灰树花菌丝体糖肽GFPSlb体内抗肿瘤作用的研究

采用移植型小鼠黑色素瘤B16模型进行试验,研究灰树花菌丝体糖肽GFPS1b的体内抗肿瘤作用.结果表明,灰树花菌丝体糖肽GFPS1b对移植型小鼠黑色素瘤B16有显著的抑制作用,抑瘤率在30%以上;样品作用组瘤体积生长速率比阴性对照组慢,且瘤体积小;同时能延长荷瘤小鼠的存活期;HE染色结果表明,GFPS1b中、高剂量组能使B16肿瘤细胞呈团索状实性排列或弥漫性分布,并有肿瘤细胞大片坏死,坏死区周围可见凋亡细胞;免疫组化技术进一步显示,GFPS1b能诱导瘤组织中Bax基因蛋白表达,同时也能显著下调Bcl-2蛋白的表达.研究表明,GFPS1b对小鼠移植性肿瘤有显著的抑瘤作用.     

灰树花多酚的提取和活性研究

从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，并研究其性质和活性，采用弱极性的大孔吸附树脂从灰树花菌丝体粗提物中吸附多酚类物质，吸附量大，解吸容易，获得褐色粉末状产物，应用红外、紫外扫描和鉴别试验证明其主要为多酚类物质，用F-D法以间苯三酚为标准测得酚类物质质量分数为9．3％,平板系列稀释法测定体外抗菌活性，灰树花多酚对金黄色葡萄球菌等具一定的抑制作用，红细胞氧化溶血和MDA试验测定其抗氧化活性，实验显示：对于红细胞的自氧化和H202所致的氧化均具有一定的抑制活性，可显著抑制小鼠肝匀浆自发生成MDA。碘呈色法和DNS比色法试验结果显示灰树花多酚可抑制α-淀粉酶活性，减少酶对淀粉的水解，树脂法适合从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，灰树花多酚具有抗氧化、抗菌及抑制α-淀粉酶等活性。     

灰树花菌丝体抗肿瘤糖肽GFPS1b结构的研究

以体外抑制肿瘤细胞增殖的活性作为筛选导向，从灰树花深层发酵培养菌丝体中提取、分离纯化得到一酸性糖酞GFPS1b．HPGPC法测得其重均相对分子质量为21000．蛋白质质量分数16．60％，糖质量分数为81．32％。利用化学方法（单糖组成分析、部分酸水解、甲基化分析）和仪器方法（GC、GC—MS、红外吸收光谱、核磁共振）分析GFPS1b的糖链结构，结果表明其单糖组成主要有G1c、Ga1、Ara和少量的糖醛酸，其糖链主链由两个α-D—G1c（1→3）、α-D—Ga1（1→4）、α-D—G1c（1→3，6）和α-D—Ga1（1→6）组成的，其中葡萄糖基的6位发生取代，取代侧链主要为α-L—Ara-（1—4）-α-D—Glc（1→。可以认为GFPS1b为一新糖肽。     

羊肚菌液体深层发酵条件

以羊肚菌为材料，研究了发酵过程中碳源、氮源、无机盐、培养条件对菌丝体生物量、胞外多糖的影响，以及发酵过程中菌丝体生物量、胞外多糖、总糖及还原糖质量浓度、培养基PH值的动态变化，并在此基础上确定了羊肚菌液体深层发酵的最佳条件。结果表明：羊肚菌液体深层发酵的最优培养基配比为：玉米粉4．0g／dL、葡萄糖1．0g／dL、黄豆粉2．0g／dL、酵母粉0．3g／dL、KH2PO4 0．2g／dL、MgSO4 0．1g／dL、CaSO4 0．1g／dL；最优培养条件为：24℃，起始pH5．8，250mL的摇瓶装液量为100mL，接种量10mL，摇瓶转速140r／min，发酵时间为108h。     

搅拌转速和通气量对灰树花深层发酵培养的影响

采用15L搅拌式发酵罐研究灰树花的扩大培养条件，主要考察了搅拌转速和通气量对灰树花菌丝量、胞外多糖产率、溶氧、菌丝形态以及发酵液粘度的影响．研究结果表明搅拌转速和通气量能显著影响灰树花的生长，并且通过对灰树花菌丝球的大小、形态以及胞外多糖的分泌影响发酵液的粘度．并得出较为优化的培养条件为：温度25℃，通气量0．75vvm，搅拌转速80r／min，装液量60％；在此条件下，发酵10d后，灰树花菌丝体最大得率为22．95g／L，胞外多糖的得率为1．521g／L。     

硫酸酯化灰树花多糖的制备与分析

利用碱提酸沉淀法从灰树花(Grifola frondosa)发酵菌丝体中获得碱提水不溶性多糖GAP,氯磺酸-吡啶法对GAP进行硫酸化修饰后,即制得能溶于水的硫酸化灰树花多糖.通过DEAE-Sepharose F.F.离子交换柱层析精制为一种相对分子量为2.8×10~4,硫酸基质量分数为16.4％的硫酸酯化灰树花多糖(S-GAP).琼脂糖电泳显示,S-GAP可被甲苯胺蓝染色且着色较深.S-GAP的紫外光谱和红外光谱分析表明,在波长208,264,268,286 nm以及波数1 230 cm-1、810 cm-1处有硫酸酯键的特征吸收峰.     

百合多糖的化学结构及抗肿瘤活性

用水提取百合块茎粗多糖 ,经Sevag脱蛋白质 ,透析后经DEAE cellulose及SephadexG 10 0柱色谱纯化 ,得到百合纯多糖组分LBPS I .经完全酸水解 ,PC ,GC ,IR ,高碘酸氧化 ,Smith降解 ,甲基化分析 ,1H及13C NMR等研究百合多糖的化学结构 ,表明LBPS I的相对分子质量为30 2 0 0 ,比旋光度 [α]2 0D =+192 .3(c 0 .75 ,H2 O) ,特性粘度 [η]=14.0 6× 10 3 mL/ g .LBPS I是由α D (1,4 ) Glcp和α D (1,3) Glcp以 2∶1的比例交替形成主链 ,并有α D (1,6) Glcp侧链的葡聚糖 .小鼠移植性实体瘤研究表明 ,LBPS I对移植性黑色素B16和Lewis肺癌有较强的抑制作用     

灰树花胞外多糖的性质与结构

对发酵法生产的灰树花胞外多糖GLP A 2的理化特性与结构进行了初步研究 .经凝胶柱层析和HPLC检测纯度 ,证明水溶性多糖GLP A 2为单一均匀组分 ,不含蛋白质和核酸 ,比旋光度[α]12D =+ 177.5 0°(H2 O ,0 .1) ,HPLC法测得平均相对分子质量为 6 .2× 10 4 .GC、IR和13C NMR分析表明 ,GLP A 2是一类 β 葡聚糖 ,分子的主链以 β (1→ 3) 糖苷键连接 ,并含有 β (1→ 6 )、α (1→2 )、α (1→ 3)及 β (1→ 2 )糖苷键相连的侧链 .GLP A 2可与刚果红结合 ,形成的络合物在 0～ 0 .4mol/L的NaOH溶液中 ,表现出最大吸收波长 (λmax)的特征变化 ,同时在CD谱中出现明显的有序结构信息 .这提示GLP A 2在溶液中存在三股螺旋构象 ,维持其有序构象的力可能以氢键力为主     

营养条件对灰树花产胞外多糖产量的影响

灰树花是一种营养丰富的食、药两用真菌 .灰树花胞外多糖是一种具有生理活性的真菌多糖 .作者研究了营养条件对灰树花产胞外多糖的影响 ,确定了合理的初始碳源、氮源、无机离子、生长因子的质量浓度 .进一步的正交试验表明 ,灰树花产胞外多糖较佳的培养基组合为 :葡萄糖 4 0g/L ,蛋白胨 5g/L、磷酸二氢钾 4 g/L ,硫酸镁 2 g/L、玉米浆 2 0 g/L .     

黑木耳胞外多糖深层发酵培养基组成的优化

研究了营养性因子对黑木耳深层发酵的影响.结果表明,葡萄糖、酵母膏、豆饼粉有利于黑木耳菌体生长和胞外多糖的形成.正交优化实验得到最佳培养基组成:葡萄糖40g/L,豆饼粉9g/L,KH2PO44g/L,无机盐X22g/L.     

灰树花富锗培养研究

对食药用真菌灰树花的耐锗和富锗特性进行了研究 .结果表明 ,灰树花的耐锗能力和富锗能力都很强 .在锗质量分数为 1 0 0～ 3 0 0 0mg/kg的固体培养基上 ,菌丝均能生长 ,当锗质量分数超过 2 50 0mg/kg时 ,菌丝生长受到一定影响 .采用液体深层培养 ,在锗质量分数为 1 0 0～ 1 50 0mg/kg范围内 ,菌丝体富集锗的范围为 2 96～ 3 74 6mg/kg(以干菌丝计 ) ,当锗质量分数为 50 0mg/kg时 ,菌丝体对锗的吸收率最高 ,达 3 .58% .适当的锗还能促进菌丝体对培养液中还原糖的利用并提高菌丝干收率及胞外多糖分泌量 ,但对发酵液 pH值、发酵周期及菌丝体胞内多糖产量没有明显影响 .     

巴西蘑菇发酵菌丝体醇提物的抑瘤活性

巴西蘑菇深层发酵的菌丝体，用热水提取出水溶性成分（主要是活性多糖）后，残渣用体积分数859，6的乙醇提取，对乙醇提取物进行了抑瘤活性的研究。体外细胞培养实验表明，菌丝体醇提物对人肝癌细胞Bel-7402有一定抑制作用，半抑制浓度（IC50）为1507μg／mL：体内则显示出了较强的抑瘤效果，腹腔注射（i．p．）每天10、50、100mg／kg，对S180荷瘤鼠的瘤重抑制率分别为44．72％、66．50％和70．49％；灌胃（p．o．）每天800mg／kg，对S180腹水瘤鼠的生命延长率达到52．94％。结果表明：巴西蘑菇深层发酵菌丝体的醇提物具有较强的抑瘤作用，其具体的功效成分值得进一步研究。     

黑木耳多糖的提取及降血糖作用

利用纤维素酶(EC 3.2.1.4)和蛋白酶(EC 3.4.14.9)从黑木耳当中提取出了2种多糖,相对分子质量分别为3.17×105和1.83×105。以正常小鼠和糖尿病小鼠为对象,对黑木耳多糖的降血糖功能进行了研究,使用剂量为100,200,400 mg/kg(以体重计)。结果表明,当质量分数在200 mg/kg以上,黑木耳多糖能够显著降低糖尿病小鼠的血糖值,但对正常小鼠的血糖值没有影响。黑木耳多糖能够增加糖尿病小鼠的糖耐量。