糖尿病肾病患者肾小球中α-辅肌动蛋白-4和肾病蛋白的表达及其临床意义

目的通过检测α-actinin-4mRNA和nephrinmRNA在糖尿病肾病（DN）患者肾小球组织中的表达,探讨其在糖尿病肾病患者蛋白尿发生中的作用。方法用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测α-actinin-4mRNA和nephrinmRNA在测糖尿病肾病组、单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组患者肾小球组织中的表达。结果糖尿病肾病组nephrinmRNA表达显著低于单纯糖尿病、单纯血尿组及对照组,糖尿病肾病组α-actinin-4mRNA表达显著低于单纯糖尿病、单纯血尿组及对照组,两者表达存在正相关。结论糖尿病肾病患者肾小球组织nephrin和α-ctinin-4mRNA的表达减少,导致蛋白尿的产生。     

雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的 观察雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocinmRNA和蛋白表达的影响.方法 将体重200 ～ 260 g的50只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和4个模型组（n=10）,后者分别应用链脲佐菌素造模成功后分为糖尿病肾病组（DN组）、厄贝沙坦组、雷公藤多甙组和雷公藤多甙联合厄贝沙坦组.给予相应干预8周后,检测血尿指标,HE染色观察肾组织病理变化,逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测各组大鼠肾皮质中nephrin和podocinmRNA和蛋白表达.结果 （1）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin mRNA （0.507±0.024比0.276 ±0.015,P ＜0.01）和podocin mRNA （0.533±0.024比0.463±0.022,P＜0.01）表达上调.（2）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin蛋白（0.738±0.029比0.199±0.012,P＜0.01）和podocin蛋白（0.811 ±0.032比0.227±0.014,P＜0.01）表达上调.（3） HE染色和Masson染色显示,糖尿病组大鼠肾脏肾小球体积增大,系膜基质弥漫增多,系膜细胞明显增多,基底膜弥漫增厚,间质可见灶性淋巴细胞及单核细胞浸润,厄贝沙坦组和雷公藤多甙组病变较糖尿病组减轻,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾脏组织病变较厄贝沙坦组和雷公藤多甙组进一步减轻.结论 雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病大鼠的肾脏足细胞具有保护作用,这种保护作用可能是通过上调足细胞nephrin和podocin mRNA和蛋白表达有关.     

雷公藤多甙对DN大鼠肾组织中Ⅳ型胶原表达的影响

目的探讨治疗雷公藤多甙糖尿病肾病（DN）的效果及机制。方法将24只SD大鼠随机分为观察组、模型组及对照组各8只,观察组及模型组均经尾静脉注射STZ 65 mg/kg制备DN模型。制模成功后观察组予雷公滕多甙10 mg/kg＋2 ml蒸馏水灌胃,模型组及对照组予等量（约2 ml）蒸馏水灌胃,均为1次/d、连续8周。采用放免法测24 h尿白蛋白、尿肌酐（U）和血肌酐（P）、全部尿量V（ml）,按公式U×V/P（ml/min）计算内生肌酐清除率（CCr）。采用免疫组化法检测各组肾组织中Ⅳ-C表达。结果观察组和模型组CCr及24 h尿蛋白均显著低于对照组,其中观察组显著低于模型组（P均〈0.05）;模型组肾小球、肾小管中Ⅳ-C表达均明显高于对照组,观察组肾小球中Ⅳ-C表达显著低于模型组（P均〈0.05）。结论雷公藤多苷可改善DN大鼠肾功能,可能机制为降低肾小球组织中Ⅳ-C表达;此为DN治疗提供了理论依据。     

2型糖尿病肾病患者肾组织中血管内皮细胞生长因子及其受体的变化

目的了解血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体(VEGF-R)在2型糖尿病肾病患者肾组织中的变化及其与糖尿病肾病(DN)临床与病理表现之间的关系.方法以正常肾组织为对照,采用特异性抗体和免疫组织化学染色方法,对30例DN患者肾组织中VEGF和VEGF-R的分布及其强度变化进行了观察,并结合临床及肾脏病理进行了分析.结果DN患者肾小球VEGF和VEGF-R无论在分布上,还是在强度变化上与正常人相比均有明显差异.DN患者肾小球VEGF和VEGF-R表达增加与患者蛋白尿(83.3%vs33.3%,P＜0.01)、糖尿病视网膜病变(66.7%vs16.7%,P＜0.01)关系密切,而与高血压,糖化血红蛋白水平之间无明显相关性.DN患者肾小球VEGF和VEGF-R表达增加还与肾小球内皮细胞损伤所致的一些组织形态学改变,如K-W结节(72.2%vs16.7%,P＜0.05)、肾小球内皮细胞增生(66.7%vs33.3%,P＜0.05)及微血管瘤形成(61.6%vs25.0%,P＜0.05)的发生显著相关.结论DN患者肾组织中VEGF及VEGF-R2的表达增加与DN患者的蛋白尿形成、糖尿病视网膜病变和内皮细胞损伤所致的形态学改变关系密切.VEGF介导了DN患者肾小球内皮细胞损伤和功能紊乱的发生.     

阿霉素肾病大鼠nephrin及podocalyxin蛋白表达及泼尼松干预作用的探讨

目的 探讨阿霉素肾病（ADN）大鼠肾组织nephrin及podocalyxin蛋白表达及泼尼松的干预作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分成ADN组、泼尼松组、对照组,于0、4、8周测定大鼠24h尿蛋白（24hUP）、血清胆固醇（Cho）及白蛋白（Alb）。实验8周取肾组织观察病理形态改变,计算肾小球细胞外基质面积与肾小球面积之比（ECM/GA）,评估肾脏病理积分。用免疫组织化学法观察肾小球nephrin、podocalyxin表达。结果 实验4周时,ADN组较之对照组24hUP、Cho升高（P〈0.05）,Alb下降（P〈0.01）。实验8周时,泼尼松组较ADN组24hUP、Cho下降,ECM/GA及肾脏病理积分降低,nephrin、podoralyxin表达增多,Alb升高（P〈0.01）。ADN组nephrin、podlocalyxin表达与24hUP、Cho、ECM/GA及肾小球病理积分均呈负相关,与Alb呈正相关;nephrin与podocalyxin呈正相关。结论 nephrin、podocalyxin与蛋白尿的发生及发展密切相关。泼尼松能减轻ADN大鼠的蛋白尿及肾脏病理损害,其机制可能通过上调nephrin、podoralyxin表达来发挥肾保护作用。     

膜性肾病肾活检组织中nephrin和podocin表达改变及其意义

目的:检测膜性肾病(MN)患者肾活检组织中nephrin、podocin的表达和分布,分析MN蛋白尿与nephrin和podocin表达改变的关系,探讨肾小球足细胞裂孔隔膜蛋白nephrin和podocin在MN蛋白尿发生中的作用. 方法:选取2005年1月至2008年1月经肾穿刺活检病理确诊为II、III期MN的患者22例,其中肾病综合征组15例(MN-A组),非肾病综合征组7例(MN-B组),临床上排除系统性红斑狼疮、乙肝相关性肾病、糖尿病肾病以及肿瘤等继发性肾脏疾病;另取5例因肾脏肿瘤行一侧肾切除的远端相对正常肾脏组织作为对照(对照组).收集并分析患者的主要临床表现、内生肌酐清除率(Ccr)、尿常规、24h尿蛋白定量、血清白蛋白(Alb)、血脂等相关临床资料;按常规方法取肾组织制备3 μm厚石蜡切片,行HE、PAS、PASM、Masson染色普通光镜以及免疫组化(IgG、IgA、IgM、C3、C4、C1q)检查;各组肾组织行nephrin、podocin及IV型胶原α3链免疫荧光双套色染色,激光共聚焦显微镜下观察nephrin、podocin在两组MN及对照组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析. 结果:22例MN病理分期分别为II期14例,III期8例;肾小球内免疫球蛋白及补体的沉积以IgG和C3为主,呈颗粒状沿毛细血管袢弥漫性分布.对照组肾组织免疫荧光染色可见nephrin和podocin沿肾小球毛细血管袢呈均匀连续线样分布;MN患者肾小球内nephrin与podocin表达皆明显减弱,免疫荧光强度降低,分布不均,部分区域有节段性缺失,部分由线状分布变成颗粒状分布,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);MN-A组与MN-B组比较,MN-A组肾小球nephrin和podocin的平均表达量均低于MN-B组,差异有统计学意义(P<0.05),且尿蛋白量与nephrin或podocin表达呈负相关. 结论:MN患者肾小球内nephrin和podocin表达量均降低,分布形式亦发生改变,部分呈节段性缺失或不连续颗粒状分布,并与尿蛋白排泄量呈负相关,提示nephrin和podocin表达的减少及分布异常可能与蛋白尿发生及蛋白尿程度有关;但其损伤的始动因素仍需进一步探讨.     

缬沙坦联合丹参对糖尿病大鼠肾脏病理结构及TGF-β1表达的影响

目的 应用缬沙坦联合丹参对糖尿病肾病（DN）大鼠模型进行干预,观察其对肾小球平均体积、肾毛细血管基底膜平均厚度及肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,探讨两药联用的肾保护作用及可能的机制.方法 应用链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病（DM）大鼠模型,随机分为4组：正常对照组、模型组、缬沙坦组、缬沙坦与丹参联合治疗组（联合组）.8 w后观察各组血糖、糖化血红蛋白（HbAlc）、内生肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAE）、尿β2微球蛋白排泄率（β2-MG）等变化.光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球的平均体积、电镜观察并测定肾小球毛细血管基底膜平均厚度.免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达.结果 与对照组相比,模型组及各给药组大鼠血糖、HbAlc、Ccr、UAE、β2-MG均显著上升（P＜0.01）;肾小球平均体积、毛细血管基底膜平均厚度均显著扩大（P＜0.01）;肾组织中TGF-β1的蛋白质表达显著上调（P＜0.01）.缬沙坦和（或）丹参干预后,上述上调指标除血糖、HbAlc外均被显著抑制（P＜0.05或0.01）,联合组优于缬沙坦组（P＜0.05）.结论 缬沙坦联合丹参对DM大鼠具有改善肾脏病理结构的肾保护作用.其机制可能与其下调肾组织中TGF-β1的表达有关.     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠肾组织BMP-7表达的影响

目的探讨缬沙坦对2型糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织骨形态发生蛋白-7（BMP-7）表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、DN模型组和缬沙坦治疗组。高脂高糖加小剂量链脲佐菌素建立DN模型。缬沙坦治疗12周后,检测大鼠血糖（BG）、血肌酐（sCr）、肾质量（KW）、肾肥大指数（KW/BW）、TC、TG和24 h尿白蛋白（UAL）。用光镜观察肾组织病理学变化。用免疫组织化学方法及实时定量PCR检测BMP-7、转化生长因子-β1（TGF-β1）含量。结果糖尿病大鼠24 h UAL明显高于对照组（P〈0.01）,DN模型组高于缬沙坦治疗组（P〈0.01）。缬沙坦明显改善肾小球硬化及肾间质纤维化（P〈0.05）;与对照组比较,DN模型组肾组织TGF-β1 mRNA表达上调（P〈0.01）,BMP-7 mRNA表达显著下调（P〈0.01）,缬沙坦可显著抑制肾组织TGF-β1过度表达（P〈0.01）,部分上调BMP-7的表达（P〈0.01）。结论缬沙坦可减少蛋白尿及细胞外基质,改善肾脏病理,其机制可能与其下调TGF-β1及恢复BMP-7的表达有关。     

培哚普利对阿霉素肾病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨培哚普利对阿霉素肾病大鼠肾脏损害的保护作用及其机制.方法 将SD大鼠45只随机分为对照组15只、模型组30只.模型组大鼠尾静脉一次注射盐酸阿霉素7 mg/kg,对照组大鼠尾静脉注射等容积生理盐水,注射阿霉素1周后尿蛋白定量＞ 100 mg/24 h即算建模成功.将建模成功的26只大鼠随机分为肾病模型组和培哚普利治疗组,各13只.培哚普利治疗组给予培哚普利0.5 mg/（kg·d）灌胃,共6周.对照组和肾病模型组给予等容积生理盐水灌胃.检测各组大鼠24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、白蛋白、胆固醇、甘油三酯、血尿素氮及血肌酐,光镜观察肾组织病理变化,免疫组化和Western blot检测nephrin和TGF-β1的表达.结果 与对照组相比,肾病模型组及培哚普利治疗组24h尿蛋白定量、胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、血肌酐和肾小球TGF-β1表达均升高（P＜0.05）,但培哚普利治疗组上述指标均低于肾病模型组（P＜0.05）.与对照组相比,肾病模型组及培哚普利治疗组血清总蛋白、白蛋白、肾小球nephrin表达降低（P＜0.05）,但培哚普利治疗组上述指标高于肾病模型组（P＜0.05）.结论 培哚普利可上调阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin的表达,抑制TGF-β1的表达,减少尿蛋白排泄,并减轻肾组织病理损害.     

肾病综合征患儿肾小球中nephrin、podocin、α-actinin及WT1的表达

目的 :检测肾病综合征 (NS)患儿肾小球足细胞中nephrin、podocin、α actinin及WT1的表达和分布特征 ,以探讨这些分子在蛋白尿发生中的可能作用。　 方法 :用免疫荧光染色 ,激光扫描共聚焦显微镜采集图像及图像分析的方法 ,检测 2 5例NS患儿 [其中肾脏病理为微小病变 (MCD) 2例 ,系膜增生性肾小球肾炎 (MsPGN) 17例 ,局灶节段性肾小球硬化 (FSGS) 5例 ,新月体性肾小球肾炎 (CREGN) 1例 ]、9例单纯性血尿患儿及 9例对照肾组织中nephrin、podocin、α actinin及WT1的表达。　 结果 :(1)NS患儿肾小球中podocin的表达量 (82 9± 2 1 5 )与单纯性血尿组 (10 3 6± 2 0 2 )及对照组 (110 8± 15 4 )比较差异显著 (P =0 0 12 ,P =0 0 0 1) ;WT1的表达量 (6 1 3± 9 2 3)与对照组 (6 9 7± 9 2 7)比较差异也显著 (P =0 0 37) ;nephrin和α actinin表达量 (12 9 3± 2 2 6 ,10 4 3± 19 0 )与单纯性血尿组(132 1± 7 4 0 ,94 9± 13 0 )及对照组 (133 9± 8 5 ,10 3 6± 15 0 )比较差异均不显著 (P >0 0 5 )。 (2 )对照组肾组织中nephrin和podocin的染色均见于肾小球毛细血管壁 ,呈均匀、线状分布 ;α actinin主要沿肾小球毛细血管壁呈点状分布 ;WT1的染色主要集中于肾小球细胞核。 (3)病理表现为MsPG     

间充质干细胞条件培养基对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的利用微量渗透泵持续恒量地向糖尿病肾病(DN)模型大鼠腹腔内泵入间充质干细胞(MSCs)条件培养基,观察其对DN大鼠的保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为3组:正常组,DN模型组和MSCs条件培养基组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养;DN模型组大鼠每天给予高脂高糖饲料;MSCs条件培养基组是对造模成功的DN大鼠植入Alzet微量渗透泵。检测血糖、血清胰岛素和甘油三酯等指标,观察肾脏病理情况,免疫印迹法(Western blot)检测肾组织nephbin蛋白的表达情况。结果与DN模型组大鼠相比,MSCs条件培养基组的血糖、血清胰岛素、24 h尿蛋白、血肌酐和血尿素氮均显著增高,差异具有统计学意义(P0.05)。MSCs条件培养基组大鼠的肾小球系膜截面积与肾小球体积均显著减小(P0.05)。与正常组大鼠相比,MSCs条件培养基组大鼠nephrin蛋白的表达情况显著降低(P0.05),但与DN模型组相比显著增加(P0.05)。结论微量渗透泵持续泵入MSCs条件培养基可显著改善DN大鼠肾功能。     

骨化三醇对阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin表达的影响

目的研究骨化三醇对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾组织损伤及足细胞裂隙隔膜分子(nephrin)表达的影响。方法6周龄雄性SD大鼠分为:正常对照组(Control组),ADR肾病组,骨化三醇治疗组(ADR+VD组)。大鼠模型以单次尾静脉注射阿霉素(7.5 mg/kg),治疗组大鼠灌胃法服用0.25μg/(kg·d)骨化三醇。所有大鼠在处死前称重、留尿检测24 h尿蛋白(UP),留血检测血清白蛋白(Alb)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cre);苏木素-伊红(HE)染色、马松三色染色(Masson)、透射电镜(TEM)观察肾病理学结构;免疫荧光观察nephrin的定位;免疫组织化学染色半定量检测nephrin的表达;Western印迹检测nephrin蛋白表达。结果与ADR肾病组比,ADR+VD组24 h UP、BUN、Cre、肾脏指数显著降低(P<0.05),Alb水平显著升高(P<0.05);组织化学染色显示骨化三醇减轻肾组织系膜基质增生及纤维化;TEM显示骨化三醇修复足细胞损伤;免疫组化与Western印迹检测结果显示高度一致性,骨化三醇升高ADR引起的nephrin表达降低(P<0.05)。结论骨化三醇能够减轻ADR引起的肾损伤和大量蛋白尿,这与改善肾足细胞标记分子nephrin低表达密切相关。     

艾塞那肽对糖尿病肾病小鼠足细胞的保护作用

目的:探讨艾塞那肽对糖尿病肾病小鼠足细胞的作用。方法:通过给予C57BL/6J小鼠高脂饮食并注射链脲佐菌素建立糖尿病肾病模型,按随机数字表法将其分为糖尿病肾病对照组(DN组, n＝8)、艾塞那肽干预组(DN＋Ex组, n＝8)。同时将普通饲料喂养的C57BL/6J小鼠作为正常对照组(NC组, ...     

The PI3K/p-Akt signaling pathway participates in calcitriol ameliorating podocyte injury in DN rats

Objectives

The present study aimed to investigate the relationship between PI3K/p-Akt signaling pathway and podocyte impairment in DN rats as well as the protective effect of calcitriol.

Methods

SD rats were randomly divided into four groups: normal control (NC), normal treated with calcitriol (NC + VD), diabetic nephropathy (DN) and DN treated with calcitriol (DN + VD); all VD rats were treated with 0.1 μg/kg/d calcitriol by gavage. DN model rats were established by intraperitoneal injections of streptozotocin (STZ). Rats were sacrificed after 18 weeks of treatments.

Results

In the present study, increased albuminuria was observed as early as 3 weeks of diabetes and continued to increase more than six-fold throughout the length of the study (18 weeks). Expectedly, animals receiving the treatment with calcitriol was protected from this increase, lower about one third. Meanwhile, the expression of podocyte specific markers, including nephrin and podocin, together with PI3K/p-Akt was significantly decreased in DN rats, whereas calcitriol reversed these above changes accompanied by elevated the expression levels of VDR. Additionally, a positive correlation was observed between the expression levels of nephrin and VDR (r = 0.776, P < 0.05). Likewise, the expression of nephrin was positively correlated with both PI3K-p85 and p-Akt (r = 0.736, P < 0.05; r = 0.855, P < 0.05, respectively).

Conclusion

PI3K/p-Akt signaling pathway participates in calcitriol ameliorating podocyte injury in DN rats. The manipulation of calcitriol might act as a promising therapeutic intervention for diabetic nephropathy.     

FoxO1变化对糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的:观察心肌中插头转录因子O1（FoxO1）在糖尿病（DM）小鼠心肌中表达量变化及对小鼠心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。方法: 将90只健康雄性Swiss小鼠随机分为5组:假手术（Sham）组、I/R组、DM+Sham组、DM+I/R组及DM+FoxO1SiRNA+I/R组,每组18只。采用高糖高脂饮食加链脲菌素(Streptozocin,STZ)腹腔注射诱导建立DM小鼠模型。采用FoxO1SiRNA心肌点注射下调心肌FoxO1表达。心肌I/R损伤模型的建立,采用结扎心脏冠状动脉左前降支30 min后再灌注方案实施。心肌再灌注3 h后,用原位缺口末端标法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡。用ELISA法检测心肌中 Caspase-3的活性。用Western blot法检测心肌中FoxO1的表达量。心肌再灌注24 h后,用2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法检测心肌梗死（MI）的面积。结果: 与Sham组比较,DM+Sham组心肌中FoxO1的表达量明显增高（P<0.01）。与I/R组比,DM+I/R组MI的面积增大（P<0.05）,心肌细胞凋亡数量及Caspase-3活性明显增加（P<0.01）。与DM+I/R组相比,DM+FoxO1SiRNA+I/R组心肌FoxO1的表达量下调（P<0.05）,MI面积及Caspase-3的活性减小（P<0.05）,心肌细胞凋亡数量减少（P<0.01）。结论: DM小鼠心肌中FoxO1表达量的增加可加重心肌I/R损伤;而下调心肌中FoxO1的表达量后,心肌I/R损伤减轻。     

人组织激肽释放酶对糖尿病肾病大鼠的影响

目的：探讨基因重组人组织激肽释放酶（KLK）对大鼠糖尿病肾病的影响。方法：大鼠经链脲佐菌素诱导制成糖尿病（DM）模型于第8、12、16周留取尿标本。比色法检测大鼠血浆KLK变化，放射免疫技术、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫组化技术测定肾组织一氧化氮（NO）、环磷腺苷（cAMP）、血内皮素1（ET-1）变化及光镜电镜观察肾组织形态改变。结果：（1）DM组与正常对照组（C）组大鼠比较，体重（BW）、血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量下降（P〈0．01或P〈0．05）。而DM组的血糖（BG）、血肌酐、血尿素氮（BUN）、肾重（KW）体重比值、ET-1、尿白蛋白（Ualb）排泄率、24h尿蛋白定量均高于（NC）组（P〈0．01或P〈0．05）。（2）糖尿病KLK治疗组（DK）组与NC组大鼠比较，BW、血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量下降（P〈0．01或P〈0．05）；而BG、KW／BW、Ualb排泄率、24h尿蛋定量均高于c组（P〈0．01或P〈0．05）。DM组、DK组间BG、BUN、BW、KW／BW无显著性差异，血浆KLK活性、肾组织中NO、cAMP含量，DK组明显高于DM组（P〈0．01或P〈0．05）。而血肌酐、Ualb排泄率、24h尿蛋白定量则显著低于DM组（P〈0．01或P〈0．05）。（3）①16周时，DM组血浆KLK活性明显低于8周时的水平（P〈0．01），明显较NC组降低（P〈0．01）；而DK组血浆KLK活性明显高于8周时的水平（P〈0．05），该组病变较DM组轻。②DK组12周、16周尿白蛋白排泄率均低于8周时的水平（P〈0．05），16周时，DK和DM比较尿白蛋排泄率差异显著（P〈0．05）。③16周时，DM组肾组织中NO、cAMP含量则明显低于C组（P〈0．01），而与DM组相比，DK组肾组织中NO、cAMP含量较高（P〈0．01或P〈0．05）。结论：给予外源性人组织KLK可抑制糖尿病大鼠肾小球系膜细胞增殖、基质增多，可使尿蛋白排泄减少，延缓糖尿病肾病的发展。     

二甲双胍调节糖尿病大鼠心房小电导钙激活钾通道亚型蛋白表达的信号通路

目的探讨蛋白激酶A(PKA)/钙调蛋白Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路在二甲双胍(Met)调节2型糖尿病(T2DM)大鼠心房小电导钙激活钾通道亚型KCa2.2和KCa2.3蛋白表达中的作用。方法健康雄性Wistar大鼠40只,随机选8只喂普通饲料为对照组(Con组),另32只喂高脂高糖饲料联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素构建T2DM大鼠模型后,再随机分为DM组、Met组、H-89组(腹腔注射PKA抑制剂H-89)和KN-93组(腹腔注射CaMKⅡ抑制剂KN-93),每组8只。用ELISA检测大鼠心房组织PKA活性,qRT-PCR检测CaMKⅡmRNA表达,Western blot和免疫组织化学检测KCa2.2、KCa2.3和磷酸化CaMKⅡ(p-CaMKⅡ)蛋白表达。结果 Con组、DM组、Met组和H-89组PKA活性分别为0.74±0.04、0.50±0.05、0.69±0.03和0.48±0.03。与DM组比较,Met组PKA活性明显提升(P<0.01);与Met组比较,H-89组显著抑制PKA活性(P<0.01)。Con组、DM组及Met组CaMKⅡmRNA分别为1.00±0.07、0.61±0.03和0.92±0.09。与Con组比较,DM组CaMKⅡmRNA表达明显降低(P<0.01);与DM组比较,Met组CaMKⅡmRNA表达明显增加(P<0.01)。与Con组比较,DM组心房组织p-CaMKⅡ和KCa2.2蛋白表达均明显降低,KCa2.3蛋白表达明显升高(P<0.01)。与DM组比较,Met组明显提升p-CaMKⅡ和KCa2.2蛋白表达,明显抑制KCa2.3蛋白表达(P<0.01)。与Met组比较,KN-93组和H-89组分别显著抑制p-CaMKⅡ蛋白表达和PKA活性,均显著下调KCa2.2蛋白表达,上调KCa2.3蛋白表达(P<0.01)。免疫组织化学染色显示,与Met组比较,KN-93组和H-89组均显著下调KCa2.2蛋白表达,上调KCa2.3蛋白表达(P<0.05,P<0.01),与Western blot检测结果一致。结论 Met通过激活PKA/CaMKⅡ信号通路部分修复T2DM大鼠心房KCa2.2蛋白下调和KCa2.3蛋白上调。     

检测2型糖尿病患者血浆同型半胱氨酸水平的临床意义探讨

目的 探讨2型糖尿病(DM)患者血浆同型半胱氨酸(HCY)水平及意义。方法 用化学发光法对55例肾功正常的2型DM患者[DM组,其中无肾病38例、早期糖尿病肾病17例(DN)例]及51例健康人(对照组)的血浆HCY水平进行测定比较,同时分析血浆HCY与DM患者年龄、病程、血压、血浆叶酸(Fol)、维生素B12、总胆固醇(CH)、肌酐(SCr)及尿白蛋白排泄率(UAER)之间的相关性。结果 DM组血浆HCY水平均较对照组明显升高(P<0.01),合并早期肾病者血浆HCY水平较无肾病者明显升高(P<0.05);DM患者血浆HCY水平与UAER及SCr呈显著正相关(P<0.05),与其他因素间无明显相关性。结论 糖尿病患者尤其是合并肾脏损害者血浆HCY明显升高,高HCY血症可能是DN发生发展的危险因素之一。     

2型糖尿病并发冠心病患者血清FSTL1与cTnT、BNP浓度和冠状动脉病变程度的关系

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)并发冠状动脉粥样硬化性心脏病冠心病(coronary heart disease,CHD)患者血清卵泡抑素样蛋白-1(follistatin-like protein-1,FSTL1)、肌钙蛋白T(troponin T,c TnT)、血清B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP)的浓度变化与冠状动脉病变程度的关系。方法选取盐城市第一人民医院2016年1月至2018年6月确诊的单纯T2DM患者90例作为T2DM组、T2DM并发CHD患者90例作为并发组、同期健康体检对象90名作为对照组。检测3组受试者的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度,分析并发组不同冠状动脉病变支数亚组的患者血清FSTL1、c TnT、BNP浓度差异;分别采用简单线性相关及多元线性回归法分析血清FSTL1、cTnT、BNP浓度与Gensini评分的关系。结果并发组和T2DM组三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、空腹血糖(fasting blood glucose,FPG)浓度均高于对照组,高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)浓度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。并发组血清TG、TC、LDL-C、FPG浓度均高于T2DM组,HDL-C浓度低于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。并发组和T2DM组血清FSTL1、c TnT、BNP浓度及Gensini评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);并发组的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度及Gensini评分均高于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM并发CHD组患者中,三支病变亚组、双支病变亚组的血清FSTL1、cTnT、BNP浓度高于单支病变亚组,差异有统计学意义(P<0.05);三支病变亚组的血清FSTL1、c TnT、BNP浓度高于双支病变亚组,差异有统计学意义(P<0.05)。T2DM并发CHD组患者血清FSTL1、c TnT、BNP浓度与Gensini评分呈显著的正相关关系(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示血清FSTL1、c TnT、TG、BNP浓度升高、HDL-C浓度降低是T2DM并发CHD组患者冠状动脉病变程度加重的独立危险因素(P<0.05)。结论T2DM并发CHD患者血清FSTL1、cTnT、BNP浓度升高与冠状动脉病变程度加重关系密切。