运脾泻肺化痰汤通过抑制PI3K/AKT/NF-κB信号轴减轻幼龄哮喘大鼠气道炎症及黏液高分泌

目的 基于白细胞介素（IL）-23/辅助性T细胞17(Th17)炎症轴与磷酯酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B(AKT)/核因子κB(NF-κB)信号轴相关性探讨运脾泻肺化痰汤对幼龄哮喘大鼠气道炎症、黏液高分泌的影响。方法 将幼龄SD大鼠56只随机分为7组：正常组、模型组、低剂量运脾泻肺化痰汤组（LTCM）、中剂量运脾泻肺化痰汤组（MTCM）、高剂量运脾泻肺化痰汤组（HTCM）、布地奈德组、联合组，每组各8只。除正常组外，其余各组大鼠腹腔注射卵清白蛋白与氢氧化铝凝胶混合液致敏，1%卵清蛋白雾化激发。正常组、模型组均灌胃0.9%氯化钠2 mL;LTCM、MTCM、HTCM分别灌胃运脾泻肺化痰汤灌胃10、20、40 g/kg；布地奈德组予0.01%布地奈德2 mL雾化吸入20 min；联合组给予MTCM灌胃及布地奈德组雾化，连续4周。分类计数肺泡灌洗液（BALF）中不同种类白细胞；HE、过碘酸-雪夫染色（PAS）观察肺组织病理改变；ELISA检测BALF及血清中IL-17、IL-23水平，免疫组化检测肺组织IL-17、IL-23表达；Western Blot检测肺组织PI3K/AKT/...     

基于MAPK信号通路探讨运脾泻肺化痰汤对幼龄哮喘大鼠肺组织的影响

目的 探讨运脾泻肺化痰汤对幼龄哮喘大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)蛋白相对表达量、肺组织中细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-jun N-terminal kinase, JNK)基因表达水平及羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)水平的影响,同时对四者进行相关性分析,从而探索运脾泻肺化痰汤调控MAPK信号通路及改善哮喘症状的机制。方法 将幼龄SD大鼠随机分为空白组、模型组、中药高、中、低剂量组、西药组,每组10只;以卵清白蛋白加氢氧化铝佐剂建立幼龄哮喘大鼠模型,分别于第1天与第8天腹腔注射卵清白蛋白加氢氧化铝佐剂混合液1 mL,第15天起以1%卵清白蛋白雾化激发,每次30分钟,并隔日1次;第16天开始进行药物治疗,中药高、中、低剂量组每只大鼠依次灌胃运脾泻肺化痰汤生药剂量40 g/kg、20 g/kg、10g/kg,西药组以0.01%布地奈德雾化吸入20分钟,模型组和空白组灌胃0.9%生理盐...     

芪仙汤对苯并芘加剧哮喘小鼠气道炎症及黏液高分泌的影响及机制研究

目的 观察芪仙汤(黄芪、仙灵脾、巴戟天等)对暴露于大气污染物苯并芘(BaP)的哮喘小鼠气道炎症及黏液分泌的影响,并探讨其分子机制。方法 将雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、哮喘组[卵白蛋白(OVA)致敏]、BaP组(OVA+BaP)和芪仙汤组(OVA+BaP+芪仙汤37.5 g·kg^-1),每组10只。采用OVA致敏法复制小鼠哮喘模型,并以BaP滴鼻法模拟大气污染暴露。采用HE、AB-PAS染色法分别检测小鼠肺组织炎症及黏液分泌水平;qRT-PCR法检测肺组织白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)mRNA表达;免疫组化法检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达;DCFH-DA探针法检测肺组织活性氧(ROS)水平。结果 与空白组比较,哮喘组小鼠的气道、血管周围炎症细胞明显增多,气道黏膜出现中断、不连续,炎症评分显著升高(P<0.01);小鼠肺组织IL-4、IL-13 mRNA表达明显上调(P<0.05);小鼠的气道黏液分泌显著增多(P<0.01);小鼠气道MUC5AC、p-ERK蛋白表达显著...     

基于TRPV1/NRF-1/mtTFA通路研究射干麻黄汤对寒性哮喘大鼠的改善作用

研究射干麻黄汤对寒性哮喘大鼠的改善作用及其作用机制。将72只无特定病原体(specific pathogen free, SPF)的健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(地塞米松，0.4 mg·kg^-1)组以及射干麻黄汤低、中、高剂量组(3.2、6.4、12.8 g·kg^-1)。除空白组予生理盐水，其他组均采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)制成的溶液腹腔注射致敏；之后将大鼠放入0～2℃可调节的寒冷箱中，同时予OVA溶液超声雾化激发，建立寒性哮喘大鼠模型。给药3周后，观察大鼠的一般行为学，苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察大鼠肺组织的病理变化，过碘酸希夫(periodic acid-Schiff, PAS)染色观察大鼠肺组织的黏液变化，马松(Masson)染色观察大鼠肺组织的胶原沉积变化，酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血清及支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)中炎症因...     

基于PTEN/PI3K/Akt信号通路探讨归芍运脾汤防治乳腺增生的机制

目的：基于磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路研究归芍运脾汤防治乳腺增生大鼠的作用机制。方法：将70只SPF级SD大鼠随机分为正常组(n=15)和造模组(n=55)，造模组大鼠采用综合造模法(饥饱失常法+夹尾刺激法+苯甲酸雌二醇+黄体酮)复制乳腺增生模型，随后各取5只进行模型验证。模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组、枸橼酸他莫昔芬组和归芍运脾汤高、中、低剂量组，共5组，每组10只。正常组和模型组大鼠给予10 mL·kg^-1·d^-1蒸馏水灌胃，归芍运脾汤高、中、低剂量组分别给予17.2、8.6、4.3 g·kg^-1·d^-1归芍运脾汤汤剂灌胃，枸橼酸他莫昔芬组给予4 mg·kg^-1·d^-1枸橼酸他莫昔芬灌胃，治疗30 d后观察大鼠一般生存状况，采用超声诊断仪测定乳腺组织厚度，采用旷场实验阳性反应进行行为学评价，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定乳腺组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl...     

呼吸道合胞病毒感染诱发哮喘大鼠模型的建立与评价

目的:探讨用呼吸道合胞病毒(RSV)诱导鸡卵白蛋白(OVA)致敏,建立病毒感染哮喘大鼠模型的方法,并评价其效果。方法:40只SD大鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、OVA组、RSV组、和OVA/RSV组4组。应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化吸入结合RSV滴鼻激发复制病毒性哮喘模型,PBS组不造模。观察大鼠哮喘发作症状;动物体描箱法测定乙酰甲胆碱(Mch)激发条件下气道反应性(以Penh值表示);H.E染色观察肺组织病理变化,以地高辛多标记点原位杂交检测肺组织中RSV RNA。结果:RSV组和OVA/RSV组肺组织中可见明显的RSV的阳性信号(棕黄色),PBS组、OVA组则未见RSV的阳性信号。与PBS组相比,除在浓度为0mg/ml(PBS)时OVA组无显著性差异(P>0.05),余各组在各浓度Penh值均增高(P<0.05,P<0.01);与OVA/RSV组相比,各组Penh值均降低(P<0.05,P<0.01)。结论:运用OVA致敏、激发,以RSV连续滴鼻的方法制备大鼠病毒性哮喘模型,病理生理特征更符合哮喘定义;且用有活力的RSV感染诱发的哮喘与临床病毒性哮喘的实际发病情况相近,该模型的建立可以为哮喘研究提供更好的选择工具。     

简易穴位埋线对哮喘大鼠ICAM-1和NF-κB表达及气道炎症的影响

目的:探讨简易穴位埋线对哮喘大鼠的作用机制。方法:Wistar大鼠32只,随机分为简易穴位埋线组(A)、地塞米松组(B)、模型组(C)、对照组(D),每组8只。卵蛋白(OVA)致敏制造大鼠哮喘模型,A组:在实验第1天开始造模前埋线1次,穴取"肺俞""膻中""肾俞"。B组:自实验第15天开始腹腔注射地塞米松1.5mg/kg;C组:于实验第15天起腹腔注射灭菌注射用水20mg/kg;B、C组均1次/日,连续2周。D组:不做任何处理。观察4组大鼠哮喘发作症状,对各组大鼠支气管肺泡灌洗液进行细胞计数及分类,并对大鼠气道病理组织学改变进行观察;免疫组化方法观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和核因子-κB(NF-κB)的核着色情况。结果:①简易穴位埋线组大鼠哮喘发作症状减轻,支气管周围炎细胞浸润明显减少。肺泡灌洗液总细胞数及其他炎细胞数模型组明显高于简易穴位埋线组。简易穴位埋线组气道腔内炎性细胞渗出和气道壁炎性细胞浸润明显低于模型组。②模型组肺组织ICAM-1、NF-κB的表达显著高于对照组(P0.01);③地塞米松组、简易穴位埋线组肺组织ICAM-1、NF-κB的表达与模型组相比显著降低(P0.05,P0.01)。结论:简易穴位埋线可抑制ICAM-1、NF-κB表达,减轻气道炎症。     

基于P38MAPK/NF-κB通路探讨搜风愈喘方调控哮喘大鼠气道炎症的作用机制

目的 基于P38MAPK/NF-κB信号通路，探讨搜风愈喘方对哮喘大鼠气道炎症的作用机制。方法 32只SPF级SD雄性大鼠随机被分为正常组、模型组、地塞米松组、搜风愈喘方组，每组8只。除正常组外，其余各组均以卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘大鼠模型。造模成功后，正常组和模型组以等容量生理盐水灌胃，地塞米松组以相应地塞米松溶液灌胃，搜风愈喘方组以相应剂量的中药煎煮液灌胃，连续灌胃21d。苏木素-伊红(HE)染色、过典酸雪夫氏染色(PAS)染色和马松(Masson)染色观察大鼠肺组织病理学变化；酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-13(IL-13)、白细胞介素-25(IL-25)含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肺组织中IL-13、IL-25、P38 MAPK、NF-κB P65的mRNA表达情况；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中P38MAPK、P-P38MAPK、NF-κB P65、P-NF-κB P65、IκBα、P-IκBα的蛋白表达。结果 与正常组相比，模型组有明显的气道炎症现象，可见显著的炎性细胞浸润、杯状细胞化生...     

咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察咳喘六味合剂对RSV感染哮喘小鼠肺组织中气道炎症的影响。方法:将40只雄性Balb/C小鼠随机分为4组,每组10只。PBS组为非OVA致敏和不感染RSV的对照组。OVA组应用OVA注射和OVA气道雾化吸入致敏。OVA/RSV组和咳喘六味合剂组(KLH组)在应用OVA致敏后用RSV滴鼻,复制急性病毒性哮喘模型。咳喘六味合剂组(KLH组)还用咳喘六味合剂治疗。处死动物,RT-PCR检测肺组织中白细胞介素13(IL-13)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-17A(IL-17A)mRNA的表达;HE染色观察肺病理变化。结果:HE染色显示咳喘六味合剂能显著改善RSV感染哮喘小鼠气道炎症。与PBS组相比,OVA组IFN-γ降低,IL-13、IL-17A增高(P<0.05,P<0.01);OVA/RSV组IL-13、IL-17A增高(P<0.01),IFN-γ虽降低,但无统计学意义(P>0.05),且IFN-γ、IL-13均较OVA组增高(P<0.05,P<0.01)。较OVA/RSV组相比,KLH组能显著升高IFN-γ(P<0.05,P<0.01);降低IL-13、IL-17A mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:咳喘六味合剂可抑制气道炎症,改善肺组织中炎性因子的表达,达到控制哮喘的目的。     

穴位贴敷联合穴位注射乌体林斯对OVA哮喘模型大鼠气道炎症和气道高反应的影响

目的:使用穴位贴敷及穴位注射乌体林斯治疗慢性持续期OVA哮喘大鼠并探讨其作用机制。方法:卵蛋白(OVA)致敏并连续激发制作哮喘Wistar大鼠模型,大鼠按随机数字表法分为正常组、哮喘组、贴注组、布地奈德雾化组、联合组5组,治疗1个月后ELISA法测定血清中Ig E,放射免疫法测定肺组织中IL-4、IL-5、ET-1,免疫组化法测定肺组织NF-κB表达,并分析NF-κB的IOD值。结果:模型组血清Ig E,肺组织IL-4、IL-5、ET-1水平,肺组织NF-κB/p65活化情况、IOD值均高于正常组,各治疗组以上指标均低于模型组,联合组较2单独治疗组降低最明显。结论:穴位贴敷联合穴位注射可能通过两方面作用抑制NF-κB的活化,进而抑制下游细胞因子IL-4、IL-5的活性来抑制哮喘炎症的发生,降低ET-1的产生来降低气道高反应性。     

SD大鼠哮喘模型建立方法及评价的比较研究

目的:观察不同致敏液成分、致敏液注射部位、激发液浓度、激发时长所造成的SD大鼠哮喘模型的差异,旨在建立一种较为成功的哮喘大鼠模型。方法:分别以10%OVA/Al(OH)_3混合液1 mL和10%OVA/Al(OH)_3+百日咳杆菌混合液1 mL作为致敏液;注射部位分为腹腔注射和五点注射(双侧足心、双侧腹股沟皮下、腹腔);以1%OVA或2%OVA作为激发液;激发时间包括7 d和21 d;经上述方法不同组合叠加造模后评价大鼠的一般活动状态、肺组织病理及肺功能检测结果。结果:OVA+百日咳腹腔注射组和OVA+百日咳五点注射组大鼠出现呼吸急促,呼吸困难等典型的哮喘症状,OVA腹腔注射组1部分大鼠出现较轻程度的哮喘症状,其余各组哮喘症状不明显。病理结果显示:OVA+百日咳五点注射组大鼠可见大量的嗜酸性粒细胞和淋巴细胞浸润、管腔狭窄、黏液栓生成、支气管痉挛;OVA腹腔注射组1和OVA+百日咳腹腔注射组主要表现为淋巴细胞浸润和杯状细胞较多;其余各组病理改变不明显。肺功能结果显示:叠加了百日咳后的腹腔注射组和五点注射组大鼠的I值和Rn值均较单纯OVA腹腔注射组升高,五点注射组大鼠的气道高反应性升高更加明显(P0.01)。结论:OVA结合灭活百日咳杆菌共同致敏、多点皮下注射联合腹腔注射能比较成功的构建SD大鼠哮喘模型。     

当归芍药散基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对阿尔茨海默病模型大鼠神经炎症的影响研究

目的 研究当归芍药散对β淀粉样蛋白_1-42(Aβ_1-42)诱导的阿尔茨海默症(Alzheimer’s Disease,AD)模型大鼠神经炎症及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用。方法 SD大鼠大脑双侧侧脑室注射Aβ_1-42构建AD动物模型。实验分为假手术组、模型组、当归芍药散组和阳性药物组。假手术组、模型组给予生理盐水灌胃，当归芍药散组给予当归芍药散24 g·kg^-1·d^-1灌胃，阳性药物组给予米诺环素36 mg·kg^-1·d^-1灌胃，连续灌胃14 d。Morris水迷宫实验测定大鼠的学习记忆能力。复制模型成功后取材，HE染色检测海马神经元组织病理形态学变化，免疫荧光法检测小胶质细胞和星形胶质细胞活化情况，实时荧光定量PCR(qPCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA表达情况，免疫印迹法(W...     

五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响

目的：探讨五虎汤加味对呼吸道合胞病毒（RSV）感染哮喘小鼠气道炎症及黏蛋白（Muc）5AC、转录激活因子3(STAT3)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)蛋白表达的影响。方法：70只雄性6～8周龄BALB/c小鼠，每组10只，随机分为正常组、哮喘组（卵清蛋白，OVA）、RSV感染哮喘组（OVA+RSV）、五虎汤加味组（高、中、低剂量分别为4.08、2.04、1.02 g·kg-1·d-1）、地塞米松组（0.1 g·kg-1·d-1）。OVA致敏及雾化激发哮喘模型，经RSV滴鼻连续3次感染（1.0×106 PFU·mL-1,50μL），构建RSV感染哮喘模型；五虎汤加味组予五虎汤加味灌胃；地塞米松组给予地塞米松注射液腹腔注射；正常组予等量生理盐水灌胃。末次激发24 h，在2.5%戊巴比妥钠麻醉下，留取肺组织进行苏木素-伊红（HE）、苦味酸-酸性品红（VG）染色观察气道炎症反应，免疫组织化学检测Muc5AC蛋白表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化（p）-STAT3、STAT3、p-NF-κB、NF-κB、NLRP3蛋白表达情况。结果...     

咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的:观察咳喘宁对支气管哮喘大鼠肺组织核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法:40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、咳喘宁高剂量组(27g生药/kg体质量)、咳喘宁低剂量组(13.5g生药/kg体质量)、桂龙咳喘宁对照组(0.41g/kg体质量),每组8只.除正常组外以卵蛋白致敏并吸入激发法制备大鼠支气管哮喘模型,各治疗组均从第1次哮喘激发开始(造模第3周)至处死前每天灌胃给药,激发并给药4周后处死大鼠,采用免疫组化法观察肺组织NF-κB表达和病理组织学变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织NF-κB表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,各治疗组均可显著降低支气管管壁和平滑肌厚度、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞数以及肺组织NF-κB表达量(P<0.05或P<0.01);且咳喘宁高剂量组优于桂龙咳喘宁组(P<0.05).结论:咳喘宁可通过抑制NF-κB的表达,降低炎症蛋白基因的转录,减少炎性介质产生,减轻气道炎症.     

健脾益肺汤抑制NF-κB/STAT3信号通路改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑作用研究

目的观察健脾益肺汤通过抑制核因子-κB/信号转导及转录激活因子3(NF-κB/STAT3)信号通路改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑的作用。方法将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和健脾益肺汤组,采用卵蛋白(OVA)联合氢氧化铝凝胶多次激发致敏法造模,健脾益肺汤组以5 g/(kg·d)进行灌胃,每日1次,持续30 d,对照组和模型组给予等量0.9%氯化钠注射液。末次给药1 h后处死大鼠后进行大鼠肺组织切片观察,测量肺内气管壁厚度和平滑肌厚度。检测肺泡灌洗液中蛋白含量INF-γ、IL-4、IL-6、IL-13含量。应用Western blotting检测大鼠肺组织中NF-κB、p-NF-κB、STAT3和p-STAT3含量。结果与对照组比较,模型组大鼠气管壁厚度和平滑肌厚度增加,肺泡灌洗液中蛋白、IL-4、IL-6和IL-13增加,肺组织中NF-κB、p-NF-κB、STAT3和p-STAT3增加,肺泡灌洗液中IFN-γ降低(P 0.05);给予健脾益肺汤干预后,模型组大鼠气管壁厚度和平滑肌厚度降低,肺泡灌洗液中蛋白、IL-4、IL-6和IL-13降低,肺组织中NF-κB、pNF-κB、STAT3和p-STAT3降低,肺泡灌洗液中IFN-γ增加(P 0.05)。结论健脾益肺汤能改善哮喘模型大鼠气道炎症及气道重塑,其机制可能与抑制NF-κB/STAT3信号通路,减轻大鼠炎性反应有关。     

翘芩清肺剂对哮喘大鼠平喘作用与变态及血管活性因子关系的研究

目的:研究翘芩清肺剂对哮喘模型大鼠的平喘作用及其与血小板活化因子(PAF)、白细胞总数(WBC)、嗜酸性粒细胞(EOS)及内皮素(ET)含量的变化关系,以探讨其作用机制.方法:将大鼠分为正常对照组、哮喘模型组、翘芩清肺剂高、中、低剂量组、地塞米松组和氨茶碱组,以卵白蛋白(OVA)建立哮喘大鼠模型.除正常组外,其余各组均在第1,8天以10％ OVA 1 mL ip致敏,第15天起雾化吸入1％ OVA激发哮喘,每天1次,每次20 min,连续2周,建立哮喘模型.从大鼠致敏第2天开始,各组大鼠以对应药物ig给药(其中地塞米松组从哮喘激发当日开始).正常组、模型组给生理盐水5 mL·kg-1·d-1,地塞米松组0.27 mg·kg-1·d-1,氨茶碱组50 mg·kg-1·d-1,翘芩清肺剂高、中、低剂量组26,13,6.5 g·kg-1.造模时间为4周,取材后处死大鼠,观察药物对病鼠的哮喘程度、哮喘潜伏期的影响;测定血清PAF,WBC,EOS及肺泡灌洗液(BALF)中ET含量的变化.结果:翘芩清肺剂能有效减轻哮喘模型的哮喘程度(P＜0.05)及明显延长病鼠的哮喘潜伏期(P＜0.01),降低病鼠的PAF,WBC,EOS含量及ET水平,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:翘芩清肺剂可有效改善哮喘状态,减轻哮喘发作,其作用机制可能与降低PAF,WBC,EOS及ET水平密切相关.     

白杨素调控NF-κB/Twist 1信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化的机制研究

研究白杨素(ChR)是否通过影响核转录因子κB(NF-κB)/Twist 1信号通路,进而抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞间质转分化(EMT)而产生抗肺纤维化作用。动物实验设对照组、博莱霉素组(BLC)、BLC+ChR(50 mg·kg^-1)和BLC+ChR(100 mg·kg^-1)剂量组,每组动物15只。气管注射BLC(7500 U·kg^-1)诱导肺纤维化大鼠模型,造模后连续灌胃给药28 d。细胞实验设对照组、转化生长因子-β1(TGF-β1)(5 ng·mL^-1)组、TGF-β1+ChR(1,10,100μmol·L^-1)组,Ⅱ型肺泡上皮细胞先用TGF-β1处理24 h,再用TGF-β1和(或)不同剂量ChR处理48 h。肺组织病理变化和胶原沉积情况分别采用HE染色、Masson染色和免疫组化法进行观察。肺组织和细胞内Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、E钙粘蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、核转录因子κB抑制因子α(IκBα)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-p65)和Twist 1 mRNA及蛋白表达分别采用qPCR和(或)Western blot法检测。动物实验结果显示,与BLC组相比,ChR给药28 d后,大鼠肺纤维化程度明显减轻;肺组织collagenⅠ表达明显下降(P<0.05或P<0.01);肺组织肺泡上皮细胞EMT程度明显受到抑制[ZO-1和E-cadherin的表达明显升高,α-SMA和vimentin的表达明显降低(P<0.05或P<0.01)];肺组织细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平、胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。细胞实验结果表明,不同剂量ChR能够明显减轻TGF-β1诱导的collagenⅠ的表达(P<0.05或P<0.01),显著抑制细胞EMT[E-cadherin和ZO-1的表达明显升高,vimentin和α-SMA的表达明显降低(P<0.05或P<0.01)],同时能够明显抑制TGF-β1诱导的细胞浆内IκBα和p65磷酸化水平并降低细胞核内NF-κB p65和Twist 1的表达(P<0.05或P<0.01)。综上结果推测ChR能够逆转肺泡Ⅱ型上皮细胞EMT、缓解肺纤维化,其机制可能与其降低细胞内IκBα磷酸化水平、抑制NF-κB p65的磷酸化和其核转移,进而下调Twist 1的表达有关。     

恒古骨伤愈合剂对肌筋膜疼痛综合征大鼠的干预作用

目的：明确恒古骨伤愈合剂对肌筋膜疼痛综合征(MPS)模型大鼠的干预作用，并从抗炎角度初步探索其缓解慢性疼痛的药理机制。方法：60只SD大鼠设立分组，分别为正常组、模型组、恒古骨伤愈合剂低、中、高剂量组(0.66、1.31、2.63 mL·kg^-1)，塞来昔布组(21 mg·kg^-1)，通过打击结合离心运动法建立MPS大鼠模型，造模同时灌胃给予恒古骨伤愈合剂和塞来昔布，SMALGO爪压力测痛仪检测大鼠激痛点压痛阈值，Von-Frey针和丙酮刺激法分别检测足底机械痛敏阈值和冷痛敏刺激反应；模型8周和10周，肌电图仪测定激痛点自发放电状态及抽搐反应；CatWalk步态分析仪检测大鼠步态变化；酶联免疫吸附测定法检测血清及激痛点中P物质(SP)、缓激肽(BK)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MPS大鼠激痛点中核转录因子-κB(NF-κB)抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化(p)-IκBα、NF-κB p65、p-NF-κB p65的蛋白表达水平；免疫荧光法检测激痛点中...     

基于 PPAR-γ/NF-κB 信号通路探讨肺心汤对野百合碱诱导肺动脉高压大鼠模型的作用及机制

目的 基于过氧化物酶体增殖物激活受体γ/核因子κB(PPAR-γ/NF-κB)信号通路探讨肺心汤(黄芪、桃仁、红花、葶苈子、赤芍等)对野百合碱诱导肺动脉高压(PAH)大鼠模型的作用及机制。方法 将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、西地那非组(0.025 g·kg^-1)及肺心汤低、中、高剂量组(11.7、23.4、46.8 g·kg^-1)。采用单次腹腔注射野百合碱溶液(60 mg·kg^-1)构建PAH大鼠模型。造模1 h后开始灌胃给药,每日1次,连续28 d。检测各组大鼠的血流动力学及超声心动图指标：右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(m PAP)、右心肥厚指数(RVHI)、肺动脉加速时间(PAAT)、肺动脉射血时间(PET)、三尖瓣环缩期位移(TAPSE)、右心室舒张末期内径(RVIDd)和右心室前壁厚度(RVAWT);采用HE染色法观察肺小动脉病理改变;免疫荧光法检测大鼠肺动脉中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平;ELISA法检测血浆白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水...     

基于“肺与大肠相表里”研究清半夏多糖对哮喘模型大鼠结肠水液代谢的影响

目的观察清半夏多糖对哮喘模型大鼠结肠水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)mRNA表达的影响,探讨清半夏多糖作为"大分子"多糖类成分,基于"肺与大肠相表里",对哮喘大鼠结肠水液代谢调节的作用机制。方法 48只SPF级Wistar大鼠,随机分至正常对照组、哮喘模型组、清半夏多糖高、中、低剂量组。采用鸡卵清蛋白(OVA)诱导致敏、激发,建立哮喘大鼠模型。PowerLab数据采集分析系统收集各组大鼠血氧饱和度,记录造模前后体质量变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清、肠黏液中核因子κB(NF-κB)的含量;苏木素-伊红(HE)、高碘酸-雪夫(PAS)染色观察结肠组织病理改变和杯状细胞数量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测结肠AQP5 mRNA变化。结果哮喘模型组大鼠的血氧饱和度显著降低(P0.01);阳性药组和清半夏多糖中剂量组大鼠血氧饱和度均有显著升高(P0.01);哮喘模型组大鼠体质量变化不大,而正常对照组和阳性药组体质量持续显著上升(P0.01),清半夏多糖各组大鼠体质量有上升趋势。ELISA结果显示,哮喘模型组大鼠血清和肠黏液NF-κB含量显著升高(P0.01);而阳性药组、清半夏多糖高剂量组能显著降低哮喘模型大鼠血清、肠黏液的NF-κB的含量(P0.01,P0.05),清半夏多糖中剂量能显著降低哮喘大鼠肠黏液中NF-κB的含量(P0.01)。HE染色结果发现,与正常对照组比较,哮喘模型组大鼠结肠组织出现明显病理改变,阳性药组、清半夏多糖各组与哮喘模型组比较具有缓解作用;PAS染色结果发现与哮喘模型组比较,阳性药组、清半夏多糖各组结肠杯状数量明显增多、染色加深。qPCR结果显示,阳性药组,清半夏多糖各组与哮喘模型组比较,AQP5 mRNA均有明显降低(P0.01)。结论基于"肺与大肠相表里"理论,研究发现清半夏多糖可能通过对哮喘模型大鼠结肠AQP5 mRNA的表达从而影响结肠黏液生成,进而干预哮喘进程,说明清半夏多糖可能是原药材发挥"燥湿化痰"的物质作用基础。