微小RNA-128对肝癌细胞增殖和凋亡的影响和机制

目的探讨微小RNA-128(miR-128)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响和机制。方法生物信息学结合双荧光素酶报告基因分析miR-128下游靶基因。肝癌细胞MHCC97H分为miR-128过表达组和阴性对照组,分别感染miR-128和阴性对照序列慢病毒。miR-128过表达稳定细胞系再次分为miR-128+空质粒组和miR-128+高尔基体蛋白73(GP73)组,感染包装对照和GP73基因的腺相关病毒。活细胞计数检测试剂盒检测各组细胞增殖,脱氧核糖核昔酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡并计算凋亡指数。6-8周Balb/c裸鼠30只随机分为过表达组和对照组,各15只,分别接种miR-128过表达组和阴性对照组肝癌细胞,随后测量肿瘤体积。结果生物信息学和双荧光素酶报告基因显示GP73是miR-128靶基因。与阴性对照组比较,miR-128过表达组增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-128+空质粒组比较,miR-128+GP73组增殖能力提高,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-128表达组凋亡指数增加,差异有统计学意义(P<0.05。与miR-128+空质粒组比较,miR-128+GP73组凋亡指数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。裸鼠接种肿瘤细胞第5周时,过表达组肿瘤体积为(1209±108)mm^3,低于对照组(1985±298)mm^3,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-128抑制肝癌细胞增殖,促进凋亡。miR-128通过靶向调节GP73基因影响肝癌细胞增殖和凋亡。miR-128/GP73为临床肝癌治疗靶点提供新参考。     

微小RNA-146b-5p通过Robo1对胆囊癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miRNA, miR)-146b-5p通过Robo1对胆囊癌细胞增殖和凋亡的影响。方法选取郑州大学第一附属医院2017年1月到2021年12月手术切除的59例胆囊癌及其癌旁组织作为研究对象, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析肿瘤组织和癌旁组织miR-146b-5p表达水平;采用免疫组织化学分析两种组织Robo1蛋白表达水平。采用转染试剂转染miRNA对照和miR-146b-5p抑制剂至人胆囊癌细胞系GBC-SD, 分别命名为miRNA对照组和miR-146b-5p KD组, 采用噻唑蓝(MTT)和克隆形成实验分析两组细胞活力和增殖能力;采用划痕实验、Transwell和蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力;采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析miR-146b-5p的靶基因;采用Western blot分析靶基因表达水平。计量数据比较采用t检验。结果胆囊癌组织miR-146b-5p表达水平(1.01±0.16)明显低于癌旁组织(1.94±0.30), 差异有统计学意义(t=20.860, P<0.05)。mi...     

微小RNA-19b对急性坏死性胰腺炎腺泡细胞坏死的作用

目的 观察微小RNA-19b(miRNA,miR-19b)在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)中的表达变化及其对腺泡细胞坏死的作用.方法 建立ANP模型:接种AR42J细胞1×105个/孔于24孔板,24 h后加入200 μm/L牛磺石胆酸-3-硫酸酯二钠盐(TLC-S),1h后检测淀粉酶和miR-19b表达量.病毒转染及分组:转染腺病毒介导miR-19b模拟物(mimic)为mimic组,转染miRNA反义寡核苷酸链(AMO)为AMO组,转染空病毒组及未转染病毒的空白组,转染48 h后荧光检测转染效率,诱导ANP,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-19b的表达量,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色法检测AR42J细胞坏死率.结果 TLC-S处理后AR42J细胞较未处理细胞淀粉酶水平[(1 084.5±64.9)U/L比(290.3 ±6.8)U/L]明显升高(P＜0.05),miR-19b表达量升高(2.51±0.14)倍,建立模型成功;mimic组miR-19b表达量较空病毒组升高(5.94±0.95)倍,AR42J细胞坏死率明显升高[(50.3±1.5)％比(39.6±2.3)％,P ＜0.05];AMO组miR-19b表达量降低(0.38±0.15)倍,AR42J细胞坏死率明显降低[(23.1±3.3)％比(39.6±2.3)％,P＜0.05];空病毒组比空白组miR-19b表达量、细胞坏死率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-19b表达量在ANP中升高,上调其表达,腺泡细胞坏死率增加,下调其表达,腺泡细胞坏死率降低.     

微小RNA-21对脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞凋亡的影响

目的 :探讨微小RNA-21(miR-21)能否抑制FASL的表达进而减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元细胞的凋亡。方法:通过慢病毒载体转染PC-12细胞,测定最佳的感染复数(MOI)。分别转染不同的慢病毒载体建立并验证上调miR-21、下调miR-21和对照的PC-12细胞体系,经过氧糖剥夺以及复糖复氧处理模拟脊髓损伤后缺血再灌注损伤过程。利用Hoechst/PI染色技术检测上调以及下调miR-21对PC-12细胞凋亡情况的影响;利用q RT-PCR技术以及Western blot技术检测上调以及下调miR-21表达对PC-12细胞中FASL表达水平的影响。在293T细胞中,通过质粒转染技术分别建立miR-21/miR-21阴性对照和FASL野生型/FASL突变型/FASL阴性对照的共转染体系,利用双荧光素酶实验验证miR-21和FASL的靶向关系。结果:MOI=20为最佳的感染复数。在该条件下进行慢病毒转染72h后,荧光显微镜下可观测到绝大多数PC-12细胞中有明显的绿色荧光,通过q RT-PCR技术检测miR-21的水平发现:上调组的miR-21水平较对照组明显提高(P0.05);但是下调组miR-21水平和对照组相比却没有明显变化(P0.05)。转染三种不同慢病毒的PC-12细胞经过氧糖剥夺及复氧处理后,Hoechst/PI双染法检测结果证实上调组细胞凋亡较对照组明显减少(P0.05),而下调组的细胞凋亡比例较对照增高(P0.05)。另外,氧糖剥夺及复氧处理后,三组PC-12细胞中FASL表达水平均较处理前增高,而上调组的FASL水平较对照组均下降(P0.05),下调组的FASL水平较对照组有所升高(P0.05)。双荧光素酶实验结果发现miR-21在FASL野生型(3′UTR-WT)组间有显著差异(P0.05),而miR-21在FASL对照组以及FASL突变型组间无显著差异(P0.05)。结论 :miR-21能够通过靶向抑制FASL表达,减少脊髓缺血再灌注损伤后神经元的凋亡。     

微小RNA-130b在嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞损伤中的作用及机制

目的探讨微小RNA-130b(miR-130b)在嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导的足细胞损伤中的作用及机制。方法小鼠肾脏足细胞系MPC5予以PAN 25、50、100μg/mL干预,实时定量PCR检测MPC5细胞系内miR-130b及其宿主基因2610318N02Rik(RIK)表达;转染miR-130b抑制剂(miR-130b inhibitor)或对照(NC inhibitor)后予以PAN 100μg/mL刺激,24 h后采用Western blot检测足细胞裂孔膜蛋白Synaptopodin和Nephrin蛋白表达变化;采用鬼笔环肽染色检测足细胞骨架改变;采用流式细胞技术检测细胞凋亡变化;采用Targetscan 7.2预测miR-130b潜在靶基因,Western blot检测miR-130b模拟物(mimic)对于潜在靶基因PGC1α蛋白表达的影响;采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-130b mimic对于荧光活性的影响。结果 PAN可以抑制足细胞内的miR-130b及宿主基因RIK表达;与转染NC inhibitor组比较,miR-130b inhibitor提高足细胞裂孔膜蛋白synaptopodin和nephrin表达;鬼笔环肽染色显示抑制miR-130b可以部分缓解PAN诱导的足细胞骨架紊乱及重组;流式细胞技术检测结果示干扰足细胞miR-130b表达可以减少PAN诱导的细胞凋亡;Targetcan 7.2分析显示PGC1α是miR-130b的潜在靶基因,Western blot结果显示,转染miR-130b mimic可以降低足细胞内PGC1α表达;双荧光素酶报告基因系统结果示,与NC mimic及突变的PGC1α3'-UTR共转染组比较,miR-130b mimic与野生型PGC1α3'-UTR共转染组荧光素酶活性降低。结论 miR-130b通过靶向抑制PGC1α表达参与PAN诱导的足细胞损伤。     

miR-30c对肝癌细胞增殖和周期及凋亡的影响

目的:观察过表达微小RNA-30c(miR-30c)对肝癌Hep G2细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法:过表达miR-30c慢病毒载体转染Hep G2细胞为过表达miR-30c组,同时设立空病毒载体转染的阴性对照组和无转染的对照组。荧光定量PCR检测miR-30c表达水平,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。结果:对照组、阴性对照组和过表达miR-30c组miR-30c的2~(-△△Ct)值分别为0.16±0.04、0.15±0.03和0.58±0.14,其中对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P0.05),过表达miR-30c组miR-30c的2~(-△△Ct)值显著高于对照组和阴性对照组(P0.01)。过表达miR-30c组在24、48、72 h吸光度值显著低于对照组和阴性对照组(P0.01),对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P0.05)。对照组、阴性对照组和过表达miR-30c组G_2期细胞分别占整个细胞周期的(13.04±1.26)%、(12.43±1.18)%和(32.57±5.34)%,其中对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P0.05),过表达miR-30c组G_2期比例显著高于对照组和阴性对照组(P0.01)。对照组、阴性对照组和过表达miR-30c组凋亡细胞的比例分别为(5.74±1.15%)、(6.12±1.34)%和(24.42±4.45)%,其中对照组和阴性对照组间差异无统计学意义(P0.05),过表达miR-30c组凋亡细胞比例显著高于对照组和阴性对照组(P0.01)。结论:过表达miR-30可以抑制肝癌Hep G2细胞增殖,阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

微小RNA-200c对人胰腺癌干细胞上皮-间充质转化的作用

目的观察微小RNA-200c(miR-200c)在人胰腺癌干细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用。方法应用流式细胞术(FACS)在人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出以CD24⁺CD44⁺ESA+作为标志物的胰腺癌干细胞。将miR-200c前体片段和阴性对照片段分别转染到胰腺癌干细胞中。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)和miR-200c的表达。Transwell试验检测细胞的侵袭能力。采用t检验。结果人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出CD24⁺CD44⁺ESA+细胞(0.8%)。miR-200c在胰腺癌干细胞中的相对表达值(0.15±0.01)显著低于PANC-1细胞(1.00±0.09),差异有统计学意义(t=3.306,P<0.05)。胰腺癌干细胞平均穿膜细胞数[(321.00±7.62)个]明显高于PANC-1细胞[(70.00±16.47)个],差异有统计学意义(t=2.152,P<0.05)。转染miR-200c前体片段24 h后的胰腺癌干细胞中miR-200c的相对表达值(3.70±0.42)明显高于转染阴性对照片段的胰腺癌干细胞中miRNA-200c的相对表达值(0.22±0.21),差异有统计学意义(t=2.073,P<0.05)。E-cadherin、vimentin、ZEB1 mRNA在转染miRNA-200c前体片段的胰腺癌干细胞中的表达分别为(3.12±0.02)×10^-4、0.36±0.15、(0.38±0.07)×10^-4,在转染阴性对照片段的胰腺癌干细胞中的表达分别为(1.31±0.05)×10^-4、1.16±0.08、(1.13±0.03)×10^-4,两组比较差异有统计学意义(t=1.941、2.165、2.308,P<0.05)。转染miR-200c前体片段后的胰腺癌干细胞的平均穿膜细胞数[(80.00±5.35)个]明显低于转染阴性对照片段的干细胞[(310.00±19.41)个],两组比较差异有统计学意义(t=2.613,P<0.05)。结论miR-200c过表达可以抑制胰腺癌干细胞的上皮-间充质转化,逆转其侵袭能力。     

组织转谷氨酰胺酶基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其对肝星状细胞的影响

目的 构建组织转谷氨酰胺酶(tTG)RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,研究其对肝星状细胞(HSC)的影响.方法 设计、合成tTG基因RNAi有效靶序列,与慢病毒载体系统进行连接、转染,获得表达tTG基因的RNAi慢病毒载体质粒(Lenti-siRNA-tTG);将大鼠活化HSC分成阴性对照组(CON)、siRNA-GFP对照组(GFP)和siRNA-tTG组(nTG).应用real-time PCR、Western blot和MTT法检测Lenti-siRNA-tTG感染后HSC中tTG、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(collagen-1)的mRNA和蛋白表达情况以及HSC的增殖情况.结果 成功构建siRNA-tTG慢病毒载体;Lenti-siRNA-tTG感染后,HSC中tTG和collagen-1的mRNA表达水平降低(P<0.05),HSC中tTG、lysine和collagen-1的蛋白表达水平下降(P<0.01),HSC的增殖能力降低(P<0.05).结论 Lenti-siRNA-tTG能通过抑制HSC中tTG基因的表达而抑制HSC的增殖,并降低HSC中collagen-1合成和交联的形成,具有潜在的抗纤维化形成的功能.     

微小RNA-29b-3p对大鼠膝骨关节炎模型的保护作用及其机制

目的探讨微小RNA(miR)-29b-3p对大鼠膝骨关节炎模型的保护作用及其机制。方法 30只SD大鼠随机分为对照组、模型组和miR-29b-3p KD组, miR-29b-3p KD组大鼠经膝关节腔注射过表达miR-29b-3p沉默腺相关病毒, 对照组和模型组经膝关节腔给予对照腺相关病毒。3组大鼠表达30 d后, 模型组和miR-29b-3p KD组大鼠采用木瓜蛋白酶局部注射复制膝骨关节炎动物模型。建模4周后, 采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析膝关节miR-29b-3p表达水平;Mankin组织学评分和Pelletier评分分析关节炎病变程度;分析3组大鼠膝关节最大活动度;采用酶联免疫吸附实验分析白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;采用免疫组织化学分析基质金属蛋白酶(MMP)-13和Ⅱ型胶原的表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果 miR-29b-3p KD组大鼠膝关节组织miR-29b-3p表达水平(0.76±0.11)明显低于模型组(2.09±0.15), 差异有统计学意义(t=22.240, P<0....     

微小RNA let-7c慢病毒载体的构建及过表达研究

目的 构建微小RNA let-7c重组慢病毒载体,验证转染该载体系统后对肝癌细胞增殖的影响 方法 构建表达含494bp let-7c基因的重组慢病毒载体,检测let-7c及对照组病毒滴度分别为5.01×10E8 TU/m1、5.15×10E8TU/ml;转染HepG2细胞,以荧光定量聚合酶链反应(PCR)对let-7e表达水平进行检测;细胞计数试剂盒(CCK-8)试验评价let-7c过表达后对HepG2细胞增殖的影响.结果 构建的let-7c慢病毒载体经质粒酶切和测序鉴定正确;转染HepG2细胞72 h后,let-7c表达上调312倍;CCK-8法检测显示HepG2细胞增殖受到明显抑制(P＜0.01).结论 成功构建Iet-7c重组慢病毒载体并感染HepG2细胞后高效表达成熟let-7c,抑制了HepG2肝癌细胞的增殖.     

ERp29蛋白在BALB／c小鼠附睾头部和尾部精子中的鉴定和定位

目的 对在BALB/c小鼠附睾精子中内质网蛋白29(endoplasmic reticulum protein 29,ERp29)进行鉴定以及定位.方法 应用免疫印迹方法鉴定BALB/c小鼠附睾头、尾部精子ERp29蛋白,同时利用激光共聚焦显微镜和间接免疫荧光定位的方法研究ERp29在附睾头、尾部精子上的定位.结果 证实ERp29蛋白存在于BALB/c小鼠附睾头部和尾部精子中,且其在尾部精子中含量较头部明显增高.ERp29蛋白主要定位于BALB/c小鼠附睾头部精子的头部前端,而在附睾尾部精子则主要定位于头部和尾部主段.结论 通过对ERp29蛋白在BALB/c小鼠附睾头部和尾部精子上的鉴定和定位,可以帮助进一步研究该蛋白对小鼠精子的作用.     

雷公藤内酯醇及雷公藤内酯醇聚合物胶束对HT29细胞增殖及凋亡的影响

目的研究雷公藤内酯醇(Triptolide TP)和雷公藤内酯醇聚合物胶束(Triptolide loaded poly-meric micelles,TP-PM)对人结肠癌HT29细胞增殖及凋亡的作用及机制,评价聚合物胶束作为雷公藤内酯醇纳米载体的可行性。方法用含不同浓度的TP和TP-PM(1-100ng/mL)培养液孵育HT29细胞24h、48h和72h后,利用WST-1、BrdU试剂盒测定细胞的存活率、增殖率;通过测定LDH活性判断细胞膜完整性;利用流式细胞仪测定细胞死亡、存活和凋亡率;并通过Caspase-Glo3/7定量试剂盒测定细胞caspase3/7的表达情况。结果 TP和TP-PM对HT29细胞活性和细胞增殖的抑制作用显著,呈明显的剂量、时间依赖性,TP-PM对HT29的抑制作用优于TP(P0.05)。TP和TP-PM对HT29细胞膜的破坏轻微。FDA-PI双染结果显示,两组中FDA阳性细胞均呈现时间、剂量依赖性的下降(P0.01);PI阳性细胞率呈现时间、剂量依赖性的上升(P0.01);FDA、PI双阴性细胞也明显上升,但不呈时间、剂量依赖关系。Caspase测定结果显示TP和TP-PM均可引起Caspase3/7活性增高,TP-PM组引起的凋亡作用强于TP组(P0.05)。结论 TP和TP-PM可以通过诱导凋亡的方式抑制肿瘤细胞生长和增殖,且TP-PM的作用强于TP,聚合物胶束是一种极具前景的载药体系。     

SH2-B对结肠癌HT-29细胞增殖的影响

目的：探讨SH2-B对结肠癌HT-29细胞周期演进和细胞增殖的影响。
方法：免疫荧光筛选SH2-B低表达结肠癌细胞（HT-29）。用LipofectAMINE2000将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞（转染组），并设空载体转染组和未转染组作为对照。Western-blotting分析SH2-B转染后SH2-B的表达，MTT法分析SH2-B转染后HT-29细胞的增殖，流式细胞术分析SH2-B转染后HT-29细胞周期变化。
结果：将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞后可获得SH2-B的有效表达。转染SH2-B 后HT-29细胞增殖显著增强（P＜0.05）。流式细胞仪检测结果显示，转染SH2-B组S期细胞显著高于未转染组和空载体组（P＜0.05）。
结论：SH2-B促进结肠癌HT-29细胞增殖和细胞周期演进。

     

微小RNA-29b在肾小管上皮细胞的表达及调节上皮间质转分化的作用机制

目的研究血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)中微小核糖核酸(miRNA)-29b(miR-29b)表达的影响,以及miR-29b在细胞间质转分化中的作用,为研究肾间质纤维化机制提供新思路。方法体外培养NRK-52E,将不加入AngⅡ的细胞作为对照组,加入AngⅡ的细胞为实验组,按加入不同浓度的AngⅡ(10~(-9)mol/L、10~(-7)mol/L)及AngⅡ刺激时间(12 h、24 h、48 h)的长短又分为实验亚组,同时设立miR-29b mimic转染组及阴性对照组。显微镜下观察对照组与实验组细胞的形态学改变,运用实时荧光定量聚合酶链反应检测rniR-29b表达,蛋白质免疫印迹试验检测Snail、E钙黏附素(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达。两两比较用t检验。结果实验组中AngⅡ刺激12 h后,细胞形态呈梭形改变;随着AngⅡ刺激浓度的增加,α-SMA、Snail蛋白表达显著升高,E-cadherin表达量显著下降,与对照组相比,差异均有统计学意义(P0.05)。实验组中随着AngⅡ刺激时间的延长,细胞α-SMA、Snail和E-cadherin的表达呈时间依赖性,α-SMA、Snail的表达显著增加,E-cadherin表达量显著降低,与对照组相比,P0.05。同时AngⅡ呈浓度和时间依赖性下调NRK-52E细胞中miR-29b表达,与对照组相比,P0.05。此外,miR-29b mimic转染组和阴性对照组相比,α-SMA、Snail蛋白表达显著降低(P0.05),E-cadherin表达量显著升高(P0.05)。结论 AngⅡ可诱导NRK-52E细胞发生间质转分化,且miR-29b可抑制AngⅡ诱导的NRK-52E细胞发生间质转分化。     

地氟醚通过上调miR-29b表达减轻大鼠的心肌损伤

目的 探讨微小RNA-29b（miR-29b）在地氟醚处理减轻大鼠心肌梗死中的作用。
方法 成年雄性健康Wistar大鼠80只,10周龄,体重350～400 g,随机分为五组：假手术组（S组）、心肌梗死组（MI组）、地氟醚组（MD组）、空载AAV9组（MA组）和miR-29b沉默组（MR组）,每组16只。S组仅分离冠状动脉不结扎,其余组均建立心肌梗死模型,S组和MI组造模前3 d经尾静脉注射磷酸缓冲液（PBS）,MD组造模前3 d经尾静脉注射PBS,并于造模前30 min吸入5.9%地氟醚1 h,之后吸入1.3%地氟醚维持麻醉,MA组和MR组造模前3 d分别经尾静脉注射AAV9、AAV9-miR-29b-sponge,余同MD组。再灌注120 min后,采用Werstern blot法检测心肌组织转录激活因子3（STAT3）、p-STAT3、白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白含量;RT-qPCR检测心肌组织miR-29b表达量;红四氮唑（TTC）和HE染色观察心肌梗死面积百分比和组织形态;TargetScan预测并用双荧光素酶实验验证miR-29b与STAT3的靶向关系。
结果 与S组比较,MI组STAT3、p-STAT3、IL-1β、TNF-α蛋白相对含量明显升高,miR-29b相对表达量明显降低,心肌梗死面积百分比明显增大（P＜0.05）,心肌组织可见炎症浸润等损伤。与MI组比较,MD组STAT3、p-STAT3、IL-1β、TNF-α蛋白相对含量明显降低,miR-29b相对表达量明显升高,心肌梗死面积百分比明显减小（P＜0.05）,心肌组织损伤减轻。与MA组比较,MR组STAT3、p-STAT3、IL-1β、TNF-α蛋白相对含量明显升高,miR-29b相对表达量明显降低,心肌梗死面积百分比明显增大（P＜0.05）,心肌组织损伤加重。转染STAT3-3′UTR-WT、miR-29b mimics的心肌细胞荧光素酶活性明显弱于转染STAT3-3′UTR-WT、miR-29b NC的心肌细胞（P＜0.05）。
结论 地氟醚处理可通过上调miR-29b表达,靶向抑制STAT3表达,抑制STAT3相关炎症反应,减轻大鼠心肌梗死损伤,发挥心肌保护作用。     

大蒜素对人结肠癌HT29细胞增殖影响及作用机制研究

目的:探讨大蒜素对体外培养结肠癌HT29细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度大蒜素对HT29细胞增殖抑制率;流式细胞术测定细胞周期变化及凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达。结果:MTT显示大蒜素能抑制人结肠癌HT29细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示10μg/ml大蒜素可明显诱导HT29细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期;可降低癌基因蛋白Bcl表达,而促进Bax表达。结论:大蒜素对人结肠癌HT29细胞增殖具有抑制作用,可能与细胞周期阻滞和凋亡相关蛋白表达有关。     

MicroRNA-224在肝癌HepG2细胞中的表达及其靶基因的预测分析

目的 应用基因芯片技术研究microRNA-224在肝癌HepG2细胞中的表达,通过生物信息学预测其下游靶基因,并初步揭示其在肝癌发生过程中的作用.方法 利用基因芯片技术筛选得到和正常肝上皮LO2细胞比较差异表达的基因,通过生物信息学预测表达上调的microRNA-224的靶基凶,并对其靶基因进行功能注释.结果 与LO2细胞比较,microRNA-224在肝癌HepG2细胞中旱高表达.MicroRNA-224预测靶基因有264个,其多个基因涉及细胞周期、信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等众多生物学过程.结论 MicroRNA-224在肝癌HepG2细胞中呈现高表达,可能间接或直接地调控其下游靶基因表达,在肝癌发生过程中起着重要的作用.     

Spinal anaesthesia with 29 gauge Quincke point needles and post dural puncture headache in 2,378 patients

Two thousand three hundred and seventy–eight spinal anaesthetics using a 29 G Quincke point needle were administered in a District Hospital between May 1983 and December 1991. The overall post dural puncture headache rate (PDPH) was 1.2% with a maximum of 2.5% in patients between age 30 and 39. PDPH was related to the experience of using 29 G needles (0.5% in consultants versus 2.0% in trainees, P<0.05).     

Ribosomal protein L29/HIP deficiency delays osteogenesis and increases fragility of adult bone in mice

Mice lacking HIP/RPL29, a ribosomal modulator of protein synthesis rate, display a short stature phenotype. To understand the contribution of HIP/RPL29 to bone formation and adult whole bone mechanical properties, we examined both developing and adult bone in our knockout mice. Results indicated that bone shortening in HIP/RPL29‐null mice is due to delayed entry of chondro‐osteoprogenitors into the cell cycle. Structural properties of adult null bones were analyzed by micro‐computed tomography. Interestingly, partial preservation of cortical thickness was observed in null males indicating a gender‐specific effect of the genotype on cortical bone parameters. Null males, and to a lower extent null females, displayed increased bone material toughness to counteract decreased bone size. This elevation in a bone material property was associated with increased bone mineral density only in null males. Neither male nor female null animals could withstand the same maximum load as gender‐matched controls in three‐point bending tests, and smaller post‐yield displacements (and thus increased bone brittleness) were found for null animals. These results suggest that HIP/RPL29‐deficient mice exhibit increased bone fragility due to altered matrix protein synthesis rates as a consequence of ribosomal insufficiency. Thus, sub‐efficient protein translation increased fracture risk in HIP/RPL29‐null animals. Taken together, these studies provide strong genetic evidence that the ability to regulate and amplify protein synthesis rates, including those proteins that regulate the cell cycle entry during skeletal development, are important determinants for establishment of normal bone mass and quality. © 2008 Orthopaedic Research Society. Published by Wiley Periodicals, Inc. J Orthop Res 27:28–35, 2009