壮骨止痛方提取物对去卵巢骨质疏松型大鼠血清PTH、CT的影响

目的:观察壮骨止痛方提取物对去卵巢大鼠血清降钙素(CT)、甲状旁腺素(PTH)的影响及电镜观察。方法:以3月龄雌性SD绝经后骨质疏松模型大鼠,灌胃13周后处死取材,测定血清中PTH和CT的含量,观察透射电镜下股骨超微结构。结果:治疗组能降低PTH的水平,差异有统计学意义(P<0.05);正常组的CT与治疗组的相比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗组能升高CT的水平,差异有统计学意义(P<0.05)。电镜观察:正常组骨细胞线粒体无变性,骨细胞突起无改变,骨陷窝较小。模型组大部分骨细胞胞核及胞浆浓缩明显,骨细胞的指状突起明显减少。治疗组骨细胞较正常,骨细胞指状突起伸向骨质深处。结论:骨止痛方全方提取物不仅能达到促进雌激素分泌作用的效果,而且能抑制骨吸收,加快骨形成,延缓骨量丢失,调节体内微量元素的平衡,改善骨的内部结构以防治骨质疏松。     

壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠血清瘦素及长形受体的影响

目的:观察壮骨止痛方对去卵巢大鼠血清瘦素(leptin)及长形受体(OB-Rb)的影响,探讨其抗骨质疏松机制。方法:72只SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应质量的脂肪。造模成功后,造模组大鼠按体质量随机分为模型组、壮骨止痛方高剂量组(13.2 g/kg)、中剂量组(6.6 g/kg)、低剂量组(3.3 g/kg)和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,检测大鼠骨密度(BMD)和血清瘦素及其长形受体含量。结果:模型组大鼠血清OB-Rb含量及BMD均显著低于假手术组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。壮骨止痛方高、中、剂量组大鼠瘦素长形受体含量及BMD均显著高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:壮骨止痛方具有促进去卵巢骨质疏松大鼠瘦素受体表达,增强瘦素的作用,这可能是其抗骨质疏松的作用机制之一。     

壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑瘦素及其受体的影响

目的观察壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠下丘脑瘦素及其受体的影响,探讨其抗骨质疏松机制。方法 72只200 g左右的SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应质量的脂肪。造模成功后,造模组大鼠按体质量随机分为模型组、壮骨止痛方高剂量组(13.2 g/kg)、中剂量组(6.6 g/kg)、低剂量组(3.3 g/kg)和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,检测大鼠骨密度和下丘脑Leptin含量及OB-Rb蛋白表达。结果模型组大鼠下丘脑Leptin及OB-Rb含量显著降低,骨密度显著减少,与假手术组比较差异有统计学意义。壮骨止痛方各剂量组大鼠OB-Rb蛋白表达显著增加,骨密度显著增加,与模型组比较差异有统计学意义。结论促进OB-Rb蛋白表达,可能是壮骨止痛方抗骨质疏松的作用机制之一。     

壮骨止痛方治疗大鼠去卵巢骨质疏松症的蛋白质组学分析

目的:探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松相关蛋白改变谱。方法:利用二维凝胶电泳分离股骨组织的总蛋白,通过软件分析2-DE图谱,比较各组间蛋白的表达量,然后利用MALDI-TOF-MS制作差异蛋白点的肽谱,确定各差异蛋白的种类,通过生物信息学分析所得蛋白的功能。结果:壮骨止痛方能调节骨骼肌的能量代谢、物质转运,对大鼠去卵巢骨质疏松症产生调节作用。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin 信号通路、血清 Sclerostin 水平的影响

目的:探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-catenin信号通路以及Sclerostin含量的影响。方法:将实验动物分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量治疗组、壮骨止痛方低剂量治疗组、雌二醇组5组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、Sclerostin的水平。结果:模型组大鼠血清β-catenin降低、Sclerostin水平上升,经壮骨止痛方药物干预后,大鼠血清β-catenin水平明显升高、Sclerostin水平明显下降。结论:壮骨止痛方药物可以提升Wnt/β-catenin信号通路的表达,降低血清Sclerostin的水平,达到预防治疗骨质疏松的作用。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠血清BGP、TRAP、SOD含量的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松大鼠血清骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)以及血清超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响。方法将实验动物分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量治疗组、壮骨止痛方低剂量治疗组、雌二醇组5组,用酶联免疫免法测定大鼠血清中BGP、TRAP、SOD的水平。结果模型组大鼠血清OPg,SOD降低、TRAP水平升高,经壮骨止痛方药物干预后,大鼠血清OPg,SOD水平明显下降、TRAP水平明显下降。结论壮骨止痛方药物可以提升大鼠血清OPg,SOD的比值,降低TRAP的水平,达到预防治疗骨质疏松的作用。     

滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠血清性激素的影响

目的观察滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠E2、FSH、LH的影响。为复方中药治疗骨质疏松症提供初步实验依据。方法用卵巢摘除法制作骨质疏松模型,并分别以中药、西药（乙烯雌酚）治疗,观察治疗前后大鼠血清性激素E2、FSH、LH的变化。结果中药能显著提高去势大鼠E2水平,降低去势大鼠FSH和LH水平,与模型组比较有显著性差异（P〈0.05）。结论滋补肝肾方可以改善去势大鼠血清性激素水平。     

壮骨止痛方对去势骨质疏松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素的影响

目的:观察壮骨止痛方对去势骨质松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素的影响,探讨壮骨止痛方治疗骨质疏松的可能机理。方法:选取3月龄250g左右SD雌性大鼠60只,按体重随机分为模型组、假手术组、空白组、壮骨止痛方组,每组15只。术后5天拆线后开始给药,连续13周。腹主动脉取血,放免法检测血清瘦素及胰岛素。结果:与去势模型组比较,壮骨止痛方组雌鼠血清瘦素及胰岛素含量明显降低(P<0.05)。结论:壮骨止痛方能显著降低去势骨质松模型雌鼠血清瘦素及胰岛素水平,这可能是其治疗骨质疏松的机理之一。     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察益骨胶囊预防和治疗用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织TGF-β1mRNA基因表达的影响,在分子水平上阐明益骨胶囊防治骨质疏松症的可能作用机制.方法:从72只10月龄SD雌性大鼠中随机抽取24只为假手术A和B组,余48只待手术造模后随机分为4组:模型A组、模型B组、预防组、治疗组,每组12只;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;预防各组均在手术后3天即开始灌胃,假A组、模A组灌胃NS 3 ml、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共24周;治疗各组均在手术后第13周即开始灌胃,假B组、模B组灌胃NS 3 ml、治疗组灌胃益骨胶囊水溶液3 ml,每天1次,共12周.FQ-PCR方法检测骨组织TGF-β1mRNA基因表达.结果:大鼠造模24周时,益骨胶囊预防组和治疗组骨组织TGF-β1mRNA基因表达均明显高于模型组,与假手术组相近.结论:益骨胶囊能促进骨组织TGF-β1mRNA基因表达.     

壮骨冲剂对去卵巢大鼠骨密度的影响

骨质疏松症是比较常见的老年性疾病,尤其是老年女性患者居多,临床上以中医中药治疗本病取得了较好的疗效,为了进一步确定中药治疗骨质疏松症的科学依据,我们用自拟壮骨冲剂观察其对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响。     

补肾填精方对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响

目的通过对比观察补肾填精方左归丸和左归丸去补阳药对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响,探讨左归丸阳中求阴法防治骨质疏松症的作用机制。方法取雌性SD大鼠32只,采用双侧卵巢摘除术建立骨质疏松模型,随机分为假手术组(Sham)、模型对照组(OVX)、左归丸组(ZGP)、左归丸去补阳药组(ZGPQ),每组8只。灌胃给药12周后收集各组大鼠血清和股骨组织,采用ELISA法检测血清中PICP和ICTP水平,采用Masson染色法检测股骨组织胶原纤维形态,采用免疫组织化学染色法检测股骨组织ColⅠ蛋白表达水平。结果与Sham比较,OVX血清PICP和ICTP水平显著升高(P0.01)、股骨组织ColⅠ蛋白表达显著降低;与OVX比较,补肾填精方下调血清PICP和ICTP水平(P0.05,P0.01)、上调股骨组织ColⅠ蛋白表达。结论补肾填精方左归丸对去卵巢引起的骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与其干预胶原代谢有关,全方效果较为明显。     

固本活血壮骨颗粒对去卵巢大鼠血清IGF-1和IL-1β影响的实验研究

目的:通过观察固本活血壮骨颗粒对实验性骨质疏松症大鼠血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、白介素1-β(IL-1β)水平的影响,探讨固本活血壮骨颗粒防治骨质疏松症的微观机制。方法:取3月龄的雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、仙灵骨葆胶囊组、尼尔雌醇组、固本活血壮骨颗粒小剂量组、大剂量组6组。除假手术组仅切除双侧卵巢附近的相当于卵巢大小的小块脂肪外,其余各组均切除双侧卵巢。术后1周开始给药,灌胃90d后取血分离血清,采用ELISA法检测血清IGF-1、IL-1β水平。结果:模型组与假手术组比较,IGF-1水平降低,IL-1β水平增高,且差异有显著性(P<0.05);仙灵骨葆胶囊组和大剂量组提高IGF-1水平,降低IL-1β水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:固本活血壮骨颗粒通过提高IGF-1水平、降低IL-1β水平,改善去卵巢大鼠骨组织显微形态,对去卵巢大鼠的骨质疏松症具有防治作用,此作用具有一定的剂量依赖性。     

壮骨止痛胶囊对去卵巢雌鼠骨质疏松症无机元素的影响

1 材料与方法 1.1 实验动物 10～12月龄SD系雌性大白鼠60只,体重319g±29.7g,由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供,合格证号02-49-2.     

壮骨止痛胶囊对去卵巢雌鼠骨质疏松症骨强度和生物力学的影响

目的：为验证壮骨止痛胶囊对去卵巢雌鼠骨质疏松症骨强度和生物力学的影响。方法：选取10～12月龄雌性SD大白鼠60只，随机分为假手术组、去卵巢模型组、骨松宝对照组、壮骨止痛胶囊低、中、高剂量组共6组，每组10只。术后5d拆线后开始给药，连续13周。取血尿骨标本从骨密度、骨生物力学指标、骨组织病理形态学等几个方面进行研究。结果：1．壮骨止痛胶囊能明显增加去卵巢模型鼠股骨、胫骨、腰椎骨矿含量和骨密度（P〈0．01）。2．壮骨止痛胶囊能显著提高模型鼠左胫骨弹性应力和最大抗弯强度（P〈0．01）。3．壮骨止痛胶囊能明显提高模型鼠左股骨颈梁髓比和左股骨头区域的平均骨小梁密度（P〈0．01）。结论：壮骨止痛胶囊能增加去卵巢模型鼠骨密度，改善骨的生物力学性能，逆转骨质疏松症的病理形态学改变。     

滋补肝肾方对去卵巢大鼠血清性激素的影响

目的:探讨滋补肝肾方治疗围绝经期综合征的机理,为其临床疗效提供实验依据。方法:将84只生育年龄未育雌性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、中药高、中、低剂量组、西药组。去势手术后30天开始给药,连续给药60天后采用放射免疫法测定各组大鼠血清E2、FSH水平。结果:滋补肝肾方能明显增加血清E2的含量,其作用强于西药,但与剂量并不成正相关。结论:滋补肝肾方具有一定的雌激素样作用,或是通过兴奋肾上腺皮质而发挥治疗作用。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)信号通路的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量组、壮骨止痛方低剂量组、雌二醇组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、OPG、RANKL的水平。结果模型组大鼠血清β-catenin明显降低,RANKL/OPG比值升高,经壮骨止痛方药物干预后,β-catenin水平明显升高,RANKL/OPG比值明显下降。结论壮骨止痛方可能通过提升大鼠血清β-catenin的含量,降低RANKL/OPG的比值,从而激活Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路,起到防治骨质疏松的作用。     

生骨密骨方对去卵巢骨质疏松大鼠血清骨代谢标志物的影响

目的:研究分析生骨密骨方对卵巢去势(OVX)骨质疏松(OP)大鼠骨血清骨代谢标志物中骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、骨钙素(BGP)、I型胶原羧基端肽β降解产物(β-CTx)、血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TPACP5b)的影响。方法:选取48只6月龄雌性未生育健康SD大鼠,手术摘除其双侧卵巢,建立骨质疏松大鼠动物模型。建模后随机分为3组各16只:对照组(OV组)、雌二醇组(OE组)、生骨密骨组(OT组)。术后OV组灌服生理盐水,OE组给予戊酸雌二醇片,OT组给予生骨密骨方水煎服浓缩液,3组等量给予连续12周,收集血浆,检测血清标志物B-ALP、β-CTx、BGP和TPACP5b,比较3组之间的结果。结果:与OV组相比较,OT组及OE组大鼠血清B-ALP、β-CTx、TPACP5b浓度水平降低,BGP水平显著增加(P0.05),且OT组与OE组在大鼠血清B-ALP、β-CTx、TPACP5b及BGP标志物浓度水平的差异无显著性(P0.05)。结论:生骨密骨方能够通过改变骨代谢标志物中的浓度水平,起到防治骨质疏松的疗效且效果显著。     

延经丸对去卵巢骨质疏松大鼠血清PTH、CT的影响

目的:观察中药延经丸对去卵巢骨质疏松大鼠血清PTH、CT水平的影响。方法:60只6月龄SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、阳性对照组、延经丸大剂量组、延经丸小剂量组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型,灌胃4周后处死,采用放射免疫方法测定血清PTH和CT含量。结果:各治疗组均能降低PTH水平,差异有统计学意义(P?0.01);延经丸大剂量组PTH含量接近假手术组,与阳性对照组和延经丸小剂量组差异有统计学意义(P?0.01)。各治疗组均能升高CT水平,差异有统计学意义(P?0.05),延经丸大剂量组与阳性对照组和延经丸小剂量组之间差异有统计学意义(P?0.01)。结论:延经丸能降低骨质疏松大鼠血清PTH水平、升高血清CT水平,促进骨形成,抑制骨吸收,从而改善大鼠骨代谢。     

虎潜丸对去卵巢大鼠骨密度和TGF-β2表达的影响

目的：观察虎潜丸对去卵巢大鼠骨密度和转化生长因子-B2（TGF-β2）的影响,探讨“肾主骨”理论与去卵巢大鼠模型骨密度和TGF-β2的相关性。方法：将40只SD大鼠按随机原则分为虎潜丸组、雌激素组、模型组、假手术组,每组10只。对除假手术组外的其余3组大鼠行卵巢摘除手术,术后7d各组予相应药物灌胃治疗。干预12周后,观察比较各组大鼠离体第5腰椎骨骨密度和大鼠腰椎松质骨、肾组织中TGF-β2的表达强度。结果：虎潜丸组和雌激素组大鼠骨密度、腰椎骨及肾组织中TGF-β2表达水平均高于模型组,差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。结论：虎潜丸能提高去卵巢大鼠模型腰椎骨骨密度,并上调腰椎松质骨、肾组织中TGF-β2的表达。     

密骨方对去卵巢骨质疏松骨折大鼠臂板蛋白3A表达的影响

目的:采用密骨方干预去卵巢骨质疏松骨折Wistar大鼠,观察密骨方对大鼠骨折断端臂板蛋白3A表达的影响,探讨中药密骨方影响骨折愈合的机制。方法:45只3个月龄雌性Wistar大鼠随机分为3组:假手术骨折对照组(Sham,n=15),骨质疏松骨折模型组(OVX,n=15),骨质疏松骨折密骨方组(OVX-M,n=15)。适应性饲养1周后建立骨质疏松模型,OVX组与OVX-M组依次摘除双侧卵巢,Sham组切除卵巢周围同质量的脂肪组织。3组大鼠去卵巢术后5个月,建立骨折模型,手术刀加外力致股骨中部骨折,并复位固定。骨折术后第2天,OVX-M组进行中药密骨方灌胃干预,采用1mL/100g的剂量比例进行灌服,1次/d。分别在密骨方干预后第2,4,6周采集骨组织样本,用Western Blot实验方法检测骨折断端臂板蛋白3A含量。结果:Sham组在第2,4,6周呈上升趋势;OVX组在第2,4,6周呈先上升后下降趋势;OVX-M组在第2,4,6周呈先上升后下降趋势。第2周,Sham组与OVX组比较,差异无统计学意义(P=0.223);OVX-M组与OVX组比较,差异无统计学意义(P=0.066)。第4周,Sham组与OVX组比较,差异无统计学意义(P=0.159);OVX-M组与OVX组比较,差异无统计学意义(P=0.093)。第6周,Sham组与OVX组比较,差异有统计学意义(P=0.004);OVX-M组与OVX组比较,差异有统计学意义(P=0.023)。结论:中药密骨方干预可提高大鼠骨折断端臂板蛋白3A的表达,促进骨质疏松骨折愈合。