间皮素与肿瘤诊治的相关研究进展

间皮素是一种细胞表面糖蛋白, 正常组织中很少表达, 但卵巢癌、胰腺癌和恶性间皮瘤等肿瘤组织及血液中高表达.因此, 间皮素有助于间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌等肿瘤的早期诊断, 与肿瘤的分期和预后有关.使用抗毒素、抗间皮素嵌合抗体、抗体-药物结合物、嵌合抗原受体T细胞、间皮素肿瘤疫苗等治疗高表达间皮素的肿瘤的方法正在逐步走向成熟.旨在对间皮素在卵巢癌、胰腺癌、恶性间皮瘤诊断与治疗中的作用作一综述.     

间皮素对卵巢癌诊断价值的Meta分析

目的：通过Meta分析评估血清间皮素对卵巢癌的诊断价值。方法：全面检索PubMed、Embase、Web of Science、CBMdisc、万方和中国知网等数据库应用间皮素诊断卵巢癌的文献,采用RevMan 5.3、Stata 12.0和Meta-disc 1.4等统计软件进行分析。结果：有9篇文献共计1 068例患者纳入本次Meta分析,其中卵巢癌患者451例,非卵巢癌患者617例,合并灵敏度为0.80(95%CI：0.76～0.83),合并特异度为0.81(95%CI：0.78～0.84),合并阳性似然比为6.93(95%CI：3.32～14.46),合并阴性似然比为0.24(95%CI：0.16～0.35),合并诊断比值比为45.69(95%CI：17.49～119.35),SROC曲线下面积为0.90,Q=0.83。结论：血清间皮素对于卵巢癌诊断有较高的敏感度及特异度,与其他肿瘤标志物进行联合检测,可作为临床辅助诊断卵巢癌的有效方法。     

血清可溶性间皮素相关蛋白早期诊断大鼠恶性胸膜间皮瘤的实验研究

目的 通过定量检测大鼠恶性胸膜间皮瘤血清中SMRP的表达情况,探讨早期诊断恶性胸膜间皮瘤(MPM)的价值,为高危人群筛查、早期诊断提供理论依据及实验基础。方法 采用ELISA法定量测定大鼠MPM SMRP的表达情况,分析MPM不同分期、不同病理类型、不同分化程度的SMRP表达差异,应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)获取早期诊断MPM的诊断效能。结果 不同分期、不同分化程度的MPM SMRP表达比较差异有统计学意义(P<0.05),分期越高,SMRP表达越高;分化程度越低,SMRP表达越高。不同病理类型表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。对T₁、T₂、T₃和T₄分期诊断 AUC分别为0.83、0.86、0.92和0.85,敏感度、特异性分别为100.0%、88.2%,100.0%、85.7%,71.4%、100.0%和87.5%、100.0%,诊断阈值分别为1.90、4.53、8.73和11.97mmol/ml。对N₀、N₁、N₂分期诊断,AUC值为0.59、0.84、0.92,敏感度、特异性分别为100.0%、100.0%,47.1%、100.0%和64.0%、100.0%。对M₁分期诊断,AUC=0.88,敏感度、特异性分别为75.0%、100.0%。结论 血清SMRP表达水平对筛查、早期诊断MPM具有重要价值,可作为MPM高危人群筛查的一项重要生化指标。     

间皮素与CA125在卵巢癌中的共定位表达及意义

目的通过对上皮性卵巢癌中间皮素和CA125的表达、定位和细胞黏附的研究,探讨间皮素的功能。方法采用间接免疫荧光双标记染色法、Westernblot检测间皮素和CA125的表达及定位,通过人工基底膜成分的黏附实验和EDTA介导的细胞分离实验检测细胞黏附功能。结果间皮素和CA125主要分布在细胞膜,间皮素蛋自在3种细胞系表达由强列弱依次为OVCAR-3、SKOV-3、3AO,3AO和SKOV-3对塑料基质和人工基底膜Matrigel的黏附能力明显低于OVCAR-3（P〈0．01）。结论在3种卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中间皮素和CA125均有不同程度的表达,存在共定位关系,间皮素的表达与细胞黏附功能相关联。     

柚皮素对脂肪间充质干细胞增殖的影响

目的探讨柚皮素在体外对人脂肪间充质干细胞（adipose-derived stem cell, ADSC）增殖的影响。方法采用CCK-8法检测柚皮素对ADSC细胞活性的影响,流式细胞术检测细胞周期,Western印迹法检测P16ink4a的表达水平,β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测细胞衰老的情况,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧类（ROS）含量,mRNA测序（RNA-seq）分析相关调控信号通路。结果CCK-8结果表明柚皮素在浓度为25μmol/L时能够明显促进ADSC的增殖（P<0.01）,流式细胞术结果显示柚皮素能使ADSC快速进入S期,促进了细胞的增殖（P<0.05）,Western印迹法检测结果显示柚皮素能够下调P16ink4a的表达（P<0.05）,β-半乳糖苷酶染色检测结果显示柚皮素能够延缓细胞衰老（P<0.01）,活性氧检测结果显示柚皮素能够清除细胞内活性氧的含量（P<0.01）,RNA-seq结果表明柚皮素能够通过激活核苷酸结合寡聚结构域样受体（NOD-like receptors, NLRs）信号通路上调SOD2基因的表达促进hADSC的增殖。结论柚皮素能够促进ADSC的增殖,其相关机制可能与激活核苷酸结合寡聚结构域样受体信号通路上调SOD2基因的表达有关。     

多普勒超声联合血清可溶性间皮素相关肽及癌胚 抗原检测对早期卵巢癌的预测价值

目的 探讨多普勒超声联合血清可溶性间皮素相关肽（SMRP）及癌胚抗原（CEA）检测对早期卵 巢癌的预测价值。方法 选取2015 年1 月-2017 年1 月该院收治的120 例卵巢肿块患者依据病理诊断结果分为 卵巢癌组（55 例）和良性肿瘤组（65 例）,另选取同期来该院体检的50 例正常女性作为健康人群组。所有患者 均行彩色多普勒超声检查,同时采集外周血测定血清SMRP、CEA 水平。与病理诊断结果作比较,分析多普勒 超声、SMRP 和CEA 单独应用及联合诊断卵巢癌的诊断效能。结果 卵巢癌组、良性肿瘤组、健康人群组3 组 间血清SMRP、CEA 水平比较,差异有统计学意义（F =68.546 和31.367,均P =0.000）;卵巢癌组血清SMRP 和CEA 水平高于良性肿瘤组和健康人群组（P <0.05）。良性肿瘤组与健康对照组上述指标比较差异无统计 学意义（P >0.05）。卵巢癌组超声血流参数阻力指数（RI）和搏动指数（PI）低于良性肿瘤组（P <0.05）。 超声联合血清SMRP、CEA 水平联合检测的敏感性（92.7%）高于其他4 项检测的敏感性（83.6%、72.7%、 75.0% 及80.0%）（P <0.05）。联合检测在提高卵巢癌检测敏感性的同时,还保持较高的特异性（80.0%）,超 声联合血清SMRP、CEA 水平联合检测的ROC 曲线下面积（0.846）大于各指标单独检测（0.810、0.665 及 0.730）（P <0.05）。结论 超声联合血清SMRP、CEA 水平检测可提高卵巢癌诊断的敏感性,并能够保持较高 的特异性,对于卵巢癌的的早期筛查诊断具有一定价值。     

间皮素和CA125联合检测在上皮性卵巢癌诊断中的意义

[摘要] 目的 探讨间皮素（Mesothelin）和CA125对于上皮性卵巢癌的诊断价值。 方法 采用酶联免疫法检测上皮性卵巢癌、卵巢良性肿瘤及健康体检者血清及尿液中的Mesothelin和血清中的CA125,并对三组受试者间的差异进行比较。 结果 上皮性卵巢癌患者血清及尿液中的Mesothelin和血清中的CA125高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照组,差异有统计学意义（P 〈 0.05）;上皮性卵巢癌在不同疾病阶段患者血清及尿液中的Mesothelin和血清中的CA125含量不同,随着疾病进展,其含量增加,差异有统计学意义（P 〈 0.05）;两者联合检测对于卵巢癌诊断的特异性为96.7%,灵敏度为95.6%。 结论 联合检测Mesothelin和CA125对于上皮性卵巢癌患者具有很好的诊断价值,其特异性及灵敏度均较高,提高了诊断的准确性,具有很好的临床应用价值。     

榭皮素对皮层神经元细胞氧化应激的保护作用

目的 探讨榭皮素对皮层神经元细胞氧化应激的保护作用.方法 原代培养皮层神经元细胞,随机分成对照组、H2O2(100 μmol/L)组、榭皮素组(Qu组)、AMPK抑制剂Compound C组(CC组)、H2O2+Qu组、H2O2+Qu+CC组,采用CCK8法检测细胞存活率,活性氧检测试剂盒检测细胞内活性氧,ELISA试剂盒检测βA表达水平,Western blot检测AMPK、p-AMPK及BACE1蛋白表达水平.结果 CCK8结果显示,榭皮素可明显降低H2O2对皮层神经元细胞存活率的抑制作用,并可显著降低H2O2诱导细胞内ROS及βA的表达;进一步研究发现,榭皮素可通过激活AMPK,上调p-AMPK的表达水平来达到抑制BACE1酶的表达.结论 H2O2刺激神经元细胞可上调氧化应激水平,榭皮素可通过促进AMPK的磷酸化,降低βA在细胞中的沉积,进一步下调ROS在细胞中的表达,从而减缓了H2O2对神经元细胞造成的损伤.     

抗间皮素嵌合抗原受体修饰T细胞治疗卵巢癌的实验研究

目的 观察抗间皮素(mesothelin,MSLN) 嵌合抗原受体修饰的T细胞对卵巢癌细胞的杀伤作用,探索新的卵巢癌治疗手段与策略.方法 设计人源化抗人间皮素的嵌合抗原受体融合基因;构建慢病毒表达载体;感染人外周血单核细胞,制备稳定表达抗MSLN嵌合抗原受体的T细胞(chimeric antigen receptor-modified T cells,CART);Western blot、qRT-PCR、流式细胞术检测CAR的表达;免疫组织化学法和Western blot检测卵巢癌样本及细胞系中MSLN表达;体内和体外实验验证CART细胞对卵巢癌细胞的杀伤能力.结果 与正常组织相比,卵巢癌组织MSLN表达显著升高(P＜ 0.01);成功制备了抗MSLN-CART细胞;体外实验证明,抗MSLN-CART细胞能够特异性识别和杀伤MSLN阳性的卵巢癌细胞,效靶比为2-4: 1时,MSLN-CART杀伤率仍达到80％;NOD/SCID小鼠卵巢癌原位移植瘤模型证明,经尾静脉回输抗MSLN-CART细胞(1 × 107/只,共2次) ,原位移植瘤消失.结论 抗MSLN-CART细胞能有效、特异且安全地杀伤卵巢癌细胞,抑制肿瘤的生长.     

柚皮素增强乙肝疫苗免疫效果的探讨

目的探讨柚皮素作为佐剂增强HBV疫苗的体液免疫效果。方法用柚皮素作为免疫佐剂免疫Balb/c小鼠,以佐剂铝盐作为阳性对照,在免疫3次后取小鼠血清做ELISA检测HBsAb滴度,比较各组的免疫效果。结果与无佐剂组小鼠对比,柚皮素和铝盐作为佐剂均可有效地引起小鼠对HBsAg的体液免疫应答。结论柚皮素可以增强乙肝疫苗的免疫效果,和铝盐相比没有统计学意义。     

柚皮素衍生物的合成及抗肿瘤活性

目的:合成甲基化柚皮素和乙酰化柚皮素,并测定其抗肿瘤活性。方法:以柚皮素为原料,碘甲烷为甲基化试剂,乙酸酐为酰化试剂,制备目标物;IR、ESI-MS1、H-NMR确证目标物结构;噻唑蓝(MTT)法测定抗肿瘤活性。结果:目标物确证为7,4′-二甲基柚皮素和5,7,4′-三乙酰柚皮素,其对人源肝肿瘤细胞SMMC-CTT 21的抑制率分别为7.60%和4.10%。结论:7,4′-二甲基柚皮素和5,7,4′-三乙酰柚皮素无抑制肿瘤细胞生长的作用。     

增强对大鼠疗效的柚皮素磷脂化复合物

柚皮素是天然的黄酮类化合物，具有多种生物活性。但由于该物质半衰期短和从体内快速排出，所以要频繁服药以维持有效的血药浓度。作者研究了柚皮素磷脂化复合物对CCl4处理的大鼠的抗氧化应激作用，并与纯的柚皮素作了比较。     

根皮素对脂多糖诱导的内毒素血症的保护作用

目的 探讨根皮素对系统性炎症反应的抑制作用.方法 以脂多糖(LPS)诱导的内毒素血症为动物模型,连续3d给予不同剂量根皮素(20、50、100 mg/kg)灌胃后,一次性腹腔注射LPS 24 h后收集动物血浆,检测血浆一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及丙二醛(MDA)的浓度.结果 50、100 rag/(kg·d)根皮素可显著降低LPS诱导的小鼠血浆NO及MDA水平(P＜0.05),20～ 100 mg/(kg·d)根皮素可显著抑制LPS诱导的小鼠血浆TNF-α的产生(P＜0.05).结论 根皮素具有对抗系统性炎症反应的作用.     

卵巢肿瘤患者尿液中间皮素联合人附睾蛋白4检测及临床意义

目的:探讨卵巢肿瘤患者尿液中间皮素(MSLN)及人附睾蛋白4(HE_4)含量及检测的临床意义。方法:73例卵巢肿瘤患者,其中上皮性卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期12例,Ⅲ～Ⅳ期29例,卵巢良性肿瘤32例,同时以30例健康体检妇女作为正常对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测三组尿液中MSLN、HE_4含量,计算单项及联合检测在卵巢肿瘤诊断中的灵敏度、特异性及其相关性。结果:上皮性卵巢癌组尿液中MSLN、HE_4浓度均高于良性肿瘤组和对照组(P<0.05);卵巢癌Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期患者尿液中MSLN及HE_4阳性率差异有统计学意义(P<0.05);MSLN+HE_4在卵巢癌尿液中联合检测的灵敏度、特异性均显著高于单一指标检测。结论:MSLN+HE_4在尿液中的联合检测无创、便捷、有效、弥补单一指标检测的缺陷,这将为卵巢癌高危人群的早期筛查提供新的途径。     

柚皮素对人髓系白血病K562细胞增殖的作用

目的:探讨柚皮素(naringenin)对人慢性髓系白血病K562细胞株生长的影响及其作用机制。方法:MTT法检测柚皮素在不同浓度、不同时间对K562细胞的影响;倒置显微镜下,Wight-Giemsa染色(W-G染色),免疫荧光染色和透射电镜下观察细胞形态变化、凋亡发生情况以及超微结构的变化;并用流式细胞仪分析细胞周期分布,用免疫组织化学的方法检测细胞增殖核抗原(PCNA)的表达。结果:柚皮素对K562细胞增殖有明显抑制作用,作用24,48和72 h后的半数抑制浓度(IC50)分别为455,225和175μmol/L;柚皮素处理组细胞在普通光镜和电镜下均见观察到显著的增殖抑制和典型的细胞凋亡形态学改变;流式细胞仪分析证实柚皮素能使K562细胞聚积在G0/G1期,S期细胞减少;在处理组PCNA的表达显著低于对照组。结论:柚皮素对K562细胞具有明显的增殖抑制作用,这一作用可能是通过细胞周期阻滞和诱导凋亡两种机制实现的。     

间皮素mRNA与子宫内膜癌的相关性研究

目的 研究间皮素mRNA的表达与子宫内膜癌的相关性.方法 采用半定量RT-PCR技术检测41例子宫内膜癌组织和14例正常子宫内膜组织中间皮素mRNA的表达情况.结果 间皮素mRNA在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达率分别为82.9%(34/41)、78.6%(11/14),相对含量分别为0.75±0.22、0.54±0.09,子宫内膜癌组织间皮素mRNA相对含量高于正常子宫内膜组织(t=2.949,P＜0.05).手术病理分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、深肌层浸润及低分化组的子宫内膜癌间皮素mRNA相对含量分别高于手术病理分期Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、浅肌层浸润及高中分化组(t=2.204～3.971,P＜0.05).结论 间皮素mRNA的过表达与子宫内膜癌的浸润、转移有相关性,检测其表达有助于子宫内膜癌恶性程度的判断和预后的估计.     

柚皮素对人支气管上皮细胞趋化因子生成的影响及机制研究

目的观察柚皮素对人支气管上皮细胞趋化因子生成的影响,并研究其可能的机制。方法培养人支气管上皮细胞,分为对照组、瘤坏死因子α(TNF-α)组、柚皮素低剂量组、柚皮素中剂量组和柚皮素高剂量组。柚皮素干预组分别与2.5、5和10μmol/L的柚皮素共孵育2 h后,与TNF-α组一起加入TNF-α进行刺激。24 h后用ELISA方法检测各组细胞上清液中Eotaxin及RANTES的表达,Western blot法检测细胞中IκBα含量;另外在反应30 min时,用EMSA法检测核转录因子κB(NF-κB)的DNA结合活性。结果 TNF-α组的趋化因子水平较对照组明显增高。随着柚皮素干预剂量的增大,趋化因子水平明显降低。柚皮素能抑制IκBα降解,并能降低NF-κB的DNA结合活性。结论柚皮素可能通过抑制NF-κB的活性来影响人支气管上皮炎性趋化因子的生成。     

柚皮素脂质体冻干粉的制备及其药效学评价

目的制备柚皮素脂质体冻干粉,并观察其对急性肺损伤(ALI)大鼠模型的治疗效果。方法乙醇注入法制备柚皮素脂质体并进行质量评价,加入冻干保护剂甘露醇(5%,W/V),冻干并进行相关粉体学评价。大鼠气管喷注脂多糖(LPS)(5 mg/kg)制备急性肺损伤模型,将48只SD雌性大鼠随机分成6组(n=8),分别为空白对照组(A组)、模型组(B组)、柚皮素原料药+LPS组(C组)、脂质体冻干粉+LPS组(D组)、地塞米松+LPS组(E组)和空白脂质体冻干粉+LPS组(F组),光学显微镜观察给药后各组大鼠肺组织形态学改变,并测定肺组织湿/干重比。结果最佳处方制得的柚皮素脂质体包封率为(82.44±0.98)%,平均粒径为(133±11)nm,Zeta电位为(-35.9±5)m V。冻干粉的休止角为36°,堆密度为0.3 g/ml。光镜观察结果显示,与A组空白对照比较,B~F组肺组织均出现不同程度炎性细胞的浸润、毛细血管充血、出血和肺泡壁增厚,其中以B组和F组改变最为显著,C组次之,D组和E组最轻。LPS诱导后B~F组肺组织湿/干重比均有不同程度增加,但D组和E组湿/干重比的增加量明显低于B组(P=0.0012,P=0.0018)。结论乙醇注入法制备柚皮素脂质体工艺简单可行,其冻干粉对大鼠急性肺损伤疗效显著。     

血清微小RNA-4731-5p和间皮素水平与需治疗原发免疫性血小板减少症发生相关性研究

目的:探究血清微小RNA-4731-5p(miR-4731-5p)和间皮素(MSLN)水平与需治疗原发免疫性血小板减少症(ITP)发生的相关性。方法:选择ITP患者118例，根据血小板(PLT)计数及是否伴有出血分为需治疗组(62例)和需观察组(56例)。另选取体检健康者60例为对照组。采用全自动血液分析仪检测白细胞计数、血红蛋白、PLT及平均血小板体积(MPV)水平。采用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法分别对血清miR-4731-5p和MSLN水平进行测定。比较三组血常规及血清miR-4731-5p、MSLN水平。分析ITP患者血清miR-4731-5p、MSLN、PLT、MPV间的相关性，影响需治疗ITP发生的因素，以及血清miR-4731-5p、MSLN对需治疗ITP发生的预测价值。结果:对照组、需观察组、需治疗组PLT、血清miR-4731-5p水平依次降低，MPV、血清MSLN水平依次升高(均P<0.05)。ITP患者血清miR-4731-5p与MSLN呈负相关(r=-0.683,P<0.05);miR-4731-5p与PLT呈正相关，与MPV呈负相关(r=0....