姜黄素拮抗瘦素损伤小鼠足细胞的实验研究

目的：探讨瘦素对小鼠足细胞的损伤效应,及姜黄素拮抗这一效应的可能.方法：小鼠足细胞分为四组,分别为空白对照组,瘦素刺激组,姜黄素加瘦素组,及姜黄素对照组.mRNA检测采用实时定量PCR方法,蛋白检测采用免疫印迹法.结果：瘦素（15 ng/ml）能显著抑制足细胞nephrin,podocin,podoplanin,podocalyxin表达,与对照组比较,mRNA表达的抑制率分别为31％、28％、33％及29％;蛋白质表达的抑制率分别为26％、30％、24％及32％,P均＜0.05.加入姜黄素（5μmol/L）后,上述足细胞标志蛋白均被上调,与瘦素组比较,mRNA表达分别上调1.25、1.15、1.34及1.20倍;蛋白质表达分别上调1.15、1.31、1.14及1.32,P均＜0.05.瘦素（15 ng/ml）能显著活化Wnt/β-catenin信号通路,与对照组比较,Wnt1、Wnt2b和Wnt6及其下游蛋白β-catenin的mRNA表达分别上调1.54、1.29、1.52及1.25倍,P均＜0.05.β-catenin的蛋白磷酸化水平抑制率为17％,P＜0.05.加入姜黄素（5μmol/L）后,上述信号通路分子均被抑制,与瘦素组比较,Wnt1、Wnt2b和Wnt6及β-catenin的mRNA表达抑制率分别为12％、12％、22％及10％,P＜均0.05.磷酸化的β-catenin上调1.13倍.结论：瘦素能通过Wnt/β-catenin信号通路损伤足细胞,而姜黄素能逆转这一反应.     

冬虫夏草人工繁育品拮抗糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的研究

目的:探讨冬虫夏草人工繁育品(ACOS)对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞损伤的保护作用。方法:将雄性SD大鼠分成对照组、DN模型组(高脂饲料及链脲佐菌素造模)、低剂量及高剂量ACOS干预组(分别用2.5 g/kg及5.0 g/kg每天灌胃,共8周)。观察尿蛋白、血生化指标、肾功能、肾脏病理及足细胞标志蛋白表达变化。结果:13周试验结束时,模型组大鼠与对照组比较,胰岛素抵抗指数、血糖、尿蛋白及血肌酐水平显著增加;肾小球增大、系膜基质增多及足突增宽;nephrin、podocin、WT-1的mRNA和蛋白表达下调,desmin的mRNA和蛋白表达上调。上述差别均具有统计学意义(P0.05)。ACOS干预后,上述所有指标均显著改善(P0.05)。结论:大鼠模型试验显示ACOS可显著改善2型糖尿病并减轻DN的足细胞损伤。     

新生小鼠足细胞损伤对肾小球发育的影响

目的 探讨新生小鼠中足细胞损伤对肾小球发育的影响及其机制。 方法 于新生ICR小鼠出生后1 d注射嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside，PA)，并以注射生理盐水作为对照。观察出生后第2、4、8、12、30、60、90天时肾重/体重、尿蛋白、血压及组织学的改变。应用免疫组化及定量RT-PCR方法测定肾皮质内肾母细胞瘤基因(WT-1)、CD31、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1、血管生成素(angiopoietin，Ang-1、Ang-2)及其受体Tie-1、Tie-2的表达水平。 结果 注射PA后，新生小鼠肾重、体重均明显低于对照组。出生后第2天(注射PA后1 d)时，肾小球足细胞出现足突广泛融合和微绒毛的脱落；第12天时，肾小球内CD31的表达明显下降，部分肾小球萎缩、发育不良，肾皮质浅层小球成熟指数明显下降；第30天时，原先发育不良的肾小球逐渐被吸收；第60天时，剩余肾小球出现系膜区的扩张和小球节段性硬化。PA鼠在第30天时出现蛋白尿；第60天时血压显著增高。定量RT-PCR显示，第2天时肾皮质Ang-1表达明显上调，Flk-1及Tie-2明显下降。 结论 PA可以在早期损伤的新生ICR小鼠足细胞，改变VEGF、血管生成素系统的表达，导致肾小球毛细血管袢发育不良及在后期产生蛋白尿、高血压和肾小球硬化。     

足细胞标志蛋白及足细胞疾病

肾小球内有三种固有细胞：系膜细胞、内皮细胞、足细胞。不同的病因可导致不同固有细胞的损伤，在临床上表现为不同类型的肾小球疾病。其中足细胞受损后，临床主要表现为蛋白尿，典型的表现为大量蛋白尿。蛋白漏出是肾小球疾病的常见表现，反过来也是加速肾小球硬化的一个重要因素。随着近年来对足细胞生物学研究的深入，尤其是在发现足细胞表达的一些特异性蛋白分子之后，足细胞现已被认为是参与各种原发或继发性肾小球疾病进展的关键细胞。     

细胞周期调节蛋白在肾小球足细胞损伤中的作用

蛋白尿是肾脏疾病常见的临床表现之一,也是进展至肾衰竭的独立危险因素.肾小球滤过屏障结构或功能异常是蛋白尿发生的重要原因.     

足细胞损伤与蛋白尿

蛋白尿是肾小球疾病的主要表现之一,近年来肾病学者对足细胞损伤与蛋白尿发生的关系进行了深入研究,且不断有新的发现和认识,本文就足细胞的损伤与蛋白尿的关系作一综述.     

足细胞相关蛋白与足细胞相关肾病研究进展

近年来对足细胞分子结构的深入研究 ,有助于足细胞相关肾病认识、诊断和分型。足细胞损伤常导致裂孔膜和足细胞结构的变化 ,基因突变或外界因素常通过四组途径改变足突细胞功能 :①裂孔膜形成 ;②足细胞与肾小球基底膜的附着 ;③actin细胞骨架 ;④足细胞顶膜区。本文综述上述四组蛋白与肾脏疾病发生的最新进展     

足细胞损伤机制研究进展

足细胞即肾小球脏层上皮细胞，被覆于肾小球基底膜（glomerulor basementmembrane，GBM）外侧，与GBM和毛细血管内皮细胞共同构成了肾小球滤过膜。足细胞是避免机体蛋白质丢失的最后一道屏障，足细胞损伤或丢失可导致大量蛋白尿及肾小球硬化。随着该领域研究的不断深入，足细胞被认为是各种原发和继发性。肾小球疾病进程中的关键细胞之一。本文就足细胞损伤机制方面的研究进展做一综述。     

足细胞与肾小球损伤

随着体外培养技术的发展，已认识到肾小球足突细胞具有其特殊的结构和性质。它参加了初期及进行性肾小球损伤过程，其具有的多种表面抗原及受体结构成份亦可能涉及肾小球免疫损伤的病理过程，已获得的信息资料从根本上改变了人们对它的看法。     

足细胞相关蛋白与足细胞相关肾病研究进展

近年来对足细胞分子结构的深入研究，有助于足细胞相关肾病认识、诊断和分型。足细胞损伤常导致裂孔膜和足细胞结构的变化，基因突变或外界因素常通过四组途径改变足突细胞功能：①裂孔膜形成；②足细胞与肾小球基底膜的附着；③actin细胞骨架；④足细胞顶膜区。本文综述上述四组蛋白与肾脏疾病发生的最新进展。     

足细胞与肾小球损伤

随着体外培养技术的发展，已认识到肾小球足突细胞具有其特殊的结构和性质。它参加了初期及进行性肾上球损伤过程，其具有的多种表面抗原及受体结构成份亦可能涉及肾小球免疫损伤的病理过程，已获得的信息资料从根本上改变了人们对它的看法。     

糖尿病肾病足细胞损伤的机制研究

<正>糖尿病肾病为糖尿病常见的慢性并发症之一,且是Ⅰ型糖尿病患者主要死因之一,其早期主要特征为微量白蛋白尿,后期逐渐进展为大量蛋白尿及血肌酐、尿素氮升高。在我国糖尿病患者人群中,约有20%～40%伴有糖尿病肾病^[1]。在欧美国家中,由于糖尿病患者数增加,糖尿病肾病患病率也呈持续上升阶段,其成为了终末期肾病的主要病因^[2]。深入研究糖尿病肾病的发病机制有助于实施有效的干预措施,从而延缓糖尿病肾病的病情发展。     

足细胞损伤的干预研究进展

目前足细胞的减少和丢失成为反映肾小球损伤和硬化的重要指标,对于其损伤的干预研究也受到诸多的关注,本文就此作一综述     

足细胞骨架蛋白相关分子网络在足细胞损伤和蛋白尿发生中的作用

足细胞,即肾小球脏层上皮细胞,具有复杂的细胞形态和结构,包括胞体以及从胞体依次伸出的主足突和次级足突(foot process)[1]".毗邻足细胞的足突之间形成的裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)构成肾小球滤过的最后一道屏障.近来SD组成分子如nepbrin、podocin和CD2AP以及离子通道蛋白TRPC6的发现进一步证实足细胞足突及其SD结构和功能异常是蛋白尿发生的重要原因[2].     

红花提取物对高糖处理的小鼠足细胞损伤的影响

目的:探讨红花提取物对高糖处理的小鼠足细胞增殖、凋亡和炎症因子分泌的影响及分子机制。方法:将小鼠足细胞MPC5分为对照(NC)组、高糖(HG)组、不同浓度红花提取物组、红花提取物+HG组、miR-NC+HG组、miR-516a-5p+HG组、anti-miR-NC+HG组、anti-miR-516a-5p+HG组、红花提取物+miR-NC+HG组、红花提取物+miR-516a-5p+HG组。MTT检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测miR-516a-5p表达水平;ELISA检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果:红花提取物处理后,高糖处理的小鼠足细胞中细胞活性升高,细胞凋亡率降低,IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,miR-516a-5p表达水平降低(P0.05)。过表达miR-516a-5p促进高糖处理的小鼠足细胞炎症因子表达和细胞凋亡,抑制细胞增殖;抑制miR-516a-5p表达与其作用相反。miR-516a-5p过表达可以逆转红花提取物对高糖处理的MPC5细胞增殖、凋亡,炎症因子表达的影响。结论:红花提取物可能通过下调miR-516a-5p表达抑制高糖处理的小鼠足细胞炎症因子表达和细胞凋亡,促进细胞增殖。     

足细胞细胞周期调控蛋白研究进展

近年来研究发现,细胞周期调控蛋白通过对足细胞损伤的应答反应,在足细胞病变中起重要作用.本文就细胞周期调控蛋白在足细胞增殖、分化、肥大、凋亡中的变化以及足细胞细胞周期调控蛋白对各种肾脏病的临床指导作用进行综述,为临床寻找更有效的诊断和治疗手段提供参考.     

抑制蛋白激酶Cα活性增加TNF-α对小鼠肝癌细胞毒性的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)及联合蛋白激酶Cα (protein kinase C alpha,PKC-α)抑制剂Go6976对小鼠肝癌(H22)细胞凋亡的影响。方法将处于对数生长期的H22细胞分成两组,每组分四部分,一组仅以不同浓度的TNF-α(0,20、40、60 ng／ml)处理,另一组TNF-α处理同时以Go6976(4．6 nmol／ml)抑制PKC-α活性,分别于4 h,8 h,16 h采用流式细胞仪检测小鼠肝癌细胞的凋亡率,Western blotting方法检测PKC—α和磷酸化PKC-α蛋白的表达情况。结果 TNF-α(0、20、40、60 ng／ml)处理H22细胞4 h,细胞凋亡率分别为2．44％±0．31％、 1．80％±0．32％、2．73％±0．14％、3．05％±0．78％,PKC-α和磷酸化PKC-α表达无显著改变;同时用 TNF-α和Go6976处理H22细胞,凋亡率、PKC-α和磷酸化PKC-α的表达与单独使用TNF-α的结果相似。TNF-α处理8 h,细胞凋亡率分别为2．11％±0．43％、1．83％±0．31％、3．40％±0．47％、6．05％± 0．78％,PKC-α及磷酸化PKC-α的表达随TNF—α浓度增加而上调;TNF—α处理同时抑制PKC-α活性,细胞凋亡率显著升高,分别为2．90％±0．39％、7．76％±0．35％、11．43％±1．05％、12．96％± 2．44％,PKC-α和磷酸化PKC-α表达相应下调。仅以TNF-α处理或TNF—α处理同时抑制PKC-α活性16 h,其结果与8 h的结果基本一致;于Go6976抑制细胞PKC-α活性组,TNF-α60 ng／ml时细胞凋亡率较TNF-α40 ng／ml时有所下降,但坏死细胞的比例却明显升高。结论 TNF-α上调PKC—α和磷酸化PKC-α表达;抑制PKC-α活性,显著增加TNF-α对H22细胞的细胞毒性。     

足细胞损伤与IgA肾病

近年来,许多不同的病因基本是通过足细胞的损伤而启动IgA肾病的进程,尤其对足细胞多种蛋白分子的研究可进一步了解IgA肾病的发病机制.     

足细胞损伤与肾小球硬化

足细胞是肾脏固有细胞之一，近几年随着多种足细胞标记蛋白的发现，足细胞损伤在蛋白尿和肾小球硬化中的作用越来越受到重视。本文就足细胞近几年的研究进展及足细胞损伤与肾小球硬化的关系作一综述。