大肠杆菌60Co诱变育种及其发酵生产聚唾液酸条件

对产聚唾液酸菌株大肠杆菌WX J11进行6 0 Co诱变 ,筛选出高产突变株WX J4 ,其聚唾液酸产量可达 10 0 1mg/L ,通过优化发酵条件即在 2 50mL的摇瓶中 ,2 50r/min转速下 ,37℃恒温培养 6 5h ,起始 pH值为 7.8,装液量为 4 0mL ,使聚唾液酸的产量提高到 150 0mg/L .聚唾液酸在菌体生长停止后释放到培养基中 ,动力学上表现为次级代谢产物 .此外 ,还对聚唾液酸的提取、水解和唾液酸的纯化作了初步研究 .     

聚γ-谷氨酸高产突变株的选育及摇瓶发酵条件

对地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)进行亚硝基胍和60Co诱变,获得一株γ PGA的高产菌株C9.γ PGA质量浓度由9.44g/L提高到19.76g/L,提高了109%.突变株传代10次,质量浓度保持基本稳定.通过正交试验和单因素试验对发酵培养基及发酵条件进行了优化.当发酵培养基中含柠檬酸12g/L、甘油80g/L、L 谷氨酸23g/L、氯化铵7g/L,pH7.0,装液量为50mL/250mL三角瓶,接种体积分数为5%时,37℃摇瓶发酵72h,γ PGA达到23.32g/L.     

法夫酵母产虾青素的摇瓶工艺

以法夫酵母 (Phaffiarhodozyma)WSS -FF6为产生菌进行摇瓶条件下的类胡萝卜素 (主要为虾青素 )发酵条件研究 .正交试验表明 :葡萄糖质量分数对酵母产色素影响较大 ,在起始 pH值为 6,培养温度 2 2℃ ,葡萄糖 3 .0 %、尿素 0 .1 %、磷酸二氢钾 0 .6%、玉米浆 0 .6%的培养基下经过72h、2 2 0r/min摇瓶发酵 ,其生物量为 6.58mg/mL ,类胡萝卜素产量为 1 4.92 μg/mL ,其中虾青素占 78% .     

赖氨酸摇瓶发酵条件的优化

针对赖氨酸发酵的工业化要求,以黄色短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＷＳＨＬ１为产生菌进行了摇瓶条件下的赖氨酸发酵条件研究．通过正交实验得到了较佳氮源配比;经在发酵过程中添加几种氮源的试验,发现发酵中后期添加适量有机氮源有利于发酵;考察不同初始硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵的影响,确定了适合工业生产的浓度范围;采用分批补料培养方式,最终赖氨酸盐酸盐质量浓度为８５．５ｇ／Ｌ     

真养产碱杆菌利用葡萄糖生产聚β-羟基丁酸的摇瓶发酵条件

以葡萄糖为碳源，对真养产碱杆菌生产ＰＨＢ的摇瓶发酵条件进行了探索。研究结果表明，在摇瓶补料条件下，细胞干重和ＰＨＢ质量浓度可分别达到３５．１ｇ／Ｌ和２８．３ｇ／Ｌ，ＰＨＢ对葡萄糖的产率系数为０．３６ｇ／ｇ．     

兽疫链球菌摇瓶发酵法生产透明质酸

∶研究了Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｚｏｏｅｐｉｄｅｍ ｉｃｓＨ２３ 摇瓶发酵生产透明质酸的条件，并对发酵机制进行了初步探讨．研究发现，Ｈ２３ 在通风和厌氧条件下都能生产透明质酸．透明质酸的合成和菌体生长是偶联的，对不同的碳源质量浓度显示出不同的规律．酵母膏、葡萄糖是合适的氮源和碳源，初始质量浓度应分别为２ ｇ／ｄＬ、４ ｇ／ｄＬ． Ｍｇ２＋ 对发酵有很大的影响，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ 最佳质量浓度为０．２ ｇ／ｄＬ． 摇瓶条件如温度、通风等也影响透明质酸的形成，温度３３ ℃，摇瓶装液量４０ ｍ Ｌ时最有利于透明质酸合成．在较适合的条件下，透明质酸产量可以达到０．４７ ｇ／Ｌ，产物对碳源的转化率为２．１％ ．     

重组大肠杆菌生产谷胱甘肽合成酶系的摇瓶发酵条件

研究了重组大肠杆菌E.coli Ⅱ-1 摇瓶发酵生产谷胱甘肽合成酶系的工艺条件，确定了E.coli Ⅱ-1 的最适产酶条件.最佳发酵培养基组成（g/L）为葡萄糖10, 蛋白胨5, 酵母膏2.5, K     

发酵生产谷氨酰胺转胺酶的摇瓶条件

在摇瓶条件下， 以淀粉为碳源，蛋白胨及酵母膏为氮源，对Ｓｔｒｅｐｔｏｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｍ ｏｂａｒａｅｎｓｅ生产谷氨酰胺转胺酶（ＭＴＧ）的摇瓶发酵条件进行了探索．研究结果表明，发酵法生产谷氨酰转胺酶的适宜初始ｐＨ 值、淀粉质量浓度、接种量分别为６．１，２ ｇ／ｄＬ，１０％ ；ＭＴＧ酶活最高可达１．８３ ｕｍ ｏｌ／（ｍ ｉｎ·ｍ Ｌ）．初始加入硫酸铵对菌体生长影响不大，但对ＭＴＧ 的合成却产生抑制作用；初始加入纯氨基酸及胱氨酸母液不利于ＭＴＧ 酶活的提高．     

pH值对聚唾液酸分批发酵的影响及补料发酵

研究了不同pH值对聚唾液酸发酵过程中菌体生长和产聚唾液酸的影响.发酵初期pH自然下降时有利于菌体生长,菌体生长对数期较长,最大菌体干重可达6.9g/L;发酵中后期pH控制在6.4时有利于聚唾液酸的延续合成,合成对数期比其它pH条件下的合成对数期延长了11h.动力学特性表现为部分相关模式,而在其它pH条件下,动力学特性表现为相关模式.对聚唾液酸的流加补料发酵进行了初步研究,最终使菌体干重达到11.16g/L,聚唾液酸产量达到2.606g/L.     

大肠杆菌产生的聚唾液酸的结构

研究了大肠杆菌产生的聚唾液酸的分子结构，对聚唾液酸的分子基团特征进行了红外光谱分析，研究了聚唾液酸糖苷键的连接方式和构型．发酵液中的聚唾液酸经超滤浓缩、有机沉淀和离子交换层析处理，得到高纯度的聚唾液酸，经^13C-NMR分析和比较，表明所得到的聚唾液酸是一种α-2，8糖苷键连接的同聚物。     

NTG对E.coli突变株聚唾液酸产量的影响

在不同的 pH条件下 ,用NTG连续处理E .coli,得到突变菌株JYⅡ 74 ;摇瓶培养 ,发酵液中聚唾液酸产量达 2 80 0mg/L ,比出发菌株提高了 130 0mg/L ,提高幅度为 72 .5 % ,且生产能力稳定 .提取发酵液中的聚唾液酸 ,红外光谱鉴定其纯度 ,13C核磁共振图谱表明 ,该多糖是一种α 2 ,8糖苷键连接的唾液酸同聚物 .     

薯干原料柠檬酸发酵菌体浓度的测定

采用物料平衡的方法导出了碳平衡间接测定菌体浓度的计算公式,并用实验结果进行了验证,结果发现通过碳平衡间测定菌体浓度的计算值与实测值误差甚小,证实了碳平衡法间接测定菌种浓度的可行性,从而解决了粗料发酵生产柠檬酸过程中菌体浓度难于测定的问题,为建立柠檬酸发酵数学模型打下了基础。     

阿片肽酿酒酵母工程菌摇瓶发酵工艺

研究了发酵培养基成分、补加方式及外源氨基酸对酿酒酵母发酵和表达的影响．结果表明，发酵前在液体发酵培养基中一次性补加酵母抽提物（YE）有利于目的产物的表达，发酵过程中补加YE不利于目的产物的表达，发酵中后期补加适量的葡萄糖有利于阿片肽的表达．添加外源氨基酸对酿酒酵母工程菌的生长有一定的促进作用，而且可以明显地影响阿片肽的表达．通过正交实验对酿酒酵母生长和表达条件进行优化，确定最优工艺参数为：培养基中酵母抽提物质量浓度为25g／L，C：N比2．8，培养基初始PH5．0，摇床转速220r／min．在最优条件下研究了酿酒酵母表达目的产物的情况，总蛋白质质量浓度为614．50mg／L．SDS-PAGE电泳和双波长凝胶扫描结果表明：目的阿片肽约占总分泌蛋白质的5％，其表达量为30．7mg／L，是优化前的1．49倍。     

聚唾液酸的水解与唾液酸的纯化

在HPLC分析唾液酸质量分数的基础上,选择盐酸作为大肠杆菌发酵液中聚唾液酸的水解用酸.在85℃水浴.盐酸浓度为0.1mol/L的条件下,水解2h,水解率平均可达95%以上.水解液中和过滤后,用离子交换色谱分离与冷冻干燥得到唾液酸产品.质谱及HPLC分析证实所得产品中主要成分是N 乙酰神经氨酸,其纯度达96.4%.     

电能在鳕鱼下脚料水解液乳酸发酵中的应用

研究了外加直流电应用在鳕鱼下脚料水解液中胚芽乳杆菌(Lactobacillus plantarum)的乳酸发酵.在电能发酵(E-E F)系统中,中性红浓度和电压值对MRS肉汤和水解液的影响明显不同.在最适的中性红浓度(100 μmol/L)和电压(1.0 V)条件下,鳕鱼下脚料水解液经48 h的发酵后乳酸量提高了11.7%,最终pH值为4.060.