MAPK信号传导通路与其在晶体中的表达和作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinase，MAPK)是生物体内重要的信号传导系统之一，参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡等多种细胞过程。本文就MAPK在晶体内基本组成、分布、活化、调节等生物学特征及其在晶状体中作用的研究进展进行综述。     

MAPK信号通路与乳腺癌的研究进展

MAPK位于胞浆,受到刺激后磷酸化进入核内,激活靶基因。主要有ERK1/2、JNK/SAPK和P38三条途径,MPKA信号转导通路与乳腺癌的关系密切,对MAPK信号转导途径的研究,有望找到治疗乳腺癌的新靶点。     

MAPK信号通路在雄激素和运动对大鼠骨骼肌蛋白合成中的作用

［摘要］目的　建立大鼠1周耐力运动模型,颈后包埋DHT缓释药片方法进行雄激素刺激,探索MAPK信号通路在雄激素和运动对大鼠骨骼肌蛋白合成中的作用．方法　24只8周龄雄性SD大鼠随机分为4组:安静对照组（NC）、运动对照组（SP）、安静+雄激素组（NCD组）、运动+雄激素组（SPD组）;NC组及SP组实施假手术,NCD组和SPD组通过颈后包埋手术方法放置DHT缓释药片;NC组和NCD组安静饲养,SP组和SPD组实施7 d跑台训练．造模结束后,抽提大鼠右侧腓肠肌总蛋白并定量,Western Blot检测各组p38、ERK、JNK总蛋白及磷酸化蛋白表达情况．结果　NC组、SP组、NCD组和SPD组总蛋白含量逐渐增加,且NCD组和SPD组同NC组相比,NCD组增加了16.16%,SPD组增加了19.63%,因此,腓肠肌总蛋白含量差异有统计学意义（P＜0.05）;SP组、NCD组和SPD组同NC组相比,MAPK信号通路中p38、ERK蛋白磷酸化水平均有升高,且运动和雄激素协同处理组升高最为显著（P＜0.05）．结论　雄激素和运动都增加了骨骼肌总蛋白的合成,且雄激素加强了运动对骨骼肌总蛋白的合成作用;雄激素和运动都有增加骨骼肌p38、ERK、JNK磷酸化趋势,提示雄激素和运动可能通过MAPK信号通路发挥作用.     

电针介导下MAPK信号通路参与镇痛作用机制研究进展

在疼痛信息传递及调控过程中,细胞内重要的信号转导系统是MAPK联级效应.而细胞内信号分子参与了伤害性感受信号从细胞外向胞核内转导信息的全部过程.静息状态下MAPK主要分布于细胞浆,当被激活后,则转移至细胞核内,通过磷酸化转录因子来调节效应基因的表达,并作为神经元和胶质细胞中研究疼痛的靶标.针灸镇痛,历史悠久,效果明显....     

OPN通过p38MAPK信号通路调控肺动脉平滑肌细胞自噬

目的 探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)增殖、自噬的影响及其机制.方法 采用免疫细胞化学法鉴定原代分离的PASMCs后,将PASMCs分为四组:空白对照组(OPN:Ong/mL)、OPN低剂量组(...     

藁本内酯调控MAPK信号通路的血管平滑肌细胞增生

目的从细胞信号通路方面研究藁本内酯抑制体外培养的鼠血管平滑肌细胞增生的机制。方法采用MTT法测定细胞生长状况;荧光探针法、Western印迹法检测细胞内活性氧（ROS）变化、ERK和P38基因的表达活性。结果藁本内酯在40μg/mL质量浓度下作用2 d抑制率达50%;胞内ROS下降;ERK、P38表达活性下降。结论藁本内酯能有效抑制鼠平滑肌细胞增生,通过抑制ROS生成、下调P38、ERK表达从而使细胞滞留在G0/G1期。     

支架蛋白JLP调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖

目的 对支架蛋白JLP在小鼠B细胞上CD40诱导信号通路活化及细胞增殖中的作用进行研究,探索支架蛋白JLP在CD40诱导小鼠B细胞信号通路及后续生物学效应中的作用.方法 磁珠分选法分选出jlp野生型和jlp基因敲除小鼠模型脾脏B细胞,使用免疫印迹法检测在接受CD40配体（CD40L）刺激后jlp野生型和jlp基因敲除型小鼠脾脏B细胞p38、Erk和Jnk MAPK,磷酸化c-Jun以及NF-κB信号通路及的活化情况,并使用CFSE检测两种基因型小鼠B细胞在接受CD40L刺激后细胞增殖情况.结果 jlp基因敲除小鼠B细胞在受到CD40L刺激后其p38、Erk、Jnk MAPK信号通路以及c-Jun活化情况均较jlp野生型小鼠B细胞明显减弱,而NF-κB信号通路的激活情况在两种基因型B细胞中并无明显差异,jlp基因敲除小鼠B细胞中CD40诱导的细胞增殖水平较jlp野生型B细胞明显降低.结论 支架蛋白JLP参与调控B细胞上CD40诱导的MAPK信号通路活化及细胞增殖.     

祛瘀生肌法对SD大鼠糖尿病溃疡创面修复MAPK信号通路相关基因的调控作用

目的:探讨祛瘀生肌中药对糖尿病难愈合性创面修复MAPK信号通路相关基因的调控作用。方法:以糖尿病溃疡创面为研究平台,将SD大鼠随机分为正常创面组、糖尿病溃疡模型组及生肌化瘀1(生肌方与化瘀方2∶1)、生肌化瘀2(生肌方与化瘀方1∶1)、生肌化瘀3(生肌方与化瘀方1∶2)方组,除正常组外,其余4组以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法制备糖尿病模型。每组给予相应干预措施后,采用Real-Time PCR技术检测MAPK信号通路应激活化蛋白激酶(JNK)、活化蛋白激酶磷酸酶(MKP)以及磷酸化p38、p53、p21 mRNA表达及分布规律。结果:与糖尿病溃疡模型组比较,祛瘀生肌中药组均可下调成模第7、11、15天MKP、JNK mRNA表达,上调p53、p38 mRNA表达,p21 mRNA表达没有明显改变,且各组间无明显的作用规律。结论:MAPK信号通路在促进糖尿病溃疡创面愈合中发挥重要的作用,祛瘀生肌中药可调控MAKP通路相关基因。     

MAPK和PI3K信号通路在胃癌中的作用及意义

【目的】 已有研究表明MAPK和PI3K信号途径是两条重要的抑制凋亡和促进增殖的转导通路,与癌症的发生发展关系密切,本实验通过检测在Akt、Erk、Bcl-2、NF-κB在胃癌及癌旁组织的表达,探讨MAPK和PI3K信号通路在胃癌发展过程中的作用及意义。 【方法】 收集50对胃癌组织及其相应的癌旁组织,应用免疫组织化学技术检测胃癌及癌旁组织中Akt、Erk、Bcl-2和NF-κB蛋白的表达情况并进行分析。 【结果】 胃癌中Akt、Erk、Bcl-2、NF-κB蛋白的阳性表达率均高于其癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。 【结论】 胃癌的发生发展是一个多步骤、多基因突变的累积过程。PI3K/Akt和MAPK/ERK信号转导通路是细胞内两条重要的促增殖和抗凋亡通路。PI3K-Akt信号通路在细胞内影响细胞生长、增殖、凋亡,丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)处于中心环节,活化的Akt可激活下游信号分子,包括抑制凋亡的Bcl-2蛋白和转录因子NF-κB。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路参与基因表达调控,细胞功能活动以及个各种生理病理过程。胞外信号调节激酶(ERK1/2)是哺乳动物中5条并行的MAPK信号通路之一,通过激活下游靶位,包括重要的转录因子NF-κB和细胞存活调节器Bcl-2,调控基因表达,从而发挥抑制凋亡的作用。本研究结果显示人胃癌中Akt、Erk、Bcl-2、NF-κB蛋白的阳性表达率均高于其癌旁组织,说明上调PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路的活性与胃癌的发生发展过程密切相关。     

斑蝥素通过抑制MAPK信号通路调控宫颈癌细胞凋亡、迁移及侵袭行为的机制

目的 宫颈癌是继乳腺癌、结肠直肠癌和肺癌之后的女性第四大癌症,严重影响女性身体健康和生活质量。中国是宫颈癌的高危地区之一。来源于大斑芫菁和眼斑芫菁干燥虫体的斑蝥素(cantharidin,CTD)具有抗肿瘤活性且可诱导多种肿瘤细胞凋亡。本文旨在探索斑蝥素对Hela宫颈癌细胞凋亡、迁移和侵袭方面的影响及其相关机制。 方法 CCK-8检测细胞活力;流式细胞术分析细胞凋亡;划痕实验检测细胞迁移;Transwell分析细胞侵袭;蛋白印迹检测P38、P-P38、P-MAPKAPK和P-Hsp27的表达。 结果 低浓度(<20 μM)的斑蝥素处理Hela细胞对细胞活力无明显影响,细胞存活率在80%以上。高浓度(>20 μM)的斑蝥素处理Hela细胞后会降低Hela细胞活力,细胞存活率在80%以下。与对照组相比,5、10、20 μM斑蝥素组细胞凋亡率依次升高(均P<0.05)。斑蝥素(5、10 μM)处理Hela细胞后,细胞迁移和侵袭能力明显减弱(均P<0.05);20 μM斑蝥素处理Hela细胞后,细胞迁移和侵袭能力减弱更明显(P<0.01)。与对照组相比,5 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达明显降低(均P<0.05);10 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达显著降低(均P<0.01);20 μM斑蝥素组P-P38/P38的比值、P-MAPKAPK和P-Hsp27表达降低更明显(均P<0.001)。 结论 斑蝥素可通过抑制MAPK信号通路提高Hela宫颈癌细胞的凋亡,降低细胞迁移及侵袭能力。      

小鼠初级精母细胞GC-2中TUBB4B的表达及其对NF-κB和MAPK信号通路的调控

目的 探究微管蛋白（TUBB4B）与胞浆羧肽酶（CCP1）在小鼠初级精母细胞（GC-2）中的互相作用关系,以及TUBB4B在调控GC-2发育中的作用。方法 使用慢病毒感染GC-2细胞分别构建TUBB4B基因敲减组（TUBB4B-KD组）和阴性对照组（NCKD组）;TUBB4B基因过表达组（TUBB4B-OE组）与阴性对照组（NC-OE组）,利用嘌呤霉素筛选稳定细胞株。采用RT-qPCR和Western blot分别在m RNA和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功,并进一步探究在GC-2细胞中TUBB4B与CCP1二者之间相互调控的表达关系。CCK8及流式细胞术检测TUBB4B沉默和过表达后对GC-2细胞增殖及周期的影响;Western blot及细胞免疫荧光实验找出TUBB4B沉默和过表达后发生表达改变的信号通路因子,并在细胞水平上进行标记验证。结果 GC-2中与NC-KD(NC-OE)组相比,TUBB4B沉默和过表达后,CCP1在mRNA和蛋白水平上的表达均发生一致的性改变（P<0.05）;同样CCP1敲减和恢复表达后与NC组相比,TUBB4B的表达也随之发生一致的性改变（P&...     

黄芩苷对哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路影响初探

目的：初步探讨黄芩苷防治支气管哮喘的作用机理。方法用卵蛋白致敏大鼠制备支气管哮喘动物模型,经黄芩苷干预治疗,运用免疫组化法及 Western Blot 法检测各组大鼠肺组织匀浆中 p38 MAPK 磷酸化蛋白表达量。结果两种检测方法均显示,p38 MAPK 磷酸化蛋白水平在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的 p38 MAPK 磷酸化蛋白水平均低于模型组（P ＜0．05）。结论黄芩苷能有效治疗哮喘的作用与抑制哮喘大鼠 p38 MAPK 信号通路的表达密切相关。     

中医药调控MAPK经典信号通路辨治银屑病研究进展

银屑病发病机制复杂,涉及多基因、多细胞、多分子,通过级联反应将信号进行逐层传递,从而形成与疾病相关的多种生物学通路,对于银屑病相关信号通路的研究已经成为探索疾病发病机制和药物干预的核心方式。丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPK）信号通路是真核生物信号传递网络中的重要途径之一,是细胞增殖、分化、细胞凋亡及应激反应的关键信号通路,参与疾病炎症反应、免疫调控等环节。在银屑病患者皮损中,MAPK及其亚族ERK、p38、JNK和BMK1的生物活性及表达水平升高,将MAPK信号通路作为切入点和突破口,有助于重新梳理和发现银屑病微观机制的上下游相关靶点调控方式,不断延伸对银屑病机制的探索。近年来,中医药界开展了大量研究,探索中医药通过调控MAPK通路治疗银屑病的机制,结果表明MAPK通路是中医药治疗银屑病的关键靶通路。该文通过对具有消、清、补功效的中药复方制剂及丹皮酚、紫草素、靛蓝、白鲜碱、苦参碱、芳姜黄酮、雷公藤多苷、羟基红花黄色素A等中药有效成分参与下的MAPK信号通路的靶位进行研究,整合不同细胞因子如白细胞介素（IL）-6、IL-17...     

TGF-β1对HepG2细胞表达VEGF的作用

目的：研究ERK在TGF-β1刺激肝癌细胞表达血管内皮生长因子中的作用。方法：体外培养肝癌细胞系HepG2，施加外源性TGF-β1，并使用细胞外信号调节激酶ERK1／2的特异性阻断剂。免疫组化以及RT-PCR检测VEGF。蛋白和mRNA的表达。结果：与空白对照组比较，施加外源性TGF-β1能够使肝癌细胞VEGF的蛋白及mRNA的表达显著增多，但是同时使用阻断剂组的VEGF mRNA表达与TGF组相比没有明显差异。结论：TGF-β1刺激肝癌细胞HepG2表达VEGF可能通过ERK／MAPK以外的信号通路实现。     

骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠RANKL/OPG平衡及MAPK信号通路的影响

目的 观察骨碎补总黄酮对去卵巢大鼠核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响.方法 选用雌性大鼠45只,分为假手术组(15只)和手术组(30只),手术组行双侧卵巢切除术,造模12周时测定BMD,确认OP复制成功后,将手术组大鼠又随机分为模型组和骨碎补总黄酮给药组,每组均15只;给药组大鼠给予骨碎补总黄酮灌胃,持续时间为12周,模型组和假手术组同时给予等量生理盐水灌胃;实验结束后测定大鼠的BMD,ELISA法检测大鼠血清RANKL、OPG含量, RT-PCR检测大鼠骨组织RANKL、OPG mRNA表达,Western blot法检测骨组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK (p38)、细胞外调节激酶(ERK)的磷酸化水平及c-Fos表达.结果 干预治疗12周后:(1)与假手术组相比,模型组大鼠左、右股骨BMD降低(P<0.05),血清RANKL含量增加、OPG含量降低、RANKL-OPG比值增大(P均<0.05),骨组织RANKL mRNA表达增加、OPGmRNA表达减少(P均<0.05).(2)与模型组比较,假手术组和骨碎补总黄酮治疗组左、右股骨BMD均增加(P均<0.05),血清RANKL含量降低、OPG含量增加、RANKL-OPG比值减小(P均<0.05),骨组织RANKL mRNA表达减少、OPG mRNA表达增加(P均<0.05),且假手术组和骨碎补总黄酮治疗组之间比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)与模型组比较,假手术组和骨碎补总黄酮治疗组大鼠骨组织P-JNK、c-Fos表达降低(P均<0.05),但这两组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 骨碎补总黄酮可增加去卵巢大鼠骨密度,其途径可能是通过调节RANKL-OPG平衡、抑制JNK磷酸化及c-Fos表达实现的.     

肝纤维化中MAPK信号转导通路对肝星状细胞活性的影响

肝纤维化（liver fibrosis）作为共同的病理学基础存在于一切慢性肝病中,肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）在所有肝纤维化病变的形成过程中起至关重要的作用。引起肝纤维化的细胞外基质（extracellularmatrixc,ECM）主要来源于HSC,它能在炎症、外界的物理化学因素、缺氧、肝损伤等刺激下分泌一些细胞因子,     

p38 MAPK信号传导通路与胚泡植入的研究进展

胚泡植入是生殖过程的关键环节，是指在特定的植入窗口期，胚泡定位、附着并侵入子宫内膜的全过程，也是人类和哺乳动物妊娠早期母体和胚胎建立密切的营养和信息交流的关键环节。关于胚泡植入机制的研究不仅是生殖生物学中的一个极其重要的理论问题，而且是生育、不育和计划生育中的一个重要应用课题。国内外许多专家学者对此进行了广泛深入的研究。     

Notch信号通路对肌成纤维细胞转化中α-SMA表达变化的影响

目的 探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT抑制Notch信号后,肌成纤维细胞标志因子α-SMA表达的变化,及Notch信号在肌成纤维细胞转化中的作用.方法 采用胰酶消化法,从新出生2～3 d的SD大鼠肺组织中分离肺成纤维细胞,波形蛋白(Vimentin)免疫细胞化学法鉴定培养至第3代的成纤维细胞的纯度,再将细胞分为对照组、TGF-β1组、TGF-β1+DAPT组;TGF-β1组及TGF-β1+DAPT组加入5 ng/mL的TGF-β1诱导成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,TGF-β1+DAPT组同时加入500 nmol/L的DAPT抑制Notch信号的表达;分别采用RT-PCR法检测α-SMA的mRNA表达变化,Western-blot法检测α-SMA蛋白的表达变化;采用SPSS 18.0统计软件进行统计学分析,两样本均数比较采用t检验,多个样本均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验.结果 Vimentin免疫细胞化学:几乎100％细胞胞浆内可见棕黄色颗粒及条纹;TGF-β1组α-SMA的mRNA和蛋白的相对吸光度值分别为(0.8510.027)和(0.7850.020),均较对照组(0.3950.018)和(0.3910.022)明显升高;TGF-β1+DAPT组的mRNA和蛋白的相对吸光度值分别为(0.3540.029)和(0.3970.016),均较TGF-β1组显著下降,但与对照组比较无明显差异.结论 TGF-β1可以诱导肺成纤维细胞转化为肌成纤维细胞,DAPT可以阻止成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化,进而抑制肺纤维化.     

电针预处理抗心肌缺血再灌注损伤及其对MAPK信号通路的影响

目的探讨电针(EA)预处理抗心肌缺血再灌注(I/R)损伤及其大鼠MAPK信号通路的影响。方法 SD大鼠随机分为6组:假手术组(SO)、电针内关穴+SO组(ES)、电针非经非穴+SO组(NS)、I/R组(I/R)、电针内关穴+I/R组(EA)、电针非经非穴+I/R组(NA),每组6只。ES、EA电针内关穴,NS、NA电针鼠尾,连续治疗12d后造模。I/R、EA、NA组均结扎左前降支建立心肌I/R模型,SO、ES、NS组均开胸不结扎。手术过程中监测心电图,测血清肌酸激酶同工酶(CK-Mb),用Western blot检测MAPK信号通路相关蛋白的表达水平。结果与SO组比较,I/R组大鼠血清CK-Mb水平、心律失常评分、蛋白PSAPK/JNK、P-P44/42和Ras表达均增加(P0.05),而P-P38水平减低(P0.05)。与I/R组比较,EA、NA组CK-Mb水平均降低,EA组心律失常评分明显减少(P0.05),EA、NA组P-P44/42和Ras表达均下调(P0.05),而P-P38水平增高(P0.05)。结论电针预处理能有效保护心肌抗I/R损伤,该效应可能与其调节受损心肌组织中MAPK信号通路密切相关。     

氯胺酮通过p38 MAPK信号通路对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨氯胺酮通过p38 MAPK信号通路对乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响.方法:以乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,根据细胞培养基添加氯胺酮和p38 MAPK抑制剂(SB203580)分为4组:control组(无氯胺酮和SB203580)、氯胺酮组(10μg/mL)、SB203580组(20μmol/L...