失水山梨醇单(叁)油酸酯的结构分析

ＴＬＣ和ＨＰＬＣ分析表明，Ｓｐａｎ－８０，８５的组成复杂。ＨＰＬＣ法可用来测定Ｓｐａｎ－８０，８５中单酯、双酯和多酯的相对含量，其结果可用来指导产品的合成。     

有机相中微生物脂肪酶合成短链脂肪酸酯的研究

用微生物脂肪酶在溶剂相中合成短链脂肪酸酯的研究表明：脂肪酶在正庚烷中催化合成短链脂肪酯转化率比水相中有明显的优势。在１０个不同来源的商品脂肪酶中，来自Ｍｕｃｏｒｍｉｅｈｅｉ，Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ和Ｐｏｒｃｉｎｅｐａｎｃｒｅａｓ的脂肪酶合成酯转化率较高，其中Ｍｕｃｏｒｍｉｅｈｅｉ脂肪酶对己酸乙酯４８ｈ合成转化率达９４％，己酸乙酯产量３３．８４ｇ／Ｌ．同时就底物酸和醇的碳链长度对酯转化率的影响进行了研究。     

有机介质中脂肪酶催化肌醇烟酸酯的合成

探讨了有机相中固定化脂肪酶催化肌醇和烟酸合成肌醇烟酸酯的可能性；系统地研究了有机溶剂特性、反应初始水活度、温度、pH值、加酶量、底物浓度及摩尔比等因素对酯化反应的影响。     

假单胞菌脂肪酶非水相催化性质

以丁酸与丁醇的酯化为模型反应，研究了假单胞菌脂肪酶的非水相催化性质。有机相中酶的催化作用需要一定的水分，最适水含量因溶剂的不同而有所差异。通常，极性强的溶剂其最适水含量高；当以水活度衡量时，各溶剂间的差别消失，最适水活度均在０．５～０．６之间。有机溶剂中酶的热稳定性较水溶液中明显提高，在环己烷中８０℃保温６ｈ酶活力仍保留约８０％；连续使用５次，酶活损失不到１０％．在环己烷中酶的最适作用温度为５０℃，比水溶液中略高；最适作用ｐＨ为９．０，与水溶液中相近。     

脂肪酶固定化工艺

研究了以纸纤维素为载体,对－β－硫酸酯乙砜基苯胺（ＳＥＳＡ）为活化剂共价偶联法固定化脂肪酶的最适条件及固定化酶的稳定性。结果表明：醚化反应最适ｐＨ为１０．０,偶联最适条件为ｐＨ８．０,酶量控制在８００μｍｏｌ／（ｍｉｎ·ｇ）,所获得固定化脂肪酶具有较高的酶活和酶回收率,且有较好的稳定性,其半衰期为３７５ｈ．     

单烷基（醚）柠檬酸酯二钠盐的合成

介绍了由月桂醇（硬脂醇，月桂醇聚氧乙烯醚（ＥＯ＝２．７）），柠檬酸，氢氧化钠合成单烷基（醚）柠檬酸酯二钠盐的方法。讨论了催化剂、温度、时间等因素对酯化反应的影响，并测定了有关产品的物性。     

有机相酶促反应中固定化脂肪酶的非共价修饰

在选用８种具有两亲性质的表面活性剂、２种胆汁盐和１２种金属盐，对庚烷中催化己酸乙酯合成的固定化米氏毛霉脂肪酶进行非共价修饰时发现：在一定的质量浓度范围内，阴、阳离子型和非离子型的表面活性剂对脂肪酶酶促催化活性有不同程度的促进；在底物浓度从０．２５ｍｏｌ／Ｌ提高至０．５ｍｏｌ／Ｌ时，气溶胶硫代琥珀酸２［２－乙己酸］酯钠盐、十二烷基磺酸钠和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００对于脂肪酶保持稳定的催化活性有较大的提高作用。并从酶的活性中心和表面活性剂的结构和特性上对原因进行了分析。而胆汁盐和金属盐对脂肪酶的修饰作用不大，在高浓度时反而会抑制酶的活性。     

微乳凝胶固定化酶催化长链脂肪酸酯的合成

研究了以AOT(二 (2 乙基已基 )琥珀酸酯磺酸钠 ) /正庚烷 /水 /明胶组成的反相微乳凝胶固定化脂肪酶 ,在有机溶剂中催化棕榈酸和十六醇的酯化反应 .反应在 2 5℃下进行 ,固定化脂肪酶重复使用 16次后 ,平衡转化率仍可达 90 % .反应既可用釜式反应器又适用柱式反应器 .产物通过冷却的反应液后沉淀析出 ,回收率可达 6 5% ,产品纯度高 .     

以酯交换及分提技术制取代可可脂的研究

以极度氢化油（主要脂肪酸为软脂酸和硬脂酸）和茶油为原料，按适当比例混合后随机交酯化，采用丙酮溶剂分提法制取代可可酯。经研究证实交酯反应的最佳工艺参数是：反应温度８０℃，催化剂浓度０．４％（ｗｔ），反应时间３０ｍｉｎ．选用两步溶剂分提工艺制取成品，结晶温度分别为１９℃（或１７℃）和２℃．产品的ＳＦＩ曲线以及甘三酯组成分析结果表明：代可可脂的熔化性能与天然可可脂相似，但蜡感较重，与天然可可脂相混时，添加量小于３０％，相容性较好。     

无溶剂体系酶促合成甘油中碳酸偏酯

根据中碳酸转化率的大小 ,对 5种不同来源的固定化脂肪酶筛选 ,其中固定化脂肪酶SSW的酶催化转化率最高 ,辛酸和癸酸转化率分别为 91.5 %和 93.5 % ;对脂肪酶SSW酶促合成甘油辛酸偏酯的反应条件优化 ,适宜反应条件为 :敞口反应器中反应温度 5 5℃ ,每克酸加酶量 10 0U/g ,辛酸 /甘油投料摩尔比 1∶1.1,甘油初始加水量 4 % (质量分数 ) .实验范围内中碳酸品种对脂肪酶SSW不显示基质特异性 .     

微RNA-21在肝细胞癌中的表达及其靶基因研究

目的 探讨微RNA(miRNA)-21在肝细胞癌中的表达特征及其功能,筛选并鉴定miRNA-21可能调控的靶基因.方法 用PAGE/Northern blot方法分析miRNA-21在10例肝细胞癌患者组织标本中的表达特征,并在3种肝癌细胞株中加以验证.用生物信息学分析预测miRNA-21可能的靶基因,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法克隆靶基因的调控区序列,利用荧光素酶双报告基因系统筛选,并通过Western blot、流式细胞仪在蛋白质水平进行分析验证.用体外细胞侵袭实验分析miRNA-21与肝癌细胞侵袭能力的关系.结果 miRNA-21在10例肝细胞癌患者中均表达上调,与癌旁组织比较,表达量增加10倍以上.在3种肝癌细胞株中也得到相似的结果.筛选并确认了RECK为miRNA-21的调控靶基因之一.抑制miRNA-21的表达可明显降低肝癌细胞的侵袭.结论 miRNA-21在肝细胞癌中表达失控,通过抑制RECK表达促进肿瘤细胞侵袭.     

Prelude to pancuronium and vecuronium

The discovery of the neuromuscular blocking activity of malouetine isolated from Malouetia bequaertiana Woodson by Quevauviller and Lainé in 1960 stimulated interest in aminosteroids as potential neuromuscular blockers. Alauddin (a pharmacist) and Martin-Smith (a medicinal chemist) began research in this area, which was then taken up by pharmaceutical companies. Pure pancuronium was synthesised in 1964 by Savage and his co-workers, directed by Hewett. Pharmacologists headed by Buckett discovered that pancuronium was far more potent than d-tubocurarine and had minimal side-effects. Buckett quickly recognised the value of pancuronium, and his persistence resulted in successful clinical trials, followed by the commercial launch of pancuronium in 1968. Vecuronium was synthesised, tested and the studies published by Buckett, Hewett and Savage in 1973, but this was before anaesthetists called for a 'clean muscle relaxant' and, furthermore, it was unstable in aqueous solution. Hence, it was only promoted for clinical trials six years later.     

小切口腹膜外入路腹腔镜精索内静脉高位结扎术

目的探讨采用单一小切口经腹膜外入路腹腔镜下进行精索内静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张的技术可行性、安全性及治疗效果。方法取平行腹股沟小切口,依次切开进入腹膜后腔,扩张腹膜后隙,经此切口置入Trocar,用镜鞘钝性分离,或在同切口内置入另一小通道换用输尿管镜照明,分离显露曲张的精索内静脉,采用钛夹夹闭或LigaSure切断、或自制静脉牵出钩牵出精索内静脉行丝线结扎离断。结果本组8例手术全部取得成功,手术时间18～50min,平均手术时间32．5min,5例完全在单一通道内完成,3例采用同一切口下置入相邻两个小通道操作。术中无并发症发生。术后平均随访时间8．5个月,疗效满意。结论单一小切口腹膜外入路腹腔镜下精索内静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张技术可行、操作简便安全、疗效确切,可作为精索静脉曲张手术治疗方法之一。     

The discrepancy between immunocytochemical and biochemical assay of estrogen receptor in breast cancer patients treated by endocrine therapy

Estrogen receptor (ER) expression was investigated by ER-immunocytochemical assay (ICA) and the dextran coated charcoal (DCC) method in 10 recurrent or primary-advanced breast cancer patients treated with endocrine or chmmo-endocrine therapy. In 6 of these 10 patients, ER was examined both before and after treatments by the 2 methods. ER contents measured by the DCC method were found to be decreased after treatments, however, no change in the immunoreactivities of ER-ICA was observed. In the remaining 4 patients, the ER of new lesions refractory to endocrine or chemo-endocrine therapy was examined. ER status was determined as negative in 3 of the 4 patients by the DCC method, whereas by ER-ICA, the proportion of ER stained cells was about 70 per cent, those cells being diffusely distributed in the section. A discrepancy between ER-ICA and the DCC method was thus demonstrated in breast cancer patients treated by endocrine therapy.     

沉默XIAP基因对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究siRNA（small interfering RNA）对MCF-7细胞株XIAP（X-chromosome-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）基因表达的抑制作用及对癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。方法 体外转录法合成特异性针对人XIAP基因的siRNA；荧光标记法标记XIAP siRNA；脂质体法将siRNA转人MCF-7细胞；流式细胞仪检测siRNA的转染效率；半定量RT-PCR及Western blot法检测siRNA对XIAP基因表达的抑制作用；MTT法检测siRNA对细胞生长增殖抑制作用；TUNEL法观察siRNA诱导细胞凋亡的作用。结果 siRNA的转染效率在一定剂量范围内随浓度的增加而增加，siRNA转染组XIAP mRNA表达水平可下调约77%，对照组mRNA表达水平无明显改变。细胞生长增殖抑制率在一定范围内具有剂量依赖性和时间依赖性。荧光显微镜下观察肿瘤细胞发现，siRNA50、100、200nmol/L转染组出现典型的凋亡形态学变化。结论 体外转录合成的siRNA能特异有效下调XIAP基因的表达，瞬时转染XIAP siRNA能有效抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡，低剂量XIAP siRNA对瘤细胞显示了显著的抗增殖作用。     

Laparoscopic treatment of pancreatic insulinoma

Laparoscopy and laparoscopic ultrasonography (LUS) have been proposed for the diagnosis and treatment of pancreatic insulinoma. We present for cases of pancreatic insulinoma approached by laparoscopy guided by LUS. In three cases, insulinomas were in the pancreatic body and in one case in the pancreatic head. All lesions were detected preoperatively by abdominal US and confirmed by computed tomography. Laparoscopy was performed under general anesthesia. LUS was performed using a 10-mm flexible probe. In two cases the adenoma was enucleated using scissors and electrocoagulation, major vessels were controlled using clips, and enucleation was completed using a 30-mm endo-GIA. In one case a laparoscopic distal pancreatectomy with spleen preservation was performed. In one case the adenoma was deep in the pancreatic head; minilaparotomy was performed and the adenoma enucleated. Patients were discharged in good health 5–7 days after surgery. The postoperative course was complicated in one case of enucleation by peripancreatic fluid collection that was treated percutaneously. Our experience confirms that accurate localization followed by excision of tumors via the laparoscopic approach constitute a significant advance in the management of insulinoma.     

背阔肌电生理支配权重分析在同侧C7神经根移位术中的临床意义

目的 通过比较健侧G移位术中背阔肌上、中、下份复合肌肉动作电位（compound muscle action potential，CMAP）波幅的差异，了解臂丛神经根对背阔肌的支配权重，从而为同侧G移位术的应用提供电生理依据。方法于健侧G移位术中依次刺激臂丛神经上、中、下干，分别于背阔肌上、中、下份记录CMAP，比较CMAP波幅差异，确定各臂丛神经对背阔肌的支配权重。术后4周随访背阔肌肌力。结果CMAP波幅提示背阔肌上份主要受臂丛中干和上中干支配占60％，受上干支配仅10％；中份受中干支配占70％，受上干支配占15％；下份受中、下干和中干支配占70％，无单独上干支配。综合背阔肌上中下份分析显示由上干主要支配仅占8％、由中干主要支配占33％、由下干主要支配占10％、中下干支配占23％、上中下干支配占8％。术后4周随访背阔肌功能无明显影响。结论通过术中对背阔肌所受臂丛神经支配的电生理权重的研究，证实了同侧G神经根移位术的安全性。     

轮状病毒外壳蛋白VP4在大肠埃希菌中的表达

目的 克隆表达轮状病毒融合素蛋白VP4.方法 以轮状病毒SA11株细胞培养物提取总RNA为模板,经RT-PCR获得VP4全长基因片段cDNA,将其重组于pET-30a(+)表达载体,转化大肠埃希菌BL21(plysS),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,并用镍柱纯化.结果 重组载体所含目的基因片段的序列与文献公布序列相符,IPTG诱导表达的目的蛋白主要以包涵体形式存在;SDS-PAGE检测表达产物与目的蛋白大小一致,为88 kD,Western blot检测发现目的蛋白所带组氨酸标签可与标签抗体反应;镍柱纯化获得RV SA11 VP4融合素蛋白,纯度达90%.结论 构建了表达载体pET-30a(+)-VP4,经诱导表达、纯化,获得了RV融合素蛋白VP4.     

重组人硫氧化还原蛋白对原代培养肝细胞的影响

目的探讨重组人硫氧化还原蛋白(rhTrx)对原代培养肝细胞生存生长的影响。方法逆转录聚合酶链反应法扩增出hTrx cDNA,并在原核表达系统中表达。IgM还原实验和胰岛素还原实验测定rhTrx的生物学活性。3H胸腺嘧啶核苷(TdR)掺入试验和细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测rhTrx对SD大鼠原代培养肝细胞生存生长的影响。结果克隆出hTrx开放阅读框cDNA并获得高效表达,可溶性目的蛋白回收率为23．20％,蛋白纯度为96．30％。IgM还原和胰岛素还原实验均显示制备的rhTrx具有较好的生物学活性(t=7．5860,P<0．01)。加入rhTrx培养的肝细胞生长旺盛,并维持了良好的细胞形态。rhTrx可促进原代培养肝细胞的DNA合成,并以剂量依赖方式明显抑制乙醇造成的肝细胞损害。结论制备出具有生物学活性的rhTrx,hTrx对原代培养肝细胞的生存具有促进作用。     

rhBMP-2/卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的实验研究

目的：观察rhBMP-2／卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的能力，检验rhBMP-2的诱导成骨活性，方法：手术造成20mm桡骨中上段骨缺损，实验组植入rhBMP-2／卵磷脂的复合材料片，对照组植入单纯卵磷脂片，通过影像学、组织学观察及骨密度测定，评价rhBMP-2／卵磷脂复合材料修复犬长骨节段性骨缺损的效果，结果：影像学检查示实验组术12周骨痂桥接缺损，术后24周皮质骨连接；对照组无骨痂形成，组织学检查示实验组术后12周组织和肌组织充填，骨密度测定示术后12周骨痂密度达到正常值的76％，24周达正常值的85％，结论：rhBMP-2具有良好的诱导成骨活性，rhBMP-2／卵磷脂复合材料能够很好的修复犬桡骨20mm的骨缺损。