桂枝加葛根汤对神经炎症小鼠海马空间记忆、细胞因子和小胶质细胞的影响

目的:探讨桂枝加葛根汤对脂多糖(LPS)诱导神经炎症小鼠海马空间记忆、炎性细胞因子和小胶质细胞激活的影响及可能的作用机制.方法:将63只雄性ICR小鼠随机分为5组:正常对照组(Control,n=13)、神经炎症模型组(Model,n=13)、桂枝加葛根汤低剂量组(GGD-low,n=10)、桂枝加葛根汤高剂量组(GGD-high,n=14)、二甲基四环素阳性对照组(Positive oontrol,n=13,0.05 g·kg-1,每日1次,连续3d).给予小鼠ip LPS(0.33 mg·kg-1)建立AD的神经炎症模型,桂枝加葛根汤低、高剂量(6,12 g·kg-1)治疗4周后分别采用Morris水迷宫、ELISA和免疫荧光法检测观察桂枝加葛根汤对神经炎症小鼠空间记忆、海马细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量以及小胶质细胞的激活现象的影响.结果:Morris水迷宫结果显示,LPS诱导后小鼠的逃避潜伏期明显比正常对照组延长(P＜0.05),桂枝加葛根汤低、高剂量治疗后小鼠逃避潜伏期均明显比模型组缩短(P＜ 0.05,P＜0.01);LPS导致小鼠海马TNF-α,IL-1β含量显著增高(P＜0.01),小胶质细胞则表现为数量增多且呈放射状等激活现象,桂枝加葛根汤治疗后TNF-α,IL-1β含量则不同程度地明显降低(P＜0.05),小胶质细胞激活状态改善.结论:桂枝加葛根汤对LPS诱导的神经炎症小鼠海马空间记忆障碍具有改善作用,其机制可能与调节海马小胶质细胞激活和炎性细胞因子TNF-α和IL-1β含量的作用有关.     

逍遥散对LPS诱导抑郁样小鼠JNK通路的作用机制

目的：基于c-Jun氨基末端激酶（JNK）通路探索逍遥散对脂多糖（LPS）诱导抑郁样小鼠的作用机制。方法：适应性喂养后，将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组、米诺环素组（腹腔注射，50 mg·kg-1）、氟西汀组（灌胃，2.6 mg·kg-1）、逍遥散低、中、高剂量组（灌胃，6.012 5、12.025、24.050 g·kg-1），给药14 d后，模型组和各给药组腹腔注射2 mg·kg-1 LPS，正常组腹腔注射等体积生理盐水。通过旷场、O迷宫实验检测小鼠抑郁样行为；高效液相色谱法（HPLC）检测小鼠海马去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）的含量。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)含量；免疫组化检测离子钙接头蛋白-1(Iba-1)、原癌基因（c-Fos）、c-Jun蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠海马IL-1β、c-Jun、c-Fos、JNK3 mRNA表达水平；全自动蛋白表达分析系统（Western）检测小鼠海马JNK、磷酸化（p）-JNK蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组小鼠中...     

黑逍遥散调控NOX2/ROS/NF-κB信号通路干预AD模型小鼠小胶质细胞极化

基于氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)/活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)/核转录因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)信号通路探究黑逍遥散对APP/PS1双转基因小鼠小胶质细胞(microglia, MG)极化的影响及作用机制。4月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠50只，随机分为模型组、MCC950组(10 mg·kg^-1)及黑逍遥散低、中、高剂量组(6.45、12.89、25.78 g·kg^-1),同月龄、同系种雄性C57BL/6J小鼠30只，随机分为空白组、空白灌胃干预组和空白腹腔注射组，各组给药干预90 d。Morris水迷宫检测学习认知能力，尼氏染色和透射电镜观察海马神经元病理形态和超微结构，免疫荧光检测小胶质细胞M1型标志物CD16/32⁺/Iba-1⁺、M2型标志物CD206⁺/Iba-1⁺的阳性表达及海马ROS表达情况，比色法检测海马丙二醛(malondiald...     

基于海马小胶质细胞M1型极化研究逍遥散对OVX联合CUS焦虑抑郁模型大鼠的影响

研究逍遥散对卵巢切除(ovariectomized,OVX)联合慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress,CUS)模型大鼠的抗焦虑抑郁作用及机制。采用OVX联合CUS建立围绝经期抑郁症模型,通过旷场试验评价大鼠的焦虑抑郁水平;Real-time qPCR法检测大鼠海马中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA的水平;免疫荧光双染法检测大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG)区小胶质细胞离子钙接头蛋白分子-1(ionized calcium binding adaptor molecule-1,Iba-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的荧光表达;Western blot法检测大鼠海马DG区小胶质细胞Iba-1和iNOS的蛋白表达。结果显示,模型组大鼠水平穿格运动次数、垂直运动次数、中心停留时间明显减少,且梳理时间显著延长(P0.05或P0.01);海马炎症因子IL-1β和IL-6水平显著升高(P0.05);大鼠海马DG区小胶质细胞Iba-1/iNOS共表达的阳性细胞增多;海马Iba-1和iNOS蛋白表达水平显著升高(P0.01),提示应激状态大鼠海马DG区小胶质细胞被激活并向M1型极化。逍遥散高剂量组能显著增加模型大鼠水平穿格运动次数、垂直运动次数和中心停留时间(P0.05或P0.01),且可显著下调炎症因子IL-1β和IL-6水平(P0.05),同时逆转海马小胶质细胞的激活及数量变化;逍遥散低剂量组虽对旷场试验行为学指标和IL-1β和IL-6水平影响不显著,但均表现出改善趋势;低剂量逍遥散显著下调iNOS蛋白水平(P0.05),高剂量逍遥散对海马小胶质细胞Iba-1和iNOS蛋白表达水平均有显著下调(P0.05或P0.01)。因此,逍遥散可以改善OVX联合CUS模型大鼠的焦虑抑郁样行为,其机制与其抑制海马小胶质细胞M1极化而发挥抗炎作用有关。     

地黄饮子对APP/PS1小鼠IL-1、TNF-α和NF-κB p65的影响

目的研究地黄饮子(DHYZ)对APP/PS1双转基因痴呆小鼠炎症因子和核转录因子(NF-κB)的影响。方法将35只APP/PS1双转基因痴呆小鼠随机分为模型组、DHYZ组;另以同背景同月龄的C 57 BL/6 J阴性小鼠为空白组。DHYZ给予地黄饮子相当于生药9. 75 g/(kg·d)灌胃,模型组和空白组给予等量蒸馏水灌胃。各组灌胃30天后进行Mirror水迷宫空间探索试验后取材。HE染色法观察皮层及海马CA1区神经细胞的形态结构;尼氏染色法观察神经元;免疫组化方法检测炎症因子TNF-α、IL-1β; Western印迹检测法检验磷酸化NF-κB p65(pp65)的表达。结果 DHYZ降低APP/PS1小鼠皮层和海马组织的TNF-α、IL-1β(P <0. 01)和皮层区NF-κB pp65(P <0. 01),进而改善皮层及海马CA1区细胞的形态结构和增加皮层及海马区的尼氏小体数量。结论 DHYZ改善学习记忆能力可能通过抑制pp65,下调细胞炎性因子IL-1和TNF-α的释放水平,使皮层及海马神经元损伤减少。     

芳樟精油通过调控Nrf2/HO-1通路和抑制炎症因子改善小鼠抑郁样行为的机制研究

为探讨芳樟精油的抗抑郁作用及其对炎症因子和核转录因子E2相关因子2 (Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路的调控机制,采用腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠抑郁模型,利用旷场实验、高架十字迷宫实验和强迫游泳实验进行行为学测试;通过Western blot和qRT-PCR方法检测小鼠海马组织中Nrf2/HO-1通路蛋白及基因表达水平变化,用酶联免疫吸附检测(ELISA)法检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β的含量变化,并通过Tunel染色检测小鼠脑组织细胞凋亡情况的变化;结果表明,与空白对照组相比,模型组小鼠旷场中心区运动距离、旷场中心的停留时间和中心区域的进入次数显著减少,高架十字迷宫实验中小鼠进入开臂的时间百分比(OT%)和进入开臂的次数百分比(OE%)显著减少,强迫游泳实验小鼠不动时间显著延长;而相较模型组,给予芳樟精油治疗后,小鼠在旷场实验中心区域运动距离显著增加,在旷场中心区域的停留时间显著增加,旷场中心区域的进入次数显著增加,高架十字迷宫小鼠进入开臂的OT%和OE%显著增加,强迫游泳实验中小鼠不动时间显著减少;此外,模型组...     

苦参子提取物的抗抑郁作用机制分析

目的：探讨苦参子提取物的抗抑郁作用及其分子作用机制。方法：采用腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠抑郁模型，设置正常组、模型组、氟西汀组(2.5 mg·kg^-1)，以及苦参子低、中、高剂量组(200、400、800 mg·kg^-1)，连续灌胃7 d，利用旷场实验、高架十字迷宫实验和强迫游泳实验考察苦参子提取物的抗抑郁作用。苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠海马组织病理形态变化，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠脑组织中G1/S特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)、Wnt1蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)的蛋白表达水平。通过原位末端标记法(TUNEL)检测海马细胞凋亡情况。结果：小鼠行为学结果显示，与正常组比较，模型组的旷场运动速度、旷场中间区运动距离、高架十字迷宫开臂停留时间均显著降低(P<0.01)，强迫游泳实验不动时间明显增加(P<0.05)。与模型组比较，苦参子中、高剂量组的旷场运动速度、开臂停留时间增加(P<0.05,P<0.01)，强迫游泳...     

透邪解毒汤对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的干预效果及机制研究

目的 观察透邪解毒汤对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的干预效果,并探讨其作用机制。方法 将40只C57BL6小鼠随机分成对照组、模型组、透邪解毒汤低浓度组及透邪解毒汤高浓度组,每组10只。对照组和模型组每日均予0.9%氯化钠注射液0.2 mL灌胃,透邪解毒汤低、高浓度组每日分别予1、2 g/mL透邪解毒汤药液0.2 mL灌胃,各组均连续灌胃5 d后,除对照组外其余3组小鼠分别给予腹腔注射LPS(10 mg/mL)0.2 mL诱导建立ALI模型,并在LPS注射24 h后收集肺泡灌洗液、摘取全部肺组织。比较各组小鼠肺损伤评分、肺湿/干质量比情况,比较各组小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的mRNA相对表达量及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β表达情况,比较各组小鼠肺组织中Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路相关蛋白TLR4、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38)、...     

白藜芦醇对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的改善作用

目的探讨白藜芦醇对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的改善作用。方法 50只小鼠随机分为模型组、多奈哌齐组(10 mg/kg)及白藜芦醇低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg),每组10只,10只C57BL/6小鼠作为对照组,各组灌胃给药40 d。Morris水迷宫定位航行实验和空间探索实验分别检测小鼠学习记忆能力,免疫荧光法检测小鼠海马区星形胶质细胞表达,RT-PCR法和ELISA法分别检测小鼠海马区IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和水平。结果与模型组比较,白藜芦醇组缩短逃避潜伏期,增加穿越平台次数和目标象限停留时间,降低星形胶质细胞表达及IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达和水平,以中、高剂量组更显著(P0. 05,P0. 01)。结论白藜芦醇可改善APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制星形胶质细胞增生和炎性因子释放、减轻炎症反应有关。     

雷公藤红素对神经病理性疼痛模型小鼠的干预作用

目的:观察雷公藤红素对神经病理性疼痛(NP)模型小鼠疼痛、焦虑及抑郁共病的干预作用以及初步机制探索。方法:将小鼠随机分为假手术组,模型组,普瑞巴林组(25 mg·kg-1),雷公藤红素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·kg-1),以L5脊神经结扎(SNL)的方法制备NP小鼠模型,采用Von Frey法检测小鼠机械痛阈值,旷场和悬尾实验分别检测小鼠焦虑和抑郁症状,免疫组化(IHC)观察各组小鼠海马小胶质细胞形态的变化;选用BV2-TdT小胶质细胞,以1 mg·L-1脂多糖(LPS)诱导细胞炎症,分为正常组、模型组、雷公藤红素(100 nmol·L-1)组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,免疫荧光(IF)检测TNF-α的蛋白表达。结果:与假手术组比较,SNL模型组小鼠具有显著的机械痛敏、焦虑和抑郁症状(P0. 05,P0. 01),且海马小胶质细胞胞体面积明显升高(P0. 05),呈阿米巴样;与SNL模型组比较,20 mg·kg-1雷公藤红素能明显升高SNL小鼠50%缩足阈值和旷场中央区停留时间(P0. 05,P0. 01),降低SNL小鼠悬尾不动时间(P0. 05),减少SNL小鼠海马小胶质细胞的胞体面积(P0. 05)。体外实验显示,与正常组比较,LPS诱导BV2小胶质细胞后2～4 h,细胞TNF-α的mRNA和蛋白表达均明显升高(P0. 05,P0. 01);与LPS组比较,100 nmol·L-1雷公藤红素能显著抑制LPS诱导的TNF-α在mRNA和蛋白水平上表达的异常升高(P0. 01)。结论:雷公藤红素能改善NP模型小鼠痛与情绪障碍共病,其机制可能与中枢神经免疫调控有关。     

逍遥散对LPS诱导的抑郁样大鼠的干预作用及机制研究

目的:探讨逍遥散对脂多糖(LPS)诱导的抑郁症大鼠的干预作用及抗炎作用机制。方法:采用侧脑室注射LPS诱导建立抑郁症大鼠模型,以逍遥散30、15 g/kg连续灌胃给药14d,进行大鼠旷场实验、飞溅测试和糖水偏好试验,检测大鼠血清IL-6和TNF-α水平,以及海马和皮层部位IL-6、TNF-α、IDO1、5-HT1AmRNA表达水平。结果:与模型组相比,逍遥散30、15g/kg明显增加大鼠的站立次数、延长梳洗时间、提高糖水偏好百分比;同时显著降低大鼠血清中IL-6、TNF-α含量。与模型组相比,逍遥散30、15 g/kg明显下调皮层、海马IL-6、TNF-α、IDO1mRNA表达水平及IL-6荧光表达,上调5-HT1A mRNA表达水平。结论:逍遥散对侧脑室注射LPS诱导的神经炎症样抑郁症有一定对抗作用,作用发挥与抑制炎症因子分泌,阻断IDO激活,上调5-HT水平有关。     

蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠海马NF-κB、IL-6表达的影响

目的:观察蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及海马核因子κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血的方法制备小鼠血管性痴呆模型,将小鼠随机分成假手术组,模型组,天保宁0.01g/kg剂量组,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组,每组12只,各组灌胃相应药物20ml/kg,连续35d。给药35d后利用跳台仪、Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力;采用苏木素-伊红(HE)染色考察海马区病理形态;采用免疫组织化学染色法检测海马区NF-κB、IL-6表达。结果:与模型组相比,蓝布正10g/kg、5g/kg剂量组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,穿越平台数显著增加;与模型组比较,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组小鼠海马组织病变情况改善,海马区NF-κB、IL-6表达显著下降。结论:炎症反应在血管性痴呆的发生中起到重要作用,蓝布正可能是通过降低NF-κB表达,抑制炎性因子(如IL-6)的释放,保护脑神经元,改善血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。     

黑柴胡提取物对老年痴呆小鼠模型认知功能和脑内神经炎症的作用研究

目的:研究黑柴胡提取物(EOB)对老年痴呆(AD)小鼠模型的治疗作用及其神经炎症相关作用机制。方法:黑柴胡粉碎后使用75%乙醇水溶液进行提取,浓缩干燥得到EOB。ICR小鼠随机分为空白组、模型组、EOB高、中、低剂量组、阳性对照组。除空白组外各组小鼠侧脑室注射LPS(5μg/μL,3μL/只)建立AD小鼠模型,空白组小鼠侧脑室注射等体积生理盐水。造模后次日开始连续灌胃给药,EOB各给药组高、中、低剂量分别为4g/kg、2g/kg、1g/kg,阳性对照组给予5mg/kg多奈哌齐,每天1次,连续灌胃21d。在造模后第14至20天,采用Morris水迷宫实验和新物体识别(NOR)实验评价各组动物的认知能力;造模后第21天取材,ELISA法检测各组小鼠海马组织中TNF-α、IL-1β和ROS的含量。结果:侧脑室注射LPS能明显损伤AD小鼠的空间学习记忆能力和新物体识别能力,使小鼠海马组织中炎症因子TNF-α、IL-1β和ROS的含量显著升高。EOB各剂量组给药可明显缓解LPS造成的认知功能损伤,同时明显降低AD小鼠海马组织中TNF-α、IL-1β和ROS的含量。结论:EOB能够明显缓解LPS诱导的AD小鼠学习记忆功能损伤,这一作用可能与其能够抑制脑内神经炎症反应有关。     

没药甾酮下调TLR4/NF-κB通路减轻脓毒症相关性脑病神经炎症反应机制探究

目的 探讨没药甾酮（GS）下调Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路减轻脓毒症相关性脑病（SAE）神经炎症反应的机制。方法 采用脂多糖（LPS）诱导小鼠小胶质细胞系（BV2细胞）制备脓毒症相关性脑病细胞模型。在此细胞模型中,通过CCK-8法检测BV2细胞的增殖凋亡情况,确定LPS和GS的最佳给药浓度;在此给药浓度基础上分为空白对照组（NC组）、LPS组及LPS+GS组,采用Western blotting法检测给药6、12、24 h后TLR4/NF-κB通路关键蛋白的表达情况;最后,采用ELISA法检测细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)的表达情况。结果 当LPS浓度≥3μg/mL和GS浓度>30μg/mL时细胞增殖被显著抑制（P <0.01）,选择LPS(3μg/mL)和GS(30μg/mL)作为联合给药浓度,在此浓度基础上联合给药最长至168 h,BV2细胞增殖仍稳定,故选择此浓度作为最佳给药浓度。与NC组相比,LPS诱导后各时间点TLR4/NF-...     

脂多糖干预时间与小胶质细胞生成IL-1β和TNF-α时效关系的研究

目的以原代培养的大鼠皮质小胶质细胞为研究对象,观察脂多糖(LPS)处理小胶质细胞时间与小胶质细胞生成白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的时效关系,寻找能够使小胶质细胞产生大量IL-1β、TNF-α的LPS最佳干预时间,为建立最佳小胶质细胞炎症模型提供依据。方法培养原代大鼠皮质小胶质细胞,随机分为10组,5组为LPS组,以含LPS(终浓度为100 ng/m L)的无血清胶质细胞培养液分别孵育1 h、3 h、6h、12 h、24 h;每个LPS组均设平行对照,对照组用无血清胶质细胞培养液孵育,孵育时间同LPS组。孵育结束后,ELISA方法检测各组培养液中IL-1β和TNF-α蛋白含量,RT-PCR方法检测小胶质细胞中IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达水平。结果孵育原代小胶质细胞1 h、3 h、6 h、12 h、24 h后,LPS组培养液中IL-1β和TNF-α蛋白含量及小胶质细胞中IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达水平均明显高于对照组(P均0.05);LPS组培养液中IL-1β和TNF-α蛋白含量及小胶质细胞中IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达水平随着处理时间延长逐渐上升,IL-1β在3 h达到高峰,TNF-α在6h时达到高峰,二者在6 h均处于较高水平,以后随时间延长逐渐下降,相邻LPS处理组间比较差异均有统计学意义(P均0.05)。结论 LPS能够刺激小胶质细胞大量产生IL-1β和TNF-α,这种效应与LPS刺激时间相关,在刺激6 h时IL-1β和TNF-α均处于较高水平,LPS刺激6 h时是理想的小胶质细胞炎症模型。     

艾灸“足三里”对疲劳模型大鼠海马炎症因子及小胶质细胞活化的影响

目的探讨艾灸足三里治疗疲劳的可能作用机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常组、模型组和艾灸组,每组8只。模型组和艾灸组大鼠以慢性负重力竭游泳21天建立疲劳大鼠模型。艾灸组在造模同时艾灸大鼠双侧"足三里",隔日1次,共11次;正常组和模型组不予处理。干预前后比较各组大鼠力竭游泳时间。干预后观察各组大鼠旷场实验行为,采用实时荧光定量PCR法检测海马白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA表达,采用免疫组化法检测海马(CA1区、CA3区)小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白1 (Iba-1)表达。结果干预后艾灸组力竭游泳时间为(658. 00±250. 76) s,较模型组(263. 38±105. 87) s显著延长(P 0. 01)。各组大鼠旷场实验的水平移动距离、垂直移动距离差异均无统计学意义(P 0. 05)。与正常组比较,模型组大鼠海马IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达及Iba-1表达升高(P 0. 01);与模型组比较,艾灸组大鼠海马IL-6 mRNA表达及Iba-1表达降低(P 0. 05或P 0. 01)。结论艾灸"足三里"可改善大鼠运动性疲劳,其机制可能与抑制海马小胶质细胞的活化和炎症因子有关。     

血府逐瘀汤对COPD模型小鼠炎症因子及TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的影响

目的 运用分子生物技术探究血府逐瘀汤对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型小鼠炎症因子与TLR4/衔接蛋白髓样分化因子（MyD88）/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的作用。方法 香烟烟熏联合LPS滴鼻法制作COPD模型小鼠,血府逐瘀汤给药处理后,通过HE染色法镜下比较各组小鼠肺组织病理改变;ELISA检测小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-17(IL-17)水平;免疫组化检测小鼠肺组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白水平。结果 镜下HE染色可见血府逐瘀汤不同剂量组小鼠小气道、肺泡、血管的病理改变及炎性细胞的聚集均有不同程度地减轻。血府逐瘀汤各剂量组小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17的含量较模型组明显下降（P <0.05）。免疫组化观察到血府逐瘀汤各剂量组小鼠肺组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达较模型组更低（P <0.05）。结论 血府逐瘀汤可以减少COPD小鼠血清中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-8...     

芪冬活血饮对LPS致炎巨噬细胞炎症反应的作用及机制探讨

目的:通过观察芪冬活血饮大鼠药物血清对NF-κB抑制巨噬细胞炎症细胞因子及TLR4、Cav-1、NF-κBp65 mRNA表达的影响,探讨其炎症调控的机制。方法:将巨噬细胞分为空白对照组(UT组)、LPS组、NF-κB抑制组(NI组)、NF-κB抑制+LPS组(NL组)、LPS加空白血清组(LB组)、LPS加药物血清组(LD组)、NF-κB抑制+LPS+空白血清组(NLB组),NF-κB抑制+LPS+药物血清组(NLD组)8组。巨噬细胞予阻断剂阻断0.5 h后加入LPS致炎,并予药物血清干预,LPS处理12 h后测定各组细胞上清液TNF-α、IL-1β、IL-10水平,及TLR4、Cav-1、NF-κBp65 mRNA相对表达量。结果:LD组TNF-α、IL-1β、IL-10水平及NF-κBp65、Cav-1、TLR4 mRNA相对表达量均低于LB组和LPS组,比较有统计学意义;NLD组TNF-α、IL-1β、IL-10水平及NF-κBp65、Cav-1、TLR4mRNA相对表达量均低于NL组,两组TNF-α、IL-1β有显著统计学差异,NF-κBp65mRNA、IL-10比较差异无统计学意义,Cav-1、TLR4mRNA比较差异有统计学意义。结论:芪冬活血饮药物血清可减轻LPS刺激的巨噬细胞炎性反应;除TLR4/Cav-1/NF-κBp65途径外,芪冬活血饮还可以通过非NF-κBp65途径降低炎症反应。     

红花黄色素对APP/PS 1双转基因小鼠脑组织中胶质细胞活化及炎症因子释放的影响

目的:探讨红花黄色素(SY)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease AD)转基因小鼠学习记忆能力的影响及其对脑组织中胶质细胞活化和炎症因子释放的影响。方法:选用6月龄APP/PS 1双转基因小鼠60只,随机分成5组:转基因组、多奈哌齐组(0.75 mg/kg)、红花黄色素10、30、100 mg/kg剂量组,同月龄野生型C57BL/6小鼠12只作为对照组,其中转基因组与对照组灌胃相应体积的生理盐水。连续3个月灌胃给予相应药物治疗后,进行Morris水迷宫实验。采用免疫组织化学法检测GFAP及CD45的表达,ELISA试剂盒测定各组小鼠皮层中IL-6、IL-8及TNF-α的表达。结果:与野生型小鼠相比,转基因组小鼠空间学习记忆能力明显下降,皮层及海马CA1、CA3、DG区的CD45、GFAP表达水平均增高,皮层组织中TNF-α、IL-6、IL-8水平显著增加。经红花黄色素治疗后,红花黄色素10、30、100 mg/kg剂量组学习记忆能力显著改善,其对GFAP、CD45、IL-6、IL-8及TNF-α的表达具有显著降低的作用;红花黄色素100 mg/kg剂量组对转基因小鼠海马各区CD45、皮层及海马部位GFAP以及皮层IL-6、IL-8的表达均有显著降低的作用;红花黄色素10 mg/kg剂量组对小鼠大脑海马CA1、CA3及皮层部位的CD45、海马及皮层部位的GFAP、皮层IL-8的表达有显著降低的作用。结论:红花黄色素可以提高痴呆小鼠的学习记忆能力,同时可抑制脑组织胶质细胞活化,减轻皮层组织炎症损伤。     

三七总皂苷对LPS诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用

目的:探讨三七总皂苷对脂多糖(LPS)刺激所致BV2小胶质细胞炎症反应的保护作用及其机制。方法:MTT比色法检测不同浓度三七总皂苷对BV2小胶质细胞活性的影响;免疫荧光法检测IL-1β、NF-κB的定位及表达;PCR法检测IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA的表达;Western blot法检测IL-1β、TNF-α、COX-2蛋白表达。结果:三七总皂苷在6.25～50μg/mL对BV2小胶质细胞生长无明显影响。与LPS模型组比较,各浓度(6.25、12.5、25、50μg/mL)三七总皂苷均能不同程度抑制IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA和IL-1β、TNF-α、COX-2蛋白表达;50μg/mL三七总皂苷能有效抑制NF-κB的核转移及IL-1β在胞浆内的表达。结论:三七总皂苷对LPS刺激所致的BV2小胶质细胞炎症反应有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB通路激活有关。