软脉煎治疗动脉粥样硬化的临床和实验研究述评

动脉粥样硬化的病因病机以肾中精气亏虚为本,痰瘀交阻为标;治疗当补益肾中精气,兼化痰祛瘀,创立中药复方软脉煎。临床和实验研究证实,软脉煎可通过多种途径防治动脉粥样硬化。     

活血胶囊对动脉粥样硬化兔平滑肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的探讨活血胶囊干预对动脉粥样硬化兔主动脉平滑肌细胞凋亡及凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法通过高脂饮食建立实验性动脉粥样硬化兔动物模型,采用TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡,SP免疫组化法检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与模型组比较,活血胶囊低、高剂量组均能降低兔主动脉平滑肌细胞凋亡的凋亡指数(P<0.05,P<0.01),降低Bax蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),并呈现一定的量效关系(P<0.05)。结论活血胶囊可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减少平滑肌细胞凋亡,从而抑制动脉粥样硬化斑块的形成。     

软脉煎对凝血酶诱导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞增生的影响

目的：探讨具有补肾益气作用的软脉煎对与家兔胸主动脉血管平滑肌细胞增生有关的血小板源生长因子-A链（PDGF—A）mRNA以及细胞超微结构的影响。方法：用贴块法培养家兔胸主动脉血管平滑肌（VSMC），用药物血清学方法将药物血清作用于细胞模型。设立正常组，模型组，软脉煎5倍、10倍、20倍成人剂量组和舒降之10倍成人剂量组。逆转录一聚合酶联反应法测定各组血小板源生长因子A链mRNA表达水平。电镜观察各组超微结构的改变。结果：软脉煎能够使家兔VSMCs PDGF—A链的mRNA表达降低并改变其超微结构。结论：肾中精气亏虚可能是动脉粥样硬化病变发生的根本原因之一，补肾益气可能是治疗动脉粥样硬化的有效原则。     

软脉胶囊对实验性动脉粥样硬化家兔的流式细胞学指标的影响

目的：观察软脉胶囊对实验性动脉粥样硬化家兔的流式细胞学指标的影响。方法：采用喂养法复制家兔动粥样硬化模型，用流式细胞检测技术测定细胞凋亡率、增殖率、Bcl-2、Fas、Bax基因的表达产物。结果：软脉胶囊高、低剂量组细胞凋亡率Fas、Bax明显高于模型组；软脉胶囊高、低剂量组的Bcl-2明显低于模型组。结论：软脉胶囊抗动脉粥样硬化形成的机制是通过降低基因Bcl-2的表达和增加基因Fas、Bax的表达，促进细胞凋亡。     

补肾煎对去势兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

观察补肾煎对去势兔动脉粥样硬化血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及机制。将27只纯种新西兰雌兔随机分为：A组（卵巢切除）、B组（未切除卵巢）、C组（卵巢切除＋补肾煎）,均给予高脂饮食,同时注射牛血清白蛋白0．25g/kg,造成动脉粥样硬化模型,12周时比较动脉形态学变化、MTT法测定各组培养血管平滑肌细胞增殖活性、电镜观察、原位末端标记法及流式细胞仪了解各组平滑肌细胞凋亡情况。结果：C组主动脉内膜增生低于A组;C组培养平滑肌细胞增殖低于A组及B组;C组培养平滑肌细胞凋亡高于A组及B组。结论：补痛煎可能通过站滑肌2细胞的增殖及增加其凋亡而减轻去势兔动脉粥样硬化的形成。     

软脉煎联合西药治疗颈动脉粥样硬化的临床研究

目的评价具有补肾益气功效的中药复方软脉煎治疗肾精亏虚型颈动脉粥样硬化的临床疗效和安全性。方法将98例肾精亏虚型颈动脉粥样硬化患者随机分为治疗组和对照组,每组49例;对照组给予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗基础上加用复方软脉煎,疗程均为6个月。比较两组患者治疗前后颈动脉内中膜厚度(IMT)、斑块面积、终点事件发生率等疗效指标和安全性指标。结果治疗后,治疗组IMT较治疗前降低(P0.01),对照组较治疗前增厚(P0.01);治疗组IMT治疗前后差值较对照组大(P0.01)。治疗组斑块面积较治疗前缩小(P0.05),且其治疗前后斑块面积差值较对照组增大(P0.01)。治疗组累积终点事件发生率、次要终点事件发生率较对照组低(P0.05)。结论软脉煎联合西医常规治疗可抑制颈动脉粥样硬化增厚,延缓斑块面积进展,降低临床终点事件发生率。     

软脉煎治疗颈动脉粥样硬化的临床研究

目的 :为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化 (AS)的作用 ,主要是对颈AS患者观察治疗前、后颈动脉内膜中层厚度 (IMT)、斑块面积的变化 ,氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL) ,一氧化氮 (NO) ,内皮素(ET)以及中医辨证分值。方法 :采用经彩色多普勒超声确诊有颈AS证据 ,且符合中医肾气虚的患者作为观察对象。彩色多普勒超声检测治疗前、后颈AS灶的变化 ,酶联免疫吸附法测氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL) ,硝酸还原酶法测一氧化氮 (NO) ,放免法测内皮素 (ET)以及观察治疗前、后中医辨证分值 ,并设舒降之 (辛伐他汀 )组进行对照。结果 :AS患者应用软脉煎治疗后 ,其颈动脉IMT减小 (P <0 0 1 ) ,粥样斑块面积缩小 (P <0 0 5 ) ,舒降之对照组无上述作用。治疗前后血清ox -LDL、ET、NO、ET/NO的变化无显著意义 (P >0 0 5 )。软脉煎组治疗后中医症候分值明显改善且优于舒降之对照组 (P <0 0 1 )。结论 :提示软脉煎能使AS病变在一定程度上得到消退 ,同时说明中医辨证论治的重要性。     

软脉胶囊对家兔动脉粥样硬化预防作用的实验研究

目的 :观察软脉胶囊对家兔动脉粥样硬化模型中脂质代谢和主动脉斑块面积形成的影响。方法 :采用喂养法复制家兔动脉硬化模型 ,同时分组给药 ,3个月后测定家兔有关生化指标并进行病理形态学检查。结果 :软脉胶囊高 (1 2 6g kg·d)、低剂量组 (0 42g kg·d)和阳性药物步长脑心通组0 2 5 2g/kg·d的甘油三脂 (TG)、血清总胆固醇 (TC)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL)均较模型组明显降低 (P <0 0 5和P <0 0 1 ) ,软脉胶囊高剂量组还能升高高密度脂蛋白胆固醇 (HDL—c)、载脂蛋白A1(ApoA1) (P <0 0 5和P <0 0 1 ) ,降低载脂蛋白B10 0 (ApoB10 0 ) (P <0 0 1 )。病理形态学检查显示软脉胶囊高、低剂量组兔主动脉斑块面积明显减少 ,动脉内膜增厚不明显 ,可见少量平滑肌细胞增生及弹力纤维形成。结论 :软脉胶囊能明显抑制主动脉粥样硬化斑块的形成 ,是预防动脉粥样硬化的理想而有效的药物。     

当归芍药散对实验性动脉粥样硬化家兔血脂及主动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的：观察当归芍药散(以下简称“归芍散”)对实验性动脉粥样硬化(AS)的作用，并初步探讨其机制。方法：采用高脂饲料喂饲法复制实验性AS家兔模型，观察归芍散对其血脂、脂蛋白含量水平，主动脉病理形态学改变及细胞凋亡率、增殖率、Bax和Bel-2蛋白表达量的影响。结果：归芍散能明显降低血清总胆固醇(TC)，甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-c)含量水平，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)含量；抑制主动脉内膜脂质沉着、泡沫细胞的产生和堆积；能有效促进早期实验性AS家兔主动脉平滑肌细胞(SMC)的凋亡，抑制其增殖。结论：归芍散能有效防治AS，其机理可能与有效调整血脂、调控平滑肌细胞凋亡密切相关。     

绞股蓝总皂甙对肝细胞瘤细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨绞股蓝总皂甙（Gp）对人肝细胞瘤细胞（Huh-7）细胞凋亡的影响及作用机制。方法:采用流式细胞术检测Gp对人Huh-7细胞凋亡的影响,Western blot分析Gp作用Huh-7细胞后表达的Bcl-2,Bcl-XL,Bax和Bad蛋白水平。结果:20mg/ml Gp作用于细胞24h后,64％的Huh-7细胞发生凋亡,而人纤维细胞凋亡率为12％。Westem blot结果显示Gp作用后Huh-7细胞中Bcl-2表达明显降低,而Bax表达显著上调。结论:Gp可诱导人Huh-7细胞凋亡,其作用机制是通过下调Bcl-2和上调Bax的表达而发挥作用。     

软脉宁抗动脉粥样硬化作用的实验研究

:采用饲高脂饲料的方法 ,形成家兔动脉粥样硬化 (AS) 模型 ,观察了中药软脉宁对 AS家兔血脂影响。实验结果表明 ,软脉宁能有效地防治 AS,显著降低血清总胆固醇 (TC) 、甘油三酯 (TG) 、低密度脂蛋白胆固醇 (L DL- C) 、载脂蛋白 B(Apo B) 的含量 ,升高 HDL-C/ TC比值及载脂蛋白 Al(Apo Al) 的含量。实验结果提示软脉宁抗实验性家兔 AS的机制是降低血脂     

心气虚证模型大鼠脑内细胞凋亡相关基因的变化研究

目的：建立心气虚证大鼠模型,研究模型大鼠脑神经元细胞凋亡情况。方法：75只SD大鼠随机分为5组：正常对照组、疲劳对照组、小剂量心得安＋疲劳组、中剂量心得安＋疲劳组和大剂量心得安＋疲劳组,采用强迫跑步加灌服心得安的方法建立心气虚证大鼠模型,观察其脑内凋亡相关基因Bax、Bcl-2和Caspase-3 mR-NA的表达情况。结果：中剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层和海马Bcl-2 mRNA表达明显降低;大剂量心得安＋疲劳组大鼠的大脑皮层Bcl-2 mRNA表达明显降低、海马Caspase-3 mRNA表达明显升高。结论：心气虚证模型大鼠脑内存在神经元细胞的凋亡。     

加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病 大鼠细胞凋亡的影响

目的:通过研究加味附子理中免煎颗粒对急性马兜铃酸肾病(AAN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响探讨其治疗急性AAN的作用机制。方法:将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药组、强的松组、中药+强的松组,其中正常组10只,其余各组均为20只。模型组、中药组、强的松组及中药+强的松组按100 mg.kg-1.d-1剂量予马兜铃酸A纯品连续ig 3 d建立AAN模型;从实验第6天开始,中药组予加味附子理中免煎颗粒(按生药量计为3.55 g.kg-1.d-1,10 mL.kg-1.d-1)ig,强的松组予强的松(0.5 mg.kg-1.d-1)ig,中药+强的松组予加味附子理中免煎颗粒(3.55 g.kg-1.d-1)+强的松(0.5 mg.kg-1.d-1)ig,模型组和正常组则予蒸馏水10 mL.kg-1.d-1 ig;连续给药3周后处死各组大鼠。以RT-PCR检测各组大鼠肾组织Bcl-2mRNA,Bax mRNA的表达,免疫组化法及Western blot法检测各组大鼠肾组织Bcl-2,Bax蛋白的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡。结果:模型组大鼠肾组织Bcl-2 mRNA和蛋白表达明显减少,而Bax mRNA和蛋白表达增多;与模型组比较,中药组、强的松组和中药+强的松组均能不同程度增加Bcl-2 mRNA和蛋白的表达,降低Bax mRNA和蛋白的表达,差异均有统计学意义(P<0.05);其中以中药+强的松组的作用最佳(P<0.05)。TUNEL结果显示,正常组大鼠肾小管可见少量凋亡细胞,模型组则有大量凋亡的肾小管上皮细胞,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,中药组、强的松组和中药+强的松组凋亡细胞数均减少(P<0.05);而中药+强的松组凋亡细胞数减少最为明显(P<0.05)。结论:肾小管上皮细胞凋亡参与了急性马兜铃酸肾病的发病,加味附子理中免煎颗粒能减轻急性马兜铃酸肾病大鼠肾小管上皮细胞的凋亡,但联合强的松治疗疗效更佳。     

芪丹煎对动脉粥样硬化家兔载脂蛋白的影响

目的观察益气活血中药复方芪丹煎对实验性动脉粥样硬化(AS)家兔的影响,探讨该方防治AS导致心肌缺血的机制。方法采用酶法测定血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、载脂蛋白AI(ApoAI)和载脂蛋白B(ApoB),电镜观察胸主动脉的病理改变。结果与模型组比较,芪丹煎可以明显降低血清TG(P<0.05)、TC和ApoB(P<0.01)水平,增加ApoAI含量(P<0.01)。结论降低血脂、调节载脂蛋白含量可能是芪丹煎抑制AS的机制。     

苦参碱调节Bax和Bcl-2蛋白表达诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制

目的:探讨Bax和Bcl-2蛋白在苦参碱诱导A549细胞凋亡中的作用。方法:MTT法检测苦参碱对A549细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达情况。结果:不同浓度的苦参碱对肺腺癌细胞生长均有抑制作用,抑制率与浓度呈正相关。苦参碱随时间进行性降低Bcl-2蛋白的表达,相应地稳步提高Bax蛋白的表达,同时促进Bax从胞浆内向线粒体移位,紧接着降解Caspase-3蛋白。结论:苦参碱通过调节细胞内Bax和Bcl-2蛋白的表达经线粒体信号转导途径诱导A549细胞的凋亡。     

羊栖菜多糖对软脂酸诱导的HL-7702细胞凋亡的保护作用

目的:探讨羊栖菜多糖(SFPS)对软脂酸诱导的肝细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法:SFPS不同浓度(25、50、100μg/mL)预处理24h后,0.5mmol/L软脂酸(PA)作用48h诱导正常人肝细胞株(HL-7702)凋亡。MTT比色法检测SFPS对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC标记法检测细胞的凋亡;RT-PCR法检测凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达并计算其比值(Bcl-2/Bax)。结果:0.5mmol/L PA处理48h的HL-7702细胞存活率下降为正常对照组的64.9%,细胞凋亡率为35.1%,Bax表达上升,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值明显下降(均P<0.05);与模型组相比,SFPS不同浓度(25、50、100 ug/ml)预处理后细胞存活率逐渐升高,细胞凋亡率显著降低,Bax表达逐渐下降,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值逐渐上升(均P<0.05)。结论:SFPS对PA诱导的肝细胞凋亡有较好的保护作用,其作用机制可能与调节Bcl-2、Bax基因的表达有关。     

龙葵碱调控与蛋白表达及活性诱导细胞凋亡的研究

探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的作用机制。方法透射电镜观察凋亡细胞形态变化,原位缺口末端检测法(TUNEL法)检测DNA断裂情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,间接免疫荧光法激光共聚焦扫描显微术检测Bcl-2与Bax蛋白表达,比色法检测caspase-3活性的变化。结果在透射电镜下观察,龙葵碱组细胞出现细胞固缩,染色质致密,核凝聚固缩,染色体断裂形成核碎块,凋亡小体形成等细胞凋亡特征形态。TUNEL法发现龙葵碱高、中、低剂量组HepG2细胞均有绿色荧光,阴性对照组无荧光。流式细胞术分析表明0.4、2、10μmol/L龙葵碱作用HepG2细胞24h凋亡率分别为4.0%、8.5%、20.1%。同时,龙葵碱升高caspase-3活性,下调Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达。     

软脉煎对氧化低密度脂蛋白造成血管内皮细胞损伤的影响

目的：为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化(AS)的机制，主要是对氧化低密度脂蛋白(OX—LDL)造成血管内皮细胞(VEC)损伤的影响。方法：采用人脐静脉内皮细胞原代培养，加OX—LDL共同孵育造成血管内皮细胞损伤模型，用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型。用M1vr法测细胞生存率，并设舒降之(辛伐他汀)组进行对照。结果：OX—LDL组内皮细胞生存率明显降低(P＜0．01)：软脉煎组和舒降之组均能显著提高细胞生存率(软脉煎组P＜0．01，舒降之组P＜0．05)；软脉煎组细胞生存率高于舒降之组(P＜0．01)。结论：软脉煎能改善OX—LDL对内皮细胞的毒性作用，且优于舒降之组。     

新加生脉饮对阿霉素所致心肌细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的通过观察新加生脉饮对阿霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的逆转和防治作用,为阿霉素心肌损伤的临床治疗奠定实验基础。方法利用阿霉素的心脏毒性诱导心肌细胞凋亡大鼠模型。将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、阿霉素模型组、卡托普利(10 mg/kg)组、新加生脉饮(3.75 g/kg)组,ig给予相应药物,每日1次,共给药6周。实验过程中观察大鼠的精神、活动、进食、毛色等情况,治疗6周后测定心功能、大鼠左室肥厚指标,HE染色观察心肌病理变化,TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况,免疫组化法检测心肌Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠心功能显著降低。与模型组比较,各药物治疗后可不同程度改善大鼠心功能情况,其中新加生脉饮组疗效显著。与对照组比较,模型组大鼠心体比、左室肥厚指数、心肌细胞凋亡指数均明显升高。与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地改善大鼠心肌肥厚及心肌细胞凋亡情况。与对照组比较,模型组大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax、Caspase-3蛋白表达水平升高;与模型组比较,卡托普利及新加生脉饮可不同程度地增加大鼠心肌Bcl-2蛋白表达水平,减低Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结论新加生脉饮能改善心肌细胞凋亡大鼠心功能情况,通过降低心肌细胞中Caspase-3蛋白的表达或抑制其活性,增加Bcl-2蛋白的表达,降低Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax,从而抑制心肌细胞凋亡。     

益肾通络汤对兔动脉粥样硬化模型平滑肌细胞凋亡的干预作用

目的通过益肾通络汤对兔动脉粥样硬化模型的干预，探讨益肾通络汤对动脉粥样硬化的消退作用，是否可以通过平滑肌细胞（SMC）的凋亡来协助完成。方法26只新西兰雄兔随机分为3组：正常对照组6只、模型组10只、益肾通络组10只，通过兔耳缘静脉一次性注射牛血清白蛋白及向脑饲料喂养制作免动脉粥样硬化模型。HE及特殊染色后病理观察，缺口末端标记法（TUNEL）检测SMC凋亡情况。结果益肾通络组和模型组较正常组内中膜明显增厚（P〈0．05），益肾通络组较模型组内中膜厚度较薄（P〈0．05）；正常组无SMC凋亡，益肾通络组较模型组SMC凋亡表达增加明显（P〈0．05）。结论益肾通络汤可能具有通过增加平滑肌细胞的凋亡来协助消退或减缓动脉粥样硬化宽块形成的作用。