乙型肝炎病毒X基因反式激活功能的研究进展

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｘ基因产物（ＨＢｘＡｇ）是一种广谱的转录激活蛋白。在多种细胞因子的参与下，ＨＢｘＡｇ可激活多种病毒和细胞的转录控制基因区，ＨＢｘＡｇ转录激活功能的机理及其在ＨＢＶ相关的肝病中的作用正在进一步研究中。     

乙型肝炎病毒X基因在大肠杆菌中亚克隆与鉴定

用ＨｐａⅠ和Ｂｇ１Ⅱ双酶切３２ｋｂＨＢＶＤＮＡ，得到近１１ｋｂ大小的完整ＨＢｘ基因，利用绿豆芽核酸酶将ＨＢｘ基因、载体ｐＢＲ３２２的ＢａｍＨⅠ酶切粘性末端切成平末端，在Ｔ４ＤＮＡ连接酶作用下进行体外重组后转化到大肠杆菌中，获得亚克隆Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ｐＢＲ３２２ＨＢｘ，并经药物平板筛选、电泳分析和ＤＩＧ标记的探针做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交实验证实。Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９ｐＢＲ３２２ＨＢｘ亚克隆的建立对进一步研究ＨＢｘ基因的功能、肝癌发生的机理以及乙型肝炎病毒感染的诊断等均有重要意义     

肝细胞肿瘤患者癌组织中HBx基因的检测

目的通过检测肝细胞肿瘤（ＨＣＣ）患者癌组织中ＨＢｘ基因探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）在 ＨＣＣ中的重要性。方法根据ＨＢｘ基因ＤＮＡ序列设计引物,采用特异性聚合酶链式反应（ＰＣＲ） 对３１例病理确诊并经手术切除后的ＨＣＣ患者癌组织进行了检测,同时采用ＰＣＲ方法检测了同一 患者血清ＨＢＶ ＤＮＡ。结果ＰＣＲ显示３１例ＨＣＣ患者癌组织中ＨＢｘ基因和血清中ＨＢＶ ＤＮＡ 的阳性率分别为７７．４％（２４／３１）和３２．３％（１０／３１）。结论ＨＢｘ基因片段广泛存在于ＨＣＣ患者癌 组织中并且在癌细胞中可能存在整合。     

乙型肝炎病毒转录后调节机制的研究进展

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）转 一的调节涉及多个环节，包括ＨＢＶ启动子之间的相互作用、多聚腺甘酸化位点的利用、肝细胞核蛋白与ＨＢＶ转录“转录后调节序列”的结合、ＨＢＶ转录体由细胞核向细胞浆的转运等。抑制性转录后调节序列结合蛋白 发现不仅对阐明突主抗ＨＢＶ感染的非细胞溶解机制具有重要意义，而且为抗ＨＢＶ治疗提供了一条新的途径。     

HBVX基因及其表达产研究进展

本文概述了乙型肝炎病毒Ｘ基因的转录，翻译与调控，Ｘ基因变异，Ｘ蛋白与ＨＢＶ复制，肝细胞癌发生的关系，以及Ｘ蛋白对ＭＨＣ激活的研究进展。     

无症状HBsAg携带者血清前S_2蛋白检测意义

无症状ＨＢｓＡｇ携带者血清前Ｓ_２蛋白检测意义江苏省苏州市卫生防疫站２１５００３金芳，闵秀瑾，刘春荣，许元根近来，有人建议采用测定乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ２蛋白取代传统的测定ＨＢｓＡｇ的方法，但测定ＨＢＶ前Ｓ２蛋白是否能确切反映ＨＢＶ的感染，以及无?..     

乙肝表面抗原酶联免疫实验质控结果分析

在对从赠进行ＨＢｓＡｇＥＬＩＳＡ检测中,为避免因检测试剂、实验室操作等原因造成的检测误差,１９９８年７月￣１９９９年６月对从业人员ＨＢｓＡｇ的检测中,利用已 质控ＨＢｓＡｇ标准品对ＨＢｓＡｇ的检测进行了变异系数分析,８轮质控中,６轮采用“即刻法”质控,２轮采用Ｌｅｖｅｙ－Ｊｅｎｎｉｎｇｓ质控图进行。结果表明,１２２次ＨＢｓＡｇＥＬＩＳＡ检测中,１１７镒质控ＨＢｓＡｇ标准品的Ｓ／ＣＯ值落ｘ－２ｓ至ｘ     

延边地区不同人群乙型肝炎病毒感染的初步调查

１９９８年通过对延足地乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染水平调查，了解延边地区乙型肝炎病毒感染的分布及流行规律、特点以及便提出有利的防治措施。经抽样调查对谗不同人群用ＥＬＩＳＡ法做了ＨＢｓＡｇ抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｓ三项阳性率调查，进行ｘ检验统计处理分析。发现ＨＢＶ感染率在年龄，性别、民族和职业分布各有显著差异。在４０－４９岁年龄组最高２２．４％，男性（５０．４％）高于女性（４４．３％），朝鲜族（５１．１％     

HBV前S1蛋白与HBV免疫标志物的相关性

ＨＢＶ是一种具有独特结构的嗜肝ＤＮＡ病毒。前Ｓ１蛋白（Ｐｒｅ－Ｓ１）是ＨＢＶＳ区基因编码产物,主要存在于Ｄａｎｅ颗粒表面的大分子蛋白; ＨＢｓＡｇ小球形中亦有少量Ｐｒｅ－Ｓ１,它在ＨＢＶ附着和侵入肝细胞的机制中起重要作用,现已证实［１,２］Ｐｒｅ－Ｓ１蛋白     

证券公司空气中几种污染物分布及评价

观察证券公司空气ＣＯ２和ＣＯ（红外线测试），甲醛和ＮＯｘ（比色法），采用撞击法测定溶血性链球菌（ＨＳ）和细菌总数（ＢＴ）。结果表明：除ＢＴ外，其他污染物日变化曲线均随股民人数和吸烟程度而变化，高峰值出现在上午１０时和下午３时，但后者比前者更为突出；各污染物浓度均随距地面高度上升而下降，甲醛、ＮＯｘ和ＨＳ浓度下降明显（Ｐ均＜０．０５）；除ＢＴ外，其它污染物超标（４８．３％～７６％）普遍并严重（最大３倍），因此，建议证券公司应列入公共场所卫生监督范畴     

绿色荧光蛋白基因与乙肝病毒e抗原基因在家蚕细胞中的表达

用绿色荧光蛋白基因（ｇｆｐ）和乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｅ抗原基因融合，构建了家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）重组转移载体ｐＢｍＧＨｅ，使融合基因处于多角体基因（ｐｌｈ）启动子控制之下。共转染后得到的重组病毒ｒＢｍＧＨｅ能在家蚕细胞中表达约５０ｋＤａ的ＧＦＰ／ＨＢＶｅ融合蛋白。被感染的细胞在紫外光下发射出美丽的绿色荧光。用ＥＬＩＳＡ检测，ＨＢｅＡｇ抗原活性滴度达到１１２８００。这种既能发射绿色荧光又具有抗原活性的双功能融合蛋白为研制一种新型的发光免疫诊断试剂开辟了一条新路。     

N-端融合蛋白对重组HBeAg抗原性的影响

目的　研究 Ｎ－ 末端融合蛋白对大肠杆菌中表达的 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性的影响。方法　用 Ｐ Ｃ Ｒ 法,从抗－ Ｈ Ｂｃ（ ＋ ） 血清标本中获得 Ｈ Ｂ Ｖ Ｐｒｅ ｃ － ｃ 基因片段,将其插入质粒 Ｔｒｃ９９ Ａ,重组成亚克隆 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ。以 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ为模板,扩增获得编码乙肝病毒核心蛋白１ ～１４０ 氨基酸的基因片段,加上终止信号,分别插入质粒ｐ Ｇ Ｅ Ｘ－ ２ Ｔ 和 Ｔｒｃ９９ Ａ 中,各自转化后,以 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导,大肠杆菌表达插入基因。以 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 方法测定表达产物的分子量和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｃ Ａｇ 滴度。结果　在 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导下,大肠杆菌中分别表达 Ｎ－ 端融合的 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 融合蛋白和非融合 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 蛋白。分子量各为４１０００ Ｄ 和１５０００ Ｄ。培养裂解物经 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定,融合蛋白 Ｈ Ｂｅ Ａｇ ： Ｈ Ｂｃ Ａｇ 的滴度比为２５６ ：１ ,非融合蛋白为１６ ：１ 。结论　 Ｎ－ 端融合蛋白 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性更接近血清 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 。     

203份HBV无症状携带者血清中前S1蛋白检测结果分析

目前已知道前Ｓ1蛋白主要存在于乙肝病毒 (ＨＢＶ)Ｄａｎｅ颗粒 ,由病毒ＤＮＡ长链Ｓ区前Ｓ1基因编码产生 ;ＨＢｅＡｇ是ｃ区前ｃ基因表达的产物。在实际工作中 ,鉴于ＨＢＶ ＤＮＡ检测方法复杂 ,成本昂贵 ,可将前Ｓ1蛋白和ＨＢｅＡｇ检测作为ＨＢＶ复制和具传染性的间接指标。为了探讨前Ｓ1蛋白检测的可行性和必要性 ,我们将学生体检中筛选出的 2 0 3份ＨＢｓＡｇ阳性及同人群 5 0份正常血清 ,进行乙肝二对半和前Ｓ1蛋白检测。并利用ＰＣＲ技术对ＨＢｅＡｇ阴性 ,抗ＨＢｃ和前Ｓ1蛋白阳性的33份血清作了ＨＢＶ ＤＮＡ检测。材料与方法　 (1…     

支气管肺泡灌洗术排尘治疗矽肺的实验研究

通过观察染尘后不同时间矽肺大鼠支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＳｉＯ２含量、细胞总数、ＬＤＨ活性．蛋白和脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量，结合矽肺病理变化情况，对支气管肺泡灌洗术（ＢＡＬ）治疗矽肺的可能性及有关机制进行初步探讨。实验结果表明：当染尘后不同时期ＢＡＬＦ中细胞总数、ＬＤＨ活性、总蛋白及ＬＰＯ含量均高于相应对照组，且差别有显著或非常显著意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。随着染尘时间延长，ＢＡＬＦ中ＬＤＨ含量、细胞总数、ＬＤＨ活性和总蛋白含量呈下降趋势，而矽肺病变则逐渐加剧。提示：ＢＡＬ可以通过排出肺内部分粉尘、细胞和非细胞成份，对减少肺内纤维化机会，延缓矽肺病变的发生发展将有积极作用。且以早期或急性矽肺施行ＢＡＬ为宜。     

前S1蛋白与乙型肝炎病毒传染性关系的病例对照研究

随机选择２４例前Ｓ１抗原阳性慢性乙型肝炎患者为病例组、２２例前Ｓ１抗原阴性慢性乙型肝炎患者为患者对照组、１６例无症状ＨＢｓＡｇ携带者为携带者对照组。检测其家庭共同生活成员乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染情况。结果表明：病例组家庭成员ＨＢＶ感染率，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃＩｇＧ３阳性和ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃＩｇＧ３阳性检出率均高于对照组，而且病例组家庭内ＨＢＶ感染危险度也大于对照组，比值比（ＯＲ值）分别为５．０和６．４，两对照组间未见差别。说明前Ｓ１蛋白是ＨＢＶ传染指标之一。     

复合蛋白锌治疗HBsAg、HBeAg、抗-HBc三阳患儿疗效观察

选择ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ三项血清学指标阳性患儿３５例（其中肝功正常２７例，ＡＬＴ单项增高８例）作为复合蛋白锌治疗观察对象，疗程３～６个月。结果３５例中ＨＢｓＡｇ转阴３例（８．５７％），ＨＢｅＡｇ转阴１２例（３４．２８％），抗－ＨＢｅ转阴２例（５．７１％），抗－ＨＢｃ转阴３例（８．５７％）。其中６例做了血清锌检查，其值在６．４～１２．４之间，处于较低水平。复合蛋白锌初步观察对ＨＢｅＡｇ转阴有一定作用，显示通过微量元素的调整对ＨＢＶ的复制可能有一定抑制作用。     

用家蚕细胞表达HBeAg及其应用

对经重组病毒感染的ＢｍＮ细胞的表达产物ＨＢｅＡｇ进行实验研究，并与菌产ＨＢｅＡｇ进行了比较。结果表明用家蚕细胞表达的ＨＢｅＡｇ分别作为捕获和酶标抗原建立的检测抗ＨＢｅ方法，不仅传统方法检测的阳性标本全部阳性，而且在传统方法阴性（抗ＨＢｃ阳性）组中，检出２例阳性，在抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ全部阴性的４２例标本中，也发现２例阳性。说明本法的敏感性高于传统方法。同时，用此方法制备的ＨＢｅＡｇ，在相同的蛋白浓度下，其抗原反应性也比用原核细胞表达的ＨＢｅＡｇ高出１００倍，且与抗ＨＢｃ交叉反应低１００倍，表明用家蚕细胞表达的ＨＢｅＡｇ不但效价高，且特异性、敏感性均优于大肠杆菌表达系统产生的ＨＢｅＡｇ。     

杂色曲霉素单克隆抗体的研制与特性鉴定

杂色曲霉素（ＳＴ）衍生后偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）或血蓝蛋白（Ｈ）上，制得复合抗原ＢＳＡ－ＳＴ和Ｈ－ＳＴ。将ＢＳＡ－ＳＴ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选到一株稳定分泌抗ＳＴ抗体的单克隆杂交瘤细胞株，该株细胞诱导的小鼠腹水及血清中均富含抗ＳＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ－ＳＴ）。经鉴定，ＭｃＡｂ－ＳＴ属于ＩｇＧ＿１，与Ｈ－ＳＴ反应之亲和力常数为１．２９ｘ１０￣９Ｌ／ｍｏｌ，其分子量为１６８０００（重链５３０００，轻链３１０００）。ＭｃＡｂ－ＳＴ的结构类似物的相对交叉反应下超过２％。应用ＭｃＡｂ－ＳＴ及Ｈ－ＳＴ建立的ＩＣ一ＥＬＩＳＡ法测定ＳＴ的线性范围是０．１～１０ｎｇ／ｍｌ，最低检测量是０．５ｐｇ／　２５μｌ，为快速检测粮食中ＳＴ提供厂重要手段。     

乙型肝炎患者血清前S1、S2蛋白检测的临床意义

乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)外壳蛋白包括ＨＢｓＡｇ、前Ｓ1和前Ｓ23种组分,其中前Ｓ1可能与ＨＢｓＡｇ的运输与分泌有关,前Ｓ2可能介导ＨＢＶ粘附人肝细胞。作者检测92例乙肝患者血清前Ｓ1和前Ｓ2蛋白,并观察与其血清ＨＢＶ标志物和ＨＢＶ-ＤＮＡ关系,以进一步探讨血清前Ｓ1、Ｓ2蛋白检测的临床意义。一、材料与方法:1.标本收集:本研究共收集连云港市第四人民医院肝炎科住院病人标本92份,全部病例均经临床明确诊断,采血后分离血清、-20℃保存备测。2.主要试剂:①ＨＢＶ标志物检测(包括ＨＢｓＡｇ、抗-ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗-ＨＢｅ、抗-ＨＢｃ检…     

乙型肝炎病毒感染血清标志物的阅读

现已发现乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)有 4个开放可读编码框架 (ＯＲＦ) ,即Ｓ、Ｃ、Ｐ、Ｘ区。Ｓ区编码表面抗原(ＨＢｓＡｇ)和前Ｓ1、前Ｓ2 等 ;Ｐ区编码多聚酶 (ＤＮＡ -Ｐ) ;Ｘ区编码Ｘ抗原和核心抗原 (ＨＢｘＡｇ、ＨＢｃＡｇ) ;Ｃ区又分前Ｃ区和Ｃ区 ,前Ｃ区 (1814～ 190 0氨基酸 )编码ｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ) ,Ｃ区 (190 1～ 2 4 50氨基酸 )合成ＨＢｃＡｇ。上述标志物在不同个体、不同时间的不同表达代表着不同的临床意义 ,现简述之。1　ＨＢＶ血清标志物表达形式组合及临床意义1 1　ＨＢＶ感染表达的模式　见表 1。表 1　ＨＢＶ感染的表达模…