白术组培快繁技术

白术外植体诱导及植株再生试验结果表明:NAA为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导和芽分化的主导因子;MS BA 1.0 mg/L NAA 0.3 mg/L GA30.2 mg/L为白术叶片、叶柄愈伤组织诱导、芽分化的最佳培养基;腋芽增殖的培养基以MS BA 0.3 mg/L IBA 0.5 mg/L较为理想,诱导率达95%;1/2MS IBA 0.1~0.5 mg/L为白术试管苗生根的最佳培养基,生根率在90%以上;试管苗移栽成活率达90%以上。     

凹叶厚朴快繁技术体系的建立

目的建立凹叶厚朴Magnolia officinalis subsp.biloba快速繁殖体系。方法以选育的优质凹叶厚朴种胚为初始外植体,采用单因素及正交试验筛选不同基本培养基,不同植物调节剂(6-BA、NAA、IBA、IAA),获取最适种胚启动培养基,丛芽增殖培养基和生根培养基。结果适宜种胚萌发的启动培养基为B5+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L,出芽率达87.0%;适合丛芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,增殖系数可达6.2;适合生根的培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg/L,30 d生根率可达84%。结论建立了凹叶厚朴快速繁殖体系,为凹叶厚朴优质种苗的工厂化育苗奠定了基础。     

对叶百部总生物碱对辣椒素致豚鼠咳嗽的影响

研究对叶百部总生物碱对辣椒素致豚鼠咳嗽的影响。方法豚鼠灌胃给予对叶百部总生物碱(5、10、20 mg/kg)或磷酸可待因(10 mg/kg)3 d后,采用辣椒素喷雾复制咳嗽模型,记录咳嗽次数和咳嗽潜伏期。ELISA法检测空腹血清和肺组织中P物质(SP)水平,HE染色观察气管和肺组织的病理变化。结果与正常组比较,模型组豚鼠血清和肺组织SP水平增加(P<0.01),气管和肺组织均出现不同程度损伤,气管黏膜增厚和肿胀,肺泡萎陷;与模型组比较,对叶百部总生物碱组豚鼠咳嗽潜伏期延长,咳嗽次数减少(P<0.01),血清和肺组织SP水平降低(P<0.01),气管和肺组织病理损伤明显减轻。结论对叶百部总生物碱可拮抗辣椒素所致豚鼠咳嗽反应,其机制可能与该成分可减轻辣椒素对呼吸系统的损伤、抑制神经肽SP表达有关。     

丹参组培快繁技术研究

选择不同外植体研究丹参组织培养中,不同激素水平对组织生长、分化、试管苗生根等的影响.结果表明:以叶片为外植体,接种在MS 6-BA 0.8～1.0 mg/L培养基上,丛生芽分化率为98%～100%,且所需时间较短;茎尖接种用MS 6-BA0.2～1.0 mg/L培养基,成苗率达95%以上;试管苗生根以MS IBA1.0 mg/L KT 1.0 mg/L最好,高达99%.     

北五味子快繁体系的建立

目的探究一种北五味子快速繁殖的方法。方法通过正交试验对北五味子的组织培养进行研究,得出北五味子的快速繁殖的最适培养基。结果在MS培养基上附加NAA 0.3 mg/L+ZT 0.1 mg/L+6-BA 1.5 mg/L时芽的增殖效果最好;而附加NAA 0.2 mg/L时,生根效果最佳。最适培养条件为温度25℃、光照强度为2 000 lx,光周期12 h。结论本研究所得最适培养基以及培养条件可用来提高北五味子产量及质量。     

对叶百部中氧化对叶百部碱的分离鉴定及测定

目的分离纯化对叶百部药材指标成分氧化对叶百部碱,并建立其定量测定方法。方法对叶百部乙醇提取液浓缩后经盐酸溶解和氨水洗,再经三氯甲烷萃取。柱分离采用Phenomenex Gemini C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250mm),以乙腈-水(45∶55)为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长242 nm,柱温30℃。结果分离得到氧化对叶百部碱单体化合物作为定量测定对照品,该成分在0.282².82μg范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均加样回收率为99.63%(RSD=1.9%)。结论方法快速简便,可靠,重复性好,为对叶百部药材的质量控制提供依据。     

对叶百部茎叶的生药鉴定

目的 时对叶百部茎、叶进行生药鉴定研究,为进一步深入研究与开发利用提供依据.方法 性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定.结果 时叶百部茎的维管束为周木型,叶肉内舍有草酸钙柱晶等特征.结论 以上特征可作为对叶百部茎、叶鉴定的参考依据.     

对叶百部多糖的提取及其抗氧化活性研究

目的对对叶百部多糖(STP)的抗氧化作用进行研究。方法以水提醇沉法提取对叶百部多糖,采用分光光度法研究对叶百部多糖在不同体系中对超氧阴离子自由基(.O2-)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基(DPPH.)的清除作用。结果对叶百部多糖对.O2-、.OH和DPPH.均具有一定的清除作用,其IC50分别为(218.6±16.1),(319.1±18.2)和(375.3±16.4)μg/ml。结论对叶百部多糖对自由基的清除作用存在明显的量效关系,具有较好的抗氧化活性。     

水半夏组培快繁体系的建立

目的建立水半夏的组培快繁体系,为快速、大量生产水半夏种苗提供基础。方法利用不同植物激素配比的培养基,以水半夏块茎为外植体进行试验。结果愈伤培养基MS+NAA 0.2 mg/L+KT 1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L可成功诱导水半夏愈伤组织;丛生芽培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L诱导不定芽效果较好,增殖倍数高;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.4 mg/L+KT 0.2 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L+AC 0.3 g/L,有利于水半夏不定根的快速形成,12～14周即可获得再生水半夏植株。培养基MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂6 g/L为诱导水半夏分化一次性成苗的最佳激素配比,5～6周可形成试管苗,10周后可用于炼苗。结论建立的水半夏组培快繁体系为水半夏优良品种的快速繁殖奠定基础,且可应用于工厂化生产水半夏种苗。     

天门冬组培快繁体系研究

目的 建立天门冬组培快速繁殖体系,保护和合理利用天门冬资源.方法 采用不同基本培养基和不同种类及质量浓度的植物生长调节剂对天门冬不同外植体进行愈伤组织诱导、丛生芽诱导及生根培养研究.结果 愈伤组织诱导的最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,pH 5.8;丛生芽诱导的适宜培养基为MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L LAA,pH 5.8;生根的适宜培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,其中培养基中铁盐的质量浓度降低到6.95 mg/L,蔗糖的质量浓度降低至20 g/L,pH值为5.8.结论 天门冬不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中嫩芽诱导愈伤率最高,为天门冬最适组织培养的外植体;利用组织培养技术能够实现天门冬快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

金线莲组培快繁技术研究

目的 建立金线莲快繁体系.方法 以茎段为外植体,开展了茎段不同部位、培养基、激素、有机物和活性炭对不定芽增殖、幼苗生长的影响研究,并进行了移栽试验.结果 外植体以不含顶芽和长根的中间段茎节为好;不定芽增殖最佳培养基配方为MS(或B5)+BA3.0 mg/L +NAA0.5～1.0 mg/L,两个月增殖倍数达5.0以上;壮苗最适培养基为1/2MS+NAA3.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+香蕉提取物20%(或椰子汁20%);试管苗移栽适宜的基质为菜园土1份+2～3 mm粗砂2份(或1份)+木屑1份(或2份),3个月成活率均达100%,且生长良好.结论 采用上述方法,能实现金线莲幼苗的快速繁殖.     

响应面法优化对叶百部生物碱提取工艺的研究

目的得到一个快速、高效的对叶百部中生物碱的提取工艺,为对叶百部在医药、食品等方面的开发提供理论支持。方法以PEG1000用量、硫酸钠用量和料液比为响应因素,总生物碱提取率为响应值,采用响应面法考察以上提取条件对对叶百部中生物碱提取效率的影响。结果确定最佳提取条件为PEG1000质量分数32.4%,无水Na2SO4质量浓度0.353 g/m L,料液比1∶27.5,超声时间50 min。经验证,响应面优化的最佳提取条件下对叶百部总生物碱含有量最高,为9.01 mg/g,与理论预测值吻合良好。结论与传统的加热回流法相比,本提取工艺提高了总生物碱提取率,缩短了提取时间,降低了提取温度,在百部活性成分的提取分离方面展现了良好的应用前景。     

对叶百部多糖的相对分子质量测定及单糖组成分析

目的 提取纯化对叶百部多糖,并对其相对分子质量及单糖组成进行研究.方法 采用乙醇沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶过滤层析法从对叶百部中纯化得到水溶性多糖,命名为STP-1,分子筛层析法测定其分子质量,柱前衍生气相色谱法对其单糖组成进行研究.结果 STP-1的分子量为4.2×104Da,单糖组成包含鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal),其摩尔比为2.35∶ 1.78∶ 1∶15.09∶ 13.56.结论 对叶百部多糖为五种单糖组成的中性杂多糖,以葡萄糖和半乳糖为主.     

对叶百部遗传多样性的ISSR分析

目的分析不同居群对叶百部Stemona tuberosa的亲缘关系和遗传多样性。方法应用ISSR分子标记技术研究长江流域以南各省对叶百部的遗传多样性;采用POPGENE32进行亲缘关系分析,NTSYSpc-2.10E进行UPGMA聚类分析。结果 7条ISSR引物共检测到74个清晰的扩增位点,多态性位点74个,多态性位点百分率100%;有效等位基因数(Ne)为1.524 4,平均Nei’s基因多样性指数(He)为0.314 6,平均Shannon多样性指数(I)为0.478 6,各居群间的遗传距离介于0~0.950 2,平均值为0.416 3。结论从分子角度揭示了对叶百部具有较高的遗传多样性,其居群间亲缘关系与地理环境有一定的相关性,实验结果将为后续对叶百部引种栽培及根用药植物资源的持续利用,特异生物碱的筛选及其运用于化学分类,以及对叶百部道地药材产区的科学选择奠定理论基础。     

瑶药穿心藤组培快繁体系的建立

目的：建立瑶药穿心藤高效组织培养再生体系,以利于保护和利用穿心藤种质资源。方法：以当年生穿心藤茎段为外植体,研究不同基础培养基对不定芽的诱导、不同浓度植物生长调节剂对不定芽诱导和分化以及不定芽增殖和生根的影响,筛选不同培养阶段的最适培养基。结果：最适穿心藤不定芽诱导培养基为改良MS+6-BA 2.00 mg/L+NAA 0.20 mg/L,诱导率达94.63%;最适不定芽增殖培养基为改良MS+6-BA 3.00 mg/L+NAA 0.40 mg/L,增殖系数可达10.30,芽绿且健壮;最适组培苗生根培养基为改良MS+NAA 0.50 mg/L,平均单株生根数为6条,生根率高达97.13%;组培苗炼苗6 d时,移栽苗长势健康,成活率最高,达100%。结论：建立了穿心藤的组织培养再生体系,为穿心藤种质资源保护和产业化种植奠定基础。     

白及组培快繁的实验研究

目的:探索白及组培快繁的最适培养基和培养条件,为进一步完整建立白及快繁体系奠定基础。方法:以白及成熟蒴果为材料,在不同培养基上进行无菌播种,种子萌发后利用组织培养方法进行无性系繁殖。结果:白及种子萌发的最佳培养基为1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L;白及丛生芽增殖最佳培养基MS+1.0mg/L BA+0.1mg/L NAA,1/2MS+1.0 mg/L NAA+7.5%香蕉汁有利于白及生根,MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+7.5%香蕉汁既可以促进白及球茎的生长,在一定程度上又可以促进白及的生根。结论:激素于白及组培快繁有显著影响,通过激素适当配比得到白及快繁的最佳培养体系,对白及资源的利用和保护有重要意义。     

铁皮石斛带节茎段的组培快繁体系研究

目的：建立铁皮石斛带节茎段为外值体的快速繁殖体系,保护和合理利用铁皮石斛资源.方法：以铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）的带节茎段作外植体,比较不同培养基、激素等因素对铁皮石斛诱导、增殖及生根的影响.结果：最适茎段诱导腋芽的培养基为1/2MS＋ 2.0mg L-1 6-BA＋ 0.2mgL-1 NAA,腋芽诱导率可达93.3％;最适丛生芽增殖的培养基为1/2MS＋ 1.5mgL-1 6-BA ＋0.5mgL-1 NAA,平均增殖系数达到5.46;最适的生根培养基是1/2MS＋0.5mgL-1 IBA ＋0.5mgL-1 NAA＋ 0.2％ AC,组培苗生根多,生根率达到72％.以上各种培养基琼脂粉浓度均为0.8％,蔗糖浓度均为2％,pH5.6 ～5.8.同时研究发现,组培苗的移栽基质以细木屑为优,具有疏松透气、排水良好等优点,成活率可达88％.结论：利用带节茎段能够实现铁皮石斛快速繁殖,为其人工扩大栽培奠定了良好基础.     

广西不同产地对叶百部总生物碱的含量测定

目的:测定广西不同产地对叶百部中总生物碱的含量,为完善其质量标准提供依据。方法:以对叶百部碱为对照品,采用酸性染料比色法测定其总生物碱含量。结果:建立了总生物碱的含量测定方法,广西不同产地对叶百部药材总生物碱含量为6.56²0.93 mg/g。结论:该法重复性和稳定性良好,具有简便、快速、灵敏的特点,可以作为其含量测定方法。     

药用植物百部的组织培养与快速繁殖

目的 探讨百部的组培快繁技术，为优良品种的快速繁殖奠定基础。方法 以带侧芽百部茎段为外植，采用MS为基本培养基，附加不同植物生产调节剂进行试验。结果 采用MS 6-BA3.0mg/L IBA0.2mg/L的培养基能成功地诱导芽的分化；对于芽增殖，以MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L培养基较好；诱导生根以MS IBA2.0mg/L AgNO30.5mg/L培养基较好，培养30d后生根率可达50%以上；20mg/L多菌灵处理可明显提高移栽成活率。结论 初步建立了百部的组培快繁体系。使工厂化生产百部种苗成为可能。