何首乌提取物二苯乙烯苷延缓糖尿病大鼠肾小球滤过率下降的实验研究

目的:探讨何首乌提取物TSG延缓DM大鼠肾小球滤过率下降的机理。方法:雄性Wistar大鼠150只，分NC组48只；余102只高糖高脂喂养，8周后造DM大鼠模型。95只大鼠造模成功，DN组50只；DN+TSG组45只。给予DN+TSG组(30 mg·kg^-1·d^-1)腹腔注射8周，实验20周。通过HE染色、光镜、电镜下观察各组大鼠肾脏病理变化；采用免疫组化测定大鼠肾组织中ET-1、vWF的表达变化水平；Western-blot蛋白定量分析大鼠肾组织中NT蛋白的表达水平。结果:TSG干预8周时及给药结束后即实验12、16、20周时测DN组：UAlb/Ucr、CHOL、Scr逐渐升高(P<0.05),DN+TSG组较DN组：UAlb/Ucr、CHOL降低，20周Scr降低(P<0.05);HE染色、电镜结果较DN组病理变化减轻；免疫组化：与DN组比ET-1、vWF在肾组织中表达减少(P<0.05),但均未恢复到NC组的水平；Western蛋白印迹：与NC组比较，DN组和TSG+DN组大鼠肾脏NT蛋白表达量的灰度比值升高；与DN组...     

填精通络方对糖尿病肾病大鼠肾小管损伤的治疗作用

目的:探讨填精通络方(TJTLF)对链脲左菌素(STZ)诱导2型糖尿病肾病(DN)肾小管损伤的保护作用。方法:采用单侧肾结扎+高脂饲料喂养+小剂量STZ腹腔注射的方法制备2型DN大鼠模型,并用中药TJTLF进行干预。ELISA法检测大鼠尿液β_2微球蛋白(β_2-MG)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)含量,光学显微镜观察大鼠肾小管细胞结构及肾小管损伤指数变化,比较干预前后大鼠肾小管损伤情况。结果:DN模型组大鼠肾小管腔内可见脱落细胞碎片,部分肾小管空泡样变性;尿液β_2-MG、NGAL较正常组明显升高(P0.05)。中药TJTLF干预后,大鼠肾小管损伤指数降低(P0.01),尿液β_2-MG、NGAL含量降低(P0.05)。结论:TJTLF能够减轻2型DN大鼠的肾小管损伤,对肾小管具有一定的保护作用。     

ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡

目的探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)衍生肽ARA290对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用及其可能机制。方法采用链脲菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为4组:糖尿病模型组(DM组)皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次;ARA290治疗组(DA组)皮下注射ARA290(50 U/kg),隔日1次;EPOR阻断肽+ARA290治疗组(DAEB组)皮下注射EPOR阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次;CD131阻断肽+ARA290治疗组(DACB组)皮下注射CD131阻断肽(10μg/kg)和ARA290(50 U/kg),隔日1次。同时设立正常对照组(NC组),皮下注射生理盐水0.5 mL,隔日1次。药物干预12周后检测大鼠尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、尿N-乙酰葡萄糖苷酶(N-acetylglucosidase,NAG)、β_2微球蛋白(β_2-microglobulin,β_2-MG)、α_1微球蛋白(α_1-microglobulin,α_1-MG)、血肌酐(Scr)。肾组织切片HE染色,观察肾脏病理变化。采用免疫荧光检测肾脏EPO受体(EPO receptor,EPOR)、CD131的表达,TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化及Western印迹检测大鼠肾脏Caspase-3表达。结果免疫荧光检测显示大鼠肾脏表达EPOR、CD131,且两者存在共定位表达;TUNEL检测显示ARA290可以抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡;免疫组化及Western印迹检测显示ARA290降低糖尿病大鼠肾脏Caspase-3表达;生化检测显示ARA290可以降低糖尿病大鼠UAER、尿NAG、β_2-MG、α_1-MG、Scr,HE染色显示ARA290可以减轻肾脏病理损伤。此外,给予糖尿病大鼠ARA290和EPOR或CD131阻断肽皮下注射后,ARA290抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡、降低早期肾脏病变指标及减轻肾脏病理损伤的作用减弱。结论大鼠肾脏表达EPOR和CD131,EPO衍生肽ARA290可通过EPOR、CD131介导抑制糖尿病大鼠肾小管上皮细胞凋亡,发挥肾脏保护作用。     

清热方改善糖尿病肾病大鼠肾小管自噬应激的实验研究

目的:探讨糖尿病肾病(DN)内热证与肾组织自噬应激的相关性及清热方对DN大鼠肾小管损伤的修复作用。方法:选取经临床肾活检诊断为DN的患者14例为观察者,另取肾活检诊断为轻微病变的轻度蛋白尿或仅有血尿的患者7例作为对照,对每位患者进行中医症状量化评分,并留取肾组织进行微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)免疫组化染色。SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DN模型,将糖尿病大鼠和非糖尿病大鼠随机分为对照组、糖尿病组(DM)、清热方组和DM+清热方组,对照组及DM组给予生理盐水灌胃,清热方组正常大鼠及DM+清热方组给予清热方水煎剂灌胃,连续给药24周,实验结束后免疫荧光染色方法检测大鼠肾组织LC3-Ⅱ水平,酶联免疫法测定各组大鼠尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和肾损伤分子1(KIM-1)表达水平变化。结果:DN患者热证评分明显高于对照组患者,DN患者肾组织LC3-Ⅱ阳性表达亦明显强于对照组患者;DM组大鼠尿液NGAL、KIM-1水平较对照组显著升高,DM+清热方组大鼠尿液NGAL、KIM-1水平较DM组下降;DM组大鼠肾组织LC3-Ⅱ免疫荧光表达积分较对照组升高,DM+清热方组大鼠肾组织LC3-Ⅱ免疫荧光表达积分较DM组下降。结论:DN患者内热证可能与肾组织自噬应激具有一定相关性,清热方具有改善糖尿病肾病大鼠肾小管损伤的作用,具体机制可能与下调自噬应激密切相关。     

Vaspin对糖尿病肾病大鼠肾组织NF-κB和TGF-β_1表达的影响

目的:观察vaspin对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)和转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为对照组(10只)和造模组(30只),再将30只造模成功的DN大鼠随机分为3组:DN组、vaspin组、氯沙坦组,每组10只。干预12周后检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白定量。应用RT-PCR和Western blot分别检测大鼠肾组织NF-κB和TGF-β_1的基因和蛋白表达。结果:DN组大鼠的Scr、BUN和24 h尿蛋白定量均高于对照组(P0.05),肾组织中NF-κB和TGF-β_1表达水平明显高于对照组(P0.05);vaspin组大鼠的Scr、BUN和24 h尿蛋白定量均低于DN组(P0.05),肾组织中NF-κB和TGF-β_1的表达水平明显低于DN组(P0.05)。结论:Vaspin可能通过下调DN大鼠肾组织NF-κB和TGF-β_1的表达,延缓DN的进展。     

当归补血汤对糖尿病肾病大鼠GRP78的影响

目的:研究当归补血汤对糖尿病肾病大鼠的内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)治疗中的作用机制。方法:实验设空白组(NC组)、模型组(DN组)、当归补血汤高剂量组(7.14 g·kg~(-1)·d~(-1),DH组)、当归补血汤低剂量组(1.79 g·kg~(-1)·d~(-1),DL组)、格列奇特组(2.68 mg·kg~(-1)·d~(-1),GT组),链脲佐菌素(STZ)结合高脂高糖饮食建立大鼠糖尿病肾病模型(T2DM),连续喂养8周,观察大鼠的一般状态;检测生化指标(血糖、血脂、肾功能);光镜、电镜观察其肾脏病理变化;免疫组化、western Blot及RT-PCR检测GRP78的蛋白及mRNA表达水平。结果:DN组大鼠空腹血糖、血总胆固醇较NC组明显升高;治疗组血生化相关指标均低于DN组;DH组最为明显。形态学观察可见DN组小鼠肾小球细胞水肿,系膜基质增多,肾小管上皮细胞胞浆出现空泡;经治疗病变减轻;DN组的GRP78的表达高于空白;治疗组的GRP78的表达降低;DH组尤为明显。结论:当归补血汤能保护肾脏,减少尿蛋白,其对DN大鼠的肾脏保护作用可能与调控GRP78表达抑制ERS反应有关。     

升清降浊胶囊对STZ诱导糖尿病肾病大鼠肾脏VEGF表达及肾功能的影响

目的:观察升清降浊胶囊(原名尿毒清胶囊)对STZ诱导糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏VEGF表达及肾功能的影响。方法:40只大鼠随机分为正常组、DN模型组、对照组、治疗组共4组,每组10只。腹腔注射40 mg/kg STZ复制大鼠DN模型,对照组予缬沙坦胶囊33.3 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗组予缬沙坦胶囊33.3 mg·kg-1·d-1升清降浊胶囊83.3 mg·kg-1·d-1灌胃,4周后检测各组大鼠空腹血糖、血肌酐、尿素氮及尿蛋白定量;处死各组大鼠,行肾组织HE、PAS、PASM及Masson染色观察病理情况;免疫荧光检测肾组织VEGF;RT-PCR法检测各组肾组织VEGFmRNA表达,并进行统计学分析。结果:治疗组DN大鼠尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05);肾脏病理形态显示系膜及基质增生情况明显减轻;肾组织免疫荧光提示VEGF明显减少;VEGF mRNA表达定量明显下降(P0.05)。结论:升清降浊胶囊可明显改善DN大鼠肾功能,降低VEGF mRNA表达。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾小管间质sFRP-1表达的影响

目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾小管间质Wnt通路抑制因子-分泌型卷曲相关蛋白-1(sFRP-1)表达的影响。方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法诱导建立糖尿病肾病(DN)模型,实验分组为:正常对照组(对照组)、DN模型对照组(模型组)、益肾胶囊组、氯沙坦组,每组8只。益肾胶囊组每只大鼠灌胃益肾胶囊625 mg.kg-1.d-1,氯沙坦组每只灌胃氯沙坦20 mg.kg-1.d-1,正常组和模型组每日给予等量生理盐水灌胃,于2、4、8、12周末测定24 h尿蛋白定量,于治疗12周后测定各组血糖、血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr),同时观察肾小管病理损伤,并采用免疫组化和实时荧光定量PCR方法观察大鼠肾小管间质中sFRP-1、Wnt通路关键调节因子β-catenin表达情况及肾组织中sFRP-1、β-catenin mRNA的表达。结果:12周末,与对照组相比,模型组大鼠血糖、24 h尿蛋白定量、肾小管损伤指数均显著上升,免疫组化示:肾小管间质中sFRP-1表达增加,β-catenin出现胞浆或(和)核表达,实时荧光定量PCR结果显示二者mRNA表达上调(P<0.05);益肾胶囊治疗后,与模型组相比,肾小管间质中sFRP-1表达进一步增加,肾组织中sFRP-1 mRNA进一步上调,β-catenin胞浆或(和)核表达减少,β-catenin mRNA表达下调(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过上调sFRP-1在DN大鼠肾小管间质的表达,发挥对DN大鼠肾脏的保护作用。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾组织MBL、IL-6、TNF-α表达的影响

目的:观察雷公藤多苷(multiglucosides of triptergium wilfordii,GTW)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tissue necrosis factor-α,TNF-α)表达影响,探讨MBL、IL-6、TNF-α与DN关系,阐明GTW对DN保护作用及可能机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组高糖高脂饮食6周后,以链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立DN大鼠模型。造模成功的大鼠随机分为DN组和GTW治疗组,治疗组经口灌胃GTW(10 mg·kg-1·d-1)8周。第14周末称体重并查24 h尿蛋白定量、血清生化指标、观察肾脏结构及炎细胞浸润程度,免疫组化法检测MBL-A、IL-6、TNF-α蛋白在肾脏中的表达,RT-PCR法检测肾组织MBL1mRNA表达情况。结果:GTW可减轻DN大鼠蛋白尿,降低血清肌酐、尿素氮水平,下调肾组织MBL、IL-6、TNF-α表达。结论:GTW对DN大鼠肾组织有保护作用,可能与GTW减少了DN大鼠肾组织MBL、IL-6、TNF-α表达,减轻了免疫炎症反应对肾脏的损伤有关。     

芡实对糖尿病肾病大鼠肾组织中SOCS-3及IGF-1表达的影响

目的：探讨芡实对糖尿病肾病（diebetic nephrothy,DN）大鼠肾组织中细胞因子信号抑制因子-3（suppressor of cytokine signaling-3,SOCS-3）及胰岛素样生长因子-1（insulin like growth factor-1,IGF-1）表达的影响及可能机制。方法：采用单剂量腹腔注射链脲佐菌素（ STZ,45 mg/kg）建立大鼠DN模型,将DN模型大鼠随机分为5组：DN组（ DN组）、小剂量芡实组（EL,1.5 g·kg^-1·d^-1）、中剂量芡实组（EM,3.0 g·kg·-1d-1）、大剂量芡实组（EH,6.0 g·kg-1·d-1）及氯沙坦钾组（ LP,30 mg·kg-1·d-1）;另设正常对照组（ NC组）,每组10只。分别治疗12周后测定各组大鼠生化指标;HE、Masson、PAS染色及电镜观察肾组织病理变化;免疫组化、Western blot法检测肾组织中SOCS-3与IGF-1表达情况。结果：12周末,与NC组相比,DN组大鼠24 h尿蛋白定量（24 h Upr）、尿素氮（BUN）及血肌酐（Scr）均明显升高（P〈0.05）,肾小球体积增大、系膜细胞增生、基质增多,肾小管扩张,肾组织中SOCS-3表达增加、IGF-1表达明显增加（P〈0.05）;与DN组相比, LP组与EM组大鼠24 h Upr、BUN及Scr明显降低（P〈0.05）,病理改变减轻,肾组织SOCS-3表达明显增加、IGF-1表达明显下降（P〈0.05）;LP组与EM组间降尿蛋白作用差异无统计学意义。结论：芡实可能通过上调SOCS-3表达,抑制IGF-1过表达进而减少蛋白尿,发挥肾脏保护作用。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1与细胞间黏附分子-1表达的影响

糖尿病肾病(DN)肾内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达上调,单核/巨噬细胞浸润等炎症机制越来越受到重视犤1犦。本研究探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病(DM)肾组织MCP-1、ED-1、ICAM-1表达的影响,旨在为DN的抗炎治疗提供实验依据。一、材料和方法1.糖尿病模型建立及分组:30只雄性昆明种SD大鼠(安医大实验动物中心提供),行右肾切除术和腹腔注射单剂量STZ65mg/kg。随机分3组:对照组(C);模型组(DM);MMF给药组(DM MMF),每组10只。MMF10mg·kg-1·d-1灌胃。整个实验期间不用胰岛素。2.指标检测:术后8周末测尿…     

芪蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织BMP-7及TGF-β1/smads信号传导通路的影响

目的：观察芪蛭降糖胶囊对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠肾组织骨形成蛋白-7（bone morpho-genetic protein-7,BMP-7）及转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β1/Smads信号传导通路的影响。方法：48只清洁级雄性Wistar大鼠按体重随机抽取40只,采用切除右肾加腹腔注射链脲菌素（ streptozotocin,STZ）的方法制备DN模型,另外8只大鼠行右肾假切术。造模成功后按尿微量白蛋白（ microAlbumin,mAlb）高低,两头随机抽取分为模型组、缬沙坦对照组、芪蛭降糖胶囊低剂量组、芪蛭降糖胶囊高剂量组。成模2 d起各组给予相应浓度和剂量的药物,给药12周时观察DN大鼠尿mAlb、α1微球蛋白（α1-MG）和血清肌酐（ Scr）、尿素氮（ BUN）。然后,处死所有动物,肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数（tubulointerstitial injury index,TII）,免疫组化法检测BMP-7、TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达。结果：给药12周后,模型组大鼠尿 mAlb、α1-MG较假手术组显著增多（ P 〈0.01）,3个治疗组DN大鼠尿mAlb、α1-MG较模型组明显减少（P〈0.01）,2个中药治疗组的上述4项指标亦较对照组降低（P〈0.05-0.01）,且呈剂量依赖性。模型组大鼠Scr、BUN亦较假手术组显著升高（P〈0.01）,对照组与模型组相比无明显变化（P〉0.05）,但2个中药治疗组较模型组明显降低（P〈0.05-0.01）。 HE染色显示,3个治疗组大鼠肾组织病理损害明显减轻,2个中药治疗组大鼠肾组织病理改善比对照组更明显;PAS染色进行TII评分发现,3个治疗组大鼠TII显著低于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组TII明显低于对照组（P〈0.05-0.01）;Masson染色观察发现,3个实验组大鼠肾小管间质病变明显轻于模型组,2个中药治疗组大鼠肾小管间质病变轻于对照组;免疫组化法染色并对其灰度值测定发现,3个治疗组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达低于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达低于对照组（P〈0.05-0.01）;3个治疗组大鼠BMP-7、Smad7在肾脏组织的表达高于模型组（P〈0.01）,2个中药治疗组大鼠BMP-7、Smad7在肾组织的表达高于对照组（P〈0.05-0.01）。结论：芪蛭降糖胶囊可能通过干预BMP-7/TGF-β1/Smads信号转导通路抑制了TGF-β1信号的细胞内转导,而对DN肾间质纤维化起到治疗作用。     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路及α-SMA、FN的影响

目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠24h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、JAK/STAT及α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)的影响及其机制。方法:SD大鼠55只,随机留取10只为正常对照组(N)。利用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法建立DN大鼠模型。造模成功大鼠按随机数字表法分为糖尿病肾病模型组(DN)、益肾胶囊治疗组(DN+Y)、氯沙坦钾治疗组(DN+L)、氯沙坦钾+益肾胶囊治疗组(DN+L+Y),每组10只,连续灌胃12周。于实验的12周检测24h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血糖、BUN、Scr;取大鼠肾组织做组织病理学观察;免疫组化法检测肾组织磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、α-SMA、FN的表达。结果:实验12周末,与DN组比较,益肾胶囊治疗组24h尿蛋白定量、BUN、Scr明显降低(P<0.05),肾组织形态学改变较轻,p-JAK2、p-STAT3、α-SMA、FN的表达显著降低(P<0.05)。氯沙坦钾联合益肾胶囊治疗组与氯沙坦钾治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织JAK/STAT信号通路的活化,下调α-SMA、FN的表达,延缓了糖尿病肾病的进展;益肾胶囊联合氯沙坦钾可更好地保护肾脏功能,提示二者联合使用有协同作用。     

糖尿病肾脏病大鼠造模方法的改进及肾组织IL-10表达水平

目的对糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠造模方法进行改进并检测IL-10在肾组织的表达水平。方法48只雄性SD大鼠被随机分为正常对照组(NC组,n=24)、糖尿病(diabetes mellitus,DM)组(DM组,n=24),DM组以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)40 mg/kg一次性腹腔注射诱导DM模型。造模成功后分别于0周、4周、8周、12周检测血糖、尿糖、尿微量白蛋白、尿肌酐水平,观察大鼠肾脏病理在不同时间点的差别,应用免疫组化检测IL-10水平的表达。结果DM组大鼠造模成功率为75%,出现明显多饮、多食、多尿症状,至12周时,DM组大鼠平均体质量为(478.0±79.1)g,明显低于NC组(650.0±26.9)g;DM组大鼠血糖在造模成功后0周血糖(25.6±5.3)mmol/L显著高于NC组(5.2±0.2)mmol/L,直至实验结束发现血糖仍维持在(23.0±5.5)mmol/L;DM组大鼠尿微量白蛋白/尿肌酐比在8周、12周分别为(39.0±18.6)mg/g、(77.0±12.3)mg/g,均显著高于同期对照组(15.1±5.4)mg/g、(15.8±7.0)mg/g;光镜观察DM组大鼠0周即出现肾间质水肿、炎细胞浸润,第12周出现肾小球基底膜轻度增厚、肾小管上皮细胞空泡变性;免疫组化结果显示,NC组各期IL-10表达量均较DM组高。结论高糖高脂联合小剂量STZ建立DKD模型,在12周时肾脏才出现肾小球基底膜轻度增厚、肾小管上皮细胞空泡变性等病理改变,而不能单纯应用尾静脉血糖≥16.7 mmol/L判断DKD造模成功,肾组织IL-10表达降低进一步论证IL-10参与DKD发病并有可能作为DKD治疗的靶点。     

氧化应激介导糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化及普罗布考的干预作用

目的 研究氧化应激在糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管上皮细胞转分化中的作用,探讨抗氧化剂普罗布考对大鼠DN的肾脏保护作用。 方法 30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、DN组和普罗布考干预组（1％普罗布考饮食）,每组10只。分别于第3周、第8周及第12周检测24 h尿蛋白（UTP）;12周末检测各组大鼠血糖、血脂（胆固醇、三酰甘油）、Scr、肌酐清除率（Ccr）、肾脏组织匀浆液丙二醛（MDA）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。肾组织病理切片行 HE和Masson染色;采用免疫组化和Western印迹检测肾组织核转录因子Sp1、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及E钙黏蛋白（E-cadherin）表达。 结果 与正常对照组比较,DN组血糖、Scr、肾组织匀浆MDA和24 h UTP水平显著增高（均P < 0.01）,Ccr显著降低（P < 0.01）;肾组织肾小管损伤分数、α-SMA和 Sp1蛋白表达水平明显增高（均P < 0.01）;肾组织E-cadherin蛋白表达明显下调。肾组织MDA含量分别与α-SMA及Sp1蛋白表达呈正相关（r ＝ 0.896,P < 0.01;r ＝ 0.862,P < 0.01）,与E-cadherin蛋白表达呈负相关（r = -0.673, P < 0.01）。普罗布考干预组Scr、24 h UTP、肾组织MDA、肾小管损伤分数及肾组织α-SMA、 Sp1蛋白表达水平较DN组均明显降低（均P < 0.01）;Ccr和肾组织E-cadherin蛋白表达水平较DN组均明显增加（均P < 0.01）。 结论 氧化应激在DN大鼠肾小管上皮细胞转分化中起重要作用。普罗布考可能通过抗氧化、下调肾组织Sp1蛋白表达及抑制肾小管上皮细胞转分化延缓DN大鼠肾脏病变进展。     

蝉花菌丝对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用机制研究

目的：观察蝉花菌丝对糖尿病肾病（DN）大鼠肾小管沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）表达及肾小管损伤的影响,探讨蝉花菌丝延缓 DN 进展的作用机制。方法：链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠高血糖,糖尿病所致肾损伤的大鼠模型（DN）与正常大鼠一起随机分为4组：对照组、蝉花组、DN 组、DN ＋蝉花组,饲养24周。观察 DN 大鼠肾间质α- SMA、SIRT1表达及纤维化程度,检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿白蛋白、24 h 尿蛋白、尿白蛋白肌酐比（UACR）、肌酐清除率（Ccr）、肾脏指数。结果：DN 大鼠肾小管 SIRT1表达显著下降,α- SMA 表达明显上调,肾小管纤维化加速,BUN、尿白蛋白、尿白蛋白排泄率、24 h 尿蛋白等均显著增加;蝉花菌丝治疗能显著提高 DN 大鼠肾小管 SIRT1表达,延缓肾小管纤维化进程,降低 BUN、尿白蛋白、尿蛋白及尿白蛋白肌酐比;蝉花菌丝对非糖尿病大鼠上述指标无显著影响。结论：蝉花菌丝可改善DN 肾小管病理损伤、延缓 DN 进展,从而发挥肾脏保护作用,其机制可能与上调肾小管 SIRT1表达有关。     

蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾小管上皮细胞自噬-溶酶体通路的影响

目的探讨蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾病(DN)肾小管上皮细胞自噬-溶酶体的影响与机制。 方法将24只大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠高血糖模型后,随机分为模型组(DN)和治疗组(DN+蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊),用药24周;另外10只未诱导高血糖大鼠设为对照组。检测各组大鼠肾功能指标,取肾皮质行组织病理学检查,采用Western印迹检测大鼠分离肾小管的胶原蛋白-Ⅲ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转录因子EB(TFEB)、自噬泡标记蛋白LC3和自噬底物p62表达。将HK-2细胞分为牛血清白蛋白(Co-BSA)组、Co-BSA治疗组、糖基化终末产物-BSA(AGEs-BSA)组及AGEs-BSA-治疗组。Western印迹检测各组细胞p62、TFEB表达;以TFEB质粒转染HK-2细胞,通过RT-PCR检测过表达效率,观察各组HK-2细胞溶酶体红色荧光探针荧光强度,并检测各组细胞组织蛋白酶活性。 结果与对照组大鼠相比,模型组大鼠的血肌酐(Scr)、24 h尿蛋白水平增高、LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显增多,而肾小球滤过率(GFR)、TFEB表达明显减少。与模型组大鼠相比,治疗组大鼠的Scr、24 h尿蛋白均明显降低,GFR明显升高,LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显减少,TFEB表达明显增多。在HK-2细胞中,TFEB和p62的表达情况与在大鼠肾组织中相似。与Co-BSA组相比,AGEs-BSA组的探针荧光强度和组织蛋白酶活性明显减弱;过表达TFEB后,AGEs-BSA组的荧光强度和组织蛋白酶活性均明显增强。 结论蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾小管上皮细胞可能具有上调TFEB表达、调节自噬-溶酶体通路的作用。     

何首乌提取物二苯乙烯苷对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响

目的：何首乌提取物二苯乙烯苷（TSG）对糖尿病（DM）大鼠肾脏氧化应激干预机制。方法：采用左侧肾结扎术加尾静脉注射链脲佐菌素（STZ,40 mg/ kg）造糖尿病肾病（DN）大鼠模型,1周后随机分为模型组和 TSG 治疗组,治疗组给予 TSG（20 mg＆#183;kg -1＆#183;bw -1）腹腔注射,模型组接受等容量生理盐水。在6周末分别用代谢笼收集24 h 尿,计尿液总量后离心,用散色比浊法测定 MAU 和尿肌酐（Ucr）;HE 染色、电镜观察肾脏损伤后病理形态学变化;比色法、黄嘌呤氧化酶法测MDA、Scr、SOD。结果：TSG 减轻了 DN 大鼠肾脏损伤后病理形态学变化、减少了 UAER、MAU/ Ucr、MDA 的含量,升高了 SOD的含量,差异均有统计学意义（P 〈0．05）。结论：TSG 能够减少 DN 大鼠尿微量白蛋白,对 DM 大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与 TSG 改善 DM 大鼠肾组织中氧化与抗氧化之间的失衡有关。     

血管紧张素1-7对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化的影响

目的 研究血管紧张素1-7(Ang1-7)对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化的影响及其可能机制.方法 32只雄性Wistar大鼠被随机分为4组:健康对照组(NC组)、模型组(DM组)、替米沙坦组(TM组)、治疗组(T组).建模成功后第9周末检测各组大鼠24 h尿蛋白量、尿NAG/Cr、血糖、血胰岛素、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、BUN、Scr、血K+及血Na+ ;PAS染色观察肾脏病理改变 ;实时定量PCR法检测各组大鼠肾脏组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA水平 ;Western印迹法检测PPARγ、α-SMA、TGF-β1蛋白表达.结果 (1)第9周末,DM组大鼠血压、尿蛋白量、肾质量/体质量较NC组显著升高(P＜0.05),TM组及T组较DM组显著降低(P＜0.05),且T组变化更明显.(2)DM组第9周末肾间质损伤指数显著高于NC组(P＜0.05),TM组及T组则低于DM组(P＜0.05).(3)实时定量PCR结果显示,DM组TGF-β1、α-SMAmRNA水平显著升高(P＜0.05),PPARγ mRNA水平显著下降(P＜0.05),TM组及T组较DM组TGF-β1、α-SMA mRNA水平均显著下降(P＜0.05),PPARγ mRNA水平显著上升(P＜0.05),且T组变化更明显.(4)Western印迹结果显示,DM组TGF-β1、α-SMA蛋白水平显著升高(P＜0.05),PPARγ蛋白水平显著下降(P＜0.05),TM组及T组较DM组TGF-β1、α-SMA蛋白水平均显著下降(P＜0.05),PPARγ蛋白水平显著上升(P＜0.05),且T组变化更明显.结论 Ang1-7在体内可通过上调PPARγ表达,抑制α-SMA表达,对糖尿病大鼠肾小管间质纤维化可能具有抑制作用.     

辛伐他汀对糖尿病肾病大鼠肾小管间质CTGF、β-catenin表达的影响

目的:观察辛伐他汀对糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管间质结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法:将30只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(N)、DN模型组(DN)、DN模型+辛伐他汀治疗组(DS)三组。利用腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型;模型建立后,第4周、8周、12周,记录大鼠体重、检测血糖、测量24 h尿蛋白定量;12周末处死大鼠,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、胆固醇(TC);取大鼠肾组织行HE染色,进行病理组织学观察;用免疫组化法检测肾小管间质中CTGF及β-catenin的表达;采用实时荧光定量PCR技术检测肾组织中CTGF及β-catenin基因mRNA的表达。结果:实验12周末,与DN模型组比较,DS组大鼠24 h尿蛋白定量、Scr、BUN显著降低(P<0.05);肾组织病理改变减轻,免疫组化和实时荧光定量PCR结果均显示,肾小管间质CTGF、β-catenin的表达明显下调(P<0.05)。结论:辛伐他汀可同时下调糖尿病肾病大鼠肾小管间质CTGF及β-catenin的表达,降低蛋白尿,保护肾脏功能。提示辛伐他汀可能通过调节CTGF和Wnt/β-catenin信号通路的表达,发挥其延缓肾小管间质纤维化的作用。