miR-146a-5p在恶性肿瘤中的研究进展

miR-146a-5p是miR-146a家族中主要成员之一,根据其作用靶基因的性质常被标记为肿瘤促进因子或肿瘤抑制因子,并在恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。近年来研究发现,miR-146a-5p很有可能成为新的识别恶性肿瘤的生物学分子标志物或成为一种药物靶点。本文对miR-146a-5p在恶性肿瘤中的研究进展加以综述,为进一步研究miR-146a-5p与恶性肿瘤的关系提供思路。     

miR-146a-5p基因多态性与多囊卵巢综合征发病风险的相关性

目的研究分析miR-146a-5p基因多态性与多囊卵巢综合征(PCOS)发病风险的相关性。方法回顾性选取PCOS患者122例为观察组,选取同期本院体检正常者110例为对照组。收集两组年龄、身高、体质量及BMI等指标。采用血液基因组DNA提取试剂盒提取DNA,采用四引物扩增受阻突变体系聚合酶链反应(T-ARMS-PCR)法对miR-146a-5p rs2910164位点进行基因分型。Logistic回归模型用于评价miR-146a-5p的rs2910164位点与PCOS发病风险的关联强度及PCOS的危险因素。结果观察组体质量、BMI显著高于对照组(P＜0.05);观察组与对照组miR-146a-5p的基因型分布差异有显著性(P＜0.05);miR-146a-5p的基因型在两组间的分布符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)。观察组和对照组的CG基因型分布差异存在显著性(OR=2.16,95%CI=1.19~3.70,P＝0.004)。观察组的C等位基因频率显著高于对照组(OR=1.78,95%CI=1.15~2.36,P＝0.001)。在C等位基因的显性作用(CC+CG与GG之间的比较)中,CC+CG基因型显著增加了PCOS的风险(OR=1.91,95%CI=1.42~2.75,P＝0.001)。对年龄和BMI进行调整后,共显性、显性和隐性模型的基因型在OR中均未显示任何显著变化。以PCOS为因变量,以体质量、BMI和miR-146a-5p基因型为自变量,进行Logistic回归分析,结果显示miR-146a-5p rs2910164、体质量、BMI是PCOS的独立危险因素。结论miR-146a-5p的rs2910164位点C等位基因与PCOS发病风险增加有关,可以作为预测PCOS发病风险的潜在预警生物标志物。     

miR-146a-5p表达与新生儿坏死性小肠结肠炎肠道损伤严重程度的相关研究

目的 ·检测新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠道miR-146a-5p表达水平,并分析其与NEC患儿肠道损伤严重程度的相关性.方法 ·收集2014年1月—2018年12月于上海交通大学附属儿童医院普外科就诊的NEC和肠闭锁(intestinal atresia,IA)...     

miR-146a-5p靶向IRAK-1调控DVT患者内皮祖细胞的增殖及炎症

目的 研究微RNA(miR)-146a-5p靶向白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)调控深静脉血栓(DVT)患者内皮祖细胞(EPCs)的增殖及炎症.方法 选取2018年7月至2019年6月该院诊断为DVT的10例患者及10例体检的健康志愿者为研究对象,分离外周血EPCs,检测miR-146a-5p、IRAK-1...     

miR-23a-3p在脂多糖诱导的人肾小管上皮细胞中的表达及作用

目的探讨miR-23a-3p在脂多糖诱导的人肾小管上皮细胞中的表达及其作用。方法使用LPS诱导人肾小管上皮细胞HK-2细胞建立脓毒症性急性肾损伤细胞疾病模型,用CCK-8法检测细胞活力,实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测IL-6 mRNA和miR-23a-3p的相对表达量。将实验细胞分为3组： 正常对照组、LPS＋空白对照(NC)组和LPS＋miR-23a-3p模拟物（mimic）组,采用Western印迹法检测炎症和凋亡相关蛋白p-NF-κB、IL-6、Cleaved Caspase-3和Usp5的表达水平。结果LPS可以抑制HK-2的细胞活力并增加炎症因子IL-6 mRNA的表达水平,同时,miR-23a-3p在LPS诱导的HK-2细胞中表达下降。与正常对照组相比,LPS增加了p-NF-κB、IL-6、Cleaved Caspase-3和Usp5蛋白的表达水平,而转染miR-23a-3p模拟物可以逆转以上这些变化。结论miR-23a-3p模拟物可以显著减轻LPS诱导的HK-2细胞的炎症和凋亡水平,其作用机制可能与靶向抑制Usp5有关。     

血浆外泌体miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病中的表达及诊断价值

目的 研究miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病血浆外泌体中的表达差异性及其诊断价值。方法 通过生物信息学网站筛选结核病外泌体中具有差异性表达的miRNAs(miR-26a-5p和miR-151a-3p)。再以70例结核病患者(结核病组),58例体检健康者(健康对照组)样本进行临床验证：采用差速离心法提取血浆外泌体,透射电子显微镜,粒径分析,Western blot对其鉴定,采用RT-qPCR检测血浆外泌体中miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病组和对照组中的表达水平,并通过ROC曲线评价二者在结核病中诊断价值。结果 透射电镜、粒径分析、Western blot鉴定到典型的外泌体特性,即成功提取到血浆外泌体。在临床验证中,以内参和外参同时校准,结核组患者血浆外泌体中miR-26a-5p表达水平低于对照组(P<0.000 1),结核组患者血浆外泌体中miR-151a-3p表达水平高于对照组(P<0.000 1),与生物信息学结果一致。作为诊断标记,以内参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的曲线下面积(AUC)分...     

miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的探讨miR-125a-5p对胰腺癌细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法荧光定量PCR检测胰腺癌组织中miR-125a-5p的表达水平,细胞计数试剂盒-8检测下调miR-125a-5p水平对胰腺癌细胞生长的影响,流式细胞术检测下调miR-125a-5p表达水平对胰腺癌细胞周期和凋亡的影响,软琼脂集落形成实验评价miR-125a-5p在胰腺癌细胞恶性转化过程中的作用。结果 miR-125a-5p在胰腺癌组织的表达高于癌旁正常组织(P<0.05)。下调miR-125a-5p表达水平后,胰腺癌细胞系Panc-1和MIA Pa Ca-2的生长受到抑制(P<0.05),早期凋亡率分别增加13.6%和11.0%(P<0.05),细胞集落数目分别下降27.3%和27.8%(P<0.05),Panc-1细胞S期细胞百分比降低11.8%(P<0.05)。结论 miR-125a-5p在胰腺癌组织中高表达,下调miR-125a-5p表达水平使胰腺癌细胞生长受到抑制,集落形成能力下降,细胞周期受到阻滞,凋亡比例增加,提示miR-125a-5p在胰腺癌中发挥癌基因的作用。     

miR-10a-5p靶向ITSN1对宫颈癌细胞增殖和顺铂化疗敏感性的影响

目的 探讨miR-10a-5p对宫颈癌细胞增殖及对化疗药物顺铂敏感性的影响及机制.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测23对宫颈癌及配对癌旁组织miR-10a-5p的相对表达水平.利用空载体病毒(阴性对照组)或miR-10a-5p过表达慢病毒(miR-10a-5p过表达组)感染人宫颈癌细胞株Caski,同时设...     

LncRNA SNHG7靶向调节miR-146a-5p对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和细胞凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因7(lncRNASNHG7)对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制.方法:培养人正常胃黏膜上皮细胞GES-1和胃癌细胞NCI-N87、Hs-746T、NCI-SNU-16;将si-NC、si-SNHG7分别转染至 NCI-N87细胞中,记为 si-NC 组、si...     

miR-146a-3p靶向TLR4减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的 研究微小RNA (miR)-146a-3p对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)和炎症反应的作用及机制.方法 将32只BALB/c小鼠随机分为假手术组、ALI组、ALI+agomiR-阴性对照(NC)组以及ALI+miR-146a-3p激动剂组(ALI+agomiR-146a-3p组),每组8只.通过气...     

lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌组织的表达变化

目的 分析lncRNA MALAT1、miR-146b-5p膀胱癌(BC)组织的表达变化。方法 选取2017年1月6日至2020年1月6日本院收治的90例膀胱癌病患为研究样本,病患接受手术治疗疾病,留取膀胱癌组织、癌旁组织。应用荧光实时定量PCR法对于以上组织内的lncRNA MALAT1、miR-146b-5p进行测定,分析以上物质在BC组织内的表达变化。结果 癌旁组织和BC内miR-146b-5p、lncRNA MALATI相对表达量对比具有统计学意义(P<0.05);BC淋巴结转移和miR-146b-5p、lncRNA MALATI表达存在相关性;BC组织内的miR-146b-5p、lncRNA MALAT1表达情况呈负相关(P<0.05)。结论 膀胱癌组织内的miR-146b-5p表达降低,lncRNA MALAT1表达上升。以上两者负相关。这种情况的出现和病患淋巴结转移有关联性,日后其可能成为诊治膀胱癌疾病的重要标记物。     

肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义

目的 探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 选取2017年6月～2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组.采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-...     

miR-34a-5p在ox-LDL引起内皮细胞损伤中的作用机制

目的 研究miR-34a-5p在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)引起内皮细胞损伤中的作用及机制。方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分为对照组、ox-LDL组、阴性对照(NC)组、NC+ox-LDL组、miR-34a-5p敲低+ox-LDL组,采用荧光定量PCR检测miR-34a-5p的表达水平,采用western blot检测沉默信息调节因子1(Sirt1)、p53、核因子κB(NF-κB)的表达水平,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-34a-5p靶向Sirt1,采用试剂盒检测细胞活力A₄₉₀水平及凋亡率,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测一氧化氮(NO)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)。结果ox-LDL组中miR-34a-5p、p53、NF-κB的表达水平高于对照组,Sirt1的表达水平低于对照组(P<0.05);Sirt1基因mRNA 3′UTR中含有miR-34a-5p的互补结合位点,miR-34a-5p组Sirt1的荧光素酶活性低于NC组(P<0.05);NC+ox-L...     

lncRNA MEG3靶向miR-130a-5p调控人视网膜色素上皮细胞损伤的研究

目的 探讨lncRNA MEG3在年龄相关性黄斑变性(AMD)患者中的表达及其靶向miR-130a-5p对人视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的影响。方法 选取2020年6月至2021年8月永州职业技术学院附属医院收治的AMD患者38例以及同期的健康体检者38例,收集其空腹静脉血,qRT-PCR检测其血清lncRNA MEG3表达水平。不同浓度(0μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L、600μmol/L)过氧化氢(H₂O₂)处理人RPE细胞系ARPE-19细胞构建RPE细胞损伤模型,并检测lncRNA MEG3在H₂O₂处理的ARPE-19细胞中表达。双荧光素酶报告基因实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验分析lncRNA MEG3与miR-130a-5p的靶向关系。ARPE-19细胞分为对照组(常规培养,不进行任何特殊处理)、H₂O₂组(200μmol/L H₂O₂处理24...     

术前血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平预测前列腺癌患者术后复发转移的价值

目的：探讨血清miR-148a-3p及miR-139-5p水平对前列腺癌（prostate cancer,PCa）患者术后复发转移的价值。方法：选取2015年1月1日至2017年12月31日海口市第三人民医院收治的PCa患者142例,根据其术后是否发生复发转移分为未复发转移组（n=84）和复发转移组（n=58）。检测两组术前miR-148a-3p、miR-139-5p及前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）表达水平,分析其与临床病理特征的关系。应用ROC曲线分析miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA预测PCa术后复发转移的价值。Pearson相关分析miR-148a-3p、miR-139-5p与PSA相关性。结果：复发转移组血清miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA水平分别为（4.80±0.75）、（7.64±2.38）和（63.75±14.92） ng/mL,均高于未复发转移组的（2.15±0.36）、（3.50±0.62）和（18.72±8.60） ng/mL,差异有统计学意义（t值分别为10.648、14.715和9.804,均P=0.000）。复发转移患者血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达水平与肿瘤分期（t=5.117,P=0.024;t=5.304,P=0.018）、Gleason评分（t=5.512,P=0.006;t=6.218,P=0.000）及PSA水平（t=10.208,P=0.000;t=13.620,P=0.000）有关联。ROC曲线分析显示,血清miR-148a-3p、miR-139-5p及PSA预测PCa术后复发转移的最佳截值分别为3.40、5.38和36.80 ng/mL,三项联合预测PCa术后复发转移的AUC（0.914,95%CI=0.858～0.972）最大,其敏感度和特异度为92.0%和83.6%。相关分析显示,复发转移患者血清miR-148a-3p、miR-139-5p水平与PSA均呈正相关（r=0.774,P＜0.001;r=0.806,P＜0.001）。结论：术前血清miR-148a-3p及miR-139-5p表达上调与PCa术后复发转移有关,联合PSA检测对预测PCa术后复发转移具有较高的价值。     

子痫前期蜕膜巨噬细胞源性外泌体来源miR-146a-5p通过靶向HIF1α抑制滋养细胞的活力和侵袭能力

目的：探究蜕膜巨噬细胞源性外泌体miR-146a-5p对子痫前期滋养细胞的作用及其分子机制。方法：收集子痫前期（preeclampsia,PE）患者和正常妊娠女性蜕膜组织,使用密度梯度法与流式细胞术分选获得巨噬细胞,提取蜕膜巨噬细胞源性外泌体;为了鉴定外泌体,采用透射电镜观察结构,western blot验证外泌体CD63蛋白表达;采用CCK-8检测外泌体对滋养细胞活力的影响;Transwell实验检测滋养细胞迁移变化;qPCR检测外泌体中miR-146a-5p的表达;western blot检测滋养细胞中HIF1α蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测miR-146a-5p与HIF1α是否存在结合位点。结果：巨噬细胞外泌体呈现直径约30～130 nm的中间凹陷“饼状”结构形态,CD63高表达,符合外泌体特征。与正常组相比,PE组蜕膜巨噬细胞源性外泌体显著降低滋养细胞增殖与迁移（P<0.001）。PE组蜕膜巨噬细胞源性外泌体中miR-146a-5p表达量显著下降,蜕膜巨噬细胞源性外泌体处理滋养细胞后滋养细胞中HIF1α蛋白表达显著升高,miR-146a-5p和HIF1α之间存在靶向结合...     

miR-30a-5p对肺癌细胞增殖与迁移的影响及其机制

研究miR-30a-5p 对非小细胞肺癌（NSCLC）增殖和迁移的影响,并探讨其调控机制。方法NSCLC A549细胞系分成两组,miR-30a-5p组和对照组,分别转染miR-30a-5p mimics和microRNA scramble,MTT实验及细胞划痕实验分别测定两组细胞增殖和迁移能力,实时聚合酶链反应（real time-PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别测定两组泛素蛋白连接酶（UBE3C）mRNA 和蛋白质表达水平。结果培养48 h后,miR-30a-5p 组相对活细胞百分比低于对照组[（203.7±16.8）% vs（330.4±20.7）%（p =0.000）];培养72 h后,miR-30a-5p组相对活细胞百分比（258±30.2）%,对照组相对活细胞百分比（403.4±28.4）%,miR-30a-5p组相对活细胞百分比低于对照组（p =0.001）。细胞划痕实验示：miR-30a-5p组划痕愈合率为（23.2±2.7）%,对照组划痕愈合率为（89.2±4.8）%,miR-30a-5p 组划痕愈合率低于对照组（p =0.000）。real time-PCR显示,miR-30a-5p 组UBE3C mRNA 表达水平为（0.15±0.02）,对照组UBE3C mRNA 表达水平为（1.03±0.09）,miR-30a-5p组UBE3C mRNA表达水平低于对照组（p =0.000）;Western blot显示,miR-30a-5p组UBE3C 蛋白表达水平为（1.57±0.26）,对照组UBE3C 蛋白表达水平为（5.32±0.42）,miR-30a-5p 组UBE3C 蛋白表达水平低于对照组（p =0.000）。结论miR-30a-5p抑制NSCLC 增殖和迁移,其机制与下调UBE3C表达有关。     

血清miR-30a-5p作为原发性肾病综合征新分子标志物的研究

目的 观察原发性肾病综合征(PNS)患者血清miR-30a-5p的表达水平,并探索其临床价值.方法 选取在首诊并诊断为PNS的160患者作为病例组,按照1 ∶ 1匹配原则另选160例同期健康体检人员为对照组.收集两组临床资料和血液样本,检测血生化指标,并采用定量PCR技术检测血清miR-30a-5p的表达水平.对患者进...