太湖蓝藻培养单细胞蛋白的可行性

以蓝藻原料为氮源发酵生产酵母单细胞蛋白,考察了碳源、维生素、微量元素、矿物质元素、培养温度、接种量、初始pH、通气量等对酵母产量的影响,优化了发酵条件,1 g/dL(干重)的蓝藻培养基最终使酵母产量达到6.2 g/L,并利用高效液相色谱法检测酵母产物胞内微囊藻毒素.结果表明,酵母中微囊藻毒素含量为390 μg/kg.     

用玉米芯水解液发酵木糖醇的研究

对用玉米芯水解液发酵木糖醇进行了研究。结果表明玉米芯水解液中的葡萄糖和杂质成分对木糖醇发酵具有抑制作用。试验显示一些添加剂能明显减轻这种抑制作用。本试验用玉米芯水解液进行的木糖醇发酵中,木糖醇的转化率为理论值的74.9%。     

半定向选育提高单细胞蛋白营养品质的研究

利用酒精废醪培养假丝酵母作单细胞蛋白,对提高假丝酵母的蛋白质含量和含硫的氨基酸含量的半定向选育方法进行了摸索,使目的变异株的蛋白质含量平均提高了14%,其中一个变异株在蛋白质含量提高的同时,蛋氨酸含量提高了约40%     

酵母单细胞蛋白絮凝分离的研究

本文提出了分离酵母单细胞蛋白的一种新方法——用絮凝沉降法分离酵母单细胞蛋白;研究了鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用。探讨鞣酸+A絮凝酵母细胞的机理;较为系统地研究了环境因素对鞣酸+A絮凝酵母细胞的影响;首次将质心映射优化法(CMO法)和响应面法(RSM法)结合起来,运用计算机优化了絮凝条件,并就鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用进行表征;通过对酵母细胞表面的X-射线能谱分析,证实金属离子Ca~(2+)、Cd~(2+)、Mn~(2+)和K~+参与了鞣酸+A对酵母细胞的絮凝作用。通过鞣酸+A絮凝酵母细胞的小试研究,可以认为采用絮凝沉降法分离酵母单细胞蛋白是可行的,且节能效果显著,具有较大的现实意义。     

电能在鳕鱼下脚料水解液乳酸发酵中的应用

研究了外加直流电应用在鳕鱼下脚料水解液中胚芽乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的乳酸发酵.在电能发酵(E-E F)系统中,中性红浓度和电压值对MRS肉汤和水解液的影响明显不同.在最适的中性红浓度(100 μmol/L)和电压(1.0 V)条件下,鳕鱼下脚料水解液经48 h的发酵后乳酸量提高了11.7%,最终pH值为4.060.     

基于单细胞测序及蛋白质组数据分析尿酸转运蛋白在肾脏的精细表达定位

目的利用单细胞测序、微量蛋白质组学及免疫组化三部分数据深入分析肾脏尿酸转运蛋白的细胞分布及表达丰度。 方法利用2个成人健康肾脏的单细胞测序数据集(GSE131685)分析12个肾脏尿酸转运基因的细胞定位及表达丰度,进一步利用激光微切割联合质谱检测大鼠肾小管14个区段蛋白质数据集12个蛋白的定位和丰度,最后利用ProteinAtlas数据库检索上述蛋白在肾脏中的免疫组化染色结果。 结果单细胞测序数据集GSE131685中,12个尿酸转运蛋白集中表达于近端小管细胞,而在KIT数据集中,除了ABCG2、SLC22A12和SLC22A13外,其余都集中表达于近端肾小管S1,S2和S3段细胞。KEAT蛋白数据集的分析结果与KIT数据结果类似：ABCG2,SLC17A3,SLC22A12,SLC22A6和SLC22A8在近端小管S1,S2和S3段有显著的表达,尤其是SLC22A6仅富集在S2段肾小管,而ABCG2在S3段有较强的富集,其它的蛋白表达丰度相对较低。ProteinAtlas的免疫组化数据显示出与单细胞测序及蛋白质组的结果有较大的差异：ABCC2、SLC17A4、SLC22A6、SLC22A11、SLC22A12、SLC22A13及SLC2A9显示在近端小管比较特异的表达定位,其中ABCC2、SLC22A6、SLC22A11和SLC22A13信号较强。ABCC4、ABCG2和SLC16A9的表达丰度相对较低,特异性较差。 结论尿酸转运蛋白在肾脏主要集中表达于小管的S1,S2和S3段细胞,蛋白质组数据和单细胞测序数据比较接近。单细胞测序及微切割的微量蛋白组学是研究蛋白精细定位的良好工具。本研究为今后研究尿酸转运蛋白的功能及研发降尿酸药物提供基础依据。     

胃黏膜单细胞悬液的制备及其周期蛋白的表达

目的寻找一种方法能够有效去除胃黏液，把胃黏膜制备成单细胞悬液以进行胃黏膜流式细胞术等单细胞的蛋白分析研究，为即将在胃组织开展细胞组学做好准备。方法应用酶反应去除胃黏液和分离黏膜层后．再使用机械法制备成单细胞悬液，并应用细胞免疫组织化学流式细胞术和激光共聚焦显微镜技术初步检测胃黏膜细胞主要周期蛋白cyclin D、E、A、B1的表达。结果0．1％的胃蛋白酶和1．2-2．4U／L的中性蛋白酶分别能够较好地去除胃黏液，获得黏膜层，从而制备成胃黏膜单细胞悬液，从流式中首次系统地显示出其细胞主要周期蛋白的时相性表达规律：cyclin D3、B1明显表达，cyclin D2较弱，cyclin D1、A、E表达不明显，并得到激光扫描共聚焦显微镜的验证。结论利用胃蛋白酶，中性蛋白酶作用后能够去除胃黏液．较容易获得胃黏膜单细胞悬液；并提示体内的细胞周期蛋白的表达规律与体外培养的细胞系的表达规律不同。     

微载体立体培养腰椎间盘细胞蛋白多糖表达的研究

目的研究腰椎间盘细胞在微载体培养与单层培养中细胞表达蛋白多糖含量的差别。方法椎间盘疾病手术病例的术中切除组织采用酶消化法分别进行微载体三维细胞培养和单层细胞培养;取胎儿椎间盘组织,显微镜下区分髓核细胞和纤维环细胞,分别进行培养,同成入组对照。利用^35S放射标记渗入放免定量测定的方法进行蛋白多糖含量的检测。结果①椎间盘细胞胞内的蛋白多糖含量（cpm）,细胞单层培养组为101．909±11．439,微载体立体培养组为136．607±10．792,P〈0．05;②椎间盘细胞表达的蛋白多糖含量（cpm）,细胞单层培养组为105．119±13．040,微载体立体培养组为174．231±17．676,P〈0．05;③各组椎间盘细胞表达的蛋白多糖含量均高于细胞内的含量;④胎儿腰椎间盘细胞蛋白多糖的含量及表达量均高于成人退变椎间盘细胞,胎儿髓核细胞蛋白多糖的表达量高于纤维环细胞的表达量。结论椎间盘细胞的微载体三维立体培养相对单层培养具有较高细胞蛋白多糖的表达量,是一种较好的细胞培养方式。     

重组人硫氧化还原蛋白对原代培养肝细胞的影响

目的探讨重组人硫氧化还原蛋白(rhTrx)对原代培养肝细胞生存生长的影响。方法逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,并在原核表达系统中表达。IgM还原实验和胰岛素还原实验测定rhTrx的生物学活性。3H胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入试验和细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测rhTrx对SD大鼠原代培养肝细胞生存生长的影响。结果克隆出hTrx开放阅读框cDNA并获得高效表达,可溶性目的蛋白回收率为23．20％,蛋白纯度为96．30％。IgM还原和胰岛素还原实验均显示制备的rhTrx具有较好的生物学活性(t=7．5860,P<0．01)。加入rhTrx培养的肝细胞生长旺盛,并维持了良好的细胞形态。rhTrx可促进原代培养肝细胞的DNA合成,并以剂量依赖方式明显抑制乙醇造成的肝细胞损害。结论制备出具有生物学活性的rhTrx,hTrx对原代培养肝细胞的生存具有促进作用。     

cys蛋白酶-3对离体培养的骨骼肌蛋白降解的影响

目的:通过体外培养骨骼肌细胞,测定凋亡效应相关蛋白酶cys蛋白酶-3(caspase-3)及其抑制剂对骨骼肌细胞蛋白降解率的影响,探讨骨骼肌细胞凋亡的可能的调控因子。方法:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体的反应体系中加入1单位的重组Caspase-3,通过Western Blot电泳。体外培养骨骼肌细胞,并刺激其形成肌管,将培养的骨骼肌分为3组,分别为对照组、实验组A加入1单位Caspase-3,实验组B加入50 nM Caspase-3的抑制剂Ac-DEVD-CHO,体系中均加入2mM ATP(三磷酸腺苷)。用氨基酸全谱分析仪测定酪氨酸和3-甲基组氨酸的浓度。结果:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体和1单位的重组Caspase-3,均可见到14kDa-actin条带,而肌动球蛋白复合体在0.5μg、1μg剂量时条带消失,在2μg、4μg、8μg时条带逐渐增大。与对照组相比,给予caspase-3后骨骼肌细胞总蛋白降解率增加36.9%,肌纤维蛋白降解率增加66.4%,给予DEVD后总蛋白降解率下降17.7%,肌纤维蛋白降解率下降27.7%。结论:caspase 3在体外可以降解肌动球蛋白复合体,而且还能改变骨骼肌蛋白降解率。caspase-3在骨骼肌蛋白降解中发挥了重要作用,参与了骨骼肌细胞的凋亡。     

米糠健康食品的研究

以稳定化米糠为原料，研究了天然水溶性稻米营养素和稻米浓缩纤维的制取工艺.结果表明，该工艺具有全利用、全天然和清洁生产的特点，而且水溶性稻米营养素富含米糠的优质蛋白、脂肪、多糖以及众多生理活性物质.     

酶法从全酯大豆中同时制备大豆油和大豆水解蛋白工艺的研究

研究了酶法从全脂大豆中同时制各大豆油和大豆水解蛋白的工艺，水提过程的最佳工艺条件为固液比１：１０，温度４４℃，ｐＨ７．７０和提取时间３６ｍｉｎ。含油大豆蛋白进行两次有控制的酶解，得到等电点可溶大豆水解蛋白（ＩＳＳＰＨ）和稳定性低的乳化油。确定了转相法破乳的工艺条件，从乳化油分离得到纯度较高的大豆油。水解蛋白和油的得率分别达到７４％和６６％。探讨了等电点或可溶大豆水解蛋白的功能性质及其在食品中的应用。     

方格星虫酶解物成分分析及其抗氧化作用

用木瓜蛋白酶对方格星虫（Sipunculus nudus）进行酶促水解,并对酶解物冻干粉的成分进行了分析,其中粗蛋白质量分数为69.02%,多肽质量分数为60.60%,肽的平均链长为3.73个氨基酸残基,肽分子的平均相对分子质量为447.6;游离氨基酸占5.27%。氨基酸分析结果显示,方格星虫酶解物含有17种氨基酸（色氨酸未测）,其中人体必需氨基酸含量较高,占总氨基酸数的30.62%。方格星虫酶解物中还含有P、Fe、Mg、Mn、Zn、Cu、Se等至少12种矿质元素,以及含有抗氧化作用的营养成分,并通过动物试验证明了方格星虫酶解物具有显著的抗氧化作用。方格星虫酶解物可用于食品添加或用作功能性食品。     

Single cilia formation in cells of the testicular interstitium in infertile men

Testicular biopsies from 4 infertile men showing germinal cell aplasia with interstitial cell hyperplasia on light microscopy were studied by electron microscopy. Single cilia formation was observed in myoid cells, fibroblast-like cells and Leydig cells in the interstitium. Only 1 cilium was seen per cell. Transverse sections of most of cilia showed a 9+0 pattern of microtubule configuration. Cross striated rootlet fibers were attached to the basal bodies. The significance of the presence of cilia in the testicular interstitium is discussed.     

红酵母类胡萝卜素发酵助剂的筛选及应用

研究了几种促进剂和前体对红酵母RY－98类胡萝卜素发酵的影响，从中选出了番茄汁、花生油和核黄素3种对红酵母生长及类胡萝卜素合成具有显著促进作用的发酵助剂，并确定了适宜的用量。应用试验和发酵过程动态分析表明，这3种发酵助剂增产效果明显。当同时添加番茄汁3mL/L、花生油1.2mL/L和核黄素3.5mg/L时，菌体量、类胡萝卜素质量分数和产量可分别比对照组提高39.4%、32.8%和85.1%，且对发酵过程菌体生长及生理代谢规律无不良影响。     

类脂物质对大米蛋白可食用膜的影响

以大米蛋白为基料，研究了硬脂酸、蜂蜡、蔗糖脂肪酸酯3种类脂物质对大米蛋白膜的性能的影响，并考查了添加不同类脂量后大米蛋白膜机械性能争透水率的变化。实验表明，加入硬脂酸、蔗糖脂肪酸脂及蜂蜡使膜的阻水性有了较大的提高，添加硬脂酸、蔗糖脂肪酸脂对膜的机械性能影响不大。     

中华蚱蜢蛋白质的提取

对中华蚱蜢蛋白质进行了氨基酸组成分析、分类及提取工艺等方面的研究. 结果表明,中华蚱蜢蛋白质量分数56 84%,必需氨基酸质量分数 24 9%,具有很高的利用价值;各类型蛋白的提取率分别为水溶性蛋白43 4%,酸溶性蛋白 1 8%,碱溶性蛋白 1 9%,醇溶性蛋白 0 3%;提取水溶性蛋白较优的条件为固液比(g∶mL)1∶15,缓冲液 pH值 7 6,NaCl质量浓度 1 0 g/dL,提取时间4 h,提取率可为27 1%.     

长期存活与转移肾癌间质肥大细胞、淋巴细胞反应的研究

对41例长期存活与短期转移肾癌间质中肥大细胞、淋巴细胞反应进行定量观察及相互关系研究。结果发现:长期存活肾癌交界区及中心区肥大细胞计数均明显高于短期转移者(P<0.01),且交界区肥大细胞计数高于中心区。长期存活肾癌间质淋巴细胞反应程度也比短期转移者强(P<0.01)。其反应程序与肥大细胞计数有明显相关性。二者反应强者,患者生存期长、预后好。提示观察肾癌问质肥大细胞、淋巴细胞反应可为临床判断其恶性度及预后提供较为可靠的量化指标。