补肾中药基于OPG/RANKL/RANK信号通路对原发性骨质疏松症作用机制的研究进展

原发性骨质疏松症(primary osteoporosis,POP)是老年男性及绝经后女性常见的退行性骨代谢疾病,其并发症所导致的致残率或致死率已成为全球公共难题。骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)信号通路与骨代谢有着密切的联系。中药通过该信号通路治疗POP具有明显的优势,尤以补肾类中药最为突出。但是,关于补肾中药基于该信号通路治疗POP的调节机制仍然缺乏相对全面且系统的归纳总结。因此,基于OPG/RANKL/RANK信号通路在骨代谢的调节机制,从单味中药及中药复方的角度综述补肾中药防治POP的作用机制,为今后POP相关基础及临床研究提供理论依据。     

治尪汤联合甲氨蝶呤调节RANKL/OPG通路改善胶原诱导关节炎大鼠骨破坏的作用机制

目的 探究治尪汤联合甲氨蝶呤改善胶原诱导关节炎模型（CIA）大鼠的骨破坏作用及机制。方法 SD雄性大鼠随机分为正常组，模型组，甲氨蝶呤组（1.5 mg·kg^-1），甲氨蝶呤+治尪汤低（40.8 g·kg^-1），高（102.0 g·kg^-1）剂量组。除正常组外，其余大鼠分别于第1，7天尾部注射浓度为2 g·L^-1的Ⅱ型胶原乳剂50 μL建立CIA模型；第8天开始连续给药21 d，每7 d检测1次体质量、足趾厚度，进行关节炎指数（AI）评分，酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-6（IL-6），白细胞介素-1β（IL-1β）含量，抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测踝关节破骨细胞的数量，免疫组化（IHC），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（Western blot）检测踝关节核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL），骨保护素（OPG）的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠体质量显著降低（P<0.01），足趾厚度显著增加（P<0.01），踝关节AI评分显著增加（P<0.01），血清TNF-α，IL-6，IL-1β含量显著升高（P<0.01），踝关节破骨细胞数量显著增加（P<0.01），踝关节RANKL mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.01），OPG mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05），RANKL/OPG显著升高（P<0.01）。与模型组比较，甲氨蝶呤+治尪汤低、高剂量可改善大鼠体质量，降低足趾厚度，AI评分，RANKL mRNA和蛋白表达并增加OPG mRNA和蛋白表达，使RANKL/OPG降低（P<0.05，P<0.01），且甲氨蝶呤+治尪汤高剂量效果最好，甲氨蝶呤+治尪汤低剂量次之，甲氨蝶呤再次之。结论 治尪汤联合甲氨蝶呤能更好地改善类风湿关节炎的骨破坏，可能是通过抑制RANKL/OPG通路实现的，本研究为中西医结合方案治疗类风湿关节炎骨破坏提供了实验基础。     

关节炎疗效及对患者血清MMP-3及RANK/RANKL/OPG表达的影响

目的观察和痹方联合甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对肝脾失调型早期类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）疗效及患者血清基质金属蛋白酶3（matrix metalloproteinase 3,MMP-3）及核因子-κB受体活化因子（receptor activator of NF-κB,RANK）/核因子-κB受体活化因子受体（RANKL）/骨保护素（osteoprotegerin,OPG）表达的影响。方法采用随机数字表法将72例肝脾失调型早期RA患者分为治疗组及对照组,每组36例,对照组采用MTX治疗,治疗组在此基础上联合和痹方治疗,两组MTX从7.5 mg逐渐加至12.5 mg,每周1次,疗程24周。观察两组ACR20改善率、中医证候疗效、类风湿因子（rheumatoid factor,RF）、血沉（ESR）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、抗环瓜氨酸肽抗体（anti-cyclic citrullinated peptide antibody,CCP）及血清MMP-3、OPG、RANKL表达水平,并观察不良反应。结果治疗组ACR20达标率为82.86%（29/ 35）,中医证候疗效有效率为85.7% （30/ 35）,均明显高于对照组的51.52%（17/ 33）和 63.6%（21/ 33）,两组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。与本组治疗前比较,两组治疗后RF、ESR、CRP、MMP-3及RANKL水平降低,OPG水平升高（P<0.05, P<0.01）。与对照组比较,治疗组治疗后RF、ESR、CRP及RANKL均降低,差异均有统计学意义（P<0.01, P<0.05）。治疗组1例出现肝功能异常,对照组1例出现白细胞减低,2例出现肝功能异常。结论和痹方联合MTX可改善肝脾失调型早期RA患者的症状,调控RANK/RANKL/OPG系统诱导的骨质破坏。     

OPG/RANK/RANKL系统与骨质疏松症的相关研究进展

骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)和核因子κB受体活化因子配体(receptoractivator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)系统是近年来发现的一组调控破骨细胞分化激活的细     

湿热痹清丸治疗类风湿关节炎湿热痹阻证的临床观察及对OPG/RANKL/RANK通路和TNF-α的影响

目的 通过研究湿热痹清丸治疗类风湿关节炎湿热痹阻证的临床疗效及对患者血清骨保护素（OPG）、核转录因子-κB受体活化因子配体（RANKL）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响,从骨破坏的角度探讨其作用机制。方法 采用随机数字表法将纳入的类风湿关节炎湿热痹阻证患者分为两组,每组各36例患者。对照组给予口服甲氨蝶呤片、塞来昔布胶囊治疗;治疗组在对照组的基础上配合口服中成药湿热痹清丸治疗,其治疗周期为3个月。分别记录治疗前和治疗后疼痛视觉模拟（VAS）评分、关节压痛数、关节肿胀数、疾病活动度评分（DAS28-ESR）、中医症状量化积分及相关不良反应并检测外周血清OPG、RANKL、TNF-α、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）水平。结果 治疗后,治疗组总有效率为88.57%（31/35）,对照组总有效率为79.41%（27/34）,治疗组总有效率高于对照组（Z=-2.089,P<0.05）。与本组治疗前比较,两组疼痛VAS评分、关节压痛数、关节肿胀数及DAS28-ESR均明显降低（P<0.05）;治疗后与对照组比较,治疗组疼痛VAS评分、关节压痛数、关节肿胀数及DAS28-ESR改善更明显（P<0.05）。与本组治疗前比较,两组中医症状量化积分明显降低（P<0.05）;治疗后与对照组比较,治疗组中医症状量化积分降低更明显（P<0.05）。与本组治疗前比较,两组RANKL、TNF-α、ESR、CRP水平均明显降低,OPG水平明显升高（P<0.05）;治疗后与对照组比较,治疗组RANKL、TNF-α、ESR、CRP水平降低更明显,OPG水平升高更明显（P<0.05）。在本次临床试验期间未出现任何严重不良事件及严重不良反应。结论 湿热痹清丸可以有效改善湿热痹阻型类风湿关节炎患者的临床症状,有较好的安全性;湿热痹清丸可以有效调控OPG/RANKL/RANK系统,同时降低促炎因子TNF-α,这有可能是其干预RA骨破坏的作用机制。     

基于OPG/RANK/RANKL信号通路防治股骨头坏死的中医药研究进展

股骨头坏死（ONFH）是由于股骨头内的供血发生损害,细胞组织等发生变性,逐渐造成骨结构被破坏,股骨头进行性塌陷引起的疼痛及功能障碍性疾病。ONFH的主要病理机制在于微循环损害细胞组织能力下降、骨的吸收与新生骨的重建之间的平衡被破坏,其生物力学发生改变,加速股骨头坏死的病理进展。早期临床表现并不明显,主要为髋部或腹股沟区疼痛或酸痛,休息后可缓解,疾病发展后期可出现疼痛加剧,肢体短缩,下肢无力,行走困难或跛行。目前临床上西医常用促骨形成药、抗凝药和人工关节置换等治疗,但也存在假体松动、感染等诸多问题。研究表明,中医药治疗ONFH从整体出发,应用多功能、多靶点、多系统的中药治疗,保障了治疗途径的安全性和有效性。骨保护素（OPG）/核转录因子-κB受体活化因子（RANK）/核转录因子-κB受体活化因子配基（RANKL）信号通路在维持骨重建的动态平衡中具有关键地位,该通路利用中医药等治疗方式促进生物体内破骨细胞凋亡,减少骨吸收,加速骨形成,对于防治ONFH具有重要作用。该文通过查阅国内外相关文献,对OPG/RANK/RANKL信号通路影响相关细胞因子表达在ONFH中的作用,中药单体、中药复方及中药复方联合物理治疗增加成骨细胞分泌,促进OPG表达,提高细胞因子等表达水平,抑制破骨细胞活性等方式以防治ONFH的研究现状进行综述,为中医药防治ONFH提供新的思路和方向。     

壮骨止痛方对骨质疏松大鼠Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路的影响

目的探讨壮骨止痛方对骨质疏松雌鼠Wnt/β-链蛋白(Wnt/β-catenin)、核因子κB受体活化因子配体/核因子κB受体活化因子/骨保护蛋白(RANKL/RANK/OPG)信号通路的影响。方法将大鼠分为假手术组、模型组、壮骨止痛方高剂量组、壮骨止痛方低剂量组、雌二醇组,用酶联免疫法测定大鼠血清中β-catenin、OPG、RANKL的水平。结果模型组大鼠血清β-catenin明显降低,RANKL/OPG比值升高,经壮骨止痛方药物干预后,β-catenin水平明显升高,RANKL/OPG比值明显下降。结论壮骨止痛方可能通过提升大鼠血清β-catenin的含量,降低RANKL/OPG的比值,从而激活Wnt/β-catenin、RANKL/RANK/OPG信号通路,起到防治骨质疏松的作用。     

补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响

目的研究补肾通督胶囊对胶原诱导关节炎大鼠RANK/RANKL/OPG系统的影响,为中医药治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法 RA动物模型选用胶原诱导关节炎模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、补肾通督胶囊低剂量组(BSL)、中剂量组(BSM)、高剂量组(BSH)和雷公藤组6组,每组7只大鼠。造模后13天开始给药,BSL、BSM及BSH组分别给予120、240及480 mg/(kg·d)的补肾通督胶囊灌胃,雷公藤组给予雷公藤多苷片24 mg/(kg·d)灌胃。各组每天灌胃1次,每次2 m L。正常对照组和模型组给予2 m L的生理盐水灌胃。共灌胃18天。于31天取材,制作踝关节TRAP切片,采用ELISA法检测血清核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)、OPG巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)。结果与正常对照组比较,模型组大鼠踝关节病理切片的阳性反应、炎症和骨破坏程度显著提高(P<0.01),血清RANKL和M-CSF水平皆有显著上升(P<0.01),而OPG和OPG/RANKL水平皆有显著降低(P<0.01)。与模型组比较,BSH组和雷公藤组阳性反应、炎症和骨破坏评分也显著下降(P<0.01);而BS各组和雷公藤组RANKL和M-CSF均显著下调,而OPG和OPG/RANKL均显著上调,差异有统计学意义(P<0.01)。与雷公藤组比较,正常组M-CSF较低,而OPG和OPG/RANKL均较高,差异有统计学意义(P<0.01),而模型组和BS各组RANKL和M-CSF均显著上调,而OPG和OPG/RANKL均显著下调(P<0.01)。结论补肾通督胶囊对于关节炎大鼠缓解骨破坏的机制,可能是通过对破骨细胞的调控起作用。     

赤雹根总皂苷对类风湿性关节炎大鼠血清OPG/RANKL水平的影响

目的:观察赤雹根总皂苷(TSTR)对佐剂性关节炎(AA)模型大鼠血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响,探讨TSTR治疗类风湿性关节炎的机制.方法:SD大鼠,随机取10只作为空白对照,其余大鼠采用弗氏完全佐剂制备关节炎模型,将造模成功的关节炎大鼠随机分为模型对照组、TSTR 40,80,160 mg·kg-1·d-1剂量组、雷公藤多苷12 mg·(kg·d)-1阳性对照组.各组分别ig给予相应的药物,模型对照组ig等容积的水.连续ig给药21 d后处死.采用ELISA法检测血清OPG,RANKL水平.结果:TSTR各剂量组大鼠血清RANKL水平分别为(98.74 ±10.17),(87.81±17.78),(77.75±14.61) pmol·L-1,均显著低于模型组(120.80±12.14) pmol·L-1(P ＜0.05或P＜0.01);TSTR各剂量组血清OPG水平分别为(71.67 ±2.62),(77.50 ±0.93),(91.04±7.26) pmol·L-1,均显著高于模型组(53.64 ±3.46)pmol·L-1(P＜0.05或P＜0.0l);TSTR各剂量组OPG/RANKL比值分别为0.71 ±0.08,0.89±0.17,1.13 ±0.24,显著高于模型对照组0.43±0.06(P＜0.05或P＜0.01).结论:TSTR可能通过影响OPG/RANKL系统而对破骨细胞功能产生影响,从而防治骨破坏.     

仙灵骨葆胶囊对去卵巢骨折大鼠骨折端骨微结构的影响及OPG/RANKL信号调控机制

目的 研究仙灵骨葆胶囊对去卵巢大鼠骨折端骨微结构的影响及骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配基(RANKL)信号调控机制.方法 从48只Sprague-Dawley雌鼠中随机挑出40只切除双侧卵巢,恢复性饲养6周后建立股骨骨折内固定模型,建模大鼠随机分为模型组,阳性对照组及仙灵骨葆胶囊高、中、低剂量组,余下8只...     

灯盏花对成骨细胞及破骨前体细胞OPG/RANKL/RANK表达的影响

目的 研究不同浓度和不同作用时间的灯盏花对体外培养的成骨细胞和破骨前体细胞中OPG/RANKL/RANK mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨灯盏花对骨改建的作用及其机制。方法 体外培养人MG63细胞和小鼠RAW264.7细胞,分别取第三代细胞分为对照组和不同的实验组,分别应用不同浓度的灯盏花（0、0.001、0.01、0.1、1 mg/mL）干预48 h后提取总RNA和蛋白质,同时单独对0、1 mg组设12、24、48 h时间点提取蛋白质,采用半定量RT PCR方法检测MG63细胞OPG mRNA和RANKL mRNA的表达以及RAW264.7细胞RANK mRNA的表达,采用Western blot法检测MG63细胞OPG蛋白和RANKL蛋白的表达以及RAW264.7细胞RANK蛋白的表达。结果 灯盏花随浓度（0、0.001、0.01、0.1、1 mg/mL）增高,干预48 h后MG63细胞OPG mRNA和蛋白表达逐步降低（P〈0.05）;MG63细胞RANKL mRNA和蛋白表达逐步增加（P〈0.05）;RAW264.7细胞RANK mRNA表达增加（P〈0.05）,但0.1 mg/mL组较0.01 mg/mL组 mRNA表达稍降低,RANK蛋白表达逐步增加（P〈0.05）。1 mg/mL灯盏花干预12、24、48 h后MG63细胞OPG蛋白表达随时间逐步降低（P〈0.05）、RANKL蛋白表达随时间逐步增加（P〈0.05）;RAW264.7细胞RANK蛋白表达随时间逐步增加（P〈0.05）。结论 灯盏花大致上呈剂量和时间依赖性抑制成骨细胞OPG表达,促进成骨细胞RANKL的表达和破骨前体细胞RANK的表达,灯盏花可能有促进骨吸收的作用。     

补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织RANKL/OPG基因表达的影响

目的:研究补肾通络方对去卵巢骨质疏松模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)基因表达的影响,探讨补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的分子机制.方法:通过卵巢去势的方法造成大鼠骨质疏松模型,造模后随机分为6组:假手术组、模型组、仙灵骨葆组(5.0 g·kg-1)、补肾基础组(5.4 g·kg-1)、通络组(0.9 g·kg-1)、补肾通络组(6.3 g·kg-1).ig给药,1次/d,共10周.治疗10周后,在无菌条件下取出大鼠L3椎体,剔除软组织及骨膜,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测骨组织RANKL/OPG基因mRNA的表达.结果:与模型组相比,补肾通络组、补肾基础组、通络组RANKL mRNA表达明显下降,RANKL/OPG明显下降(P＜0.01),3组间比较,补肾通络组的干预作用明显优于补肾基础组与通络组(P＜0.05).结论:补肾通络方治疗原发性骨质疏松症的作用机制可能与调控RANKL mRNA表达,改善RANKL/OPG,从而抑制破骨细胞活性,降低骨吸收有关.     

补肾法对去卵巢大鼠OPG/RANK/RANKL信号通路影响的Meta分析

目的 随着全球老龄化趋势的发展,绝经后骨质疏松症（PMOP）已成为世界性的女性健康问题。目前常用的生物制剂存在不良反应多、无法长期用药等缺陷。多项Meta分析已证明补肾法对PMOP患者的安全性和有效性,但其治疗机制尚不明确。该文Meta分析评估基于PMOP动物模型的补肾法对骨保护素（OPG）/核转录因子（NF）-κB受体激活因子（RANK）/NF-κB受体激活因子配体（RANKL）信号通路的影响,为用补肾法治疗PMOP提供实验依据。方法 计算机检索PubMed,Ovid Medline,Embase,中国知网（CNKI）,维普和万方数据库,以收集检索从建库至2020年1月的研究,并对每篇纳入文章的研究质量进行了评估。根据SYRCLE的偏倚风险工具对每一篇纳入的文章的研究质量进行评价。使用RevMan 5.3软件根据Cochrane系统评价方法进行Meta分析。结果 包括619只大鼠的32项研究,纳入研究的质量分数都在3~5分。Meta分析结果表明,补肾法在增加骨密度（BMD）值方面优势明显［标准化均数差（SMD）=2.01,95%置信区间（CI）=1.50~2.52,P<0.000 01］。同时补肾法可增加卵巢切除（OVX）大鼠骨组织中血清OPG水平（SMD=3.33,95% CI=2.59~4.07,P<0.000 01）,提高OPG mRNA表达（SMD=11.81,95% CI=7.49~16.13,P<0.000 01）和促OPG蛋白生成（SMD=4.95,95% CI=3.09~6.81,P<0.000 01）。补肾法可以降低血清RANKL水平（SMD=-4.88,95% CI=-6.01~-3.75,P<0.000 01）和RANK水平（SMD=-7.30,95% CI=-9.53~-5.07,P<0.000 01）;补肾法还可降低骨RANKL mRNA（SMD=-6.22,95% CI=-8.95~-3.49,P<0.000 01）和骨RANK mRNA（SMD=-3.18,95% CI=-6.19~-0.18,P<0.05）及RANKL蛋白在骨组织中的表达（SMD=-3.99,95% CI=-5.47~-2.50,P<0.000 01）。结论 该研究发现补肾法在调节PMOP的动物模型中OPG/RANK/RANKL信号通路平衡方面具有重要优势,但仍然需要更多的样本,合理的设计和高质量的动物实验来进行进一步的验证。     

附子白术汤通过调节OPG/RANKL保护乳腺癌骨转移裸鼠骨损伤的研究

目的:从调节护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)系统探讨附子白术汤抑制乳腺癌骨转移骨损伤的机制.方法:采用左心室注射人乳腺癌骨转移细胞株(M DA-MB-231BO)细胞法建立乳腺癌骨转移裸鼠模型;随机分为模型组、唑来膦酸组、附子白术汤组、附子-白术药对组,另备止常裸鼠正常组(n=6).造模后第4天开始药物干预:唑来膦酸组sc唑来膦酸0.2 mg·kg-1;模型组、附子白术汤组、附子-白术药对组、正常组,分别ig给予生理盐水20 mL·kg-1、附子白术汤5.6 g·kg-1、附子-白术药对煎液2.4 g·kg-1、生理盐水20 mL·kg-1;每周3次,持续6周.观察各组裸鼠体重、骨转移灶病理和OPG,RANKLmRNA表达变化.结果:①与模型组比较,附子-白术药对组与附子白术汤组骨转移个数、骨转移率及体重下降率均明显下降(P＜0.05),骨转移灶中TRAP(+)细胞数量均减少(P＜0.01),OPG mRNA表达含量上调(P＜0.01),RANKLmRNA表达含量及二者比值降低(P＜0.01);②与附子白术汤组比较,附子-白术药对组骨转移个数、骨转移率、体重下降率、骨转移灶中TRAP细胞数量,OPG mRNA,RANKL mRNA表达含量及其比值均无统计学差异.结论:附子白术汤和附子-白术药对均可通过调节OPG/RANKL系统,减少破骨细胞的数量并抑制其活性,从而减轻乳腺癌骨转移裸鼠溶骨性损伤;附子-白术药对与附子白术汤功效相近,可能是附子白术汤的核心药物.     

基于核因子-κB受体活化因子受体/骨保护素探讨复方雷公藤外敷剂改善Ⅱ型胶原诱导型关节炎模型大鼠骨破坏

目的:观察复方雷公藤外敷剂对Ⅱ型胶原诱导型关节炎模型大鼠的骨形态学影响，探讨其可能的作用机制。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为正常组(NOR组)、模型组(CIA组)、复方雷公藤外敷剂组(TWE组)、雷公藤多苷组(TWG组)、扶他林乳胶剂组(VOT组),每组10只。除NOR组外，对其余大鼠进行尾根部皮下注射Ⅱ型胶原诱导，7 d后加强免疫造模。TWE组以0.60 g/(kg·d)外用、TWG组6.25 mg/(kg·d)灌胃、VOT组乳胶剂0.016 mL/(kg·d)外用，NOR组与CIA组以生理盐水涂抹膝踝关节，连续给药28 d。观察大鼠一般状态、双下肢肿胀程度；观察各组膝、踝关节病理形态，借助微型计算机断层扫描(micro-CT)观察骨质改变，采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定、蛋白免疫印迹法(Western Blot)观察外周血及组织骨破坏与骨保护相关因子与蛋白表达。结果:与NOR组比较，CIA组一般状态不佳，关节炎评分与足趾容积均显著增高，micro-CT显示踝关节、跖趾关节破坏严重，血清MMP1、MMP13、RANKL显著增高，滑膜组织中RANKL/OPG显著升高。与CIA...     

痹痛定分散片对AA模型骨组织OPG、RANKLmRNA表达的影响

目的通过观察痹痛定分散片对BALB/C小鼠AA模型骨组织中的骨保护素（OPG）、细胞核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）mRNA相对表达水平的影响,探讨其防治类风湿关节炎骨质破坏的作用机制。方法取BALB/C种小鼠48只,以Freund’s完全佐剂致炎,复制AA模型,随机分为6组,采用半定量RT-PCR法检测骨组织OPG、RANKLmRNA表达水平的变化。结果各治疗组均能有效降低骨组织RANKLmRNA表达水平,升高OPGmRNA表达水平,RANKL/OPGmRNA比值降低,与正常对照组比较（P〈0.01）,各组与模型对照组比较（P〈0.01）,且痹痛定分散片大剂量、中剂量组优于小剂量组和痹痛定胶囊组。结论痹痛定分散片能明显增加骨组织OPGmRNA表达量,抑制骨组织RANKLmRNA表达量,降低RANKL/OPGmRNA比值,从而有效延缓类风湿关节炎骨质破坏。     

补肾强督方含药血清对强直性脊柱炎OPG/RANKL通路的作用

目的探讨补肾强督方对强直性脊椎炎(ankylosing spondylitis,AS)骨保护素和核转录因子-κB受体活化因子配基(osteoprotegerin receptor activator for nuclear factorκB ligand,OPG/RANKL)通路的作用机制。方法选取2009年1-5月卫生部中日友好医院中医风湿病科门诊和住院活动期AS患者30例,予补肾强督方,每天1剂,早晚分两次口服,连续3个月;另选取健康志愿者30名。采集治疗前后患者血清及健康人血清。将成骨细胞hFOB1.19分为患者治疗前组、治疗后组及健康人组(对照组)。各组细胞分别于含相应血清的基础培养基中进行培养。取成骨细胞培养上清液,采用ELISA法检测成骨细胞OPG/RANKL含量及mRNA表达,采用RT-PCR检测OPG/RANKL蛋白表达。结果与对照组比较,治疗前组成骨细胞OPG含量、OPG mRNA及蛋白表达、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达均降低,RANKL mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与治疗前组比较,治疗后组OPG含量、OPGmRNA及蛋白表达、OPG/RANKL mRNA及蛋白表达升高,RANKL mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 AS患者血清能直接抑制成骨细胞OPG表达、促进RANKL表达、下调OPG与RANKL比率,补肾强督方治疗后的血清能直接促进成骨细胞表达OPG,抑制表达RANKL,上调OPG与RANKL比率,补肾强督方可能是通过直接上调成骨细胞OPG/RANKL而抑制破骨细胞分化和功能,达到促进骨生成,抑制骨吸收。     

补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周膜OPG和RANKL影响的研究

目的 观察补肾活血固齿方对牙周炎大鼠牙周组织及牙周膜骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨补肾活血固齿方治疗牙周炎的作用机制。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为空白组、牙周炎组、补肾活血固齿方组,每组8只。牙周炎组和补肾活血固齿方组大鼠采用牙周结扎联合喂食黏软食物和高糖水的方法建立牙周炎模型。造模成功后,补肾活血固齿方组给予补肾活血固齿方灌胃,空白组、牙周炎组给予等量生理盐水灌胃。连续灌胃4周后,切取各组大鼠上颌骨第一磨牙牙体牙周组织制作组织切片,HE染色观察牙周组织病理形态,免疫组化染色观察牙周膜组织中OPG和RANKL阳性表达情况。结果 HE染色显示：空白组大鼠牙周组织结构比较完整,牙龈组织无明显炎症细胞浸润,结合上皮无根方移位,破骨细胞少见,无牙槽骨吸收;牙周炎组大鼠牙龈上皮内炎症细胞增多,毛细血管扩张,牙龈结合上皮向根方移位,形成牙周袋,破骨细胞增多,牙槽骨有吸收;与牙周炎组比较,补肾活血固齿方组大鼠炎症细胞浸润减少,牙龈结合上皮部分恢复,牙周袋变浅,牙槽骨边缘破骨细胞数减少,有成骨细胞产生。补肾活血固齿方组OPG平均光密度值明显高于空白组...     

基于OPG/RANKL及Notch1信号通路探讨温针灸对膝骨性关节炎兔软骨下骨损伤的影响

目的：观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响，探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法：选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组。采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型。经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构，蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达，实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量。结果：与模型组比较，药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整，结构较为清晰，软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀。与空白组比较，模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较，药物组和温针灸组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显降低，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高，差异具有统计学意义(P<0.01)。温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：温针灸可促进OPG表达，抑制RANKL及Notch1表达，通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路，减轻KOA兔软骨下骨的损伤，从而起到治疗KOA的作用。     

盘龙七片调节骨保护素/核因子κB受体活化因子配体信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的:探讨盘龙七片对去卵巢骨质疏松大鼠骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路的影响.方法:75只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物对照组(17β-雌二醇,1 mg/kg)、盘龙七片低剂量组(0.26 g/kg)、盘龙七片高剂量组(1.29 g/kg),每组15只,除假手术组外,...