芒果苷对脂多糖诱导小鼠成骨细胞凋亡的影响及机制研究

目的 探究芒果苷对脂多糖诱导小鼠成骨细胞凋亡的影响及可能机制.方法 将小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组和LPS+芒果苷组,分别加入PBS缓冲液、脂多糖(LPS)、LPS+芒果苷.采用MTT法检测不同处理因素下各组成骨细胞的细胞存活率;qRT-PCR法检测各组细胞炎症因子TNF-α及细胞凋亡相关因子...     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

淫羊藿苷对人根尖牙乳头干细胞增殖及其骨向分化的影响

[目的] 分析经淫羊藿苷(ICA)刺激后,人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)增殖及骨向分化的作用机制。[方法] hSCAPs体外培养至第3代后与不同浓度的ICA进行温育。2 d后,采用qRT-PCR和Western Blotting技术在mRNA和蛋白水平上分别检测hSCAPs的骨向分化相关因子骨保护素(OPG)和核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)的表达;并通过CCK-8检测hSCAPs受不同浓度的ICA诱导不同时间的增殖情况。[结果] 根尖乳头分离出的hSCAPs在体外培养后,流式染色技术检测表面蛋白CD31、CD90和CD146细胞表达率分别为4.03%、96.18%和95.42%。与对照组相比,ICA的体外刺激显著促进了hSCAPs中OPG的表达(P<0.05),降低了RANKL的mRNA转录和翻译(P<0.05),促进了hSCAPs的增殖分化(P<0.05)。当浓度为0.1 mol/L时,ICA对hSCAPs的调控作用最强。[结论] ICA对hSCAPs细胞增殖和骨向分化的促进作用为临床上使用hSCAPs进行牙病治疗提供理论指导。     

体外紫云英苷抑制小鼠BMM细胞向破骨分化

目的 研究紫云英苷对小鼠骨髓源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage, BMM)向破骨细胞分化的影响。方法 从C57BL/6小鼠的股骨与胫骨骨髓腔中提取小鼠BMM细胞,并使用含核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和梯度浓度的紫云英苷(0、50、100、200μmol/L)的培养基培养5~7天,通过TRAP染色、共聚焦荧光染色与RT-PCR检测BMM细胞向破骨细胞分化的水平。结果 培养5~7天后,TRAP染色与F-actin环检测显示紫云英苷显著抑制了RANKL诱导下小鼠BMM细胞向破骨细胞的分化,且抑制效果与紫云英苷浓度相关,差异有统计学意义(P均<0.01),RT-PCR结果显示紫云英苷显著抑制了小鼠BMM细胞中破骨分化相关基因TRAP、CTSK、NFATc1的表达,差异有统计学意义(P均<0.01)。结论 紫云英苷能够有效抑制RANKL诱导下小鼠BMM细胞向破骨细胞的分化。     

淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

目的:探讨淫羊藿苷对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法:采用差速贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪鉴定表面标志。取第3代细胞加入10-6mol/L淫羊藿苷培养基,对照组仅加入等量普通培养基进行培养。通过镜下观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞表面标志,碱性磷酸酶试剂盒测定诱导细胞碱性磷酸酶活性,组织化学染色观察钙化结节形成能力。结果:体外培养的细胞表达CD29、CD44、CD105、CD166。淫羊藿苷诱导组细胞碱性磷酸酶呈阳性反应并有钙化结节形成,而对照组未见钙化结节形成。结论:淫羊藿苷能够诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,可视为一种良好的骨诱导活性因子。     

骨形态生成蛋白在成骨细胞分化机制中的研究进展

在成骨细胞分化和骨形成过程中，骨形态生成蛋白（BMP）是关键性的调节因素，它通过调节转录因子以及借助一些未知的信号转导途径，发挥诱导分化和定向分化的效应，而借助于受体的特异性信号转导系统和特异的受体抑制剂。其表达水平及功能还可受到多种方式的调控。作者就BMP在骨分化中的作用、基本机制方面的研究进展进行综述。     

骨形态发生蛋白信号传导系统与成骨细胞分化

骨形态发生蛋白(bone morphogenetic prote in,BMP)属于转化生长因子-β(transform ing growth factor-,βTGF-β)超家族,能够促进骨的形成。而骨形成的关键是骨髓基质干细胞向成骨细胞分化。BMP及其下游的级联蛋白组成的信号传导系统通过影响相关转录因子,如:Cbfa1,Osx,D lx5/     

葡萄糖对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

目的体外观察葡萄糖对间充质干细胞（BMSCs）向成骨细胞（OB）分化的影响,探讨其对骨代谢的作用机制。方法从大鼠长骨骨髓分离获取间充质干细胞,在不同糖浓度（5.6mmol/l、25mmol/l、50mmol/l）干预下向成骨细胞诱导分化培养21d;茜素红染色、光镜计数矿化率;realtime PCR测定OB的标记物碱性磷酸酶（ALP）,骨钙素（BGP）及转录因子Runx2 mRNA表达,进行不同糖浓度组干预后的变化比较。结果显示随着糖浓度升高,矿化率显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。与5.6mmol/l组比较,50mmol/l组的ALP,BGP及Runx2 mRNA表达减少,分别为73%（P〈0.05）、69%（P〈0.05）及70%（P〈0.05）,25mmol/l组的ALP、BGP及Runx2 mRNA表达下降也具有显著性（P〈0.05）。结论高糖抑制BMSCs向OB分化,可能为糖尿病性骨质疏松形成的重要机制之一。     

胚胎干细胞向成骨细胞定向分化的研究进展

目的对胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)体外诱导定向分化为成骨细胞的研究现状及所存在的问题作一综述。方法广泛查阅近年来关于ESCs体外诱导分化为成骨细胞的文献,并进行总结和分析。结果 ESCs可以作为理想的骨组织工程种子细胞来源。结论体外诱导ESCs定向分化得到成骨细胞,在骨组织工程中具有巨大的潜力,不但提供了分析成骨细胞发生的分子机制模型,也奠定了其在骨组织修复中的基础。     

炮制前后知母中芒果苷和新芒果苷的含量变化

目的:考察炮制前后知母(Anemarrhena asphodeioides Bge.)中黄酮类成分芒果苷和新芒果苷的含量变化.方法:采用HPLC法测定知母、炒知母中芒果苷和新芒果苷的含量,流动相为乙腈-25 mmol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 3.0)梯度洗脱.应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版(国家药典委员会)对3个批号的知母炮制前后的色谱图进行评价.结果:3个批号的知母炮制前后芒果苷的含量升高,而新芒果苷的含量下降;炮制前后图谱的相似度均有所下降(<1).结论:炮制后知母中黄酮类成分芒果苷和新芒果苷的含量发生了变化.     

黄芩素对人牙周膜细胞骨向分化能力的影响

目的： 探讨中药黄芩提取物黄芩素对人牙周膜细胞（hPDLCs）增殖和成骨分化功能的影响。 方法：原代培养hPDLCs,向hPDLCs中分别加入浓度为0.3125、0.625、1.25 μmol/L的黄芩素作为实验组,对照组不加黄芩素。MTT法检测黄芩素对hPDLCs增殖的影响后,分别采用碱性磷酸酶（ALP）活性测定、茜素红S 染色、Real-time PCR和Western Blot法研究黄芩素对hPDLCs ALP活性、矿化结节形成、I型胶原（Col-I）mRNA和蛋白表达的影响。 结果： 与对照组相比,各浓度黄芩素对hPDLCs增殖均无明显影响;各浓度黄芩素组均表现为ALP活性上升;同时骨向诱导21 d后可见黄芩素组矿化结节形成增加,定量分析结果显示1.25 μmol/L黄芩素组形成矿化结节数量最多;Real-time PCR和Western Blot结果显示各浓度黄芩素组Col-ImRNA和蛋白表达均有上升,7 d时随浓度的增加其表达上升,1.25 μmol/L黄芩素组达到最高水平。     

续断苷对人成骨细胞增殖和分化作用研究

目的:观察续断苷对体外培养人成骨细胞的增殖和分化的影响。方法:取人髂骨松质骨分离培养成骨细胞,传代后用含续断苷的培养液培养,用MTT方测定成骨细胞的增殖,并测定碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果:浓度为1,10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞的增殖;浓度为10,100μg/ml的续断苷培养液促进成骨细胞碱性磷酸酶分泌。结论:续断苷在一定浓度范围内促进人成骨细胞的分化与增殖。     

miR-17对炎症微环境中PDLSCs骨向分化特性的影响

目的探讨体外炎症微环境中,miR-17对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs骨向分化能力的影响。方法体外有限稀释法克隆化和密度梯度离心法分别培养牙周膜干细胞(PDLSCs)和外周血免疫细胞(PBMCs),并建立PDLSCs与免疫细胞的Transwell共培养炎症微环境体系。使用定量PCR技术检测miR-17的表达,并将PDLSCs转染miR-17模拟物Mimics和抑制剂Inhibitor后进行成骨诱导,ALP染色,定量PCR和Western Blot检测细胞成骨分化的能力。结果共培养组PDLSCs中miR-17表达降低,转染Mimics后共培养细胞成骨分化能力升高,转染Inhibitor后细胞成骨分化能力降低。结论炎症微环境中miR-17可以促进PDLSCs骨向分化。     

rhBMP-4对大鼠成骨细胞增殖及分化能力的影响

目的 探讨rhBMP-4对大鼠成骨细胞生长增殖及分化的影响.方法 取大鼠颅盖骨组织块,采用改良组织块混合酶消化法培养成骨细胞,将不同浓度的rhBMP-4加入第4代成骨细胞的培养基继续进行细胞培养,用MTT法测定细胞在第1,3,5 天的增殖情况,用碱性磷酸酶试剂盒检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性.结果 第1,3,5 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞的生长增殖能力的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05);第1,3 天,5～40 ng/ml的rhBMP-4对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05),第5天,rhMP-4各浓度组与对照组比较无统计学意义.结论 在一定时间范围内,rhBMP-4对成骨细胞生长增殖及分化有促进作用.     

流体剪切力影响成骨细胞生物学功能及分化机制的研究

摘　要：目的　 探讨流体剪切力（FSS）作用下成骨细胞生物学功能及分化机制。方法 4 组大鼠成骨细胞分别施 加 0、30、60 和 120 min FSS（12 dyn/cm2 ）刺激,免疫荧光染色后观察FSS刺激成骨细胞不同时间后的细胞骨架变化,采 用Image J软件计算细胞分形维数,比较细胞内部复杂程度;使用Ca2+试剂盒检测钙响应,碱性磷酸酶（ALP）测试盒检 测ALP活性;Real-time PCR检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osterix（Osx）基因表达;Western blot 检测FSS刺激不同时间后成骨细胞的BMP2、Runx2、Osx蛋白表达水平,采用Quantity one进行光密度分析。结果 12 dyn/cm2 FSS刺激成骨细胞可引起细胞骨架形态、微丝丰富度及细胞复杂程度的变化,以 60 min最明显。与 0 min组相比, 细胞Ca2+浓度在FSS刺激 30 min后明显升高,延续至 60 min为高峰平台期（P<0.05）,120 min 后Ca2+浓度回落;60 min 组的BMP2、Runx2、Osx基因和蛋白表达水平均明显上调（P<0.01）;ALP活性升高,在刺激 60 min时最为明显（P<0.05）。 结论 12 dyn/cm2 FSS刺激能改善成骨细胞生物学功能,促进BMP2、Runx2、Osx基因及其蛋白表达上调;能通过改变成 骨细胞骨架促进Ca2+浓度升高,进而激活与分化高度相关的BMP2-Runx2-Osx信号通路,提高成骨细胞分化标志物ALP 活性。     

芒果苷的药效作用研究进展

芒果苷是一种天然存在的C-葡萄糖基黄酮,是有效的药用化合物,可以从多种植物中分离提取得到。研究表明,芒果苷具有治疗糖尿病、抗肿瘤、抗炎、抗氧化、治疗眼部疾病、神经系统保护、肾脏保护、改善心血管疾病等作用。由于其具有众多的生物活性,对预防和治疗多种疾病有巨大潜力。本文对近年来芒果苷的药效学研究进展及其作用机制进行综述,以期为芒果苷的进一步研究和利用提供科学依据。     

淫羊藿苷对体外培养的成骨细胞骨形态发生蛋白-2表达的影响

目的:检测不同浓度淫羊藿苷(ICA)对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法:分别用10、20、40ng/mL的淫羊藿苷作用MC3T3-E1细胞,观察细胞生长情况;MTT法测绘细胞生长曲线;FCM法测定细胞生长周期;免疫细胞化学方法和Western bloting测定细胞BMP-2蛋白表达情况。结果:淫羊藿苷组可使细胞的生长曲线明显上移,S期细胞百分率升高,G1期细胞百分率减少以及BMP-2蛋白表达量增加,其中20ng/mL组作用更为显著,各组间比较有显著差异(P(0.01)。结论:淫羊藿苷可以促进成骨细胞增殖,增加成骨细胞BMP-2的表达。