丹参多酚酸对大鼠缺血心肌线粒体酶的影响

目的:探讨丹参多酚酸对大鼠心肌缺血再灌注过程中线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的影响。方法:采用健康Wistar大鼠(n=40)建立Langendorff离体心脏灌注模型,并分为4组。对照组用Krebs液持续灌注120 min;缺血再灌注组平衡30 min后全心缺血30 min,再灌注60 min;丹参多酚酸预处理组平衡5 min后加入丹参多酚酸使其在灌流液中终浓度为14μmol/L,持续灌注25 min后全心缺血30 min,再灌注60 min;丹参多酚酸后处理组平衡30 min后全心缺血30 min,加入丹参多酚酸使其在灌流液中终浓度为14μmol/L,再灌注60 min。TTC染色观察心肌梗死面积,并用心肌梗死面积、乳酸脱氢酶(LDH)活性和心脏血流动力学(包括心率、主动脉流量、冠状动脉流量和心输出量)的变化评估大鼠心肌的损伤程度。利用差速离心法提取线粒体,并通过紫外分光光度法测定心肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性。结果:丹参多酚酸预处理组的心肌梗死面积和LDH活性均显著低于缺血再灌注组([24.47±2.14)%比(34.30±2.31)%、(81.46±13.39)U/g比(142.6±6.46)U/g,均P<0.05],缺血再灌注组与后处理组无明显差异。丹参多酚酸对缺血再灌注心肌的血液动力学没有明显作用,只是冠脉流量有较小幅度的增加。丹参多酚酸预处理组线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性显著高于缺血再灌注组([6.12±0.42)U/mg比(4.29±0.28)U/mg、(3.42±0.16)U/mg比(2.62±0.96)U/mg,均P<0.05],而与对照组无明显差异。丹参多酚酸后处理组线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性与缺血再灌注组无统计学差异。结论:丹参多酚酸可以维持心肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性,通过降低缺血再灌注对心肌线粒体的损伤保护心肌。     

线粒体钙单向转运体在缺血后处理中对心肌保护的作用

目的:探讨线粒体钙单向转运体是否参与心肌缺血后处理的保护作用.方法:离体雄性Sprague-Dawley大鼠全心停灌30 min、复灌120 min,复制心肌缺血复灌(ischemia and reperfusion,I/R)损伤模型;测定左心室力学指标;分光光度法测定复灌期间各时点冠脉流出液中乳酸脱氢酶(1actate dehydrogenase,LDH)含量,复灌结束后测定心肌formazan含量.结果:与I/R组相比,缺血后处理明显改善左心室动力学指标,使复灌期间冠脉流出液中LDH含量明显降低,formazan含量明显增高.与缺血后处理组相比,线粒体钙单向转运体开放剂精胺与后处理联合应用引起左心室作功、左心室内压最大上升和下降速率下降,冠脉流出液中LDH含量增高,formazan含量降低;而线粒体钙单向转运体阻断剂钌红与后处理联合应用,左心室动力学指标改善、LDH含量减少,但formazan含量无明显变化.结论:缺血后处理可通过阻滞线粒体钙单向转运体发挥心肌保护作用.     

线粒体Slo1通道激活引起的心肌保护作用涉及线粒体渗透性转换机制

目的: 研究线粒体大电导钙激活钾通道(mitoSlo1通道)开放是否具有心肌保护作用及其是否与抑制线粒体渗透性转换孔的开放有关.方法: 采用离体大鼠心脏灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min和复灌120 min复制局部缺血/复灌损伤模型,测定心肌梗死面积、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及各项心室力学指标.提取大鼠心肌线粒体,分光光度法测定钙诱导下520 nm吸光度的改变.结果: 与单纯缺血/复灌组相比,Slo1通道激动剂NS1619预处理组明显降低离体心脏缺血/复灌后的梗死面积[(17.21±5.59 vs 46.54±3.60)%]和复灌期冠脉流出液中LDH含量[(69.21±8.30 vs 253.79±15.85) U/L],促进左室动力学的恢复;线粒体渗透转换孔开放剂atractyloside拮抗了NS1619的作用.在分离的心脏线粒体,NS1619预处理组520 nm处吸光度的下降明显低于单纯加钙组[(10.70±3.22 vs 21.53±2.57)%].结论: mitoSlo1通道激活具有抗心肌缺血/复灌损伤的保护作用,其机制可能与抑制线粒体渗透转换孔开放有关.     

预处理对离体大鼠缺血再灌注心肌自噬的影响

目的 观察预处理对离体大鼠缺血再灌注心肌自噬的影响.方法 30只SD大鼠随机分为缺血再灌注组,预处理+缺血再灌注组.缺血再灌注组在左冠状动脉左前降支近心端中上1/3处结扎阻断血流,60 min后解除阻断,再灌注60 min.预处理+缺血再灌注组结扎阻断冠状动脉左前降支5min,然后恢复灌流5 min,重复3次.再阻断60 min,复灌60min.测量心肌细胞自噬发生情况,以及心功能指标,包括左心室收缩压(LVSP)、舒张压(LVDP)和最大压力变化速率(±LVdp/dtmax)值.分段收集流出液以计算冠脉灌流量(CPF)和测定蛋白质漏出量.结果 与缺血再灌注组比较,预处理可以明显激活心肌细胞自噬的发生.预处理能显著减少LVSP、LVDP及蛋白漏出量;使±LVdp/dtmax显著增加(均P＜0.05).自噬的激活与心肌损伤呈负相关.结论 预处理能够明显激活心肌细胞自噬,改善缺血再灌注损伤大鼠的心功能.     

右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注心律失常的影响及机制研究

目的观察右美托咪定预处理对大鼠缺血再灌注心律失常的影响及机制。方法 2015年3-6月于武汉大学基础医学院选择30只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(SO组)、缺血再灌注组(I/R组)、右美托咪定预处理组(DEX组)各10只。I/R组、DEX大鼠先结扎冠状动脉30 min引起心肌缺血,再松开结扎线给予心肌再灌注120min。SO组只带线不结扎,DEX组在缺血前2 h给予右美托咪定100μg/kg腹腔注射,I/R组给予等体积生理盐水。监测记录各组缺血再灌注心律失常的发生情况,以实时定量PCR法检测心肌组织L型钙通道(Cav1.2)、钠钙交换体(NCX)mRNA的水平。结果 SO组心律无明显变化,心律失常评分为0分。DEX组心律失常发生率低于I/R组,缺血30 min和再灌注120 min心律失常评分均低于I/R组(4.5±0.6 vs.2.1±0.4,3.7±0.5 vs.1.1±0.3,P均<0.05)。与SO组比较,I/R组、DEX组心肌组织Cav1.2和NCX的mRNA水平均升高,而DEX组较I/R组明显降低(P均<0.05)。结论右美托咪定预处理可减少缺血再灌注心律失常发生,与减少Cav1.2和NCX的mRNA水平,抑制钙超载有关。     

丙泊酚预处理对大鼠离体心脏低温缺血常温再灌注损伤的保护作用

目的 观察丙泊酚预处理对大鼠离体心脏低温缺血常温再灌注损伤的保护作用. 方法 采用Langendorff离体心脏灌注模型,60只SD大鼠离体心脏平衡20 min后随机分为5组(n=12):空白对照组(Con组)于37 ℃用Krebs-Henseleit缓冲液(K-H液)持续灌注175 min;缺血再灌注组(I/R组)于37 ℃用K-H液灌注40 min,27 ℃缺血75 min,37 ℃K-H液再灌注60 min;丙泊酚预处理1组(P1组)、2组(P2组)和3组(P3组)分别在缺血前给予含50、100和150 μmol/L丙泊酚预处理,预处理后同I/R组.观察平衡末(基础值)、缺血前及再灌注末的心率(HR)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室压力上升和下降速率最大值(±dP/dtmax);在平衡末、再灌注后1、10、20、30及60 min分别取冠状动脉流出液,测定其中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH),再灌注末测定心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;并测定再灌注后各组心肌梗死面积. 结果 P2组和P3组在再灌注后60 min时HR、LVDP、±dP/dtmax、SOD活性均高于I/R组(P<0.05) ;而LVEDP、心肌梗死面积、MDA含量小于I/R组(P<0.05) ;P2组和P3组再灌注后各时间点冠状动脉流出液中CK及LDH值均明显低于I/R组相应时间点所测值(P<0.05). 结论 100和150 μmol/L丙泊酚预处理对大鼠心肌低温缺血再灌注损伤有保护作用.     

不同浓度硝酸甘油对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的作用

目的:探讨不同浓度硝酸甘油(nitroglycerin,GTN)对大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤的作用。方法:采用离体大鼠心脏Langendorff灌流方法,结扎冠状动脉左前降支30 min和再灌注120 min复制局部缺血/再灌注损伤模型,测定各项心室动力学指标、冠状动脉流出液中乳酸脱氢酶(lactatede hydrogenase,LDH)含量及心肌梗死面积。结果:与单纯缺血/再灌注组相比,GTN高浓度组(2×10-6mol/L)抑制了再灌注后心功能的恢复(P<0.05~P<0.01),增大了心肌梗死面积(P<0.01),再灌注时冠状动脉流出液中LDH释放增加(P<0.05);GTN中浓度组(1×10-7mol/L)与单纯缺血/再灌注组相比,对心功能的恢复、心肌梗死面积和LDH含量改变不明显;GTN低浓度组(1×10-8mol/L)明显促进了再灌注后心功能的恢复,减小了心肌梗死面积,冠状动脉流出液中LDH释放减少(P<0.05~P<0.01)。结论:高浓度GTN加重心肌缺血/再灌注损伤,中浓度GTN对缺血/再灌注心肌作用不明显,低浓度GTN可保护缺血/再灌注心肌。     

缺血后处理对高血脂大鼠缺血/再灌注心肌热休克蛋白的影响

目的研究缺血后处理对高血脂大鼠缺血/再灌注心肌热休克蛋白（HSP70）的影响。方法选择高血脂SD大鼠36只,随机分为3组：假手术组、缺血再灌注组（对照组）和缺血后处理组,每组12只。制备大鼠心肌缺血/再灌注模型。缺血再灌注组：收紧结扎线缺血40 min,放松结扎线再灌注240 min;缺血后处理组：缺血40 min后,再灌注10 s,缺血10 s,连续3个循环,然后再灌注240 min;假手术组：开胸后穿线做套环,但不收紧结扎线。免疫组织化学染色检测HSP70的表达,TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,同时测定血清肌酸激酶活性。结果①血清肌酸激酶活性测定：再灌注结束后缺血后处理组和缺血再灌注组肌酸激酶活性明显高于假手术组,分别为（706.26±48.54）U/L、（914.48±61.37）U/L和（278.62±27.98）U/L（P〈0.05）,缺血后处理组明显低于对照组（P〈0.05）。②心肌凋亡细胞计数：再灌注结束后假手术组未见明显细胞凋亡（〈5%）,缺血后处理组心肌细胞凋亡率明显低于缺血再灌注组,分别为（13.9±2.6）%和（21.8±3.4）%（P〈0.05）。③心肌热休克蛋白表达：缺血后处理组较对照组心肌热休克蛋白表达增强（P〈0.05）。结论缺血后处理可减轻高血脂大鼠缺血再灌注损伤,其机制可能与增强热休克蛋白表达,减少心肌细胞凋亡有关。     

ω-3脂肪酸后处理对大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响

目的探讨ω-3脂肪酸后处理对离体大鼠缺血再灌注心肌抗氧化作用的影响。方法将60只SD大鼠随机分为4组:持续灌注组(A组)、缺血再灌注组(B组)、缺血后处理组(C组)以及ω-3脂肪酸后处理组(D组)。建立Langendorff离体大鼠心脏缺血再灌注模型,A组持续灌注150min,其余各组均平衡灌注30min,全心缺血30min,再灌注90min,C组在再灌注开始前进行4个循环的复灌20s/缺血20s,D组在再灌注开始前用ω-3脂肪酸灌注15min。灌流结束后取左心室心肌测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;透射电镜下观察心肌线粒体形态结构的改变,TTC染色计算心肌梗死面积。结果与B组相比,C、D组LDH、MDA水平显著降低(P<0.05),D组SOD水平显著升高(P<0.05);C、D组的大鼠心肌线粒体损伤程度明显减轻,心肌梗死面积明显缩小(P<0.01)。结论ω-3脂肪酸后处理可提高离体大鼠心脏缺血再灌注后心肌组织SOD的水平,改善心肌抗氧化能力,减轻心肌细胞线粒体损伤。     

脑利钠肽后处理对在体大鼠缺血再灌注后心肌损伤的影响

目的 探讨脑利钠肽(BNP)后处理对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤心肌的保护作用.方法 24只雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为:(1)假手术组(SHAM组):只开胸,不结扎冠状动脉;(2)缺血再灌注组(I/R组):结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注 3 h;(3)脑利钠肽组(BNP组):结扎冠状动脉左前降支45 min,再灌注 3 h,在再灌注前10 min,开始静脉予BNP 0.01 μg/(kg ·min),BNP静脉恒速维持至再灌注结束.用2,3,5,氯化三苯基四氮唑检测缺血再灌注心肌的梗死面积,用TUNEL方法检测缺血再灌注心肌的凋亡,检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的浓度以评估缺血再灌注心肌活性氧的水平.结果 SHAM组心肌无梗死,I/R组的大鼠梗死面积为(44.02±10.15)%,BNP组的梗死面积为(21.53±9.08)%(P＜0.05).SHAM组、BNP组与I/R组的心肌细胞凋亡指数分别为(3.13±1.62)%、(19.45±9.62)%和(38.46±12.31)% (P＜0.05).与I/R组相比,BNP组的缺血再灌注心肌组织中MDA减少(P＜0.05),而SOD增多(P＜0.05).结论 BNP后处理能减少在体大鼠缺血再灌注的心肌损伤,其机制与其减少心肌缺血再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡及降低心肌缺血再灌注损伤时的活性氧水平相关.     

青蒿素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其作用机制探讨

目的：探讨青蒿素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其可能作用机制。方法采用大鼠心肌缺血再灌注模型(缺血30 min,再灌注4 h),雄性SD大鼠30只根据随机数字表随机分为三组：假手术组(SO组,n=10)、缺血再灌注组(I/R组,n=10)和青蒿素治疗组(A+I/R组,n=10,Artemisinin：25 mg/kg,Tid,造模前1 d灌胃)。检测心肌损伤标记物肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌钙蛋白I (cTnI);检测炎症因子高迁移率族蛋白1(HMGB1)、白介素17A (IL-17A)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(INF-γ)和白介素6(IL-6);检测总p38(t-p38)和磷酸化p38(p-p38)。结果与SO组比较,I/R组中心肌损伤标记物CK [(3891±245.44) U/L vs (1539±140.57) U/L]、LDH [(1917±140.54) U/L vs (889±87.23) U/L]、cTnI [(66.34±2.13) pg/mL vs (26.45±1.72) pg/mL];炎症因子HMGB1[(0.423±0.059) vs (0.301±0.067)]、IL-17A [(149.29±5.88) pg/mL vs (55.26±4.33) pg/mL]、TNF-α[(185.27±5.61) pg/mL vs (95.34±3.56) pg/mL]、INF-γ[(418.86±12.37) pg/mL vs (223.35±10.51) pg/mL]、IL-6[(156.89±6.01) pg/mL vs (65.43±4.21 pg/mL]、p-p38[(0.416±0.025) vs (0.188±0.013)]表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);与I/R比较,A+I/R组中心肌损伤标记物CK [(1934±199.56) U/L]、LDH [(973±79.47) U/L]、cTnI [(38.1±2.69) pg/mL]和炎症因子HMGB1(0.174±0.026)、IL-17A [(93.65±2.69) pg/mL]、TNF-α[(145.85±3.92) pg/mL]、INF-γ[326.54±9.81] pg/mL]、IL-6[(95.47±3.16) pg/mL]、p-p38[(0.297±0.021)]表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论青蒿素可能通过抑制p38MAPK通路减轻I/R中炎症反应;青蒿素亦可通过抑制炎症反应减轻心肌缺血再灌注损伤。     

急性颅脑损伤CT评分与血糖、乳酸脱氢酶和超敏C反应蛋白表达关系的研究

目的观察急性颅脑损伤患者的CT评分与血糖、乳酸脱氢酶和超敏C反应蛋白（hs-CRP）的关系,以期为临床工作提供理论支持。方法选择88例急性颅脑损伤的患者作为观察组,进行螺旋CT评分,选取50例正常成人作为对照组,检测两组患者血清中血糖、乳酸脱氢酶和hs-CRP的表达,探讨其与病变程度的关系。结果急性颅脑损伤患者有明显的CT特征性表现,且血清中血糖[（11.35±2.21）μmol/L vs（5.14±1.32）μmol/L]、乳酸脱氢酶[（315.47±28.64）U/L vs（212.09±22.87 U/L）]和hs-CRP[（5.53±1.02）mg/L vs（1.02±0.26）mg/L]的表达水平较对照组升高（P〈0.05）;观察组中血糖、乳酸脱氢酶和hs-CRP的表达与GCS分期、中线情况及环池情况密切相关（P〈0.05）;线性相关分析显示,CT评分均与血糖、乳酸脱氢酶和hs-CRP呈正相关（P〈0.05）。结论急性颅脑损伤时CT诊断有特异性,且血清中血糖、乳酸脱氢酶和hs-CRP的表达升高,CT联合血糖、乳酸脱氢酶和hs-CRP的检测对早期判断病变程度及预后有重要价值。     

心肌细胞来源NCoR1对小鼠心肌梗死损伤的保护作用

  目的  探究心肌细胞来源的核受体辅抑制因子1(NCoR1)对小鼠心肌梗死损伤发挥的作用。  方法  构建心肌细胞NCoR1特异性敲除小鼠并根据不同手术处理分为假手术野生型组、假手术基因敲除组、心肌梗死野生型组和心肌梗死基因敲除组,每组各50只小鼠。统计各组小鼠在心肌梗死28 d的生存率和心功能水平;通过病理染色判断梗死面积与纤维化程度;测定小鼠血清心肌酶[磷酸肌酸激酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)]及炎症指标[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)]水平。  结果  与野生型小鼠相比,基因敲除组小鼠存活率更低,左心室射血分数[(30.39±5.13)% vs. (9.46±2.10)%]和左心室缩短分数[(14.62±2.69)% vs. (4.26±0.96)%]均明显下降,而左室容积[(101.50±14.07)μL vs. (197.50±22.41)μL]明显升高(均P＜0.05);小动物PET/CT提示心肌梗死后野生型小鼠对18F-FDG的摄取量更高[(2.74±0.06)MBq vs. (1.60±0.03)MBq],梗死程度[(36.22±0.86)% vs. (47.17±1.27)%]和纤维化程度[(32.70±0.85)% vs. (46.38±1.31)%]更低(均P＜0.05);血清学指标显示敲除小鼠心肌损伤更重且炎症水平更高(均P＜0.05)。  结论  心肌细胞中NCoR1在小鼠心肌梗死中发挥重要的保护作用。      

丹曲林对大鼠缺血再灌注心肌能量代谢的影响

目的 探讨丹曲林对大鼠心肌缺血再灌注过程中能量代谢的影响.方法 48只健康雄性Wistar大鼠分为对照组、缺血再灌注组和丹曲林处理组,建立Langendorff离体心脏灌注模型.各组均先用Krebs液灌注平衡30 min.缺血再灌注组在平衡30 min后全心缺血30 min,再灌注60min;丹曲林处理组Krebs液中加入5 μmol/L丹曲林.以氯化四唑染色法观察心肌梗死面积,并用乳酸脱氢酶(LDH)活性和血液动力学变化评估心肌损伤程度.采用高效液相色谱法测定心肌组织中高能磷酸化合物,以及嘌呤核苷酸补救合成的两个酶,次黄嘌呤(鸟嘌呤)磷酸核糖转移酶(HGPRT)和腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)的活性,来研究丹曲林对缺血再灌注心肌能量代谢的影响.结果 丹曲林处理的心肌梗死面积和LDH释放均显著低于缺血再灌注组[22.1%比25.3%、(70±6)U/g比(116±10)U/g,均P＜0.05];丹曲林对缺血再灌注心脏的血液动力学没有明显作用,只是冠脉流量有轻微增加.丹曲林处理组高能磷酸化合物含量明显高于缺血再灌注组(P＜0.05),而HGPRT和APRT的活性均显著低于缺血再灌注组[(7.63±0.72)nmol·mg-1·min-1比(12.42±1.12)nmol·mg-1·min-1、(4.14±0.22)nmol·mg-1·min-1比(4.57±0.39)nmol·mg-1·min-1,均P＜0.05].结论 丹曲林减轻缺血再灌注损伤,显著促进再灌注心肌的能量代谢,对心肌有保护作用.

Abstract：

Objective To investigate the effect of dantrolene on energy metabolism in rats with myocardial ischemia-reperfusion. Methods Forty-eight male rats were randomly divided into 3 groups:control group, ischemia-reperfusion group and dantrolene treatment group. With a Langendorff model system, the hearts were perfused with Krebs buffer for 30 min as pre-ischemia control. For ischemiareperfusion, the hearts were subjected to global ischemia for 30 min and reperfusion for 60 min. The dantrolene treatment group was perfused in the presence of 5 μmol/L dantrolene before ischemia.Tetrazolium chloride (TTC) staining, lactate dehydrogenase (LDH) release and hemodynamics were used to evaluate the tissue injuries. The effect of dantrolene on energy metabolism was evaluated by measuring the quantity of high-energy phosphates and the activity of 2 enzymes in purine salvage synthesis: hypoxanthineguanine phosphoribosyl transferase (HGPRT) and adenine phosphoribosyl transferase (APRT) by highperformance liquid chromatography (HPLC). Results The myocardial infarct size and LDH release in dantrolene treatment group were lower than those of ischemia-reperfusion hearts [22.1% vs 25.3%, (70 ± 6) U/g vs (116 ± 10) U/g, both P ＜0.05]. Dantrolene had no effect on the hemodynamics, except for a slight increase in coronary flow. The hearts receiving dantrolene showed a significantly higher levels of highenergy phosphates and a lower activity of HGPRT and APRT than those in the ischemia-reperfusion group [(7.63 ±0.72) nmol · mg-1 · min -1 vs (12.42 ± 1.12) nmol · mg-1 · min-1, (4.14 ±0.22) nmol ·mg-1·min-1 vs (4.57±0.39)nmol·mg-1· min -1 , both P ＜ 0. 05]. Conclusion Dantrolene is cardioprotective for ischemia-reperfusion injury through reducing infarct size and improving energy metabolism.     

ROS-mediated ERK activation in delayed protection from anoxic preconditioning in neonatal rat cardiomyocytes

Background The activation of extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2) has been shown to be important signaling pathway in the ischemic preconditioning (IPC) response. Recently, some studies suggest a key role for the mitochondrial ATP-sensitive potassium channel (mKATP) as both a trigger and an end effector of acute and delayed protection of IPC. Hence, this study was undertaken to elucidate the relationship between mKATP and ERK1/2 in the delayed protection mechanism of anoxic preconditioning (APC). Methods An APC model was established using cultured neonatal rat cardiomyocytes. Pharmacological agents ［diazoxide, 5-hydroxydecanoate (5-HD), 2-mercaptopropionylglycine (MPG), and PD98059］ were used to modulate mKATP and ERK1/2 activation. Cellular injury was evaluated by measuring cellular superoxide dismutase (SOD) activity, cell viability, and lactate dehydrogenase (LDH) release. The generation of cellular reactive oxygen species (ROS) and the activation of ERK1/2 were determined at different time points starting from the beginning of preconditioning with anoxia or diazoxide (an mKATP opener). Results Cell viability and SOD activity in the APC ［(81.9±11.4)%, （13.6 ± 3.7） U/L］ and diazoxide ［(79.2±12.4)%, （16.5±4.6） U/L］ groups were significantly higher than in the anoxia/reoxygenation (A/R) ［(42.2±7.3)%, （8.8±2.8） U/L］ group (all P&lt;0.01). LDH activity in the APC group ［(101.9±18.9) U/L］ and diazoxide group ［(97.5±17.7) U/L］ was significantly lower than in the A/R group ［(250.5±43.6) U/L］ (all P&lt;0.01). Both APC and diazoxide simultaneously facilitated intracellular ROS generation and rapid ERK1/2 activation. But the effects of APC and diazoxide were remarkedly attenuated by 5-HP (an mKATP blocker) and by MPG (a free radical scavenger). In addition, the ERK1/2 inhibitor PD98059 also abolished the cellular protective effects induced by diazoxide. Conclusion mKATP may mediate ERK1/2 activation during anoxia preconditioning by generating ROS, which then triggers the delayed protection of APC in rat cardiomyocytes.     

过氧化物酶体增殖物PGC-1α对肝缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)对肝缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建大鼠肝缺血再灌注损伤模型,恢复灌注后12 h,以蛋白免疫印迹(Western blot)检测PGC-1α表达情况,并检测肝脏活性氧、三磷酸腺苷(ATP)水平及血丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性变化,评估肝功能情况.另一方面,构建PGC-1α慢病毒过表达载体,并在大鼠缺血再灌注前转染,于缺血再灌注后,再以Western blot检测PGC-1α表达,肝脏活性氧、ATP水平和血肝酶活性变化,评估PGC-1α表达对肝缺血再灌注损伤的保护作用.结果 缺血再灌注肝脏PGC-1α表达较假手术组及对照组(未手术)明显降低(均P<0.05),同时肝脏活性氧族水平及ALT活性显著升高,而肝ATP产生减少(均P<0.05).PGC-1α慢病毒过表达载体转染显著上调缺血再灌注肝脏PGC-1α表达,同时肝脏活性氧族水平及ALT活性较未转染组显著降低,而肝ATP产生增加(均P<0.05).结论 PGC-1α表达有利于保护肝缺血再灌注损伤.     

Effect of protective myocardium by allitridum from decreasing apoptosis in rats with ischemia／reperfusion injury

INTRODUCTIONI schemic preconditioning (IP) is a powerful protec tive endogenous adaptive response of the heartagainst a prolonged ischemic insult[1,2]. However, theapplication of IP requires a physical cut of the blood sup ply which is difficult or impractical in many clinical situ ations. So a way to circumvent these potential problemsassociated with the clinical application of IP may be pre conditioning by pharmacological preconditioning ( PP)means or manipulation of the…     

缺血预适应KATP通道的实验研究

目的探讨KATP通道在缺血预适应（ischemic preconditioning，IP）中所起的作用。方法建立在体犬鼠缺血再灌（ischemia／reperfusion，IR）模型，将60只犬鼠随机分为5组：缺血再灌（IR）组，缺血预适应（IP）组，尼可地尔（NIC）组，格列苯脲（GLI）组，5-HD组。分别测定各组的心肌梗死范围，血清CK，LDH浓度，监测各组心电图，应用透射电镜观察其超微结构的变化。结果相对与IR组，IP组明显的减少了心律失常分值和室颤发生率（P〈0．05），而5-HD组，NIC组则有加重心律失常发生的趋势；相对IR组，NIC组可部分模拟IP作用，而5-HD组则完全取消了IP的抗心肌缺血的保护作用。结论KATP通道可能是IP发生的效应器；线粒体KATP通道特异性阻滞剂能阻断KATP通道的抗心肌缺血的作用，推测至少在缺血阶段，线粒体KATP通道在IP中发挥了主要的作用。     

缺血后处理对缺血再灌注大鼠心肌梗死和心肌细胞凋亡的作用

目的观察在体情况下缺血后处理(IPC)对兔心肌梗死范围及缺血心肌细胞凋亡的影响,并与缺血预处理(IP)心脏保护作用比较. 方法采用兔心肌缺血/再灌注模型,在缺血后、再灌注前多次短暂再灌/停灌处理. 以Even's blue-TTC法检测心肌梗死范围,TUNEL方法检测缺血心肌细胞凋亡. 结果与对照组相比,缺血后处理明显减小心肌梗死范围(12.5±5.4% vs对照组26.7±6.7%, P<0.01),缺血区心肌凋亡指数明显下降(14.6±7.4 vs对照组30.4±12.3, P<0.05). 结论对于已缺血心肌,再灌前予多次短暂复灌、停灌处理具有与IP类似缩小心梗范围作用,IPC对缺血心肌的保护效应可能与其抑制缺血心肌细胞凋亡有关.