当归补血汤对糖尿病肾病大鼠高密度脂蛋白及微量蛋白尿的影响

目的:观察当归补血汤对糖尿病大鼠血清高密度脂蛋白(HDL)及尿微量白蛋白(MAU)的影响,探讨其肾脏保护效应。方法:试验设空白对照组(N组)、模型组(DN组)、格列齐特组(GT组)、当归补血汤高/低剂量组(DH/DL组),STZ+高脂饲料喂养诱导糖尿病肾病模型,灌胃8周后取材,检测血糖、血脂及肾功能相关指标,酶联免疫吸附试验检测尿MAU含量,光镜、电镜观察肾脏结构改变。结果:DH组血糖、血脂显著降低,与GT组相当,而HDL高于GT组(P0.01),肾功能改善,镜下肾脏损伤明显减轻;当归补血汤治疗组MAU低于GT组。结论:当归补血汤可有效改善DM大鼠代谢紊乱,升高血HDL,降低蛋白尿,改善肾功能,减轻肾脏损伤。     

何首乌提取物二苯乙烯苷对糖尿病肾小管损伤保护作用的实验研究

目的:探讨TSG对DM大鼠肾小管损伤的保护作用。方法:雄性Wister大鼠120只,分NC组12只、NC+TSG组12只、NC+STZ组12只、余84只行左侧肾结扎术,术后2周,12只LR组,余70只与NC+STZ组12只造DM大鼠模型。有58只大鼠血糖达标,分为DN组20只;DN+TSG_1组18只;DN+TSG_2组20只。NC+STZ组血糖达标9只。给予NC+TSG组、DN+TSG_2组(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))、DN+TSG_1组(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))腹腔注射干预治疗8周。通过光镜(HE染色)、电镜观察对比各组大鼠肾脏组织形态学变化;Western blot定量分析肾组织NT蛋白表达水平,免疫组织化学染色方法判定肾组织中iNOS的分布及表达强度变化;散色比浊法检测Uα_1-MG。结果:第一部分:DN组:Uα_1-MG升高,DN+TSG_2组较DN组Uα_1-MG降低;HE染色、电镜结果:DN+TSG_2组较DN组病理变化减轻。上述观察指标LR组、NC+TSG组、NC+STZ组、DN+TSG_1组与NC组之间均没有显著改变(P0.05),故未纳入第二部分研究。第二部分:在干预8周时,免疫组化分析显示,在DN+TSG_2组,iNOS在肾小管上皮细胞表达明显减少,与DN组比较差异均有统计学意义(P0.05),但仍未恢复到NC组的水平。Western蛋白印迹分析显示,与NC组比较,DN组和TSG_2+DN组大鼠肾脏NT蛋白表达量的灰度比值升高;与DN组相比TSG_2+DN组肾脏NT蛋白表达量的灰度比值降低,差异均有统计学意义(P0.05),DN组iNOS、NT均与α1-MG有正相关性(r=0.583,P=0.011;r=0.791,P=0.011)。结论:中药何首乌有效成分TSG对高血糖引起的肾小管损伤有保护作用,可能通过干预肾组织中NO-ONOO-氧化应激反应,减少Uα_1-MG,进而延缓DM向DN发展。     

调节内质网应激对糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的影响

目的 探讨调节内质网应激对小鼠肾组织组蛋白甲基转移酶(HMT) SET7/9表达的影响及意义.方法 db/db小鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病(DN)组和甜菜碱治疗(DN+B)组;db/m小鼠作为正常对照(NC)组,每组各18只.实验第4、8、12周末分别采用实时定量PCR和(或)Western印迹法测定小鼠肾组织SET7/9、葡萄糖调节蛋白(GRP)78、H3K4me2和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平;ELISA法测定24 h尿蛋白排泄率(UPER)和尿MCP-1浓度;全自动生化分析仪检测血糖(BG)、血肌酐、血尿素氮的动态改变;PAS染色观察肾脏病理改变.结果 与NC组比较,DN组BG、BUN、UPER、MCP-1均显著升高(均P＜0.05),且呈时间依赖性.DN组小鼠第4周末开始出现肾小球基底膜增厚、系膜细胞增生改变,第12周末出现明显系膜基质积聚.与NC组比较,DN组肾组织GRP78、SET7/9的mRNA和蛋白质表达水平均显著升高,H3K4me2蛋白水平也显著升高,且呈时间依赖效应.与DN组比较,甜菜碱治疗组小鼠肾小球病变明显减轻,GRP78、SET7/9的mRNA及蛋白表达水平显著降低,BG、BUN、UPER、MCP-1、H3K4me2水平显著降低(均P＜0.05).结论 内质网应激可能是介导糖尿病小鼠肾脏SET7/9表达的上游机制.     

细胞凋亡与糖尿病肾病的关系及糖肾康作用机制的研究

目的:从细胞凋亡角度探讨糖尿病肾病(DN)的发病机理及糖肾康对糖尿病肾病细胞凋亡的影响。方法:将60只大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、中药预防组(糖肾康8.75g·kg~(-1)·d~(-1))、中药高剂量组(糖肾康17.5g·kg~(-1)·d~(-1))中药低剂量组(糖肾康8.75g·kg~(-1)·d~(-1))。糖尿病肾病大鼠模型以小剂量链脲佐菌素腹腔注射配合高糖饮食制作;治疗6周后,采用原位末端标记法和免疫组化方法检测肾组织内细胞凋亡及Fas/FasL、Bcl-2等相关基因的表达。结果:模型组大鼠肾组织内细胞凋亡明显增多,Fas/FasL基因表达增加,Bcl-2基因表达减少,与其他组别相比有统计学差异(P<0.05或P<0.01);模型组PKC主要表达在肾小球和肾小管的细胞膜上,而其他组则主要表达于胞浆。结论:糖尿病肾病大鼠肾组织尤其是肾小管细胞凋亡明显增多,糖肾康可通过降低Fas/FasL基因表达,促进Bcl-2基因表达,抑制PKC在胞膜的表达而起到控制肾组织内细胞凋亡的作用。     

缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:探讨缬沙坦与螺内酯联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响。方法:取6周龄SD大鼠50只,随机分为正常组、模型组、缬沙坦组、螺内酯组及缬沙坦+螺内酯联合治疗组,每组10只。采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型。正常组及模型组给予生理盐水10 ml·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,治疗组均给予缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)、螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃、缬沙坦10 mg·kg~(-1)·d~(-1)+螺内酯100 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,各组大鼠均于术后2周后处死。肾组织行HE染色及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察梗阻肾组织TGF-β1mRNA、BMP-7 mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组的TGF-β1mRNA表达增多(P0.05),BMP-7 mRNA表达则显著降低,三组治疗组TGF-β1mRNA表达显著低于模型组(P值均0.05),而BMP-7mRNA表达则显著增加。联合治疗组与缬沙坦、螺内酯组的差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论:与单用缬沙坦、螺内酯相比,联合治疗能减轻UUO大鼠肾间质纤维化。     

GSK-3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠的作用研究

目的:观察糖尿病肾病大鼠应用GSK-3β抑制剂(氯化锂)后生化指标、肾脏病理、肾组织磷酸化GSK-3β(p GSK-3β)与总糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白水平的比值,探讨GSK-3β抑制剂对糖尿病肾病的作用。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(NC组)、单纯抑制剂组(NY组)、糖尿病肾病组(DN组)、DN后应用抑制剂组(DY组)。通过小剂量腹腔注射STZ联合高脂饮食建立DN大鼠模型;腹腔注射氯化锂进行干预。观察大鼠一般状态、血糖、血肌酐、尿蛋白等指标及肾组织病理变化;Western印迹方法检测肾组织总GSK-3β及p GSK-3β蛋白水平。结果:(1)与NC组相比,DN组及DY组大鼠24小时尿量、尿蛋白、血肌酐、血糖均升高;与DN组相比,DY组24 h尿蛋白定量下降。(2)与NC组相比,DN组肾脏病理呈糖尿病肾病样变化,DY组较DN组病理减轻。(3)NY组和NC组相比p GSK-3β/总GSK-3β蛋白水平差异无统计学意义;与NC组相比DN组及DY组p GSK-3β/总GSK-3β降低;DY组较DN组p GSK-3β/总GSK-3β增多。结论:氯化锂通过提高肾组织p GSK-3β蛋白表达量,抑制GSK-3β的活性,进而改善肾脏病理,减少尿蛋白,达到保护肾脏的作用。     

对比剂肾病大鼠肾脏GRP78与caspase-12表达及胰激肽原酶干预研究

目的:研究对比剂肾病大鼠肾脏中葡萄糖调节蛋白(glucose-regulated protein 78,GRP78)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)的表达情况,探讨内质网应激在对比剂肾病发生发展中的作用,及胰激肽原酶的干预效果。方法:将84只大鼠随机分为3组:假手术组(D组),模型组(Z组),胰激肽原酶干预组(Y组)。自造模前3 d至处死日当天,Y组每天给予胰激肽原酶(15 U/kg)灌胃,D组及Z组每天给予等量生理盐水灌胃。分别于造模后12 h,24 h,48 h,72 h处死部分大鼠,观察各组大鼠血清尿素氮、肌酐水平变化;HE染色观察肾脏病理改变;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测肾脏细胞凋亡情况;RT-PCR检测肾脏GRP78 mRNA及caspase-12 mRNA的表达情况;免疫组化和Western-blot观察各组大鼠肾脏GRP78及caspase-12蛋白表达情况。结果:D组GRP78 mRNA、caspase-12 mRNA及GRP78、caspase-12几乎无表达,且肾组织无明显病理损伤及细胞凋亡;Z组病理变化明显,细胞凋亡较重,且以上指标均明显升高;Y组病理变化、细胞凋亡及GRP78 mRNA、caspase-12 mRNA、GRP78、caspase-12升高均较Z组明显减轻(P0.05),但仍高于D组(P0.05)。结论:内质网应激参与大鼠对比剂肾病的发生发展,胰激肽原酶可能通过减少caspase-12表达减轻内质网应激,发挥肾脏保护作用。     

糖尿病肾病合并抗Thy-1肾炎模型构建及p27~(kip1)的变化

目的:构建糖尿病肾病合并抗Thy-1肾炎模型,观察模型的发病及病理变化,探讨p27kip1在模型中的变化及意义。方法:将大鼠随机分为4组:正常组(NC组,n=10),糖尿病肾病组(DN组,n=10),抗Thy-1肾炎模型组(Thy组,n=10),糖尿病肾病合并抗Thy-1肾炎模型组(DN+Thy组,n=10)。分别留取2周、4周、6周、8周大鼠24 h尿测尿蛋白定量,8周后留取肾脏组织分别用于提取RNA、蛋白和肾脏病理检查。结果:(1)24 h尿蛋白定量:2周以后各模型组与NC组相比尿蛋白增多(P0.05),DN+Thy组与DN组、Thy组相比尿蛋白增多(P0.05);(2)各模型组p27kip1mRNA表达量的变化,DN组的明显增加;Thy组降低;DN+Thy组的表达量略增加,但与正常组比差异无统计学意义。结论:(1)成功诱导出糖尿病肾病合并抗Thy-1肾炎的动物模型;(2)肾皮质细胞周期负调控蛋白p27kip1mRNA表达量的变化为DN合并抗Thy-1肾炎与DN、抗Thy-1肾炎的鉴别提供依据。     

Vaspin对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的:探讨脂肪细胞因子Vaspin对2型糖尿病肾病大鼠血糖水平、肾脏组织炎症因子水平及肾功能的影响。方法:以SD大鼠为实验对象,高脂饲养联合链脲佐菌素(50 mg/kg,单次腹腔注射)构建2型糖尿病肾病大鼠模型。大鼠分为正常对照组(NC组,n=10),糖尿病肾病组(DN组,n=8),Vaspin干预组(Vaspin组,n=8)。Vaspin组按每日960 ng/kg剂量经腹腔注射Vaspin蛋白溶液,NC组和DN组注射等体积生理盐水作为对照,共干预6周。干预结束后,通过口服葡萄糖耐量试验评估大鼠糖耐量情况,留取24 h尿液、血清和肾脏组织,检测尿蛋白排泄量、血尿素氮、血肌酐,计算肾比重。采用ELISA检测各组大鼠肾脏组织中炎症因子TNF-α、IL-6、MCP-1和ICAM-1的水平。结果:与NC组相比,DN组OGTT曲线下面积、肾脏指数、尿蛋白排泄量、血尿素氮、血肌酐均升高(P0.05)。Vaspin组较DN组上述指标明显下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Vaspin可通过降低2型糖尿病肾病大鼠血糖水平和肾脏组织炎症因子的表达,改善肾功能。     

祛痰通络汤对糖尿病大鼠肾组织内质网应激相关分子GRP78和CHOP表达的影响

目的:观察祛痰通络汤对糖尿病大鼠肾组织中内质网应激相关分子GRP78和CHOP表达的影响。方法:高糖高脂饲料联合腹腔注射STZ制备糖尿病模型,随机分为4组,分别为正常对照组、模型组、祛痰通络汤组、四苯基丁酸组,治疗8周。观察各组24 h尿蛋白定量、肾脏病理学变化;免疫组化和western-blot检测肾组织内质网应激相关蛋白GRP78,CHOP的表达。结果:祛痰通络汤降低尿蛋白,减轻病理改变;模型组肾组织的GRP78、CHOP表达明显升高(P0.05),祛痰通络汤组GRP78、CHOP表达明显低于模型组(P0.05)。结论:糖尿病大鼠肾脏中GRP78、CHOP表达明显增强,祛痰通络汤降低内质网应激,可能是其肾脏保护作用的重要机制。     

尾加压素Ⅱ与糖尿病肾病大鼠动脉粥样硬化形成的相关性研究及川穹嗪的干预作用

目的:本实验利用链脲佐菌素建立糖尿病肾病大鼠模型,采用免疫组织化学等方法,探讨血浆尾加压素Ⅱ与糖尿病肾病大鼠动脉粥样硬化形成的相关性及其川穹嗪对二者的影响。方法:采用高糖高脂饮食合并链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病肾病大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照NC组、糖尿病肾病DN组、川穹嗪CZ组(150mg·kg-1·d-1灌胃)(人与大鼠剂量之比约为7∶1,人常规剂量80～160mg/d除以标准体重×7,所得约为150～300mg/kg;用药方式选为灌胃,应静脉临床试验中难以进行),检测各组大鼠重量、24h尿白蛋白量、血糖、血脂、肾功能等;行HE染色观察各组大鼠病理学形态;免疫组化观察UⅡ、GPR14蛋白表达;RT-PCR观察UⅡmRNA表达。结果:与NC组相比,DN组各项检查及病理学改变明显增大,免疫组化中UⅡ、GPR14蛋白表达增加;RT-PCR观察UⅡmRNA表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);而CZ组相对DN组各项结果有所改善(P<0.05)。结论:肾小球UⅡ及其受体GPR14的高表达,提示其在糖尿病肾病动脉粥样硬化形成过程中可能起重要作用;川穹嗪可能是通过抑制UⅡ和GPR14异常表达,一定程度上缓解了肾脏病理损伤,保护肾功能。     

红曲提取物对肾病综合征血清脂谱和肾小球硬化的影响

目的:探讨红曲提取物对肾病综合征(NS)大鼠降血脂的肾脏保护作用。方法:采用嘌呤霉素引起的NS模型。实验分正常组、肾病组和治疗组(红曲提取物0.8g·kg~(-1)·d~(-1))。检测各组血清脂谱,以Northern杂交检测肾脏转化生长因子β(TGF-β)纤维连接蛋白(FN)mRNA表达。结果:肾病大鼠呈高脂蛋白血症,该组肾脏TGF-β和FNmRNA表达较正常对照组和治疗组均明显上调(P<0.01,~#P<0.01);红曲提取物治疗组,血清总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白,低密度脂蛋白和载脂蛋白B低于肾病对照组,而高密度脂蛋白和载脂蛋白A_1高于肾病组(~#P<0.05),同时治疗组较肾病组血浆白蛋白升高,尿蛋白减少。结论:红曲提取物能显著降低NS大鼠血脂水平,减轻蛋白尿,升高血浆白蛋白。并通过下调肾脏TGF-β和FNmRNA的表达防止和减轻肾小球硬化。     

尾加压素Ⅱ在糖尿病肾病大鼠动脉粥样硬化形成的表达及黄芪的干预

目的:观察糖尿病肾病大鼠主动脉、肾脏组织中尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)及其G蛋白耦联受体14(G-protein-coupled receptor14,GPR14)水平的变化,探讨UⅡ在糖尿病肾病动脉硬化形成的作用和发病机制及黄芪的干预效果。方法:采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立大鼠糖尿病肾病模型。将大鼠分为正常对照组(NC)、糖尿病肾病组(DN)、黄芪治疗组(HZ)(予黄芪注射液5ml/kg灌胃)。于14周末处死动物,常规病理学检查,免疫组化观察UⅡ、GPR14蛋白表达;RT-PCR观察UⅡmRNA表达。结果:与NC组比较,DN组主动脉、肾组织UⅡ、GPR14表达增加,肾组织UⅡmRNA表达增加(P<0.01);与DN组比较,HZ组表达显著减少(P<0.05)。结论:UⅡ及其受体GPR14的高表达提示其在糖尿病肾病动脉粥样硬化形成的过程中可能起重要作用;黄芪能够缓解肾脏病理损伤,其机制可能是通过抑制UⅡ和GPR14异常表达有关。     

高糖条件下益肾胶囊对肾小管上皮细胞SOCS-3、TGF-β_1表达的影响

目的:观察高糖条件下益肾胶囊含药血清对肾小管上皮细胞SOCS-3、TGF-β_1表达的影响,探讨益肾胶囊防治糖尿病肾病的作用机制。方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞,大鼠药物灌胃后取血制备成含药血清。按随机数字法分为7组:正常对照组、等渗对照组、高糖组、益肾胶囊小剂量组(0.625 g·kg~(-1)·d~(-1))、益肾胶囊中剂量组(1.25 g·kg~(-1)·d~(-1))、益肾胶囊大剂量组(2.5 g·kg~(-1)·d~(-1))及贝那普利治疗组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))。采用Western blot检测SOCS-3及TGF-β_1的表达;Real-time PCR检测中SOCS-3 mRNA的表达;免疫荧光化学染色法检测各组大鼠肾小管上皮细胞SOCS-3及TGF-β_1表达。结果:Real-time PCR结果示:高糖培养下大鼠肾小管上皮细胞SOCS-3 mRNA明显增高(P0.05);同高糖组比较,经含药血清干预SOCS-3表达进一步增多(P0.05);免疫荧光化学染色法及Western blot检测结果均提示:高糖干预下SOCS-3与TGF-β_1二者蛋白表达量均明显增高(P0.05);同高糖组比较,含药血清干预后SOCS-3表达呈现进一步增多,而TGF-β_1表达随着SOCS-3的表达增加而逐步下降(P0.05)。结论:益肾胶囊可能上调SOCS-3表达,抑制TGF-β_1过表达,对肾小管上皮细胞炎症反应有一定抑制作用,其具体机制有待进一步研究。     

MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦干预的影响

目的：探讨MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦对二者的影响.方法：采用高糖高脂饮食合并链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病肾病大鼠模型.将大鼠随机分为正常对照NC 组、糖尿病肾病DN组、厄贝沙坦DI组,检测各组大鼠24 h尿量、24 h尿白蛋白定量（24 h UTP）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肾重指数（KI）;行HE染色观察各组大鼠病理学形态,免疫组化观察MCP-1、ICAM-1蛋白的表达,RT-PCR观察MCP-1 mRNA、ICAM-1mRNA的表达.结果：与NC组比较,DN组大鼠肾脏病理改变加重,24 h尿量、24 h UTP、KI、BG、Scr、BUN、肾脏组织中MCP-1mRNA和ICAM-1mRNA及蛋白水平均显著增加,差异均有统计学意义（P＆lt;0.01）;与DN组比较,DI组大鼠BG、BUN、Scr有所改善,差异无统计学意义;肾脏病理改变减轻,其余指标明显降低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论：MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病肾脏损害过程中可能起重要作用;厄贝沙坦能够减轻糖尿病肾病肾组织MCP-1、ICAM-1的表达,缓解了肾脏病理损伤.     

基于iTRAQ技术探讨水蛭干预IgA肾病大鼠模型蛋白质组学研究

目的运用iTRAQ结合质谱技术检测IgA肾病(IgAN)大鼠模型尿液蛋白指纹图谱,筛选差异表达蛋白,研究水蛭治疗血瘀证IgAN的作用机制。方法选用6周龄的Wistar雄性大鼠140只,运用脂多糖牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳方法建立实验性IgAN模型,造模成功后,随机分为模型对照组(不给予干预)、生理盐水对照组(给予生理盐水2 mL/100 g灌胃)、水蛭高剂量治疗组(给予泼泥松5.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)+水蛭1.2 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃。每日一次)、水蛭中剂量治疗组(给予泼泥松5.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)+水蛭0.6 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃。每日一次)、水蛭低剂量治疗组(给予泼泥松5.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)+水蛭0.3 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃。每日一次)、泼尼松治疗对照组(给予泼尼松5.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),另设立空白对照组,每组20只。收集各组大鼠尿液样本,经过SDS-PAGE电泳后,进行iTRAQ标记,采用离线二维液相色谱分离与点靶以及质谱分析,运用数据库检索对各组样本进行相对定量分析,并利用生物信息学软件进行信息学分析。结果以P值0.05且蛋白丰度差异0.83或蛋白丰度差异1.2为差异蛋白筛选标准,共筛选出的16个差异蛋白,其中模型对照组和空白对照组相比上调、水蛭治疗后下调的蛋白有6个,模型对照组和空白对照组相比下调、水蛭治疗后上调的蛋白有10个。采用KEGG富集分析筛选出和IgAN发生、发展密切相关的有10条分子信号通路,主要通路为补体和凝血级联途径。结论应用iTRAQ技术筛选出水蛭治疗后IgAN大鼠模型尿液标本中差异表达蛋白及与IgAN发生、发展密切相关的信号通路,为深入研究IgAN血瘀证的发生机制及水蛭治疗IgAN的作用机制奠定了基础。     

升清降浊胶囊对STZ诱导糖尿病肾病大鼠肾脏VEGF表达及肾功能的影响

目的:观察升清降浊胶囊(原名尿毒清胶囊)对STZ诱导糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏VEGF表达及肾功能的影响。方法:40只大鼠随机分为正常组、DN模型组、对照组、治疗组共4组,每组10只。腹腔注射40 mg/kg STZ复制大鼠DN模型,对照组予缬沙坦胶囊33.3 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗组予缬沙坦胶囊33.3 mg·kg-1·d-1升清降浊胶囊83.3 mg·kg-1·d-1灌胃,4周后检测各组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮及尿蛋白定量;处死各组大鼠,行肾组织HE、PAS、PASM及Masson染色观察病理情况;免疫荧光检测肾组织VEGF;RT-PCR法检测各组肾组织VEGFmRNA表达,并进行统计学分析。结果:治疗组DN大鼠尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05);肾脏病理形态显示系膜及基质增生情况明显减轻;肾组织免疫荧光提示VEGF明显减少;VEGF mRNA表达定量明显下降(P0.05)。结论:升清降浊胶囊可明显改善DN大鼠肾功能,降低VEGF mRNA表达。     

NADPH氧化酶抑制剂apocynin对大鼠糖尿病肾小球细胞外基质代谢的影响

目的探讨NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA在糖尿病大鼠肾脏表达时间模式及抑制NADPH氧化酶活性对肾小球细胞外基质(ECM)代谢的影响。方法链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型随机地分为糖尿病非治疗组(DM),观察12周;NADPH氧化酶抑制剂apocynin治疗组(DM+Apo,0.2g·kg-1·d-1),疗程8周。用RT-PCR检测肾脏NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA的表达。免疫组织化学检测肾脏纤连蛋白(FN)表达。白明胶酶谱法(zymography)检测肾脏基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性。并测定Scr、尿蛋白量和肾重指数。结果DM组肾脏p22phoxmRNA的表达在4、6和8周时较正常对照组(C)明显升高(P<0.05);12周时降低至正常水平。DM+Apo组肾脏p22phoxmRNA的表达与DM组差异无统计学意义(P>0.05),但可显著逆转由糖尿病导致的肾小球体积、肾小球FN表达、肾小球ECM含量、Scr、尿蛋白量和肾重指数的升高(P<0.05),并显著提高肾脏MMP-9活性(P<0.05)。结论NADPH氧化酶的过度表达在糖尿病肾病(DN)发病的早期阶段起重要作用。抑制NADPH氧化酶活性的治疗措施可减少DN肾小球ECM积聚、延缓DN的发生和发展。     

何首乌提取物二苯乙烯苷延缓糖尿病大鼠肾小球滤过率下降的实验研究

目的:探讨何首乌提取物TSG延缓DM大鼠肾小球滤过率下降的机理。方法:雄性Wistar大鼠150只，分NC组48只；余102只高糖高脂喂养，8周后造DM大鼠模型。95只大鼠造模成功，DN组50只；DN+TSG组45只。给予DN+TSG组(30 mg·kg^-1·d^-1)腹腔注射8周，实验20周。通过HE染色、光镜、电镜下观察各组大鼠肾脏病理变化；采用免疫组化测定大鼠肾组织中ET-1、vWF的表达变化水平；Western-blot蛋白定量分析大鼠肾组织中NT蛋白的表达水平。结果:TSG干预8周时及给药结束后即实验12、16、20周时测DN组：UAlb/Ucr、CHOL、Scr逐渐升高(P<0.05),DN+TSG组较DN组：UAlb/Ucr、CHOL降低，20周Scr降低(P<0.05);HE染色、电镜结果较DN组病理变化减轻；免疫组化：与DN组比ET-1、vWF在肾组织中表达减少(P<0.05),但均未恢复到NC组的水平；Western蛋白印迹：与NC组比较，DN组和TSG+DN组大鼠肾脏NT蛋白表达量的灰度比值升高；与DN组...     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路及α-SMA、FN的影响

目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠24h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、JAK/STAT及α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的影响及其机制。方法:SD大鼠55只,随机留取10只为正常对照组(N)。利用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DN大鼠模型。造模成功大鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病模型组(DN)、益肾胶囊治疗组(DN+Y)、氯沙坦钾治疗组(DN+L)、氯沙坦钾+益肾胶囊治疗组(DN+L+Y),每组10只,连续灌胃12周。于实验的12周检测24h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血糖、BUN、Scr;取大鼠肾组织做组织病理学观察;免疫组化法检测肾组织磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-SMA、FN的表达。结果:实验12周末,与DN组比较,益肾胶囊治疗组24h尿蛋白定量、BUN、Scr明显降低(P<0.05),肾组织形态学改变较轻,p-JAK2、p-STAT3、α-SMA、FN的表达显著降低(P<0.05)。氯沙坦钾联合益肾胶囊治疗组与氯沙坦钾治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的活化,下调α-SMA、FN的表达,延缓了糖尿病肾病的进展;益肾胶囊联合氯沙坦钾可更好地保护肾脏功能,提示二者联合使用有协同作用。