肝纤维化形成机制研究进展

肝纤维化是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复过程中的代偿性反应 ,以细胞外基质 (ＥＣＭ )在肝内过量沉积为病理特征。肝纤维化已成为世界范围内的一个主要健康问题。现已证实肝纤维化发生的中心事件是 :由损伤所引起的肝星状细胞(ＨＳＣ)的激活及其转化为肌成纤维细胞 ,从而大量合成各种细胞外基质蛋白 ,沉积于肝脏最终导致肝纤维化。本文就肝星状细胞的激活及调控对近年来肝纤维化形成机制的有关进展作一简介。一、肝星状细胞的活化与ＥＣＭ的产生ＨＳＣ是肝脏间质细胞之一 ,位于肝细胞与窦内皮细胞间的Ｄｉｓｓｅ腔内。正常时呈静止状态 ,…     

星状细胞的活化

星状细胞 (ＨＳＣ)位于肝窦周围 ,Ｄｉｓｓｅ腔内层 ,较长的细胞突触包绕肝窦 ,呈星状 ,大小介于肝细胞与库普弗细胞之间 ,胞浆内富含脂滴 ,脂滴内含有维生素Ａ ,胞浆内有丰富的粗面内质网 ,在正常肝脏中ＨＳＣ约占非实质细胞的三分之一 ,或肝脏细胞总数的 1 3 %。在肝损害时Ｈ     

胰岛素对肝星状细胞的影响:细胞形态及细胞动力学观察

胰岛素作为一种多功能的激素类蛋白 ,在体内不仅调节着糖、脂肪和蛋白质代谢 ,还促进某些细胞的分裂和增殖[1] 。肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣｓ)被视为肝纤维化发生的中心环节。研究ＨＳＣｓ激活和增殖的因素 ,将有助于阐明肝纤维化的发病机制。我们旨在了解胰岛素对ＨＳＣｓ的生长、增殖作用 ,为探讨肝纤维化的发病机制提供依据。　　一、材料和方法1.ＨＳＣｓ的分离、培养及鉴定 :改良Ｆｒｉｅｄｍａｎ等[2 ] 分离ＨＳＣｓ的方法 ,采用Ⅳ型胶原酶和链酶蛋白酶循环消化分离ＨＳＣｓ,结蛋白 (Ｄｅｓｍｉｎ…     

加强对肝星状细胞的研究

18 76年Ｋｕｐｆｆｅｒ提出肝脏中存在具吞噬能力的星状细胞 (ｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ) ,后来Ｉｔｏ经过电镜观察发现星状细胞与库普弗细胞是不同的细胞群体。直到 1971年才由Ｗａｋｅ证实Ｉｔｏ所描述的星状细胞就是最初Ｋｕｐｆｆｅｒ提出的星状细胞 ,而Ｋｕｐｆｆｅｒ发现的“吞噬”现象实际上是由混杂的库普弗细胞引起的。至此 ,肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ)才被明确为肝脏的一类细胞群体。ＨＳＣ约占肝脏非实质细胞总数的33%或肝脏细胞总数的 13% ,它位于肝窦内皮下的Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,其最明显的特…     

肝星状细胞表达的受体及其生物学意义

肝星状细胞（ｈｅｐａｔｉｃ　ｓｔｅｌｌａｔｅ　ｃｅｌｌ,ＨＳＣ）被认为是介导肝纤维化发生的关键细胞,其激活后不仅参与肝损伤的调控,对细胞因子网络平衡,肝脏微生态重建等也具有决定性作用,显然,其生物学功能的复杂性由其表达受体的复杂性所决定。 一、增殖调控受体 血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）受体：静止期ＨＳＣ并不表达ＰＤＧＦ受体。激活的ＨＳＣ表达ＰＤＧＦ受体,并对ＨＳＣ具有强有力的丝裂原活性,在参与肝组织慢性炎症过程中的多肽生长因子中,双链ＰＤＧＦ是ＨＳＣ最强的有丝分裂原,是诱导ＨＳＣ激活及增殖最强的细…     

肝纤维化过程中肝星状细胞的研究进展

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌ,ＨＳＣ ;以前称为贮脂细胞、Ｉｔｏ细胞等 )位于肝窦Ｄｉｓｓｅ间隙内 ,在肝损伤过程中被激活经表型转化而成为肌成纤维细胞 (ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｅｒ,ＭＦＢ) ,产生大量细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )促进肝纤维化的形成 ,是肝纤维化形成的中心环节。一、ＨＳＣ的活化(一 )ＨＳＣ活化的启动与持续ＨＳＣ的活化是由静止的ＨＳＣ向ＭＦＢ转化的过程。涉及到细胞—细胞间、间质—细胞间相互作用。有学者提出了三步级联活化模式 ,把ＨＳＣ活化分…     

庚型肝炎病毒在慢性肝炎肝硬化中致病性及病理特征

探讨ＨＢＶ在慢性肝炎肼硬化当中感染率、临床脑病理特征,应用ＥＬＩＳＡ法检测血清抗－ＨＧＶ,用ＨＧＶＮＳ５抗原制备ＭＣＡｂ,检测５４例慢笥肝炎硬化患者肝组织中ＨＧＶ抗原,同时应用ＳＰ法分别对肝组织进行ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ、ＨＣＶ ＮＳ３Ａｇ肝脏免疫组化检测。结果提示５４例肝病患者肝组织检出２７．７８％ＨＧＶ抗原阳性。其中２４例慢性肝炎轻度中５例;１６例慢性肝炎中度中５２称;１５例肝硬中５例。ＨＧＶ     

肝星状细胞提取方法

肝星状细胞 (ＨＳＣ)作为致肝纤维化的主要细胞而成为目前研究热点。但由于ＨＳＣ比重与枯否氏细胞、淋巴细胞等有交叉 ,且易与肝细胞相吸附 ,导致分离及纯化较难。 1982年Ｋｎｏｃｋ[1] 等人成功分离出ＨＳＣ后 ,迄今为止已出现多种改良的ＨＳＣ提取方法 ,但国内尚未见有关ＨＳＣ提取方法的综述性报道 ,现综述如下 :一、原理在用循环灌注法去除肝胶原组织后 ,根据ＨＳＣ内含脂滴 ,密度较轻 ,它与肝脏内其它细胞在不同密度的离心液中有不同的浮密度的原理 ,采用密度梯度离心方法 (连续性和非连续性两种 )使ＨＳＣ存在于一高度提纯的区带中而…     

HCV NS5和核心抗原在肝细胞癌及癌旁肝组织的表达及意义

采用ＳＰ法检测４６例肝细胞癌及其３８例癌旁肝组织中ＨＣＶ ＮＳ５抗原，ＨＣＶ核心抗原和ＨＢｓＡｇ。结果在癌组织中的检出率分别为１５．２％，２１．７％和１９．６％，癌旁组织中的检出率分别为３１．６％、３６．８％和７８．９％；ＮＳ５抗原、核心抗原伴ＨＢｓＡｇ者分别为２１．７％和２３．９％，不伴ＨＣＶ核心抗原、ＮＳ５抗原者分别为４７．８％和５０％。两种ＨＣＶ抗原和ＨＢｓＡｇ均定位于肝细胞和肝癌细胞的胞浆     

星状细胞在肝纤维化中的作用

肝纤维化是肝脏中纤维生成与降解失去平衡所致。正常肝脏能精密地调节这种平衡 ,以维持细胞外基质 (ＥＣＭ)的自身稳定 ,肝纤维化时纤维生成超过了纤维降解 ,ＥＣＭ便过度地在肝脏沉积。这不仅表现为ＥＣＭ的增加 ,而且ＥＣＭ的构成成分和肝内分布也发生变化。肝星状细胞 (ＨＳＣ)既是产生ＥＣＭ的主体细胞 ,又具备产生降解ＥＣＭ相关酶类的能力 ,因而目前认为ＨＳＣ在肝纤维化的纤维生成与降解失衡上发挥重要作用 ,是肝纤维化产生与发展的中心环节。一、星状细胞是细胞外基质生成的主体细胞体外培养表明 ,ＨＳＣ一经活化就转变为特化的成肌…     

Smads信息分子与肝星状细胞的活化

肝星状细胞 (ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ ,ＨＳＣ)激活、转化为肌成纤维细胞 (ｍｙｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ)是肝纤维化形成的关键。转化生长因子 β1(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ 1)是这一病理过程的必需的生物调节因子。ＴＧＦ β1激活ＨＳＣ的信息传导经过丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶受体及其下游效应信息分子 ,即Ｓｍａｄｓ蛋白家族 ,启动胶原基因表达[1] 。由于ＴＧＦ β1与ＨＳＣ、Ｓｍａｄｓ信息分子和肝纤维化的密切关系 ,有关Ｓｍａｄｓ信息分子家族对ＴＧＦ β1信息转导的调控和影响…     

贮脂细胞和肝细胞胶原合成能力的比较

目的为明确肝纤维化过程中细胞外基质（ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ，ＥＣＭ）的细胞来源以及贮脂细胞（ｆａｔｓｔｏｒｉｎｇｃｅｌ，ＦＳＣ）和肝细胞（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ，ＨＣ）在肝纤维化胶原合成中的作用．方法用胶原酶和链霉蛋白酶Ｅ消化大鼠肝脏，结合密度梯度离心法分离培养大鼠ＨＣ和ＦＳＣ，在此基础上，用３Ｈ脯氨酸掺入结合胶原酶消化法和斑点杂交法，观察ＨＣ和ＦＳＣ胶原的合成及Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型前胶原基因的表达．结果发现体外培养的ＦＳＣ合成胶原的能力较ＨＣ强，约为ＨＣ的两倍（Ｐ＜００５）；ＦＳＣ胶原基因表达的水平同样较ＨＣ高（Ｐ＜００５）．结论ＦＳＣ在ＥＣＭ胶原合成中起主要作用，但ＨＣ的作用也不容忽视．     

急性重型肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒的检测

检测急性重量型肝炎患者肝组织中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的存在状况及探讨与发病的关系,采用免疫组化方法以抗－ＨＣＶＮＳ５单克隆抗体对２６例急性重型肝炎患者尸检肝组织中的ＨＧＶ等抗原进行了检测,结果显示２６例肝组织中检测出ＨＧＶ阳性６例（２３．１％）ＨＧＶＮＳ５Ａｇ阳性着色颗粒表达于残存的肝细胞浆内,阳性细胞呈片簇状分布于汇管区周围,６例中４例重叠有ＨＢＶ或／和ＨＣＶ感染,肝组织中ＨＢｓＡｇ或／和ＨＣＶ     

亚临床性肝性脑病检测方法的评价

肝性脑病 (ｈｅｐａｔｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ,ＨＥ)是由严重肝病引起的 ,以代谢紊乱为基础的中枢神经系统功能失调的综合征 ,其主要临床表现是意识障碍、行为失常和昏迷。 1970年Ｚｅｅｇｅｎ对临床上无肝性脑病症状、体征的肝硬化患者进行可定量的心理智能测试 ,发现部分患者存在智能障碍 ,从而引起人们的重视。这种临床无脑病症状 ,精神和神经功能常规检查正常 ,按四级分类法不属于肝性脑病范围 ,而用严格心理学测试或大脑诱发电位检查时表现异常者称为亚临床性肝性脑病 (ｓｕｂｃｌｉｎｉｃａｌｈｅｐａｔｉｃｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ ,ＳＨＥ)。ＳＨＥ可发生于多种急性和慢性肝脏疾病患者 ,如肝硬化、病毒性肝炎、血色病、Ｗｉｌｌｓｏｎ’ｓ病和血吸虫肝病等。ＳＨＥ检测到的患病率各家报道不同 ,大致在5 0 %～ 70 %之间。结果不同可能由于下述原因 :病因不同 ,病情轻重不同 ,患者年龄不同 ,更重要的是检测方法、诊断标准不同而使结果不同。有报道 ,肝脏疾病的严重程度与ＳＨＥ的发生有关 ,测试异常率在ＣｈｉｌｄＡ级患者为 14 % ,ＣｈｉｌｄＢ或Ｃ级为 4 5 %。动脉血氨升高的老年患者较同样浓度动脉血氨的...     

重视肝纤维化细胞外基质降解中TIMPs的研究

在正常肝脏纤维组织中存在着细胞外基质(ＥＣＭ)的合成与降解的动态平衡 ,肝纤维化及肝硬化时纤维结缔组织的形成 ,是各种不同致病因子导致ＥＣＭ合成与降解的失衡所致。纤维组织的形成不是一个静止过程 ,而是一个动态过程 ,因此 ,研究肝纤维化及早期肝硬化的可逆性 ,在注意胶原合成过程的同时 ,应加强胶原降解过程的研究。1　胶原降解主要由基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ)介导既往对肝纤维化ＥＣＭ合成与沉积的研究比较深入。ＥＣＭ主要由胶原以及蛋白多糖、糖蛋白等组成 ,肝星状细胞 (ＨＳＣ)是其主要来源。处于“静止”期的ＨＳＣ主要合成Ⅳ…     

肝星状细胞与肝纤维化的研究进展

一、ＨＳＣ的增殖活化及凋亡 当肝脏受到物理、化学及生物因素的刺激时,ＨＳＣ增殖并激活,转变为“肌成纤维细胞（ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ, ＭＦＢ）”,表达ａ－平滑肌动蛋白（ａ－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ, ａ—ＳＭＡ）、合成ＥＣＭ等。Ｇｒｅｓｓ一ｆｉｅｒ等［１］根据已有的研究结果,提出了ＨＳＣ激活的“三步级联反应”模式。（１）炎症前期阶段,肝细胞受损后释放丝裂原,旁分泌作用于ＨＳＣ从而引起ＨＳＣ增殖,且肝细胞丧失接触抑制。（２）炎症阶段,活化的ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、巨噬细胞及血小板释放细胞因…     

肝癌凋亡相关抗原的表达与原位末端标记的关系

目的探讨Ｆａｓ等凋亡相关抗原在肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达及其与凋亡的关系．方法剖腹ＨＣＣ３０例，标本作Ｆａｓ，Ｂａｘ，Ｉｃｅ，Ｂｃｌ２免疫组化和原位末端标记（ＩＳＥＬ）．结果ＩＳＥＬ与ＨＥ的凋亡形态及定位基本吻合，ＨＣＣ有小片及大片的凋亡；凋亡与坏死形态不同，且坏死ＩＳＥＬ阴性，可与凋亡鉴别．凋亡及健全癌细胞Ｆａｓ，Ｂａｘ阳性率均较高．癌旁及正常肝的Ｆａｓ，Ｂａｘ均较ＨＣＣ者低．Ｂｃｌ２在ＨＣＣ表达甚低．结论凋亡的ＨＣＣ组织Ｆａｓ表达高，较健全癌细胞、癌旁及正常肝组织的表达为高     

手术证实柏—查实综合征66例

柏查氏综合征(ＢｕｄｄＣｈｉａｒｉｓｓｙｎｄｒｏｍｅ,ＢＣＳ)是指由于各种原因引起的肝脏小叶静脉以上、右心房入口处以下、肝静脉(ＨＶ)主干和/或肝段下腔静脉(ＩＶＣ)任何性质的阻塞,造成ＨＶ或和ＩＶＣ回流受阻,导致窦后性门脉高压,使肝脏出现肝窦瘀血、出血、坏死,食管、胃底、双下肢、胸、腹壁静脉曲张等一组临床症候群[1]。1　临床资料1.1　一般资料　我们1985年3月～1996年5月间收治ＢＣＳ共66例,男48例,女18例,男∶女2.7∶1,年龄12～56岁,病程1个月～10年,平均2年。其中合并肝炎的8例,合并肝癌、大量吸烟酗酒者及静脉炎者各4例,…     

非酒精性脂肪性肝炎肝细胞内细胞色素P450ⅡE1的表达

目的　探讨非酒精性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝组织内细胞色素Ｐ４５０ Ⅱ　Ｅ１（ＣＹＰ　Ⅱ　Ｅ１）的表达情况。方法　采用抗生蛋白链菌素－过氧化酶法（ＳＰ）检测ＮＡＳＨ大鼠肝组织ＣＹＰ　Ⅱ Ｅ１的表达情况。同时常规苏木素伊红染色观察肝脏病理学变化。结果ＮＡＳＨ模型组动物ＣＹＰ ⅡＥ_１阳性细胞显著增加；且多在中央静脉周围，这与肝脂肪性变趋于一致。结论 ＮＡＳＨ肝组织中存在着ＣＹＰ Ⅱ　Ｅ_１的高表达。     

低密度脂蛋白对大鼠肝贮脂细胞的调控作用

目的研究低密底脂蛋白（ＬＤＬ）对大鼠肝贮脂细胞（ＦＳＣ）的调控作用。方法采用放射配体结合法检测肝ＦＳＣ是否存在ＬＤＬ受体。通过噻唑蓝（ＭＴＴ）法、透明质酸（ＨＡ）放射免疫分析法及３Ｈ－脯氨酸掺入法测定ＬＤＬ对ＦＳＣ增殖、ＨＡ及胶原合成的影响。结果大鼠肝脏ＦＳＣ上存在特异性的、高度亲和性的及可饱和性的ＬＤＬ结合位点：ＬＤＬ能促进ＦＳＣ增殖、ＨＡ及胶原合成。结论ＬＤＬ参与ＦＳＣ增殖、转化和基质合成，并可能通过受体介导影响ＦＳＣ功能。