香芹酚通过SIRT1/FOXO1通路减轻糖尿病肾病大鼠氧化应激损伤

目的：研究香芹酚通过SIRT1/FOXO1通路减轻糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠氧化损伤的机制。方法：采用高脂饮食和腹腔注射链脲佐菌素建立DN大鼠模型,将DN大鼠分为对照组、模型组、L-XQF组（5 mg/kg）、M-XQF组（10 mg/kg）和L-XQF组（20 mg/kg）。检测大鼠空腹血糖（fasting blood glucose,FBG）、尿素氮（urea nitrogen,BUN）、血肌酐（serum creatinine,SCr）、尿微量蛋白（urine microprotein,U-mAlb）的含量;之后处死大鼠,采集肾脏组织,HE染色和Masson染色分别观察大鼠肾脏组织病理变化和纤维化情况;ELISA法检测肾脏组织丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）水平;Western blot检测肾脏组织中SIRT1/FOXO1通路相关蛋白水平。结果：香芹酚能够降低DN大鼠FBG、BU...     

自噬与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病肾病发病机制复杂,目前尚未完全阐明。在研究自噬在肾脏的病理生理过程中所起的作用时,发现自噬与糖尿病肾病的发生共同受到一些信号通路的调控,这些信号通路主要涉及浦乳动物雷帕霉素受体(mTOR)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)和氧化辅酶依赖的组蛋白去乙酰化酶(Sirt1)等营养物质敏感信号通路,并证实了自噬对老年和肾损伤的动物模型的肾脏有保护作用。本文作者对自噬在糖尿病肾病发病机制中的作用做一综述。     

黄芪多糖对糖尿病动脉粥样硬化大鼠糖脂代谢的影响及血管内皮保护机制

[目的]探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对糖尿病动脉粥样硬化大鼠糖脂代谢的影响及一氧化氮(nitric oxide,NO)相关的血管内皮保护机制.[方法]选择无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD健康大鼠,采用高脂饮食+链脲佐菌素(stre...     

黄芪多糖对糖尿病肾病防治机制的研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病的常见并发症之一,其病理机制复杂,是导致糖尿病患者死亡的主要因素,迄今尚无疗效确切的西药能延缓DN的进程。作为黄芪主要活性成分之一的黄芪多糖具有广泛的药理作用,众多研究显示黄芪多糖对防治DN有显著作用。现简要介绍其在防治DN机制方面的研究进展,旨在为黄芪多糖的临床研究提供应用前景。     

黄芪多糖对腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚及自噬的影响

目的:研究黄芪多糖(APS)对心肌肥厚大鼠心肌组织中自噬表达的影响.方法:健康SD大鼠随机分为模型(AAC)组、假手术(Sham)组和APS组,AAC组及APS组均通过腹主动脉缩窄(AAC)术构建大鼠心肌肥厚模型,术后1周开始分别予灭菌蒸馏水、APS每天灌胃给药,连用8周.8周后测定各组大鼠心肌重量指数(HMI)、左室...     

黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

近年来 ,临床和动物实验研究发现黄芪多糖 (ＡＰＳ)对糖尿病及其肾脏病变有降低血糖、减少蛋白尿等作用[1 ,2 ] 。本研究旨在观察黄芪多糖对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响。材料与方法一、材料1.实验动物 :2月龄健康雄性ＳＤ大鼠 (清洁级 ) ,体重180～ 2 0 0 ｇ ,由上海市计划生育研究所ＢＫ公司提供 ,实验期间饲养于计划生育研究所动物房。2 .实验试剂 :链脲佐菌素 (ＳＴＺ)购自美国Ｓｉｇｍａ公司 ,ＡＰＳ由中国科学院上海生理研究所提供。二、ＳＴＺ 糖尿病大鼠模型的建立ＳＤ大鼠禁食约 12ｈ后 ,左下腹腔内注射ＳＴＺ溶液 (ｐＨ4.2 ,0 .…     

自噬在糖尿病肾病发病机制中的研究进展

糖尿病肾病是导致终末期肾脏疾病的主要病因之一。目前对该疾病最有效的治疗方案是使用肾素-血管紧张素系统抑制剂严格调控血糖和血压的保守治疗。然而,这只能控制糖尿病肾病的进一步恶化,仍会有部分患者继续发展至终末期肾病。因此,对于糖尿病肾病的治疗迫切需要找到新的治疗靶点。研究表明自噬是维持细胞内稳态的重要途径。其中失调的自噬可导致糖尿病患者肾脏的肾小球和肾小管间质病变,这可能是糖尿病肾病的发病机制之一。本文以自噬和糖尿病肾病相关的研究作一综述,以期总结现阶段自噬在糖尿病肾病发病机制中的研究进展,并展望自噬对糖尿病肾病治疗的意义。     

自噬与糖尿病肾病相关性研究进展

自噬是细胞为应对内外环境压力变化而出现的一种正常反应,是细胞内物质成分被溶酶体降解的过程。近年来研究发现,自噬在糖尿病肾病（DN）的发生发展中起着重要作用,是DN治疗的潜在靶点,与肾足细胞的生长发育和生理病理活动密切相关,是一种细胞的自我保护机制,调控自噬相关信号通路可影响DN发生发展。因此,本文就DN的发病机制、自噬在肾固有细胞中的作用以及调控自噬相关信号通路对糖尿病肾病发生发展的影响等方面进行综述。     

达格列净对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制研究

目的 探讨达格列净对糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）大鼠的肾脏保护作用及对AMP活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号通路表达的影响。方法 SPF级Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常组、模型组、低剂量组和高剂量组,每组各10只。成功制备DN模型后,正常组大鼠给予普通饲料+生理盐水灌胃;模型组大鼠给予高糖高脂饲料+生理盐水灌胃;低剂量组大鼠给予高糖高脂饲料+达格列净1mg/（kg·d）灌胃;高剂量组大鼠给予高糖高脂饲料+达格列净10mg/（kg·d）灌胃。各组大鼠连续干预12周。比较各组大鼠的肾功能指标、肾脏病理组织变化、p-AMPK和p-mTOR蛋白表达、Ⅰ型胶原（collagen type Ⅰ,COL Ⅰ）、Ⅳ型胶原（collagen type Ⅳ,COL Ⅳ）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）水平。结果 模型组、低剂量组和高剂量组大鼠的血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血肌酐（serum creatinine,SCr）、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著高于正常组,p-AMPK蛋白表达显著低于正常组（P<0.05）;低剂量组和高剂量组大鼠的BUN、SCr、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著低于模型组,p-AMPK蛋白表达显著高于模型组（P<0.05）;高剂量组大鼠的BUN、SCr、24h尿蛋白定量、p-mTOR蛋白表达、COL Ⅰ、COL Ⅳ和FN水平均显著低于低剂量组,p-AMPK蛋白表达显著高于低剂量组（P<0.05）。结论 达格列净对DN大鼠具有良好的肾脏保护作用,其机制可能与调节AMPK/mTOR信号通路表达有关。     

黄芪多糖治疗糖尿病肾病的临床研究

目的观察黄芪多糖冲剂治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法85例糖尿病肾病患者随机分为观察组(43例,服用黄芪多糖冲剂)和对照组(42例,服用苯那普利),观察2组治疗前后的临床症状变化,并检测血糖水平、脂质代谢、尿蛋白等。结果观察组症状消失时间短于对照组,差异有显著性(P<0．05);治疗后相关指标改善程度优于对照组(P<0．05)。结论黄芪多糖冲剂可改善糖尿病肾病患者的临床症状,降低24 h尿蛋白、尿白蛋白排泄率、餐后血糖及改善脂质代谢。     

运动诱导的Irisin表达改善2型糖尿病大鼠的肾脏损伤

目的 探讨Irisin在运动改善2型糖尿病大鼠肾功能中的作用及其可能机制。方法 采用随机数表法从40只4～6周龄的雄性SD大鼠中,选取8只作为正常对照组（NC组）,剩余大鼠用于构建2型糖尿病疾病模型。将造模成功后的大鼠再次按照随机数表法分为糖尿病模型组（DM组）、糖尿病运动组（DE组）、糖尿病Irisin组（DI组）,8只/组。DE组进行8周的跑台运动干预,DI组进行8周的外源性Irisin注射干预。干预结束后取材,试剂盒检测相关生化指标;HE、Masson、PAS染色观察肾脏组织病理学形态;采用Western blotting检测大鼠肾脏相关蛋白表达水平。结果 与NC组相比,DM组大鼠空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮含量升高（P<0.05）,血清Irisin含量降低（P<0.05）;与DM组相比,DE组与DI组总胆固醇、甘油三酯、血肌酐、尿素氮含量均下降（P<0.05）,血清Irisin含量增加（P<0.05）。与NC组相比,DM组大鼠肾脏结构紊乱,胶原纤维沉积严重;而DE组与DI组肾脏结构较DM组大鼠均有不同程度的改善,胶原纤维沉积减少。与NC...     

达格列净通过mTOR自噬信号通路改善糖尿病肾病大鼠足细胞损伤

目的 探讨达格列净对糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)大鼠足细胞损伤的影响及相关分子机制。方法 46只Wistar雄性大鼠以随机数字表法分为对照组(NC组,n=10)和造模组(n=36)。成功构建DN模型的30只造模组大鼠随机分为模型组(DN组)、达格列净组(Dapa组)、达格列净+雷帕霉素组(Dapa+Rapa组),每组10只。各组大鼠均给药干预12周,1次/d。采用血糖仪检测大鼠空腹血糖(FBG)。全自动生化分析仪测定大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白(UP)。HE染色观察大鼠肾组织病理形态学。透射电子显微镜观察大鼠肾脏足细胞变化。Western blot法检测足细胞标志蛋白(nephrin、podocin)、自噬蛋白(Beclin-1、LC3Ⅱ、P62)及mTOR信号通路相关蛋白(mTOR、p-mTOR)表达。结果 与NC组比较,DN组大鼠肾小球体积增大,肾小管上皮细胞空泡变性,存在大量炎性细胞浸润;足细胞足突融合,排列紊乱,可见明显线粒体嵴断裂或空泡化。与DN组比较,Dapa组和Dapa+Rapa组大鼠肾脏病理损伤明显减轻;足细胞...     

绿原酸对牙龈卟啉单胞菌诱导牙龈上皮细胞自噬的调控作用及机制

目的 探讨绿原酸(CGA)对牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导人牙龈上皮细胞(HGE)自噬的影响及作用机制。方法 将HGE细胞分为对照组(Control组,做任何处理)、P.g组(使用P.g诱导HGE细胞建立细胞模型)、CGA组(同P.g组处理细胞,再分别用10.0、20.0、40.0 mg/L CGA)、CGA+AMPK激活剂(AICAR)组(同P.g组处理细胞,再用40.0 mg/L CGA+1.0 nmol/L AICAR)。MTT法检测细胞增殖。分别检测HGE细胞凋亡及LC3Ⅱ、LC3I、Beclin-1、P62、p-ULK1、ULK1、p-AMPK、AMPK蛋白表达。结果 10～60 mg/L的CGA均可显著抑制P.g诱导的HGE细胞增殖,选择浓度为10.0、20.0、40.0 mg/L的CGA进行后续实验。与Control组比较,P.g组LC3Ⅱ/I、Beclin-1、p-ULK1、p-AMPK蛋白表达水平显著升高,P62表达水平显著降低(P<0.05);与P.g组比较,浓度为10.0、20.0、40.0 mg/L的CGA处理的HGE细胞凋亡率显著升高(P<0.05)...     

过表达FOXO1脂肪干细胞调控自噬对高糖诱导足细胞损伤修复的机制研究

目的 本研究旨在探究过表达FOXO1的脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)在高糖诱导足细胞损伤修复中的作用机制。方法 利用胶原酶消化法分离ADSCs。通过慢病毒感染ADSCs来构建过表达FOXO1的ADSCs。实验分为对照组、高糖组、高糖+ADSCs组、高糖+ADSCs(FOXO1+)组和高糖+ADSCs(FOXO1+)+自噬抑制剂3-MA组。利用茜素红染色检测ADSCs成骨分化能力。应用油红O染色检测ADSCs成脂分化能力。通过CCK-8法和流式细胞术检测MPC5细胞活力和细胞凋亡。通过免疫荧光检测MPC5细胞自噬相关蛋白LC3。采用Western blot法检测FOXO1、Bax、Bcl-2、p62和LC3-Ⅱ的蛋白表达。结果 流式细胞术检测显示CD29和CD90在ADSCs中高表达,而CD34和CD45表达极低;此外,茜素红染色和油红O染色结果都证实了成功分离了ADSCs。Western blot法检测结果显示,FOXO1在ADSCs(FOXO1+)细胞中高表达,表明慢病毒转染成功;同时,ADSCs(FOXO1+)细胞与MPC5细胞间接共培养明显提高MPC5细胞的FOXO1表达水平。CCK-8和流式细胞术检测发现,FOXO1过表达能够显著增强高糖诱导的MPC5细胞活力和减弱细胞凋亡。另外,免疫荧光检测表明FOXO1过表达能够促进高糖抑制的MPC5细胞自噬。同时,加入自噬抑制剂3-MA可减弱ADSCs(FOXO1+)细胞对高糖诱导足细胞损伤的修复作用。结论 过表达FOXO1的ADSCs具有修复糖尿病肾病足细胞损伤的作用,其作用机制是通过促进细胞自噬有效抑制高糖诱导的MPC5细胞凋亡。     

薯蓣皂苷通过调控AMPK/mTOR自噬信号通路影响骨肉瘤细胞增殖及侵袭的机制研究

【】 目的 探讨薯蓣皂苷(Dioscin)通过调控AMPK/mTOR自噬信号通路对MG63细胞增殖及侵袭的影响。方法 体外培养骨肉瘤MG-63细胞,分为空白对照组、薯蓣皂苷不同剂量组(20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、100μmol/L),CCK-8法观察细胞增殖能力,划痕实验观察细胞迁移能力,通过Transwell小室观察细胞侵袭能力,丹酰尸胺法(MDC)观察细胞自噬情况,Western blot检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶/腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK/AMPK)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR/mTOR)、转录因子EB(TFEB)、被微管相关蛋白轻链3II(LC3-Ⅱ)、肌球蛋白样BCL2结合蛋白(beclin-1)蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,Dioscin各剂量组MG63细胞增殖率、细胞迁移及侵袭能力依次降低,呈浓度依赖性(P＜0.05) ; MDC染色显示,空白对照组中仅有少量细胞自噬泡,作用48h后Dioscin各组自噬泡依次增多;与空白对照组相比,Dioscin各组MG63细胞中p-AMPK/AMPK、TFEB、LC3-Ⅱ、beclin-1蛋白水平依次升高,p-mTOR/mTOR蛋白水平依次降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05);与Dioscin组比较,Dioscin+AMPK抑制剂组p-AMPK/AMPK、TFEB、LC3-Ⅱ、beclin-1蛋白表达水平明显降低,p-mTOR /mTOR表达升高,差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论 Dioscin可能通过调控AMPK/mTOR-TFEB通路抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移及侵袭。     

糖尿病肾病与自噬相关信号通路关系的研究进展

糖尿病肾病(DN)是与糖代谢异常有关的慢性肾脏微血管并发症,是引起慢性肾病和终末期肾衰竭(ESRD)的一个主要因素,同时也是Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病病人的主要死因之一。目前关于DN的具体发病机制尚未清楚。自噬是普遍存在于真核生物体内的一种生命现象,主要通过降解和循环利用细胞内的蛋白质以及去除受损的细胞器来维持细胞内环境稳态,近来越来越多的研究表明自噬在DN的发生发展过程中起到重要作用,本文将从自噬相关信号通路与DN发生发展的角度进行探讨。     

自噬与糖尿病肾病关系的研究进展

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)作为糖尿病最常见并发症之一,发病机制复杂,严重危及糖尿病患者的生命健康。研究发现自噬与DN的发生存在一定的关联性;然而,相关基础研究仅处于认识阶段,仍需进一步深入探讨。因此,对DN发病机制及有效治疗方法的研究已经成为代谢性疾病领域的重要研究课题。近年来,随着糖尿病发病率在全     

糖尿病肾病与自噬

糖尿病肾病是糖尿病严重并发症之一,患病率逐年增加,在全世界范围内成为一个严重的健康问题,因此目前迫切需要寻找基于糖尿病肾病发病机制的新的预防和治疗靶点。高血糖能引起细胞内外的代谢改变,如糖基化终末产物,蛋白激酶C活性的增加和多元醇代谢异常,已确认为经典的糖尿病肾病发病机制。此外近     

丹参提取物对脑外伤大鼠神经元SIRT1-FoxO-自噬通路的影响

目的：研究丹参提取物对脑外伤大鼠神经元SIRT1-FoxO-自噬通路的影响。方法：采用Feeney 法构建大鼠脑外伤模型,将SD 大鼠78只随机分成6组,即假手术组、模型组、丹参提取物处理组(A组0.75 ml /mg、B组1.5 ml /mg、C组3.0 ml /mg)和抑制剂组。假手术组和模型组腹腔注射生理盐水5 ml,丹参提取物处理组分别腹腔注射各5 ml丹参提取物溶液,抑制剂组先按照B组剂量给药同时按照5 mg /kg注射SIRT1抑制剂(EX-527)。通过尼氏染色观察大鼠右侧脑组织神经元损伤情况;免疫组织化学染色、RT-PCR、Weston-blot分别测定SIRT1和FoxO1的细胞阳性率、mRNA水平和蛋白表达水平。结果：与假手术组相比,模型组SIRT1和FoxO1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与模型组相比,抑制剂组SIRT1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05),A、B两组SIRT1蛋白水平及C组SIRT1、FoxO1的阳性细胞比例、mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与抑制剂组相比,B、C两组SIRT1阳性细胞比例、A、B和C三组的FoxO1阳性细胞比例、SIRT1、FoxO1的 mRNA和蛋白水平都显著升高(P<0.05);与A组相比,B组FoxO1 mRNA和SIRT1蛋白表达量及C组SIRT1阳性细胞比例、SIRT1和FoxO1的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与B组相比,C组SIRT1和FoxO1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论：丹参注射液处理能够明显促进脑外伤大鼠神经元SIRT1表达,增强SIRT1的去乙酰化活性,正向调节SIRT1-FoxO1-自噬通路发挥神经保护作用。