无溶剂体系酶促合成甘油中碳酸偏酯

根据中碳酸转化率的大小 ,对 5种不同来源的固定化脂肪酶筛选 ,其中固定化脂肪酶SSW的酶催化转化率最高 ,辛酸和癸酸转化率分别为 91.5 %和 93.5 % ;对脂肪酶SSW酶促合成甘油辛酸偏酯的反应条件优化 ,适宜反应条件为 :敞口反应器中反应温度 5 5℃ ,每克酸加酶量 10 0U/g ,辛酸 /甘油投料摩尔比 1∶1.1,甘油初始加水量 4 % (质量分数 ) .实验范围内中碳酸品种对脂肪酶SSW不显示基质特异性 .     

非水相酶促酯交换法合成抗坏血酸脂肪酸酯

研究了一种L-抗坏血酸脂肪酸酯（AFAE）合成新途径。实验结果表明，氢化棕榈油、大豆油和海狗油等食用油脂作为脂肪酸基团供体，在固定化脂肪酶的催化下，在有机溶荆中与L-抗坏血酸直接进行酯交换反应形成L-抗坏血酸脂肪酸酯。对反应介质体系的筛选发现，在叔戊醇中用Novozym435催化此反应所得的产物浓度最高。对影响合成抗坏血酸脂肪酸酯的因素进行了探讨，确定了最适反应条件：初始油脂底物浓度为200-600mmol／L，温度为55℃，反应时间为9h。此条件下产物质量浓度可达43．51g／L。     

非水相酶促L-抗坏血酸棕榈酸酯合成的动力学

对叔戊醇中酶法合成L 抗坏血酸棕榈酸酯 (L AP)的反应动力学进行了研究 ,对影响其反应动力学的因素 (转速、温度、水分活度、酶质量分数和底物浓度 )进行了探讨 ,确定了最有效的酶促反应环境 .即转速为 2 0 0r/min ,温度为 55℃ ,水分活度为 0 ,加酶量为 2 0 % .并对底物进行了比较 ,得到了对酶亲和力最大的底物———棕榈酸甲酯 .     

微乳凝胶固定化酶催化长链脂肪酸酯的合成

研究了以AOT(二 (2 乙基已基 )琥珀酸酯磺酸钠 ) /正庚烷 /水 /明胶组成的反相微乳凝胶固定化脂肪酶 ,在有机溶剂中催化棕榈酸和十六醇的酯化反应 .反应在 2 5℃下进行 ,固定化脂肪酶重复使用 16次后 ,平衡转化率仍可达 90 % .反应既可用釜式反应器又适用柱式反应器 .产物通过冷却的反应液后沉淀析出 ,回收率可达 6 5% ,产品纯度高 .     

圆弧青霉脂肪酶基因的克隆和表达

圆弧青霉PG37总RNA甲醛变性电泳呈现真核生物所特有的 2 8SrRNA和 18SrRNA条带 .根据PG37所产碱性脂肪酶 (LipPC)N末端氨基酸残基序列和真核生物mRNA在 3’端具有poly(A)等所提供的生物信息 ,采用RT PCR技术扩增了LipPC成熟肽和 3’非编码区的cDNA片段 ,并将该PCR产物直接克隆至pUCm T载体中 .序列分析表明 ,LipPC含有 2 5 8个氨基酸残基 ,其中保守的五肽序列为Gly His Ser Leu Gly .进一步采用ClonTech公司的SmartTM PCRcDNA文库构建试剂盒 ,扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段 ,从而完成了LipPC完整cDNA的分析测定 .最后将编码完整脂肪酶蛋白质的cDNA克隆至 pGEX 5X 3表达载体中 ,SDS PAGE检测结果表明 ,大肠杆菌BL2 1所表达的GST LipPC融合蛋白质分子质量约为 5 3ku .     

从非洲土壤中分离新的产生脂肪酶的细菌

从采自非洲 (喀麦隆和加纳 )的 3 3个土样中分离得到的产生脂肪酶的细菌H 1 ,初步鉴定为假单胞菌属 .以菌株H 1为出发菌株 ,经紫外线照射和亚硝基胍处理 ,得诱变菌株H 58,其脂肪酶产生能力达 4 0U/mL .对菌株H 58进行生产能力的稳定性试验 ,结果良好 .连续传代 5次能保持良好的产脂肪性能 .     

圆弧青霉PG37碱性脂肪酶的发酵工艺条件

研究了圆弧青霉PG3 7碱性脂肪酶的发酵工艺条件 ,优化了PG3 7的摇瓶最适产酶条件 .其中 ,发酵培养基的组成为 (g/dL) :豆饼粉 3 .0 ,玉米浆 3 .0 ,磷酸氢二钾 1 .0 ,硫酸镁 0 .1 ,大豆磷脂0 .5,柠檬酸钠 0 .0 5,花生油 0 .2 ;发酵培养基起始 pH 7.5,发酵温度 (2 9± 1 )℃ ,摇床转速 2 50r/min ,发酵周期 96h ,发酵期间于 3 6,54,72h分别流加 0 .4 g/dL花生油 .在此条件下 ,PG3 7的脂肪酶产率为 2 0 60 μmol/ (min·mL) .PG3 7在 2 5L的实验室小罐中的产酶水平为 1 90 0 μmol/ (min·mL) .     

有机相酶促合成N-月桂酰-β-氨基丙腈

以月桂酸甲酯和β－氨基丙腈为原料，在有机相中经脂肪酶催化合成N－月桂酰-β-氨基丙腈（LAP）。在比较所用脂肪酶的催化活性的基础上，详细探讨了固定化脂肪酶Candida antarctica（南极洲假丝酵母）CAL－2催化该反应的影响因素。经筛选，适宜的反应条件为：70℃，n（β－氨基丙腈）：n（月桂酸甲酯）＝1：1，底物质量浓度为35g/L，加酶量为200U/g(以氨基丙腈的质量计），反应体系初始加水量为3％腈重。在此实验条件下反应24h后，β－氨基丙腈的最高转化率为96.8%。     

平板扩散法粗略确定碱性脂肪酶的活性

通过对圆弧青霉PG3 7所产碱性脂肪酶活性测定方法的研究和比较 ,建立了一种快速、直观、灵敏的固体琼脂平板脂肪酶活性测定方法 .利用脂肪酶在一定条件下分解三丁酸甘油酯所释放出的游离脂肪酸使指示剂 (维多利亚蓝 )变色的原理 ,根据变色圈直径的大小对酶活性进行粗略分析 ,特别适合于酶提纯过程中大批量样品酶活性的估测以及酶活性条带和其它蛋白质条带的区分 .     

微生物法制备抗抑郁药R-托莫西汀中间体

从 2 0株酵母菌中筛选出了两种还原 3 氯 1 苯丙酮生成高光学纯度R 3 氯 1 苯丙醇的较好菌株SaccharomycesB5和Candida 10 4 ,R 3 氯 1 苯丙醇的对映体过剩值为 10 0 % .研究了温度、pH、反应时间、底物质量浓度、菌体添加量等微生物培养条件及反应条件对两种菌种还原 3 氯 1 苯丙酮的影响 .以体积分数 5 %的乙醇为共底物 ,可使SaccharomycesB5和Candida 10 4转化底物的产率分别从 17%和 9%提高到 5 0 %和 4 8%     

假单胞菌JW12脂肪酶的补料分批发酵

研究了假单胞菌ＪＷ１２脂肪酶在２Ｌ和２５Ｌ容积发酵罐的补料分批发酵工艺．通过调整碳源补加速率，控制产酶期发酵液ＰＨ在８．２左右，能有效提高脂肪酶的酶活和表观生产率．在２５Ｌ标准发酵罐中，连续补加吐温－８０，最高脂肪酶酶活为１２９．２μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｍＬ），表观生产率为１５．９１     

细菌脂肪酶的结构和功能研究进展

细菌脂肪酶是一类广泛应用于工业领域的生物催化剂，具有重要的应用价值。迄今为止，已有7个细菌脂肪酶的三维结构被阐明，30个细菌脂肪酶的基因序列被测定和分析。作者综述了细菌脂肪酶的分子结构、分泌和折叠过程及其催化机制。     

The Role of Routine Assays of Serum Amylase and Lipase for the Diagnosis of Acute Abdominal Pain

INTRODUCTION

We aimed to evaluate the role of routine measurements of serum amylase and lipase in the diagnosis of acute abdominal pain.

PATIENTS AND METHODS

We identified all patients who had serum amylase and lipase assays over a 62-day period at a single university teaching hospital and reviewed their case notes.

RESULTS

We excluded 58 of the 1598 patients on grounds of ineligibility (< 18 years of age and those transferred from other hospitals). A complete data set was obtained for 1520 (98.7%) of the remaining 1540 patients. Only 9.1% of requests were based on a clinical suspicion of acute pancreatitis. Of the 44 (2.9%) patients who had acute pancreatitis, only 28 (63.6%) had an associated rise in serum amylase and/or lipase 3 times above the maximum reference range, the remainder being diagnosed radiologically. At this cut-off range, the sensitivity and specificity for serum amylase were 50% and 99%, and those for serum lipase 64% and 97%, respectively.

CONCLUSIONS

Routine measurements of serum amylase and lipase are unhelpful in the diagnosis of acute abdominal pain unless there is clinical suspicion of acute pancreatitis. In these patients, assay of lipase alone is preferable to assay of amylase alone or both enzymes.     

洗涤剂用酶的研究与开发──新型碱性脂肪酶

讨论了碱性脂肪酶的性质、生产及其在洗涤剂中的应用     

庚烷中微生物脂肪酶催化酯化反应动力学的研究

对国产解脂假丝酵母脂肪酶Ｃａｎｄｉｄａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａｌｌｉｐａｓｅ在庚烷中催化丁醇与月桂酸酯化反应的动力学进行了研究。结果发现反应不存在扩散限制，仅为动力学控制，符合米氏方程。虽然存在丁醇抑制现象，但底物浓度对反应速率的影响符合Ｐｉｎｇ－Ｐｏｎｇ反应机理，由此推导了反应动力学模型并由实验数据求得了各模型参数。     

胆源性肝硬变家兔肝脏脂蛋白脂酶变化对脂代谢的影响

目的:观察肝硬变家兔肝脏脂蛋白脂酶(LPL)变化对脂代谢的影响。方法:21只新西兰大白兔制成胆源性肝硬变模型后,随机分为长链脂肪乳剂(LCT)-肠外营养(PN)组(LCT组,n=10)和中/长链混合乳剂(MCT/LCT)-PN组(MCT组,n=11),另设正常对照组(n=12)。肠外营养(PN)前、PN后1、4、7d分别测定血浆甘油三酯(TG)和胆固醇(Chol)。实验结束后处死动物,取肝脏作病理形态学检查以及脂肪含量测定,用ABC法作LPL单克隆抗体在肝脏的表达;用Northern杂交法检测LPL基因的mRNA表达。结果:MCT乳剂对甘油三酯及胆固醇代谢的影响较小,MCT组的肝脏脂肪含量明显低于LCT组,P<0.01。形态学检查表明,两组的变性、坏死和增生性病变的检出率均无显著差异,但在LCT组肝细胞中能较多地见到脂肪颗粒。肝脏二氨基联苯胺(DAB)显色以及mRNA表达明显下降。结论:肝硬化时,肝脏代谢脂肪的能力已受损;相对而言,此时对MCT乳剂的体内代谢较小影响。     

有机介质中脂肪酶催化肌醇烟酸酯的合成

探讨了有机相中固定化脂肪酶催化肌醇和烟酸合成肌醇烟酸酯的可能性；系统地研究了有机溶剂特性、反应初始水活度、温度、pH值、加酶量、底物浓度及摩尔比等因素对酯化反应的影响。     

Comparison of Lipase Activity in Peritoneal Fluid of Dogs with Different Pathologies – A Complementary Diagnostic Tool in Acute Pancreatitis?

A clinical diagnosis of acute pancreatitis is often difficult to obtain. Histopathology remains the gold standard, whereas clinical signs, diagnostic imaging and laboratory testing, even in combination, may be insufficient. In a prospective study, lipase activity in ascitic fluid of various aetiologies was determined in 44 dogs in order to investigate its performance in cases of acute pancreatitis. Data of simultaneously determined blood lipase activities were available in 27 dogs. Lipase activity was measured by a colorimetric assay. A complete peritoneal fluid analysis was performed. Dogs were divided into four groups, according to their final diagnosis: acute pancreatitis (A), abdominal trauma (B), abdominal neoplasia (C) and others (hepatic or cardiac diseases) (D). Dogs with acute pancreatitis had a significantly higher peritoneal lipase activity than those in other groups (P ≤ 0.024), while no significant difference was found between the other groups (P ≥ 0.734). Blood lipase activity as well as protein content and total cell count of the ascitic fluid did not show any significant difference between groups. Data show that determination of lipase activity in dogs that develop ascites may be useful in complementing the diagnosis of acute pancreatitis.