miR-581在食管鳞癌中的表达及其对食管鳞癌K30细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的检测miR-581在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况及对食管鳞癌细胞K30增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法收集33例食管鳞状细胞癌组织及其癌旁组织标本,应用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测miR-581的表达情况; 采用miR-581 mimic转染食管鳞癌细胞K30作为实验组,用阴性对照片段转染K30作为阴性对照组,qPCR检测miR-581的转染效率,CCK8检测细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测迁移和侵袭能力的变化。结果与食管癌旁组织比较,癌组织中的miR-581表达下调; CCK8结果显示,过表达miR-581能抑[JP2]制食管癌细胞的增殖能力; Transwell迁移及侵袭实验结果显示,过表达miR-581能显著减少食管癌细胞穿膜细胞数。结论miR-581与食管鳞癌的进展相关,其机制有待进一步研究。     

miR-216a-3p miR-128-3p通过调控RGS17抑制口腔鳞状细胞癌细胞表型恶化的机制研究

目的:观察miR-216a-3p、miR-128-3p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞表型表达的影响,并探究其潜在的作用机制。方法:运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测癌组织、癌旁组织、人正常口腔角质形成细胞(hNOK)、OSCC癌细胞(SCC-9、SCC-25、HN4)中miR-216a-3p、miR-128-3p、G蛋白信号调节器17(RGS17)的表达;脂质体法将mimic-NC组(转染mimic)、mimic-miR-216a-3p组(转染miR-216a-3p mimic)、mimic-miR-128-3p组(转染miR-128-3p mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-RGS17组(转染si-RGS17)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA)、mimic-miR-216a-3p+pcDNA-RGS17组(共转染miR-216a-3p mimic和pcDNA-RGS17)、mimic-miR-128-3p+pcDNA组(共转染miR-128-3p mimic和pcDNA)...     

circ＿0086414靶向miR-155-5p抑制Hippo/YAP信号通路调控口腔鳞癌细胞增殖迁移和侵袭

目的:探究circ-0086414靶向miR-155-5p抑制Hippo/Yap信号通路调控口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:RT-PCR检测HIOEC、Tca8113、CAL27、SCC-9细胞中circ-0086414表达。将未转染任何质粒的SCC-9细胞设为Control组;将分别转染pcDNA-circ-0086414、pcDNA-NC、miR-155-5p inhibitor、miR-NC inhibito质粒的SCC-9细胞中,并设为pcDNA-circ-0086414组、pcDNA-NC组、miR-155-5p组、miR-NC组;将pcDNA-circ-0086414质粒转染于SCC-9细胞中,同时在培养基中加入5μmoL/L Verteporfin共同培养,设为Verteporfin组。RT-PCR检测细胞中circ-0086414、miR-155-5p表达;CCK-8检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;蛋白质印迹检测细胞中Lats1、p-Lats1、YAP、p-YAP蛋白表达;双荧光素酶报告系统实验验证circ...     

EZH2对人喉鳞状细胞癌HEP-2增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨Zeste基因增强子同源物2(EZH2)在人喉鳞状细胞癌组织和HEP-2、SCC10A细胞中的表达及其对人喉鳞状细胞癌细胞HEP-2增殖、迁移和侵袭的影响。方法：收集宣城中心医院30例喉鳞状细胞癌和10例癌旁正常喉黏膜组织标本,qRT-PCR检测喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织以及喉鳞状细胞癌细胞HEP-2、SCC10A中EZH2的表达。采用Lipofectamine2000将EZH2 shRNA质粒转染至HEP-2细胞中,通过qRT-PCR和Western blot检测EZH2 shRNA的转染效率,并通过Western blot检测EZH2下游相关信号分子的表达水平。CCK8实验检测HEP-2细胞的增殖,划痕实验和 Transwell侵袭实验检测细胞的迁移、侵袭能力。运用裸鼠体内成瘤实验检测EZH2对HEP-2细胞体内成瘤能力的影响。结果：EZH2在喉鳞状细胞癌组织及细胞中显著高表达(P＜0.01)。EZH2 shRNA质粒转染后可抑制细胞的增殖能力,细胞的迁移和侵袭也均受到明显抑制。裸鼠体内成瘤实验结果显示,EZH2 shRNA组的HEP-2细胞肿瘤形成能力明显减弱。结论：EZH2在喉鳞状细胞癌组织和细胞中高表达;EZH2 shRNA能够在体外抑制喉鳞状细胞癌细胞HEP-2的增殖、迁移和侵袭,并抑制RAF1-ERK信号通路的活化;EZH2能够在体内抑制喉鳞状细胞癌细胞HEP-2的成瘤能力。     

LncRNA HCP5调节miR-27b-3p/H2AFZ轴对口腔鳞状细胞癌增殖侵袭迁移的机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)人类白细胞抗原复合物P5(HCP5)通过调节微小RNA(miR)-27b-3p/H2A组蛋白家族成员Z(H2AFZ)轴对口腔鳞状细胞癌(OSCC)增殖、侵袭、迁移的影响。方法:收集2021年2月至2022年2月在本院行手术治疗的48例OSCC患者癌组织及邻近癌旁组织、OSCC细胞系(Tca-811、SCC-9、SCC-25、HN4)及人正常口腔角质形成细胞(hNOK),检测LncRNA HCP5、miR-27b-3p、H2AFZ mRNA表达水平；取对数生长期Tca-811细胞，分为对照组、小干扰RNA阴性对照(si NC)组、干扰HCP5表达(si HCP5)组、si HCP5+抑制物阴性对照(inhibitor NC)组、si HCP5+miR-27b-3p抑制物(miR-27b-3p inhibitor)组。双荧光素酶验证LncRNA HCP5与miR-27b-3p、miR-27b-3p与H2AFZ的靶向关系；qRT-PCR检测LncRNA HCP5、miR-27b-3p、H2AFZ mRNA表达水平；流式细胞仪及MTT法检测Tca-81...     

下调miR-409-5p对口腔癌细胞SCC-9增殖、迁移的影响

目的探讨下调微小核糖核酸-409-5p(miR-409-5p)对人口腔癌细胞SCC-9增殖、迁移的影响。 方法收集口腔癌患者口腔癌组织及癌旁正常组织,采用qRT-PCR检测癌组织及癌旁正常组织中miR-409-5p mRNA相对表达量。qRT-PCR筛选出细胞株SCC-9细胞后,将其分为空白对照组(Lip2000处理SCC-9细胞)、阴性对照组(Lip2000＋阴性对照序列处理SCC-9细胞)、miR-409-5p组(Lip2000和inhibitor-miR-409-5p共同处理SCC-9细胞)。采用MTT法、Transwell小室法检测miR-409-5p对细胞增殖、侵袭、迁移的影响。qRT-PCR法、Western blotting法检测细胞vimentin mRNA和蛋白的相对表达量。 结果与癌旁正常组织比较,口腔癌组织中miR-409-5p显著增加(P＜0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,miR-409-5p组细胞增殖、侵袭和迁移能力均下降(P＜0.05);miR-409-5p组vimentin mRNA和蛋白相对表达量也显著降低(P＜0.05)。 结论下调miR-409-5p能够抑制SCC-9细胞的增殖、迁移,其机制可能与下调vimentin蛋白表达有关。     

miR-182在胆囊癌中的表达及其对胆囊癌细胞增殖、侵袭能力的影响

目的:检测miR-182在胆囊癌中的表达,探讨其影响胆囊癌细胞增殖、侵袭的可能机制。方法:实时荧光定量PCR检测miR-182、p38在10例胆囊癌组织、癌旁组织中的表达情况;应用miR-182mimics转染胆囊癌细胞GBC-SD,应用p38 MAPK信号通路特异性阻滞剂SB203580处理转染miR-182mimics的GBC-SD细胞,通过MTT实验、细胞周期检测、Transwell小室检测miR-182对GBC-SD细胞增殖、侵袭能力的影响。结果:胆囊癌组织中miR-182、p38的表达高于癌旁组织;miR-182mimics转染GBC-SD细胞后,p38的表达水平随之升高(P<0.05),细胞增殖能力增强,细胞迁移数增多(75±8),S期细胞比例增多[(68.81±7.57)%];应用SB203580处理转染miR-182的GBC-SD细胞,细胞增殖能力降低,细胞迁移数减少(23±5),S期细胞比例减少[(34.49±7.05)%]。结论:miR-182在胆囊癌组织中高表达,通过上调p38 MAPK信号通路增强胆囊癌细胞的增殖、侵袭能力,参与了胆囊癌的发生发展过程。     

MicroRNA-216b靶向DCLK1调控卵巢癌HO-8910细胞的增殖迁移和侵袭

目的:探讨MicroRNA-216b(miR-216b)对卵巢癌HO-8910细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:收集30例卵巢癌患者癌组织和癌旁组织,采用qPCR检测癌组织和癌旁组织miR-216b的表达.采用HO-8910细胞为对照组,转染空载质粒HO-8910细胞为阴性对照组,转染miR-216b mimic的HO...     

miR-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响

目的 口腔鳞状细胞癌(OSCC)发病率高,在全世界恶性肿瘤中居第六位。越来越多的证据表明,microRNAs在调控OSCC中起着关键作用,本研究旨在探讨微小RNA (miRNA)-1301对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响。 方法 人正常口腔上皮细胞系(HGF-1)和口腔鳞状细胞癌细胞株(YD-38、MK-1)购自美国典型培养库(ATCC);采用实时定量PCR(RT-PCR)技术检测口腔鳞状细胞癌组织和癌细胞中miR-1301的水平;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测调控miR-1301的表达水平后OSCC细胞的增殖能力;划痕愈合实验检测调控miR-1301的水平后细胞的迁移能力。 结果 和正常口腔上皮细胞HGF-1(4.32±0.86)相比,OSCC细胞YD-38(2.25±0.24)和MK-1(3.32±0.85)中miR-1301的水平显著下调(均P<0.05);稳定转染miR-1301模拟物后继续培养细胞24、48、72 h,细胞的增殖水平分别为(0.26±0.02)、(0.32±0.03)、(0.42±0.04),miR-NC组的水平为(0.30±0.02)、(0.52±0.05)、(0.89±0.07),转染miR-1301模拟物后,细胞的增殖能力显著下调(均P<0.05),而在12 h时2组细胞增殖情况比较差异无统计学意义(P>0.05);与miR-NC组(1.00±0.10)相比,转染miR-1301模拟物(0.65±0.05)后,YD-38细胞的迁移能力显著下调(P<0.05),而转染miR-1301抑制剂则有相反的效果。 结论 miR-1301在口腔鳞状细胞癌组织和细胞中显著下调,转染miR-1301模拟物能够抑制OSCC细胞的增殖和迁移能力,miR-1301可能为口腔鳞状细胞癌的治疗提供新的分子靶点。      

miR-455-5p在结直肠癌中的表达及生物学特性

目的探讨miR-455-5p在结直肠癌（CRC）中的表达及生物学特性。方法收集40例CRC患者经手术切除的结肠和直肠癌组织标本及癌旁10cm的正常黏膜组织标本。采用qRT-PCR法检测CRC组织及癌旁正常黏膜组织中miR-455-5p的表达水平;采用脂质体转染试剂转染CRC细胞,Brdu增殖实验检测转染后CRC细胞增殖能力,流式细胞仪检测转染后CRC细胞凋亡率。应用生物信息学方法预测并验证miR-455-5p的靶基因。结果CRC组织miR-455-5p的相对表达量低于癌旁正常黏膜组织（P＜0.01）。经转染后CRC细胞中,上调miR-455-5p可抑制CRC细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。数据库预测PIK3R1可能是miR-455-5p的靶基因,上调miR-455-5p可抑制PIK3R1mRNA及蛋白表达。结论miR-455-5p在CRC组织中呈低表达,其生物学特性是miR-455-5p具有抑制CRC细胞生长的作用,其机制可能与调控PIK3R1的表达有关。     

miR-141抑制头颈部鳞癌细胞增殖

目的 考察microRNA-141(miR-141)对人头颈部鳞癌细胞增殖的影响。 方法 通过qRT-PCR分析19例头颈部鳞状细胞癌患者的肿瘤组织与癌旁正常组织标本中miR-141的表达。通过miR-141 mimics 或miR-141 反义寡核苷酸(ASO)上调或抑制人喉癌细胞株(Hep-2)和人舌鳞状细胞癌细胞株(SCC-9)细胞中miR-141的表达水平。采用MTT实验分析上调或抑制miR-141的表达水平对Hep-2和SCC-9细胞增殖的影响。利用生物信息学方法预测miR-141的靶基因。 结果 qRT-PCR的结果表明,头颈部鳞状细胞癌组织的miR-141的表达水平低于癌旁正常组织(P<0.05);上调miR-141的表达能够抑制Hep-2和SCC-9细胞的增殖(P<0.05),而抑制miR-141表达可以促进Hep-2和SCC-9细胞的增殖(P<0.05)。生物信息学方法预测miR-141的靶基因可能为ZEB1基因。 结论 miR-141可能通过ZEB1基因抑制头颈部鳞状细胞癌的增殖。     

miR-365-3p抑制CDK-10表达对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡和周期的影响

目的探讨miR-365-3p通过周期素依赖性激酶-10(CDK-10)影响口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡与周期的机制。方法收集在本院就诊的40例口腔鳞癌患者肿瘤组织样本及癌旁正常组织样本,检测其miR-365-3p和CDK-10表达水平。随机将人舌鳞癌细胞系(CAL-27)分为空白组、对照组及miR-365-3p三组。对照组与miR-365-3p组分别转染miR-365-3p NC与miR-365-3p mimic,空白组不进行转染。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-365-3p表达,CCK-8法及流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡。qPCR和Western blot检测CDK-10的表达水平。结果相较于对照组与空白组,miR-365-3p在miR-365-3p组的表达水平显著升高(P＜0.05),细胞增殖指数显著降低(P＜0.05);细胞凋亡水平显著升高(P＜0.05)。转染72 h后,相较于空白组与对照组,miR-365-3p组G1期比例显著降低(P＜0.05),S期+G2期比例则显著增加(P＜0.05)。转染48 h与72 h后,相较于空白组与对照组CDK-10蛋白在miR-365-3p组的相对表达量显著降低(P＜0.05)。结论miR-365-3p在口腔鳞癌细胞中的高表达能够抑制CDK-10表达,从而抑制细胞增殖,调节细胞周期,促进细胞凋亡。     

长链非编码RNA linc00152促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA-linc00152对口腔鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响.方法采用RT-qPCR方法检测linc00152在口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织以及口腔鳞癌细胞系中的表达.CAL27和SCC9细胞转染linc00152-siRNA后,采用CCK8、划痕以及Transwell实验检测CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭转移情况.结果Linc00152在口腔鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在人口腔鳞状细胞癌细胞系TSCCA、SCCl5、CAL27和SCC9中的表达显著高于人正常黏膜HOK细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);经相关性分析,Linc00152的高表达与淋巴结转移有关(P<0.05);CAL27和SCC9细胞系敲低Linc00152后,CAL27和SCC9细胞增殖、侵袭和转移明显受到抑制(P<0.05).结论linc00152在口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞系中呈高表达,下调linc00152表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和转移,linc00152可成为口腔鳞癌潜在治疗靶点.     

雷帕霉素通过抑制TLR4、IL-6、PGE2表达促进口腔鳞状细胞癌细胞凋亡研究

目的 探讨雷帕霉素促进人口腔鳞状细胞癌SCC-15细胞凋亡是否与抑制TOLL样受体-4(TLR4)、白细胞介素(IL)-6、前列腺素E2(PGE2)表达有关.方法 培养人口腔鳞状细胞癌SCC-15细胞株,雷帕霉素干预后,CCK-8法检测SCC-15细胞活性,Hochest33342/PI双染检测SCC-15细胞凋亡,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白质印迹法(Western blot)检测TLR4蛋白表达水平,ELISA法检测IL-6、PGE2表达.结果 雷帕霉素促进细胞凋亡,SCC-15细胞侵袭能力明显降低.雷帕霉素干预后,IL-6、PGE2水平降低,TLR4蛋白表达减少,与阴性组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 雷帕霉素促进人口腔鳞状细胞癌细胞凋亡可能与抑制TLR4、IL-6、PGE2表达有关.     

miR-15b-5p在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测miR-15b-5p在胃癌中的表达变化,探索其对胃癌细胞功能的影响。方法:采用实时定量PCR检测35例胃癌组织及其对应的癌旁正常胃组织中miR-15b-5p的表达;构建miR-15b-5p过表达载体及合成miR-15b-5p抑制剂,并转染胃癌细胞系AGS;应用MTT法检测胃癌细胞增殖能力变化;采用流式细胞术分析miR-15b-5p对细胞周期和凋亡的影响。结果:miR-15b-5p在胃癌组织中的表达显著下调(P<0.01);转染miR-15b-5p过表达载体抑制了胃癌细胞的增殖,将细胞周期阻滞在G_0/G_1期,并诱导了细胞凋亡;转染miR-15b-5p抑制剂促进了胃癌细胞的增殖,使细胞进入S和G_2/M期,并抑制细胞凋亡。结论:miR-15b-5p在胃癌中下调,抑制胃癌细胞的增殖,并诱导细胞凋亡。     

miR-214-3p通过靶向调节p53增强胃癌细胞的转移能力

目的 观察miR-214-3p在胃癌组织中的表达情况,探讨其对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其分子机制.方法 通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测41对胃癌及癌旁正常组织中miR-214-3p的表达及其与肿瘤临床病理特征的关系;将胃癌细胞MGC-803接种于培养皿,每组设3个复孔,分3组:miR-214-3p上调组(转染miR-214-3p模拟物)、miR-214-3p下调组(转染miR-214-3p抑制剂),以及阴性对照(NC)组;qPCR法分别检测各组p53表达水平,Transwell实验检测转染miR-214-3p抑制剂对MGC-803细胞的迁移和侵袭能力的影响;生物信息学分析和荧光素酶活性测定以确定p53是否为miR-214-3p的靶基因.结果 相比于癌旁组织,miR-214-3p在胃癌组织中上调,并且与肿瘤淋巴结转移相关;qPCR检测分析显示,相比于NC组,miR-214-3p上调组p53的表达下降,miR-214-3p下调组p53的表达上升;Tr-answell实验结果显示,与NC组相比,miR-214-3p下调组胃癌细胞的迁移和侵袭能力降低;生物信息学分析和荧光素酶活性测定结果显示miR-214-3p通过靶向结合p533′UTR从而抑制其表达.结论 miR-214-3p在胃癌发生发展过程中可能发挥了重要作用,miR-214-3p可作为胃癌的潜在靶向标志物.     

miR-486-3p靶向DDR1对口腔鳞状细胞癌的抑制作用及槟榔致口腔鳞状细胞癌的可能机制

目的 探讨miR-486-3p靶向盘蛋白结构域受体1(DDR1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)的抑制作用,并基于miR-486-3p和DDR1分析槟榔致OSCC的可能机制。方法 (1)收集20例原发性OSCC患者肿瘤组织及癌旁组织以检测miR-486-3p的表达水平。(2)取人口腔表皮癌(OEC)-M1细胞,分为对照1组(常规培养细胞,不给予任何特殊处理)、miR-486-3p mimic组(转染miR-486-3p mimic)、miR-486-3p inhibitor组(转染miR-486-3p inhibitor),以及对照2组(常规培养细胞,不给予任何特殊处理)、OE-DDR1组(转染过表达DDR1的慢病毒质粒)、sh-DDR1组(转染低表达DDR1的慢病毒质粒)。检测各组细胞增殖能力,以及活化型Caspase-3(cleaved Caspase-3)、Caspase-3蛋白表达水平。检测对照1组、miR-486-3p mimic组、miR-486-3p inhibitor组DDR1 mRNA的表达水平。(3)取HEK293细胞,分别转染miR-486-3p mimic和野生型或...     

miR-27-3P家族负向调控SCC-3细胞中ACLY的表达

目的 探讨miR-27-3P家族(miR-27a-3P和miR-27b-3P)对舌鳞癌细胞(SCC-3)中ATP柠檬酸裂解酶(ACLY)表达的影响.方法 生物学信息预测并用荧光素酶实验验证miR-27-3P和ACLY的靶向关系;miR-27a/b-3P模拟物或抑制剂转染SCC-3细胞,qRT-PCR和Western blot检测ACLY mRNA和蛋白表达水平;qRT-PCR检测口腔鳞状细胞癌(OSCC)样本中miR-27a/b-3P、ACLY表达水平;通过敲低ACLY、敲低miR-27a/b-3P以及共同敲低ACLY和miR-27a/b-3P,检测SCC-3细胞的增殖活力.结果 miR-27a/b-3P与ACLY 3'-UTR 697～703位点碱基互补配对;上调或下调SCC-3细胞中miR-27a/b-3P的表达,ACLY表达水平则降低或升高;大多数OSCC中,ACLY呈高表达,miR-27a/b-3P低表达;敲低ACLY细胞增殖活力降低,敲低miR-27a/b-3P则升高,同时敲低细胞增殖活力仍降低,但高于单独敲低ACLY.结论 miR-27a/b-3P在大多数OSCC中低表达,负向调控ACLY的表达,可能通过靶向ACLY抑制肿瘤生长.     

抑癌基因PTEN对舌鳞状细胞癌侵袭性及上皮-间质转化相关蛋白表达的影响

目的：探讨第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因（PTEN）对舌鳞状细胞癌侵袭性的影响,阐明PTEN与舌鳞状细胞癌上皮间质转化（EMT）的关系。方法：舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株分为未转染组（SCC-4细胞）、转染组（稳定转染了PTEN的SCC-4细胞）和空载体组（转染了空载体的SCC-4细胞）。用Transwell侵袭实验测定3组SCC-4细胞的侵袭能力;Western blotting法检测与EMT相关的E-cad、vimentin和snail蛋白的表达。结果：未转染组、空载体组和转染组SCC-4细胞在Transwell侵袭小室中培养36 h后穿膜细胞数分别为82±5、80±4和42±5,其中未转染组与空载体组比较差异无统计学意义(P>0.05),转染组与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.001)。与未转染组比较,转染组SCC-4细胞中E-cad、vimentin和snail蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),E-cad表达上调, vimentin 和snail表达下调;空质粒组与未转染组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论： PTEN可能是通过抑制舌鳞状细胞癌SCC-4细胞株的EMT过程来降低其侵袭能力。