVZ NSCs增殖,RT-q PCR、Western blot分别检测Hes1、Hes5 m RNA和蛋白的表达。结果与假手术组比较,其余各组Brdu阳性细胞率增加,Hes1、Hes5 m RNA及蛋白表达明显升高(P0.01);与模型组比较,依达组、丹龙组Brdu阳性细胞率明显增加,Hes1、Hes5 m RNA及蛋白表达水平明显增强(P0.01);丹龙组Hes1 m RNA表达水平优于依达组(P0.01),其余指标均无明显差异。结论丹龙醒脑方可促进脑缺血再灌注后大鼠SVZ NSCs增殖,并上调Hes1、Hes5表达水平,其机制可能与激活Notch信号通路有关。     

活血化瘀方对乳腺增生病患者血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的观察活血化瘀方对乳腺增生病患者血管内皮生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的影响和临床疗效。方法将88例乳腺增生病患者随机分为2组,治疗组60例予活血化瘀方,对照组28例予西医常规治疗。2组均治疗3个疗程,随访3个月。并选择同期健康者30例为正常对照组。采用酶联免疫法测定3组治疗前后血清VEGF及bFGF变化,统计临床疗效。结果治疗组总有效率91.67%,对照组总有效率89.29%,2组总有效率比较差异无统计学意义（P〉0.05）,疗效相当。2组治疗前VEGF及bFGF含量均高于正常对照组（P〈0.05）。2组治疗后VEGF及bFGF含量均较本组治疗前明显降低（P〈0.05）,而组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。2组治疗后VEGF含量与正常对照组相当（P〉0.05）,bFGF仍高于正常对照组（P〉0.05）。结论 VEGF、bFGF在乳腺增生病中过度表达,提示血管生成是其发生发展的重要环节,活血化瘀方可降低患者血清中VEGF、bFGF含量,阻断血管生成,促使病灶消散、吸收,为治疗乳腺增生病的有效方药。     

中风皂贝化痰胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的:观察中风皂贝化痰胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经保护作用及对碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)表达的影响。方法:SD大鼠50只随机分成假手术组、缺血再灌注组、中风皂贝化痰胶囊高、中、低剂量组(1.62,1.08,0.54 g·kg-1·d-1),每组10只。采用Zea Longa法制作脑缺血再灌注大鼠模型,观察中风皂贝化痰胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能症状以及bFGF表达的影响。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组大鼠出现严重的神经功能缺失症状,皮质和海马区bFGF表达增强;与脑缺血再灌注组相比,中风皂贝化痰胶囊组能显著改善大鼠神经功能缺失症状,且上调皮质和海马区bFGF的表达,其中以中风皂贝化痰胶囊高剂量组的神经保护作用最为显著,bFGF阳性细胞区积分吸光度为153.20±0.76。结论:中风皂贝化痰胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调bFGF的表达相关。     

丹龙醒脑片对老龄大鼠脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1表达的影响

目的:探讨丹龙醒脑片对老龄大鼠脑缺血再灌注后NF-κB、ICAM-1表达的影响.方法:用大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑片组、尼莫地平组,采用原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡神经细胞,采用免疫组化法,观察NF-κB、ICAM-1蛋白的表达.结果:丹龙醒脑片能显著减轻神经细胞的损伤;假手术组有一定量的NF-κB、ICAM-1表达,缺血后NF-κB、ICAM-1迅速增加,丹龙醒脑片组能显著抑制NF-κB、ICAM-1的表达,模型组和丹龙醒脑片组比较差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).结论:抑制由缺血再灌注损伤诱导的NF-κB、ICAM-1表达可能是丹龙醒脑片脑保护作用的机制之一.     

不同活血配伍对急性脑缺血大鼠脑组织碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的:观察补气活血、行气活血代表方补阳还五汤、血府逐瘀汤对急性脑缺血大鼠碱性成纤维细胞生长因子b FGF蛋白表达的影响,探讨不同活血配伍方法对大脑保护作用的差异。方法:采用大脑中动脉线拴法复制局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、补气活血组、行气活血组,共4组,每组10只,光镜下观察脑组织病理学变化,免疫组化检测b FGF蛋白的表达。结果:补气活血组、行气活血组b FGF含量明显升高,与模型组比较有显著性差异,补气活血与行气活血组间有显著性差异(P0.01)。结论:补气活血和行气活血的配伍均能升高脑组织b FGF的含量,但是补气活血作用强于行气活血,对脑组织具有更好的保护作用。     

地黄饮子对脑缺血再灌注模型大鼠血管新生的影响

目的揭示地黄饮子抗脑缺血再灌注损伤的作用机理。方法将SD大鼠60只,随机分为6组,即假手术组、模型组、阳性药物尼莫地平组(1 mg·kg-1)和地黄饮子高、中、低(32,16,8 g·kg-1)剂量组,每组10只,采用结扎双侧颈总动脉方法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型。模型制作后第2日开始给药,每天1次,连用7d。第8日灌注固定取脑,HE染色观察大脑海马形态学改变,用免疫组化法检测大鼠脑组织微血管密度(MVD)以及VEGF含量的表达。结果 HE染色结果:地黄饮子各剂量组大鼠海马区缺血范围比模型组小,病理改变较模型组轻。梗死区亦可见少量的神经元变性、坏死,可见少量的噬神经元现象;脑组织轻度水肿,血管轻度充血,无明显的炎性细胞浸润。模型组MVD计数与假手术组比较无统计学意义,地黄饮子高、中、低剂量组和阳性药物组MVD计数较模型组增加,差异有统计学意义。模型组VEGF含量较假手术组升高,差异有统计学意义,地黄饮子高、中剂量组和阳性药物组较模型组均能升高VEGF含量表达,差异有统计学意义。结论地黄饮子能显著改善模型大鼠脑梗死区的病理改变,减轻脑组织水肿,减轻炎性细胞浸润等,对脑缺血区神经细胞功能的恢复表现出良好的效果。地黄饮子能促进模型大鼠脑组织VEGF的释放和表达,促进脑梗死大鼠脑组织缺血区新血管形成,有明显的促血管新生作用。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠海马区神经干细胞增殖及Frizzled1、Dvl1、CyclinD1表达的影响

目的:探讨丹龙醒脑方对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠海马区神经干细胞增殖,以及Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1表达的影响。方法:将80只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组和丹龙醒脑方14.8g/kg组,采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注1d、3d和7d采用改良m-NSS法进行神经功能缺损评分,7d后取大鼠缺血侧海马组织,采用免疫荧光法检测海马区Brdu阳性细胞率;采用RT-q PCR法、Western Blot法分别检测Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达。结果:1再灌注1d,与假手术组比较,其余各组神经功能缺损评分明显升高,而各组间差异无统计学意义;再灌注3d、7d,与模型组比较,依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组、丹龙醒脑方14.8g/kg组评分明显降低。2与假手术组比较,各组Brdu阳性细胞率增大,Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1mRNA及蛋白的表达明显增强;与模型组比较,依达拉奉组、丹龙醒脑方7.4g/kg组、丹龙醒脑方14.8g/kg组Brdu阳性细胞率增大,Frizzled1、Dvl1、Cyclin D1mRNA及蛋白的表达明显增强。结论:丹龙醒脑方能改善神经缺损症状,促进脑缺血后海马区NSCs增殖,其机制可能与通过上调缺血再灌注后海马区Frizzled1、Dvl1表达水平,从而促进Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因Cyclin D1的表达水平有关。     

康泉方对大鼠前列腺组织碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的 探讨补肾通络的康泉方对实验性大鼠前列腺组织碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）表达的影响。方法 采用大鼠去势后注射丙酸睾丸酮致前列腺增生法造模,同时灌胃中药康泉方30天后,取大鼠前列腺组织,采用免疫组化和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法分别检测各组前列腺腹叶组织bFGF表达。结果 与模型组比较,康泉高、中剂量组bFGF和bFGFmRNA表达明显降低（P<0.05或P<0.01）,康泉低剂量组bFGF和bFGFmRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 康泉方能够降低实验性良性前列腺增生大鼠前列腺组织bFGF表达.     

丹龙醒脑片对老龄大鼠脑缺血再灌注后炎性因子IL-1β和IL-6表达的影响

目的从IL-1β、IL-6表达变化揭示丹龙醒脑片抗老年脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法用大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组、模型组、丹龙醒脑片组、尼莫地平组,采用免疫组化法,观察IL-1β、IL-6蛋白的表达。结果丹龙醒脑片能显著减轻神经细胞的损伤。假手术组有一定量的IL-1β、IL-6表达,缺血后IL-1β、IL-6迅速增加;丹龙醒脑片组显著抑制IL-1β、IL-6的表达。模型组和丹龙醒脑片组差异有统计学意义（P〈0.01,P〈0.05）。结论丹龙醒脑片抗老年脑缺血再灌注损伤的保护机制与其抑制由缺血再灌注损伤诱导的IL-1β、IL-6等表达有关。     

丹龙醒脑汤对MCAO模型大鼠血管新生及bFGF蛋白、Ang-1蛋白表达的影响

目的:探讨丹龙醒脑方对脑缺血再灌注(MCAO)大鼠血管新生情况及bFGF蛋白、Ang-1蛋白表达的影响。方法:制备大鼠MCAO模型,在2小时后进行血流放开并再灌注。将造模成功的大鼠分为4组,分别为模型组、尼莫地平组(10.78mg/kg)、小剂量组(丹龙醒脑汤3.70g/kg)、大剂量组(丹龙醒脑汤14.80g/kg)。每组大鼠均灌胃7日,然后处死取脑,测定缺血海马区内皮细胞数、微血管密度(MVD)、Ang-1及bFGF蛋白表达。结果:大剂量组、小剂量组与尼莫地平组比较,各指标差异不显著(P0.05);用药组与模型组比较,各指标均明显升高,P0.05;大剂量组、小剂量组与尼莫地平组比较,Ang-1蛋白、bFGF蛋白表达差异不显著(P0.05);用药组与模型组比较,Ang-1蛋白、bFGF蛋白表达升高显著,P0.05。结论:丹龙醒脑汤对MCAO模型大鼠血管新生有促进作用,且对缺血脑组织也有保护作用,作用机制与Ang-1蛋白、bFGF蛋白表达上调有关。     

益气活血组方对大鼠缺血心肌血管新生作用及对血管内皮生长因子和碱性成纤维生长因子的影响

目的：探讨益气活血组方对急性心肌梗死后大鼠缺血心肌组织血管新生作用和对血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维生长因子（bFGF）表达的影响。方法：建立心梗模型后,将40只雄性SD大鼠,采用随机数字表法分为4组：模型组、假手术组、麝香保心丸、益气活血组方。运用免疫组化法检测梗死心肌边缘区微血管计数（MVC）和微血管密度（MVD）及VEGF和bFGF表达;同时应用Western blot技术检测各组大鼠缺血心肌VEGF和bFGF蛋白质水平表达变化。结果：益气活血组方和麝香保心丸组分别与模型组比较,梗死心肌边缘区微血管计数和微血管密度都显著高于后者(P<0.01）。益气活血组方、麝香保心丸组中缺血心肌VEGF和bFGF表达以及其蛋白表达水平较其余组显著升高（P<0.01）。结论：益气活血组方能明显促进心梗后大鼠缺血心肌血管新生,上调心肌VEGF和bFGF蛋白表达可能是其中一个重要的作用机制。     

丹龙醒脑片对沙土鼠脑缺血再灌注保护作用的实验研究

目的：研究丹龙醒脑片(DLXNP)对脑缺血再灌注沙土鼠模型脑组织兴奋性氨基酸(EAAs)含量的影响及对海马区神经元的保护作用。方法：用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注方法建立脑缺血再灌注沙土鼠模型。用高效液相色谱分析荧光法(HPLC)检测脑组织谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)浓度，用病理光学显微镜观测其双侧海马CA1区神经元数目。结果：模型组与正常对照组和假手术组相比，Glu、Asp含量明显升高(P＜0．01)，海马区神经细胞数明显减少(P＜0．01)。丹龙醒脑片3个剂量组脑组织中Glu、Asp的含量明显低于模型组(P＜0．0l-0．05)，海马区神经细胞数明显多于模型组(P＜0．01)。结论：丹龙醒脑片能调节缺血再灌注大鼠脑组织兴奋性氨基酸含量、减轻其兴奋性毒性，保护大脑海马区神经元，这可能是丹龙醒脑片的作用机制之一。     

电针迎香穴对嗅觉功能障碍大鼠碱性成纤维细胞生长因子bFGF表达的影响

目的探讨电针刺激迎香穴对大鼠碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factor,b FGF)的影响。方法将50只SD大鼠平均随机分为5组,分别为正常对照组,嗅觉功能障碍组,嗅觉功能障碍+眶下神经切断组,嗅觉功能障碍+针刺组,嗅觉功能障碍+眶下神经切断+针刺组。通过Triton X-100鼻腔注射法复制大鼠嗅觉功能障碍动物模型和大鼠嗅觉功能障碍+切断三叉神经动物模型。通过动物行为学观察、ELISA、免疫组织化学等方法观察分析电针迎香穴对大鼠嗅觉功能障碍和嗅黏膜组织中b FGF的影响。结果嗅觉迷宫实验表明电针迎香穴可以有效改善嗅觉功能障碍模型大鼠的嗅觉功能(P0.01),且大鼠嗅黏膜组织及血液中b FGF浓度明显升高(P0.01)。结论电针迎香穴能对于治疗嗅觉功能障碍具有显著疗效,其作用可能是通过三叉神经通路,影响大鼠体内b FGF的产生,从而有利于嗅黏膜嗅感神经元(ORN)的再生,改善嗅觉功能障碍。     

刺五加注射液对脑缺血再灌注大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨刺五加注射液对脑缺血再灌注大鼠转化生长因子-β1表达的影响.方法:采用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注大鼠脑组织中转化生长因子β1蛋白含量.结果:应用刺五加注射液的治疗组大鼠脑组织中TGF-β1在各时间点的表达与模型组相应时间点相比明显增加(P＜0.01或P＜0.05).结论:刺五加注射液能显著提高脑缺血再灌注大鼠脑组织中TGF-β1蛋白表达,对缺血性损伤脑组织具有保护作用.