基因工程HBsAg纯化技术的研究进展

乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）是乙肝疫苗（hepatitis B vaccine）的重要组成部分,注射乙肝疫苗是目前预防乙型肝炎感染最有效的方法。血源性乙肝疫苗因成本、来源和潜在其他病毒的感染已被淘汰,取而代之的是基因工程技术生产的第2代重组乙肝疫苗。主要介绍了国内外重组HBsAg在样品净化捕获、中度纯化和精纯3个阶段的主流纯化技术。     

新型乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗的免疫原性研究

目的 观察新型乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原中蛋白（MHBs)核酸疫苗的免疫原性。方法 以新型人体应用载体质粒pSW3891构建MHBs核酸疫苗（pSW3891/MHBs/adr)，对照组和实验组Balb/c小鼠分别基因枪法免疫对照载体质粒（pSW3891)和MHBs核酸疫苗，采用酶联免疫吸附试验检测抗HBs,LDH释放测定法检测小鼠特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）杀伤活性。结果 MHBs核酸疫苗可在体外高效表达，免疫小鼠后可产生高滴度抗HBs，血清阳性终点滴度达1：97200,小鼠脾细胞HBs特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）杀伤活性达78.81%。结论 新型MHBs核酸疫苗在Balb/c小鼠实验中表现出良好的体液和细胞免疫原性。     

产妇血清表面抗原定量与乳汁中乙肝病毒载量的相关性分析

目的 探讨携带乙型肝炎病毒(HBV)的产妇血清表面抗原(HBsAg)含量与乳汁中HBV-DNA含量的相关性,并指导母乳喂养.方法 对140例产妇采用荧光定量PCR法测定乳汁中HBV-DNA和化学发光法测定表面抗原含量,并进行相关性分析.结果 A组乳汁HBV-DNA阳性组表面抗原含量为(58 183.2±39 147.8) IU/ml,B组HBV-DNA阴性组表面抗原含量为(1848.8±2458.3) IU/ml.A组血清中表面抗原含量比B组高,差异有统计学意义(P＜0.01),乳汁中HBV-DNA含量与血清中表面抗原含量呈正相关(r=0.799,P＜0.01).结论 慢性HBV感染孕产妇血清中乙肝表面抗原的定量的测定及检测其乳汁中HBV-DNA含量,对阻断母婴传播和预防家庭内水平传播及对HBV感染孕产妇的诊治和疗效评估有着重要意义,特别是为HBV感染产妇选择是否母乳喂养提供了指导依据.     

接种乙型肝炎疫苗致过敏性紫癜一例

患儿男,4岁.因皮疹、腹痛、关节痛伴暗红色大便2 d,于2003年2月24日下午在上臂三角肌处皮下注射乙型肝炎疫苗1支,夜间即出现皮肤发痒,双眼睑浮肿不能睁开,面部、双下肢及臀部可见红色斑丘疹,同时双膝关节、踝关节肿痛,不能走路,伴腹痛、呕吐2次.     

乙型肝炎病毒DNA的含量与乙型肝炎病毒表面抗原的关系

目前 ,临床上常用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测乙型肝炎病毒 (HBV)血清标志物 ,一些实验室利用乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)ELISA法检测吸光度或S CO值 (S为样品的吸光度值 ,CO为CutOff值 )高低来观察药物的治疗效果 ,我们采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)的方法检测HBVDNA的含量[1] ,并与血清标志物HBsAg的S CO值高低进行比较 ,以探讨二者之间的关系。1　材料与方法1 1　材料　无偿献血者血清样品 2 0份 ,由本中心提供。PE 5 70 0荧光PCR仪 ,美国PE公司产。AT 2自动化加样系统 ,FAME自动化酶免分析系统 ,均为瑞…     

乙型肝炎及丙型肝炎DNA疫苗研究进展

DNA疫苗是目前疫苗研究的热点之一。已经构建的乙型及丙型肝炎病毒DNA疫苗主要以乙型肝炎病毒(HBV)包膜蛋白及丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白DNA疫苗为主,且大多可诱导高水平特异性体液及细胞免疫应答。HBV及HCV DNA疫苗的高效、简便、价廉、安全、多价等优点,将有助于其推广应用,在乙型和丙型肝炎及其并发症的防治中起重要作用。     

西藏林芝地区户籍人群中HBsAg携带率的调查

目的了解西藏林芝地区户籍人群中乙型肝炎病毒(HBV)HBsAg携带情况,为其预防提供有价值的基础资料.方法从2004年9月～2005年10月收集户籍人群1854人的血液样本,其中男1006例、女848例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg.结果西藏林芝地区户籍人口中HBsAg携带率为19.53%(362/1854),男性为20.78%(209/1006),女性为18.04%(153/848),高于全国的平均水平9.72%[2],在不同性别、不同年龄、不同民族之间HBsAg携带率无显著性差异(P＞0.05).结论西藏林芝地区户籍人群中HBsAg携带率非常高,可能与缺少主动性免疫、自我保健预防意识差有关.     

复方茵陈片对乙肝病毒HBsAg和HBeAg表达的影响

目的:研究复方茵陈片对HBsAg和HBeAg表达的抑制作用。方法:分别以不同浓度含药培养基培养2.2.15细胞,运用放射性免疫测定方法检测乙型肝炎表面抗原和e抗原。结果:复方茵陈片药液最大无毒浓度为600 g·mL-1。在此浓度基础上以培养基递减稀释药液,给药组的2.2.15细胞HBsAg和HBeAg cpm值明显低于细胞对照组。结论:复方茵陈片可以抑制HBV的复制和表达。     

乙型肝炎疫苗及其佐剂的研究进展

乙肝疫苗接种是阻断乙型肝炎病毒（HBV）的传播,预防和控制乙型肝炎的有效方法。本文就乙肝疫苗的发展,尤其是通过改善佐剂以提高疫苗免疫原性的研究进展进行了综述,包括铝佐剂乙肝疫苗、新型铝佐剂乙肝疫苗、脂质体乙肝疫苗、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（Gm-CSF）佐剂乙肝疫苗、植物佐剂乙肝疫苗、免疫激活序列佐剂乙肝疫苗、微球投递佐利系统乙肝疫苗。     

检测乙肝表面抗原大蛋白和前S1抗原的区别和临床意义

目的检测乙肝患者血清中乙肝表面抗原大蛋白（Hepatitis B Virus Large Surface Protein,LHBs）、乙肝前S1、HBV-DNA,探讨LHBs用于乙肝患者临床诊断的意义。方法采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测LHBs以及乙肝前S1,采用化学发光方法检测乙肝两对半,采用荧光定量PCR方法对患者HBV-DNA进行检测。结果 （1）相同乙肝模式患者血清LHBs与HBV-DNA检出率无统计学差异（P〉0.05）;（2）HBeAg阳性患者血清中LHBs与HBV-DNA阳性率均明显高于HBeAg阴性患者,差异有统计学意义（P〈0.05）;（3）相同乙肝模式患者血清乙肝前S1的检出低于HBV-DNA的检出,两者差异有统计学意义（P〈0.05）。结论乙肝表面抗原大蛋白（LHBs）可以弥补由于乙肝病毒变异引起的HBeAg检测的不足,并在一定程度上反映了乙肝患者肝功能状况。     

成人接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗后效果观察

目的观察重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗在成人中的免疫效果。方法对HBsAg、抗HBs、抗HBc三项指标全部为阴性、且未接种过乙肝疫苗的162名16岁以上人群,按照0、1、6的免疫程序接种10μg重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗,于全程免疫1个月后采血,测定血清中抗HBs水平。结果接种重组(酿酒酵母)乙肝疫苗的99人,抗HBs阳转率为94.95%,几何平均浓度为331.08mIU/mL;接种重组(汉逊酵母)乙肝疫苗的63人,抗HBs阳转率为98.41%,几何平均浓度为270.79mIU/mL。两组间抗HBs阳转率和几何平均浓度差异均无统计学意义(P>0.05)。接种两种疫苗均未观察到明显的不良反应。结论重组(酿酒酵母)乙肝疫苗和重组(汉逊酵母)乙肝疫苗均具有良好的安全性和免疫原性。     

转基因植物乙肝食用疫苗研究进展

文章参考了国内外近期文献，综述了转基因植物食用乙肝疫苗的研究进展，提出了存在问题及展望。     

Human monoclonal antibody against Hepatitis B virus surface antigen (HBsAg)

Hepatitis B virus (HBV) is one of the main pathogens responsible for hepatitis and hepatocellular carcinoma. Human plasma-derived Hepatitis B immune globulin (HBIG) is being used for prophylactic and liver transplantation currently. However, it may be necessary to replace a HBIG with a recombinant one because of limited availability of human plasma with high anti-HBsAg antibody titer and possible contamination of human pathogens. A Chinese hamster ovary (CHO) cell line, HB-C7A, was established which produces a fully human IgG1 that binds HBsAg. The HB-C7A exhibits approximately 2600 units/mg of antibody. The affinity (K(a)) of HB-C7A is 1.1 x 10(8) M(-1) by Biacore analysis and estimated 6.7-fold higher than that of Hepabig (a plasma-derived HBIG from Green Cross Corp., Yongin, Korea) by competition ELISA. The HB-C7A recognizes the conformational "a" determinant of HBsAg and binds HBV particle more efficiently than the Hepabig. The HB-C7A binds to HBV-infected human liver tissue but does not bind to normal human tissues. This HB-C7A has several advantages compared to plasma-derived Hepabig such as activity, safety and availability.     

基因重组乙型肝炎疫苗用于成人免疫效果

目的了解基因重组乙型肝炎疫苗用于成人的免疫效果。方法对经筛查乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)均阴性的一般状况良好的18~60岁成人240例,用基因重组乙肝疫苗20μg按0、1、6个月免疫程序免疫,静脉采血检测乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)。结果全程免疫后1个月时,抗-HBs阳性率84.6%,抗-HBs几何平均滴度(GMT)为74.65m IU/m l;6个月时,抗-HBs阳性率68.5%,抗-HBs几何平均滴度(GMT)为34.6 m IU/m l。结论对成人开展乙肝疫苗接种选用基因重组(CHO细胞)乙肝疫苗20μg是安全有效的。     

呼吸道合胞病毒疫苗研究进展

呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）疫苗的研制有近半个世纪的历史，包括福马林灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位／多肽疫苗、DNA疫苗等。研制安全有效的RSV疫苗对于预防RSV感染尤为重要。本文针对RSV疫苗的研究进展作一综述。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量与HBV-DNA含量的相关性分析

目的研究乙型肝炎病毒表面抗原定量与HBV-DNA含量的相关性,乙型肝炎疾病治疗提供可靠的依据。方法共收录2011年10月至2013年10月,在我院接受乙型肝炎治疗的患者资料,共100例,对患者临床治疗情况展开回顾性分析。重点研究表面抗原定量与HBV-DNA含量之间的关联性,通过试验检测对比两项指标的变化情况,为乙型肝炎治疗提供科学的理论依据。结果结合临床试验结果,发现表面抗原、HBV-DNA等两项指标会在不同情况下发生变化,主要是表面抗原含量会引起HBV-DNA的阳性率变化。本次当表面抗原浓度处于50²00 ng/mL范围,HBV-DNA阳性率上升幅度显著。这说明了乙型肝炎病毒扩散范围变大,病毒的传染性最高,对患者身体组织功能的破坏性更大。结论深入分析表面抗原及HBV-DNA含量的内在关联,可掌握患者的机体组织状况,指导临床治疗工作。     

治疗性乙型肝炎疫苗长期毒性试验

目的：根据我国相关法规,开展治疗性乙肝疫苗的长期毒性试验.方法：将治疗性乙肝疫苗以高、中、低三个剂量经皮下注射食蟹猴,另以等体积生理盐水作为空白对照,每天给药1次,连续21 d,停药后继续观察4周.以血常规、尿常规、血生化、血清抗体和补体、病理学等为观察指标.结果：各组动物外观、行为活动未见异常,未见死亡;试验组动物对受试疫苗均产生免疫应答,血清中可检测到相应抗体;高剂量治疗性乙肝疫苗对食蟹猴肝、肾功能指标有一定影响,停药后可恢复;未见明显的迟发性毒性反应.结论：治疗性乙型肝炎疫苗安全性良好,对食蟹猴的最大无毒作用剂量为21μg·kg-1,约为人临床拟用剂量的21倍,以体表面积计,约为单次人临床拟用量的8倍.     

不同剂量重组(酵母)乙肝疫苗对小鼠细胞免疫应答的研究

目的：探索不同剂量重组(酵母)乙肝疫苗对小鼠细胞免疫调节作用。方法：将HBsAg免疫Balb／C小鼠一周后取淋巴结制备淋巴细胞悬液，经HBsAg刺激培养48h后检测其诱导产生的IL-2、IFN-γ的水平，另一份细胞同样经HBsAg刺激培养56h后，用氚-胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)标记16h后检测T细胞增殖的水平。用不同剂量HBsAg免疫小鼠后，检测血清中抗HBsIgG2a的水平。结果：中、高剂量组小鼠产生的IL-2、IFN-γ、抗HBsIgG2a以及T细胞增殖的水平显著高于低剂量组和对照组。结论：一定剂量的重组(酵母)乙肝疫苗可上调小鼠的细胞免疫功能。     

核苷(酸)类似物抗乙型肝炎病毒耐药及应对策略

目的探讨核苷(酸)类似物(NA)抗乙型肝炎病毒耐药及应对策略。方法结合近几年相关文献,对NA耐药问题进行探讨。结果与结论核苷(酸)类似物现已广泛应用于临床。但NA尚不能清除乙肝病毒的共价闭合环DNA(cccDNA),因而不能彻底清除HBV感染,需要长期用药。但随着NA的长期应用,耐药性HBV的产生影响了该类药物的疗效,成为临床医师不能回避与忽视的问题。