HPLC同时测定多维元素片中维生素B1、维生素C、维生素B6和烟酰胺的含量

 目的 应用高效液相色谱（HPLC）方法,建立多维元素片（29）中维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的同时测定方法。 方法 采用Alltima C₁₈ 色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）,以50 mmol·L-1磷酸二氢铵溶液（磷酸调至pH 3.0）-乙腈（95∶5）为流动相,流速0.5 mL·min-1,检测波长275 nm。 结果 在本方法中,维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的线性关系良好,线性相关系数（r）都大于0.999 7;专属性强,4种成分和药品中其他成分以及强制降解产物之间都有良好的分离度;精密度良好,相对标准偏差（RSD）都小于2.10%;回收率良好,回收率在98.82%和100.3%之间;稳定性能满足实验要求,维生素C在4 h内保持稳定;方法学比较显示：维生素C测定值和国标方法测定值的相关性好。结论 该方法准确、简单、快速,可作为多维元素片（29）中维生素B₁、维生素C、维生素B₆和烟酰胺的同时测定。     

Danggui injection plus vitamin B12 injection at Acupoints for hyperlipidemia

取膈俞、脾俞、足三里、丰隆和内关穴为主，注射当归注射液和维生素B12，治疗56例高血脂症患者，并与非诺贝特治疗45例相对照。治疗2个月后，两组疗效相近。     

辨证治疗糖尿病性便秘

目的:观察中医辨治治疗糖尿病便秘的疗效及对血糖、糖化血红蛋白的影响.方法:将120例糖尿病便秘患者随机分为治疗组与对照组各60例.治疗组在常规治疗基础上给予中药汤剂自拟方,对照组服用莫沙比利及维生素B12片,疗程均14 d,观察治疗前后两组大便情况及血糖(FPG)、2h餐后血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)的变化.结果:便秘改善总有效率治疗组为91.67％,对照组65％,两组有显著性差异(P＜0.01);各项便秘症状指标比较,两组差异有统计学意义(P＜0.01).治疗后两组患者FPG,2 hPG,HbAlc均有不同程度的下降,但治疗组明显优于对照组,自身前后对照和组间对照均有显著性差异(P＜0.05).结论:辨证治疗糖尿病便秘疗效肯定,并有助于改善血糖.     

免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量

目的：研究建立了免疫亲和柱净化UPLC-MS-MS测定天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂的含量测定方法。方法：采用甲醇溶液超声提取、玻璃纤维滤纸滤过、黄曲霉毒素亲和免疫柱净化的方法对天麻药材样品进行处理,以超高液相色谱-三重四级杆串联质谱仪（UPLC-MS-MS）对黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂含量进行研究并测定。结果：被测定的4种黄曲霉毒素分别在选定的范围内线性关系良好,精密度、重复性、准确度均良好,利用标准参考物质对本方法的验证结果良好,采用所建立的方法对30批不同产地天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂含量进行了测定,结果均未检出。结论：该方法科学、可行、方便、快速,适用于对天麻药材中黄曲霉毒素B₁,B₂,G₁,G₂进行含量测定。     

高效毛细管电泳法测定注射用水溶性维生素的含量

 目的采用高效毛细管电泳法(HPCE)的胶束毛细管色谱(MECC)模式分离和测定注射用水溶性维生素的含量。方法未涂层熔融石英毛细管67 cm(有效长度55 cm)×50μm;运行缓冲液为50 mmol·L^-1 SDS-50 mmol·L^-1的硼酸钠溶液(pH8.33);6.89 KPa×10 s压力进样;运行电压15.0 kV;检测波长214 nm;毛细管柱温25℃。结果注射用水溶性维生素中的九种成分分离完全,烟酰氨、维生素B6、D-生物素、核黄素磷酸钠、维生素B12、维生素C、泛酸钠、叶酸、维生素B1的线性范围分别为4.16～520.0 mg·L^-1(r=0.999 1),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.999 7),0.42-52.0 mg·L^-1(r=0.999 3),0.40～50.0 mg·L^-1(r=0.998 2),0.39-49.0 mg·L^-1(r=0.999 6),8.00～1 000.0 mg·L^-1(r=0.992 0),0.83-104.0 mg·L^-1(r=0.999 5),0.42～53.0 mg·L^-1(r=0.999 0),0.41～51.0 mg·L^-1(r=0.999 8),n=5;精密度(RSD)分别为1.75%,1.04%,1.6%,2.84%,1.85%,3.26%,1.58%,2.5%,1.92%(n=5);最低检测质量浓度分别为0.60,0.16,0.24,0.23,0.21,0.45,0.41,0.20,0.18 mg·L^-1。结论采用HPCE测定注射用水溶性维生素的方法简便、结果可靠。     

Clinical effect observation on treatment of chloasma with acupuncture

目的:观察针刺治疗黄褐斑的疗效.方法:将90例患者随机分为治疗组和对照组,每组各45例.其中,治疗组又辨证分成3型,予针刺治疗.对照组予维生素C和维生素E治疗.结果:治疗组和对照组有效率分别为93.3%和73.3%(P＜0.05),而治疗组内各型疗效无差异(P＞0.05).结 论:针刺治疗各型黄竭斑均有明显的效果.     

Clinical Study of Acupoint Injection in Treating Lumbar Intervertebral Disc Protrusion

目的：观察穴位注射治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将156例腰椎间盘突出症患者随机分为观察组80例（弥可保注射液）和对照组76例（维生素B12注射液），采用穴位注射受压神经根相应节段夹脊穴的方法。结果：观察组有效率为86．3％，对照组有效率为78．9％，两组疗效比较P〈0．01，差异有统计学意义。结论：“弥可保”注射液穴位注射治疗腰椎间盘突出症的临床疗效明显高于维生素B12穴位注射。     

大黄蛰虫胶囊治疗子宫内膜异位症

目的:探讨大黄蛰虫胶囊治疗子宫内膜异位症的疗效及对前列腺素(PG)的影响.方法:67例患者随机分为对照组34例和观察组33例.对照组口服米非司酮,12.5 mg/次,1次/d;观察组口服大黄蛰虫胶囊,5粒/次,2次/d.疗程均为12周.观察VAS评分,改良的B&B多维量表及测定血浆中前列腺素PGs.结果:治疗后观察组VAS评分低于对照组(P＜0.05);观察组B＆B多维量表评分低于对照组(P＜0.01);治疗后观察组F2a(PGF2a),前列腺素E2(PGE2)及血栓素B2(TXB2)水平低于对照组,6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)高于对照组(P ＜0.05,P＜0.01).结论:大黄蛰虫胶囊能改善子宫内膜异位症患者临床症状、体征;可能是通过调节PG水平发挥其缓解痛经等症状.     

金荞麦中原花青素B2和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化

目的：研究金荞麦中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化,为金荞麦的体内物质基础研究提供依据。方法：采用HPLC测定金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃液和人工肠液中的含量变化。结果：原花青素B₂和表儿茶素在酸性的人工胃液中含量随时间延长明显增加,胃蛋白酶对原花青素B₂和表儿茶素的含量影响不大。原花青素B₂和表儿茶素在人工肠液NE（无胰蛋白酶）中含量增加,胰酶能够降低原花青素B₂和表儿茶素的含量,对原花青素B₂含量影响尤为明显。结论：酸性的人工胃液是引起金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素含量上升的主要原因,胰酶与原花青素B₂和表儿茶素发生结合是降低原花青素B₂和表儿茶素的含量的主要原因。     

温肾方对乙肝肝硬化合并肝性脑病患者疗效及HMGB1，TLR4含量的影响

目的:观察温肾方治疗乙肝肝硬化合并肝性脑病肾阳虚证患者的临床疗效及其对高迁移率族蛋白B_1(high mobility group protein B_1,HMGB_1),Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)含量的影响。方法:纳入成都中医药大学附属医院2013年8月至2015年1月收治的66例乙肝肝硬化合并肝性脑病患者。采用前瞻性、平行对照方法设计,将纳入的66例患者按1∶1分为治疗组和对照组,每组各33例。对照组给予常规内科综合治疗、结肠透析和安慰剂灌肠。治疗组给予常规内科综合治疗、结肠透析和温肾方灌肠。疗程均为10日。治疗前后分别检测患者肝功能水平、数字连接试验(number connect test,NCT)时间、数字符号试验(digit-symbol test,DST)评分及血氨水平,外周血HMGB_1,TLR4含量。治疗结束后,分别计算两组患者清醒时间及总有效率。结果:两组患者基线具有可比性。治疗结束后,治疗组总有效率优于对照组(P 0. 05)。治疗组在血氨下降幅度,肝功能恢复程度,NCT时间下降幅度,SDT评分增加程度以及患者清醒时间缩短幅度等方面均优于对照组(P 0. 05)。治疗结束后,治疗组外周血HMGB_1,TLR4含量低于对照组(P 0. 05)。结论:温肾方可显著提高乙肝肝硬化合并肝性脑病肾阳虚证患者的临床疗效,其作用机制可能与抑制HMGB_1,TLR4含量,进而抑制炎症因子释放,降低血氨水平有关。     

UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS分析白头翁皂苷B3在大鼠肠道菌群中的代谢产物

目的:研究大鼠肠道菌群对白头翁皂苷B_3的代谢作用,为皂苷类物质在肠道菌群的代谢特征研究提供参考。方法:以连翘苷为内标物,建立UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS检测条件,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~8 min,10%~95%A;8~10 min,95%A;10~10.10 min,95%~10%A),流速0.3 m L·min~(-1),扫描方式为电喷雾(ESI)负离子模式,离子喷雾电压-3 500 V,碰撞电压130 V,干燥气流量12 L·min~(-1),温度350℃,鞘气流量12 L·min~(-1),温度350℃,碎裂电压分别为20,35,50 V。总离子流全扫描的范围m/z 100~1 100。采用负离子和多反应离子监测模式分析白头翁皂苷B_3与大鼠肠道菌群共孵育后的代谢产物。结果:从药物-菌群孵育液中鉴定出白头翁皂苷B3的3-位侧链脱糖代谢产物及苷元母核上羟化、羧化和脱羧、甲基化和去甲基化代谢产物共8种。结论:大鼠肠道菌群在实验条件下能有效代谢白头翁皂苷B3,提示上述代谢产物是其生物活性成分。     

新疆鼠尾草不同部位不同极性提取物抗氧化活性

目的:研究新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物体外抗氧化活性。方法:新疆鼠尾草地上部分和根部药材的95%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取得相应的提取物和水层部分,将各提取物分别配制成适当浓度的溶液,以Vc为阳性对照,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法、超氧阴离子自由基(O-·2)法和铁离子还原法分别测定各提取物的自由基清除能力和铁离子还原能力。结果:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物清除自由基的能力均强于阳性对照Vc,地上部分乙醇层清除自由基的能力(DPPH·法IC500.039 g·L~(-1),O-·2法IC500.130 g·L~(-1))强于根部乙醇层(DPPH·法IC500.160 g·L~(-1),O-·2法IC500.160 g·L~(-1))。对铁离子还原能力的强弱顺序为根部不同极性提取物Vc地上部分不同极性提取物。结论:新疆鼠尾草地上部分和根部不同极性提取物均具有较强抗氧化作用,地上部分可替代根部使用,为合理开发新疆鼠尾草资源提供科学依据。     

橘黄裸伞子实体中的多异戊二烯多醇类化合物分离鉴定

目的:发现更多的高等真菌次级代谢产物,研究法国野生致幻真菌橘黄裸伞Gymnopilus spectabilis子实体的化学成分。方法:采用常压硅胶柱色谱、凝胶色谱和中压液相色谱、制备高效液相色谱等手段对橘黄裸伞子实体的三氯甲烷-丙酮-甲醇(1∶1∶1)提取物进行分离纯化,利用核磁共振波谱和高分辨质谱等方法鉴定化合物结构。结果:从法国野生真菌橘黄裸伞子实体中分离得到了6个多异戊二烯多醇类化合物,分别是gymnopilene A (1),hypsiziprenol B_(10),A_(10),A_(11)(2～4),gymnopilin A_(10),3a(5,6)。结论:化合物1为新化合物,命名为gymnopilene A。化合物1～4为首次从橘黄裸伞中分离得到。     

榅桲叶和果实中总黄酮提取工艺优选

目的:优选新疆榅椁叶与果实中总黄酮的提取工艺.方法:以总黄酮含量为指标,采用正交试验考察加醇量、超声提取时间、超声功率、乙醇体积分数4个因素对提取工艺的影响.结果:榅桲叶和果实中总黄酮最佳提取工艺均为A3B3C3D1,即加30倍量60％乙醇超声提取40 min,超声功率80％.叶中总黄酮含量较果实中高.结论:优选的总黄酮提取工艺稳定可行,为新疆医药的开发提供实验依据.     

异补骨脂素纳米结构脂质载体的体外溶出及其抗白癜风活性研究

目的评价异补骨脂素纳米结构脂质载体(IPRN-NLC)的体外溶出行为,并考察其对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖、黑色素合成及酪氨酸酶活性的影响。方法采用透析袋法测定IPRN-NLC在72 h内的累积溶出量并绘制溶出曲线,MTT法测定B16F10细胞增殖情况,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,GENMED细胞黑色素含量比色法测定黑色素合成。结果在72 h时体外累积溶出量IPRN-NLC为67.31%,IPRN-物理混合物为90.30%,IPRN-DMSO为98.67%,IPRN-混悬液为53.34%。IPRN在一定质量浓度范围内可以促进B16F10细胞增殖,提高酪氨酸酶活性,增加黑色素的合成,且同质量浓度的IPRN-NLC对B16F10的作用显著高于IPRN溶液(P0.05)。结论 IPRN-NLC不仅具有缓释作用,还可以增加药物的溶解度;在一定质量浓度范围内与细胞具有较好的生物相容性,能显著提高细胞酪氨酸酶活性,促进黑色素合成。     

铁包金根、茎特征图谱的研究

目的： 建立铁包金根、茎HPLC特征图谱,为该药材质量评价研究提供参考。方法： 采用HPLC构建24批不同产地不同种类铁包金根、茎的特征图谱,通过聚类分析和主成分分析对特征图谱进行化学模式识别。结果： 以11个共有峰为特征指纹信息构建HPLC特征图谱,9批细叶勾儿茶和多叶勾儿茶根为一类,12个细叶勾儿茶和多叶勾儿茶的茎和3个多叶勾儿茶的根聚为一类。结论： HPLC特征图谱的构建为铁包金根、茎的质量评价研究提供参考依据。     

正交设计优选卷柏中总黄酮的提取工艺研究

目的 优选卷柏中总黄酮的提取工艺.方法 采用紫外分光光度法和高效液相色谱法分别测定总黄酮和阿曼托双黄酮.以提取量为考察指标,用正交设计方法 优选最佳提取工艺.结果 以总黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1B2C2D2;以阿曼托双黄酮提取量为考察指标,其优选工艺为A1～3 B1～3 C2D2.综合考察采用A1B2C2D2为最佳提取工艺,即药材加10倍量的95%乙醇,回流提取2次,每次2h.结论 优选得到的工艺稳定可行,可作为卷柏的提取工艺.     

高效液相色谱-二苯基三硝基苯肼在线检测葡萄酒中抗氧化活性成分

目的: 建立高效液相色谱-二苯基三硝基苯肼(HPLC-DPPH)在线法评价葡萄酒清除自由基的活性,研究其抗氧化活性物质基础。 方法: 葡萄酒样品经HPLC分离,在柱后与DPPH工作液在三通处混合,于PEEK管中充分反应后,流经检测器记录反应信号,以水溶性维生素E类似物(Trolox)为标准计算活性成分的抗氧化当量(TEAC),比较7种不同地区葡萄酒总抗氧化能力及活性成分差异。 结果: 通过定性分析得出葡萄酒样品中没食子酸、原儿茶酸、原花青素二聚体B₁、龙胆酸、儿茶素、咖啡酸和没食子酸乙酯对DPPH自由基具有清除活性,但原花青素二聚体B₂、香草酸、丁香酸和对香豆酸没有清除活性。不同地区葡萄酒总抗氧化能力不同,所含抗氧化活性成分也有较大差异,共有活性成分有7种,其中原花青素二聚体B₁与没食子酸活性最强,其次是儿茶素和未知物1,活性较弱的是咖啡酸、原儿茶酸和没食子酸乙酯。 结论: 葡萄酒中含有多种抗氧化活性物质;该法能够实现对天然产物抗氧化活性的分析,具有在线、无损、高通量筛选、快速分析的特点。     

基于成分分析及抗菌活性的百药煎炮制工艺研究

目的采用正交试验法,优选百药煎的炮制工艺,确定最佳工艺参数。方法采用L_9(3~4)正交试验法,以百药煎中的主要有效成分没食子酸、二聚体鞣花酸的质量分数和体外抗菌活性为评价指标,通过多指标综合加权评分法,考察3因素3水平,即因素A酵曲种类(根霉曲、安琪曲、黑曲霉)、因素B茶叶种类(绿茶、红茶、普洱茶)、因素C物料比(原药量-菌种量-茶叶量分别为25∶7.5∶2.5、25∶6.25∶1.1、25∶2.5∶1.9)对百药煎炮制工艺的影响。结果百药煎的最佳炮制工艺为A_1B_2C_1,即菌种选用根霉曲,茶叶选用绿茶,原药量-菌种量-茶叶量为25∶7.5∶2.5。结论该炮制工艺可操作性强,可为百药煎的炮制工艺提供研究数据。     

甘草泻心汤联合维生素B12对复发性口腔溃疡患儿T淋巴细胞亚群、溃疡面积及口腔菌群的影响

目的:探讨小儿复发性口腔溃疡(ROU)应用甘草泻心汤联合维生素B12治疗的临床效果。方法:选取2016年6月至2018年6月江西省儿童医院收治的116例ROU患儿,利用随机数字表法将其随机分成观察组与对照组,各58例。对照组口服维生素B_(12)治疗,观察组在此基础上内服甘草泻心汤治疗,所有患儿均治疗14 d。比较两组临床效果,治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3~+,CD4~+,CD8~+及CD4~+/CD8~+)水平,溃疡面积及口腔菌群(韦荣氏菌、链球菌)含量变化,药物副作用发生情况。结果:观察组总有效率为96. 6%(56/58),明显高于对照组的84. 5%(49/58)(P 0. 05)。与本组治疗前比较,两组治疗后外周血CD3~+,CD4~+水平及CD4~+/CD8~+均明显升高(P 0. 05),CD8~+水平均明显降低(P 0. 05);与对照组比较,观察组T淋巴细胞亚群指标(CD3~+,CD4~+,CD8~+水平和CD4~+/CD8~+)改善更明显(P 0. 05)。治疗后,两组患儿口腔溃疡面积均逐渐缩小(P 0. 05);与对照组比较,观察组治疗7,14 d后溃疡面积较对照组同期均明显更小(P 0. 05)。与本组治疗前比较,两组治疗后口腔中韦荣氏菌、链球菌含量均明显增加(P 0. 05),且观察组上升更明显(P 0. 05)。结论:小儿ROU应用甘草泻心汤联合维生素B12治疗能有效纠正患儿血中T淋巴细胞亚群失衡,促进口腔溃疡愈合,正性调控口腔微生态环境,疗效确切,患儿耐受性良好。