姜黄素对EAE大鼠脊髓中MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:探讨姜黄素对EAE大鼠脊髓中MMP-2、MMP-9活性的影响。方法:采用豚鼠脊髓匀浆诱导EAE模型,治疗组给予姜黄素进行干预,观察行为学变化,HE染色观察脑组织病理改变,real—time PCR检测颈髓组织MMP-2、MMP-9mRNA表达。结果:与EAE组相比,姜黄素治疗组临床评分明显下降,病程缩短,而且恢复较快;中枢炎性细胞浸润明显减少;MMP-9的转录水平明显下降,两组之间差异具有显著性,而MMP-2的水平两者无明显差异。结论:姜黄素对EAE具有一定的治疗作用,可能与抑制炎症细胞浸润及降低MMP-9的水平有关。     

淫羊藿黄酮对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型病理特征的干预

 目的 建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）大鼠模型,观察其组织病理特征。并进一步研究中药有效成分淫羊藿黄酮（epimedium flavone,EF）对该模型病理特征的干预作用。方法 采用豚鼠全脊髓匀浆制备抗原免疫Lewis大鼠建立EAE动物模型,每天监测动物体重和行为学变化;应用HE染色观察脑和脊髓炎性浸润、血管袖套形成等变化;Luxol Fast Blue（LFB）染色观察脊髓脱髓鞘变化;电子显微镜观察脊髓髓鞘超微结构;并考察EF对上述指标的干预作用。结果 ①随着病程进展,EAE模型组大鼠体重明显下降;从第8天起出现行为学异常,神经功能损伤评分逐渐增高,于第12天达峰值。病理形态学检查显示,EAE模型组大鼠脑组织血管周围和脑实质有大量炎性细胞浸润;脊髓腰膨大脊膜出现炎性水肿,并有炎症细胞浸润;脊髓血管周围有大量炎性细胞密集环绕,呈“袖套样”改变;脊髓髓鞘大面积脱失,且髓鞘板层松散。②EF灌胃给药能显著增加EAE模型大鼠体重,延迟发病进程,缓解发病症状。③EF能减轻EAE模型大鼠脊髓腰膨大和脑实质炎性浸润和髓鞘脱失的病理变化。结论 EF能显著降低EAE大鼠行为学评分,改善EAE大鼠大脑和脊髓的炎性脱髓鞘变化,减轻神经细胞结构损伤,从而改善其临床症状。     

雷公藤内酯醇对Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗作用

目的:探讨雷公藤内酯醇对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白和福氏完全佐剂及左旋咪唑诱发大鼠EAE;治疗组在模型组的基础上予以不同剂量雷公藤内酯醇。观察各组的发病情况;HE染色观察病理变化;Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变。结果:低剂量组EAE临床症状较模型组轻;高剂量组未出现临床症状;脑和脊髓炎症细胞浸润明显减少。结论:雷公藤内酯醇对EAE有治疗作用并与剂量相关。     

银杏叶提取物EGb761对中枢脱髓鞘大鼠神经保护作用的研究

目的 研究银杏叶提取物EGb761对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠的神经行为学及脑脊髓组织病理改变.以探讨EGb761对脱髓鞘疾病的神经保护及髓鞘再生的作用.方法 将Wistar大鼠随机分为3组,正常对照（NC）组,EAE组,BGb761组.诱导Wistar大鼠BAE模型,同时以EGb761分别于免疫当日开始治疗,并观察神经行为改变;全部动物于免疫第14d取脑,脊髓,常规病理切片,HE染色.结果 与EAE组相比,EGb761组推迟了EAE发病时间,其临床评分在疾病高峰时有明显下降.BGb761组较EAE组,脑和脊髓炎性细胞浸润,神经元肿胀、变性、坏死明显减轻.正常对照组未见异常.结论 EGb761使EAE大鼠减轻了脱髓鞘症状,减轻组织中神经髓鞘及神经元的损伤,对神经有保护作用,并促进神经髓鞘的再生.     

雷公藤内酯醇对Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗作用

目的：探讨雷公藤内酯醇对大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）的治疗作用。方法：模型组采用豚鼠髓鞘蛋白和福氏完全佐刺及左旋咪唑诱发大鼠EAE；治疗组在模型组的基础上予以不同剂量雷公藤内酯醇。观察各组的发病情况；HE染色观察病理变化；Loyez氏髓鞘染色法观察髓鞘改变。结果：低剂量组EAE临床症状较模型组轻；高刺量组未出现临床症状；脑和脊髓炎症细胞浸润明显减少。结论：雷公藤内酯醇对EAE有治疗作用并与剂量相关。     

火把花根片对EAE大鼠脑和脊髓L-选择素表达的影响

目的:探讨火把化根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用及L-选择素的影响。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE;治疗组在模型组基础上予以火把化根(600mg.kg-1.d-1)治疗,观察临床表现并评分;HE染色和Loyez氏髓鞘染色观察病理和髓鞘改变;免疫组化技术测定脑和脊髓的L-选择素水平。结果:治疗组未出现临床症状,L-选择素为1.88±0.64,与模型组比较P<0.05;脑和脊髓小血管周围炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论:火把化根片对EAE有治疗作用,其机制与抑制L-选择素表达有关。     

火把花根片对EAE大鼠治疗作用及VCAM-1影响的实验研究

目的:探讨火把化根片对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用及VCAM-1的影响。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE;治疗组在模型组基础上予以火把化根片(600mg.kg-1.d-1,日2次口服),观察临床表现并评分;HE染色和Loyez氏髓鞘染色观察病理和髓鞘改变;免疫组化技术测定脑和脊髓的VCAM-1水平。结果:治疗组未出现临床症状;VCAM-1为(2.13±0.99),与模型组比较P<0.05;脑和脊髓小血管周围炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论:火把化根片对EAE有治疗作用,其作用机制与抑制VCAM-1表达有关。     

雷公藤内酯醇对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠外周血SIL-2R表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠外周血清SIL-2R表达的影响。方法:模型组采用豚鼠髓鞘蛋白匀浆和福氏完全佐剂诱发大鼠急性EAE,治疗组在模型组基础上予以不同剂量雷公藤内酯醇[0.2mg/(kg.d),0.4mg/(kg.d)],观察临床表现并评分;HE染色和Loyez氏髓鞘染色观察病理和髓鞘改变;ELISA法测定血清的SIL-2R水平。结果:高剂量组未出现临床症状;低剂量组EAE临床症状较模型组轻。高剂量组SIL-2R浓度为(36.43±5.43)mg/mL,与模型组和低剂量Tri组比较P<0.01和P<0.05;脑和脊髓小血管周围炎症细胞浸润明显减少;髓鞘结构完整。结论:雷公藤内酯醇对EAE的治疗有剂量相关性,其作用机制与抑制SIL-2R表达有关。     

梓醇配伍大黄素对EAE小鼠大脑内NRG1的影响

目的:观察梓醇配伍大黄素对EAE小鼠大脑内NRG1表达的影响,讨论其减轻髓鞘损伤及其修复机制。方法:C57BL/6j小鼠背部脊柱旁皮下4点注射MOG35-55诱导产生EAE,观察EAE小鼠神经功能缺损严重程度,于第18天及第40天取小鼠大脑组织,HE染色观察其炎性浸润,透射电子显微镜观察小鼠大脑髓鞘、轴突病理改变,Realtime rt-PCR和WB检测小鼠大脑NRG1基因及蛋白的表达水平。结果:梓醇配伍大黄素能够改善EAE小鼠临床症状和神经功能评分,配伍组与模型组比较神经功能损伤评分降低,差异有统计学意义。HE染色显示各治疗组炎性浸润均有所减轻,TEM显示各治疗组髓鞘环形层状结构松散变形程度均较模型组减轻,WB、Realtime rt-PCR结果显示配伍组NRG1基因及蛋白表达水平较正常组及模型组明显升高。结论:梓醇配伍大黄素能减轻EAE小鼠病理改变,减缓炎症进程,增加NRG1在大脑内的表达,对髓鞘的再生具有一定的促进作用。     

安宫牛黄丸对自发性高血压大鼠急性脑出血后脑水肿及神经功能缺损的影响

目的:观察安宫牛黄丸对自发性高血压大鼠脑出血后脑组织含水量、脑系数以及神经功能缺损的影响。方法:将自发性高血压大鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、西药治疗组、中药治疗组、中西药结合治疗组,于6、24、48、72h观察大鼠神经行为学评分,测量脑组织含水量与脑系数。结果:模型组大鼠脑组织含水量、脑系数及行为学评分较空白对照组高(P<0.05),3个治疗组脑组织含水量、脑系数及行为学评分低于模型组(P<0.05),中西结合治疗组脑组织含水量、脑系数及行为学评分明显低于中药治疗组及西药治疗组(P<0.05),中药治疗组与西药中药治疗组与西药治疗组间相比差异无显著性。结论:安宫牛黄丸能够有效减轻脑出血后脑组织含水量、减少脑系数并改善神经功能缺损症状。     

大麻素1型受体过表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠神经干细胞的影响

目的:探讨大麻素1型受体(CB1R)过表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠脑神经干细胞的影响。方法:建立EAE小鼠模型(n=50)并设置佐剂组(n=10)和对照组(n=10),建模成功的EAE小鼠注射CB1R过表达慢病毒液并记为CBlR过表达组(n=20),设置空载体组(n=10)和EAE模型组(n=20)。评价各组小鼠神经功能,观察对照组、EAE模型组和CBlR过表达组小鼠的脑组织病理学变化,检测脑组织CB1R、室管膜下区Brdu和Brdu+/Nestin+以及Sox-2 mRNA水平。结果：EAE模型组神经功能评分升高、CBlR蛋白降低(P<0.05),CBlR过表达组神经功能评分下降、CBlR蛋白升高(P<0.05)。EAE模型组脑组织出现炎症细胞浸润及髓鞘缺失等典型病理变化,CBlR过表达组的病理损伤显著改善。EAE模型组Brdu、Brdu+/Nestin+阳性细胞以及Sox-2mRNA水平均显著增加(均P<0.05),CBlR过表达组比较EAE模型组亦显著增加(P<0.05)。结论:过表达CBlR可能是通过加速小鼠脑神经干细胞的增殖从而促进脑组织损伤的修复,最终有效减轻了自身免疫性脑脊髓炎小鼠的症状。     

Amelioration of experimental autoimmune encephalomyelitis in Lewis rats treated with fucoidan

We examined whether fucoidan affected the clinical symptoms of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in rats. EAE was induced in Lewis rats that were immunized with guinea‐pig myelin basic protein (MBP) and complete Freund's adjuvant. Fucoidan (50 mg/kg, daily) was administered to rats with EAE intraperitoneally, either in the EAE induction phase from either 1 day before immunization to day 7 post‐immunization (PI), or the effector phase from day 8 to 14 PI, to test which phase of rat EAE is affected by fucoidan treatment. The onset, severity and duration of EAE paralysis in the fucoidan‐treated group in the days 8–14 PI‐treated rats, but not in days ?1–7 PI‐treated rats, were significantly delayed, suppressed and reduced, respectively, compared with the vehicle‐treated controls. Treatment with fucoidan reduced the encephalitogenic response and TNF‐α production during EAE. Moreover, the clinical amelioration coincided with decreased infiltration of inflammatory cells in the EAE‐affected spinal cord. The ameliorative effect of fucoidan on clinical paralysis in EAE‐affected rats may be mediated, in part, by the suppression of the autoreactive T cell response and inflammatory cytokine production. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠CCL2,CCR2mRNA表达的影响

目的:观察目前国际上公认的人类多发性硬化(MS)的理想动物模型-实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型脊髓中单核细胞趋化蛋白2(CCL2),单核细胞趋化蛋白受体2(CCR2)mRNA表达,探讨苦参素对EAE大鼠的保护作用,为临床应用提供依据。方法:将50只雌性Wistar大鼠随机分5组,分别为正常组,模型组,苦参素低、高剂量组(150,250 mg·kg~(-1)),地塞米松组(1 mg·kg~(-1)),每组10只,自免疫当天起连续给药16 d,同期正常组、模型组ip等量生理盐水,观察记录大鼠的临床症状,并检查组织病理学变化,采用RT-PCR法检测脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达。结果:与模型组比较,苦参素有效延迟EAE大鼠的发病时间,明显降低临床神经功能学评分(P0.01),改善EAE大鼠中枢神经系统炎症浸润(P0.01)和髓鞘脱失(P0.01)程度,下调脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达(P0.01,P0.01)。结论:苦参素对EAE大鼠有防治作用,其作用机制可能与下调大鼠脊髓中CCL2,CCR2 mRNA的表达有关。     

补肾固髓片治疗多发性硬化的临床与实验研究

目的：观察补肾固髓片对多发性硬化（MS）的疗效及对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）豚鼠的影响。方法；应用补肾固髓片治疗MS患者43例，观察其治疗前后临床症状，神经功能体征，复发次数及诱发电位，磁共振（MRI）等变化；采用兔脊髓匀浆和完全福氏佐剂诱导豚鼠EAE动物模型，应用补肾固髓片治疗，以醋酸党委书记尼松作为对照药物，观察其发病，神经组织病理变化及其血清白细胞介素－2（IL－2），白细胞介素－6（IL－6），肿瘤坏死因子（TNF）和髓鞘碱性蛋白（MBP）水平。结果：补肾固髓片可改善MS患者的病情，减少复发，总有效率88．37％；实验研究发现大剂量补髓片能明显抑制AE发病，抑制脑和脊的炎症反应和脱髓鞘改变，抑制血清IL－2，IL－6，TNF和MBP的活性（与模型组比较，P＜0．01），与醋酸泼尼松组比较差异无显著性（P＞0．05），结论：补肾固髓片治疗MS疗效较好，提示其有临床研究与应用价值。     

三化汤对脑缺血再灌注大鼠神经功能、 脑含水量及脑组织病理改变的影响

目的:观察三化汤对脑缺血再灌注大鼠神经功能、脑含水量及脑组织病理形态学的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、模型组、三化汤低、高剂量组(7.2,14.4 g.kg-1)ig、尼莫地平组(8.1 mg.kg-)1ig,每日1次,连续7 d,给药1周后采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型。缺血2 h再灌注24 h后按照Zealonga 5级法对大鼠神经受损症状评分;并取脑称量脑湿重和脑干重,计算脑含水量;HE染色分析脑组织病理学改变。结果:与假手术组比,模型组大鼠神经受损症状严重(P<0.01),脑含水量明显升高(P<0.01),光镜见神经细胞明显肿胀、变性、坏死、炎细胞浸润及血管扩张等病理改变;与模型组比,三化汤高剂量组大鼠神经受损症状明显减轻(P<0.05),大鼠脑组织含水量明显降低(P<0.01)。结论:三化汤对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

六味地黄和金匮肾气丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠淋巴细胞亚群和NK细胞的影响

目的:观察六味地黄丸和金匮肾气丸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞的影响。方法:皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白_35-55(MOG_35-55)与完全弗氏佐剂(CFA)混合的抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素(PTX),建立EAE模型。每天记录各组小鼠体重及神经功能评分;造模后第12,25及40天,用流式细胞仪检测小鼠外周血淋巴细胞亚群及NK细胞;取各组小鼠脑和脊髓,进行病理观察。结果:模型组小鼠造模后第9天开始陆续发病,第22天达到高峰,神经功能评分为4.0分,体重明显降低,淋巴细胞亚群中CD8⁺明显降低,CD4⁺/CD8⁺比值明显升高,NK细胞水平明显降低。各治疗组小鼠的神经功能评分均比模型组降低,病程缩短,CD8⁺,CD4⁺/CD8⁺比值及NK细胞水平基本调节至正常。病理观察发现模型组小鼠大脑和脊髓病变表现为小静脉周围炎性细胞浸润形成袖套样改变及神经核固缩。激素组、六味地黄丸组和金匮肾气丸组均有不同程度减轻,病灶区域的炎性浸润细胞数较少,袖套样改变少见。结论:六味地黄丸和金匮肾气丸均有防治EAE的作用。其作用机制可能与调节细胞免疫系统有关。六味地黄丸在改善EAE小鼠体重、神经评分及调节细胞免疫等方面要优于醋酸泼尼松和金匮肾气丸。     

白芍总苷对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠血清Th1型细胞因子的影响

目的:探讨白芍总苷(TGP)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)发病的治疗作用及其免疫学机制.方法:将50只大鼠随机分为正常对照组,EAE对照组及低,中,高剂量TGP治疗组,低,中,高剂量TGP治疗组大鼠造模后分别ig TGP 50,100,200 mg·kg -1·d-1,EAE对照组大鼠造模后ig等量生理盐水,观察各组的发病情况及血清中Th1型细胞因子γ干扰素(IFN-γ),肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化.结果:TGP各剂量治疗组的症状均较EAE对照组轻,发病潜伏期均较EAE对照组明显延长,高峰期症状评分均较EAE对照组明显降低;各TGP治疗组治疗后血清IFN-γ,TNF-α水平均显著低于EAE对照组.上述改变呈剂量依赖性.结论:TGP对EAE具有治疗作用,其治疗效果呈剂量依赖性;其治疗机制与抑制Th1型细胞因子( IFN-γ,TNF-α)产生有关.     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠细胞外基质表达影响的实验研究

目的观察姜黄素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织细胞外基质成分胶原蛋白-Ⅰ(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)、胶原蛋白-Ⅲ(Collagen-Ⅲ,Col-Ⅲ)和纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)表达的影响,分析其抗纤维化的机制。方法采用大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型。将32只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,姜黄素1组和姜黄素2组。对模型组和治疗组大鼠行左侧输尿管结扎建立单侧输尿管梗阻的动物模型。姜黄素1治疗组于术后第2天给予姜黄素100mg.kg-1.d-1灌胃,姜黄素2治疗组于术后第10天给予姜黄素100 mg.kg-1.d-1灌胃。术后28 d处死大鼠,取梗阻侧肾组织行HE和Masson染色以观察各组大鼠肾组织病理改变。用免疫组化染色方法观察Col-Ⅰ,Col-Ⅲ和FN的表达分布。结果模型组肾小管间质损伤程度、胶原的表达均高于假手术组。姜黄素能明显改善大鼠肾脏病理改变,减少细胞外基质沉积。结论姜黄素可通过下调Col-Ⅰ,Col-Ⅲ和FN在肾组织的表达,从而减少细胞外基质的过度聚集,抑制或减缓肾小管间质纤维化的发生发展。     

醒脑开窍针法对脑缺血再灌注大鼠脑组织病理形态的影响

目的 探讨脑缺血再灌注大鼠脑组织病理形态的变化以及醒脑开窍针刺方法对脑组织的影响.方法 45只SD大鼠随机分为正常组、模型组、假手术组、针刺组和非穴位针刺组,除正常组5只外,其余4组各10只,采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,针刺组采用醒脑开窍针法,非穴位针刺组直接针刺非穴位点不行手法,正常组、假手术组和模型组相同时间点抓取,不做其他处理.除正常组外其余4组分设造模后6h和24h两个观察时间点,通过光镜与电镜观察缺血侧大鼠脑组织病理形态的变化.结果 模型组大鼠脑组织大量神经元变性、坏死和大量炎细胞浸润等病理损害,针刺组各时间点均较模型组同时间点病变程度明显减轻,非穴位针刺组各时间点病变程度依然随时间段的延长而渐趋加重,和同时间点模型组相比并无明显改善.结论 醒脑开窍针法可使不同缺血时相脑组织损伤得到改善,对临床治疗脑缺血具有重要的意义.