星点设计-效应面法优选蜜糠炒白术的炮制工艺

目的: 优选蜜糠炒白术的炮制工艺,为建昌帮炮制工艺的传承提供实验依据。 方法: 以白术内酯Ι,Ⅲ及水浸出物含量的总评“归一值”(overall desirability,OD)为因变量,蜜糠用量、炒制时间、炒制温度为自变量,采用星点设计-效应面法优选蜜糠炒白术的炮制工艺并进行预测分析。 结果: 最佳炮制工艺为蜜糠用量55.8%,炒制温度261 ℃,炒制时间3.4 min。水浸出物、白术内酯Ι和Ⅲ的质量分数分别为71.5%,0.028%,0.069%。OD分别为0.74,0.76,0.72。OD预测值与真实值的偏差1.4%。 结论: 采用星点设计-效应面法优选的蜜糠炒白术炮制工艺稳定可行且预测性良好,为规范地方饮片特色炮制工艺及其质量标准提供参考。     

麸炒白术的炮制工艺优化

目的:优选麸炒白术的炮制工艺.方法:以白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ和苍术酮含量为指标,HPLC测定指标成分含量,采用L9(34)正交试验考察炒制温度、炒制时间、投麸量对麸炒白术炮制工艺的影响,确定最佳炮制工艺.结果:麸炒最佳工艺为炒制温度170℃,炒制时间2 min,投麸量10％.结论:优选的炮制工艺切实可行.     

麸炒白术的质量研究

目的:确定麸炒白术的最佳条件。方法:以麸炒白术饮片为分析对象,用水浸出物、醇浸出物及HPLC测定的白术内酯Ⅲ含量作为指标,以正交实验方法进行实验。结果:麸炒白术用切片厚度为3 mm的白术饮片炮制时各种指标最高。临床用麸炒白术饮片炮制的最佳条件为:锅内空间温度140-180℃,炮制时间5 m in,辅料用量10%。结论:该研究客观性强,具有较好的实践意义。     

麸炒白术中试炮制工艺优选

目的:确定麸炒白术的最佳中试炮制工艺。方法:采用正交试验法和多指标综合加权评分法,以白术饮片外观性状、白术内酯(Ⅰ+Ⅲ)含量和醇溶性浸出物为考察指标,对影响白术炮制的因素进行考察。结果:中试最佳工艺为:炒制温度240℃,加热时间21min,辅料用量10%,炒制转数25r/min。结论:该工艺运用现代饮片工业,为进一步制定白术饮片的质量标准提供了参考依据,为工业化大生产提供了数据支持。     

建昌帮特色辅料蜜糠制药的工艺研究

目的探究建昌帮最具传统特色的炮制辅料"蜜糠"与药共制的工艺及效果。方法采用星点设计分别优选蜜糠炒白术、蜜糠炒白芍、蜜糠炒山药三种饮片炮制工艺。结果蜜糠炒白术的最佳工艺为蜜糠用量55.8%,炒制温度261℃,炒制时间3.4min;蜜糠炒白芍的最佳工艺为蜜糠用量30%,黄酒用量9%,在260℃下炒制4min;蜜糠炒山药的最佳工艺为蜜糠用量61.55%,在炒制温度263℃下炒制3.85min。结论三种药物经过蜜糠炒制之后健脾效果增强;拟定建昌帮蜜糠炒制药物的共性工艺为炒制温度260~270℃,炒制时间3~4min。     

麸炒白术炮制工艺优选

目的确定麸炒白术的最佳炮制工艺。方法采用正交试验法和多指标综合加权评分法,以白术饮片外观性状和白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ总量为考察指标,对影响白术炒制过程的因素进行考察。结果麸炒最佳工艺为:辅料用量10%,投料温度300℃,加热时间2.5 min。结论该工艺为进一步制定白术饮片的质量标准提供了参考依据。     

不同炮制方法对白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ含量的影响

目的:探讨建昌帮蜜糠炒法对白术中白术内酯含量变化的影响,并与生白术及其他炮制品比较,探讨白术内酯类成分含量的差异性。方法:采用UPLC双波长法测定不同炮制品中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的含量,流速0.6 m L·min~(-1),柱温35℃,白术内酯Ⅰ,Ⅲ检测波长均为220 nm,白术内酯Ⅱ检测波长276 nm,进样量2μL,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0~30min,30%~51%A;30~32 min,51%~100%A)。结果:白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ线性范围依次为2.63×10-3~6.575×10~(-2),1.972×10-3~4.93×10~(-2),2.424×10-3~6.06×10~(-2)μg。生白术、清炒白术、麸炒白术、蜜麸炒白术、糠炒白术、蜜糠炒白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的总量分别为0.663,0.901,1.184,0.885,1.228,1.725 mg·g~(-1)。结论:与生品相比,炮制可使白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的含量升高,其中以建昌帮蜜糠炒白术中含量为最高。     

多指标正交设计优选建昌帮炮制辅料蜜炙谷糠的制备工艺

目的优选建昌帮炮制辅料蜜炙谷糠(蜜糠)的最佳制备工艺。方法以总黄酮、阿魏酸、醇浸出物、水浸出物、水分量及外观性状为指标,采用L9(34)正交试验考察加蜜量、加水量、炒制时间和温度对蜜糠制备工艺的影响,确定最佳制备工艺。结果蜜糠最佳制备工艺为加谷糠量30%的蜜,加蜜量50%的水,在90℃下炒制120 s。结论优选的蜜糠制备工艺切实可行,为建昌帮炮制辅料蜜糠质量标准的制定奠定基础。     

正交试验法优选蜜糠炒枳壳炮制工艺

目的: 优选并确立建昌帮枳壳蜜糠炒制工艺,为规范蜜糠炒建昌帮特色饮片的炮制工艺提供参考. 方法: 以柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷及醇溶性浸出物含量的综合评分为指标,通过正交试验考察炮制时间、加蜜糠量、炮制温度对蜜糠枳壳炮制工艺的影响.采用HPLC测定柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷含量,流动相乙腈-水(18:82,磷酸调pH 2),检测波长283 nm. 结果: 温度对炮制工艺具有显著性影响,最佳枳壳蜜糠炒制工艺为炮制时间80 s,加蜜糠量0.10 g·g^-1,炮制温度240℃;醇溶性浸出物、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷质量分数分别为28.242%,4.782%,0.160%,2.819%. 结论: 优选的炮制工艺合理、可靠、重复性好,适用于蜜糠枳壳的工业化生产.     

枳实制白术的炮制工艺优选及HPLC特征图谱分析

目的:探讨枳实制白术的最佳炮制工艺,建立其HPLC特征图谱。方法:采用"脾虚泄泻"免疫力低下动物模型和大鼠饮水量来评价枳实制白术的健脾祛燥作用;通过对比不同配比枳实制白术饮片的健脾祛燥作用,筛选枳实与白术的最佳配比;采用正交试验,以辛弗林和白术内酯Ⅲ的含量为评价指标,优选枳实制白术的炮制工艺,并建立其特征图谱。结果:10%枳实制白术组的效果最佳。枳实制白术饮片炮制过程中,影响辛弗林及白术内酯Ⅲ的主次因素依次为烘制温度炒制温度炒制时间,最佳炮制工艺为取生白术饮片100 g,加入枳实汁50 mL(生药质量浓度0.2 g·mL~(-1)),浸泡24 h,不时翻动,直至汁尽药透,于110℃炒制6 min,取出,于40℃烘箱干燥。枳实制白术有5个共有峰,均能达到较好分离,该分析方法具有良好的精密度、重复性和稳定性,符合特征图谱相关要求。结论:药汁制是中药炮制的重要组成部分,枳实制白术的健脾祛燥作用充分体现了这一炮制特色——增效,纠正偏性。建立的HPLC特征图谱方法准确、可靠,为枳实制白术的质量控制提供了参考。     

HPLC-PDA指纹图谱结合UFLC-Q-TOF/MS定性鉴别评价不同产地白术药材质量

目的 建立白术药材HPLC-PDA指纹图谱并进行定性鉴别,为全面控制白术质量提供参考。方法 白术加70%甲醇超声60 min;色谱分析采用Inertsil#174;ODS-SP色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温40℃,体积流量1.0 m L/min,采用Waters 2998紫外检测器,检测波长为235 nm,流动相为水(A)-乙腈(B),洗脱梯度为0~10 min,30%~45%B;10~25 min,45%B;25~50 min,45%~70%B;50~55 min,70%B;55~62 min,70%~30%B;62~75 min,30%B。质谱测定采用电喷雾离子源(ESI)的飞行时间质谱(TOF/MS);正离子模式下;质量扫描范围m/z 50~1 500。结果 分别对不同产地的白术进行比较、拟合,标定了白术HPLC-PDA指纹图谱的6个共有峰,并通过高分辨UFLC-Q-TOF/MS对共有峰进行了指认,分别为5-羟甲基糠醛、白术内酯III、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯VI和双白术内酯;对白术的色谱条件及系统适用性、提取条件进行了优化、考察,其精密度、稳定性、重复性RSD值均小于2%;测得的10批次样品与拟合指纹图谱相似度均大于0.95。结论 所建立的HPLC指纹图谱可作为规范白术的均一性和稳定性的质量控制手段。     

星点设计-效应面法优选米泔水漂白术炮制工艺

目的优选樟帮特色米泔水漂白术炮制工艺,为米泔水漂白术炮制规范提供科学依据。方法采用星点设计-效应面法进行米泔水漂白术炮制工艺设计,以米泔水用量、漂洗时间、漂洗温度为考察因素;采用HPLC法测定白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等成分量,进行加权综合评分计算OD值(归一化值),采用Design Expert进行2次项回归拟合,优选其最佳工艺并进行验证。结果最佳炮制工艺漂洗条件为米泔水用量为9倍、漂洗时间55 h、漂洗温度26℃,在此条件下,白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等成分量综合评分OD值为0.960。结论米泔水漂白术在此条件下稳定可行,能为米泔水漂白术饮片生产与质量标准规范提供参考。     

HPLC法同时测定白术中4种倍半萜

目的建立HPLC法同时测定白术中白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮的含有量。方法白术甲醇提取液的分析采用Eclipse Plus C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-水,梯度洗脱;柱温25℃;体积流量1. 0 m L/min;检测波长220 nm、276 nm。结果白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、苍术酮分别在0. 005 2~0. 052 mg/m L (R^2=0. 999 6)、0. 010~0. 10 mg/m L (R^2=0. 999 9)、0. 090~2. 9μg/m L (R^2=0. 999 7)、0. 30~1. 8 mg/m L (R^2=0. 999 9)范围内线性关系良好,平均加样回收率99. 13%~100. 34%,RSD 0. 72%~4. 76%。结论该方法准确稳定,重复性好,可用于白术的质量控制。     

Strong Specific Inhibition of UDP‐glucuronosyltransferase 2B7 by Atractylenolide I and III

Drug‐metabolizing enzymes inhibition‐based drug–drug interaction remains to be the key limiting factor for the research and development of efficient herbal components to become clinical drugs. The present study aims to determine the inhibition of uridine 5′‐diphospho‐glucuronosyltransferases (UGTs) isoforms by two important efficient herbal ingredients isolated from Atractylodes macrocephala Koidz, atractylenolide I and III. In vitro recombinant UGTs‐catalysed glucuronidation of 4‐methylumbelliferone was used to determine the inhibition capability and kinetics of atractylenolide I and III towards UGT2B7, and in silico docking method was employed to explain the possible mechanism. Atractylenolide I and III exhibited specific inhibition towards UGT2B7, with negligible influence towards other UGT isoforms. Atractylenolide I exerted stronger inhibition potential than atractylenolide III towards UGT2B7, which is attributed to the different hydrogen bonds and hydrophobic interactions. Inhibition kinetic analysis was performed for the inhibition of atractylenolide I towards UGT2B7. Inhibition kinetic determination showed that atractylenolide I competitively inhibited UGT2B7, and inhibition kinetic parameter (Ki) was calculated to be 6.4 μM. In combination of the maximum plasma concentration of atractylenolide I after oral administration of 50 mg/kg atractylenolide I, the area under the plasma concentration‐time curve ration AUC_i/AUC was calculated to be 1.17, indicating the highly possible drug–drug interaction between atractylenolide I and drugs mainly undergoing UGT2B7‐catalysed metabolism. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.     

白术中内酯类成分的TLC鉴别与UPLC含量测定

建立白术的薄层鉴别与其中3种内酯类成分含量同时测定方法。使用硅胶GF_(254)薄层板对白术进行定性鉴别;利用UPLC-PDA梯度洗脱法同时测定白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,选用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为乙腈-水,检测波长235 nm。薄层鉴别特征明显,专属性强;含量测定的方法学考察结果符合规定,白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ线性关系良好(r0.999 9),平均回收率分别为93.48%(RSD 1.4%),94.97%(RSD 1.6%),92.71%(RSD 1.2%)。所建立的白术薄层鉴别方法专属性强、重复性好,3种内酯类成分同时测定方法操作简单、灵敏度高,两者结合可以更好的用于白术的质量评价。     

HPLC法测定白术中白术内酯Ⅱ的含量

目的研究白术内酯Ⅱ的高效液相色谱测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,对白术中白术内酯Ⅱ进行含量测定,色谱柱:Kromasil-C18柱(4.6×250 mm,5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);流速:1.0 mL/min;紫外检测波长:276 nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果测定了22种不同白术样品中白术内酯Ⅱ的含量,平均加样回收率为99.8%,RSD为1.2%。结论本法简单、灵敏、结果可靠,可作为白术质量控制的定量方法。     

Atractylenolide I and atractylenolide III inhibit Lipopolysaccharide-induced TNF-alpha and NO production in macrophages

In order to clarify the mechanism involved in the antiinflammatory activity of atractylenolide I and atractylenolide III from the rhizomes of Atractylodes macrocephala Koidz, their effects on tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and nitric oxide (NO) production in peritoneal macrophages were examined. Atractylenolide I and atractylenolide III decreased the TNF-alpha level in LPS-stimulated peritoneal macrophages in a dose-dependent manner, their IC(50) values were 23.1 microm and 56.3 microm, respectively. RT-PCR analysis indicated that they inhibited TNF-alpha mRNA expression. Furthermore, they inhibited NO production in LPS-activated peritoneal macrophages, the IC(50) value of atractylenolide I was 41.0 microm, and the inhibition ratio of 100 microm of atractylenolide III was 45.1% +/- 6.2%. The activity analysis of inducible nitric oxide synthase (iNOS) indicated that they could inhibit the activity of iNOS, their IC(50) values were 67.3 microm and 76.1 microm, respectively. Western blot analysis showed that atractylenolide I and atractylenolide III attenuated LPS-induced synthesis of iNOS protein in the macrophages, in parallel. These results imply that the antiinflammatory mechanism of atractylenolide I and atractylenolide III may be explained at least in part, by the inhibition of TNF-alpha and NO production. Atractylenolide I showed more potent inhibition than atractylenolide III in the production of TNF-alpha and NO in LPS-activated peritoneal macrophages. So, atractylenolide I could be a candidate for the development of new drugs to treat inflammatory diseases accompanied by the overproduction of TNF-alpha and NO.     

基于UPLC-MSE的白术化学成分分析及产地差异研究

目的 无歧视分析白术药材的整体化学成分,探究不同产地白术药材在化学成分上的差异。方法 采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-Q-TOF-MS^E）对不同产地白术药材进行化学成分分析。应用主成分分析（principal component analysis,PCA）、正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA）对河北、安徽、浙江3个产区白术药材进行多元统计分析并结合方差分析筛选不同产地白术药材主要的差异化学成分。结果 共鉴定出53个化学成分,包括21个萜类、11个有机酸类、3个氨基酸类、3个糖苷类以及15个其他类成分。表征出21个差异化学成分,包括3个特有成分及18个共有差异成分,其中河北安国白术的特有成分为9,10-环氧-12(Z)-十八碳烯酸,且腺苷、6,9-二羟基-3,3a-二氢白术内酯III、furan sesquiterpene、白术内酯I、白术内酯II、双白术内酯的含量最高。安徽亳州白术的特有成分为L-异亮氨酸,且新绿原酸、7-羟基香豆素、绿原酸、咖啡酸的含量最高。浙江磐安白术的特有成分为白术内酰胺,且尿苷、L-缬氨酸、8,9-epoxy atracolactone、4,6-二羟基-3,3a-二氢白术内酯III、白术内酯III、芹子二烯酮、3β-乙酰氧基苍术酮、棕榈酸含量最高。结论 不同产地白术化学成分差异明显,各产地的特有成分可作为产地区分的依据,21个差异化学成分可为不同产地白术质量评价提供依据,同时也为白术的开发利用提供了参考。     

白术的化学成分研究

目的研究白术的化学成分。方法用溶剂提取,硅胶柱色谱或制备高效液相色谱分离,通过波谱分析鉴定其结构。结果从白术中分离得到12个成分,分别为苍术酮(Ⅰ)、白术内酯Ⅰ(Ⅱ)、白术内酯Ⅱ(Ⅲ)、白术内酯Ⅲ(Ⅳ)、双白术内酯(Ⅴ)、白术内酰胺(Ⅵ)、杜松脑(Ⅶ),蒲公英萜醇乙酸酯(Ⅷ)、β-香树脂醇乙酸酯(Ⅸ)、β-谷甾醇(Ⅹ)、γ-菠甾醇(Ⅺ)和尿苷(ⅩⅡ),并用X-单晶衍射确证了双白术内酯的结构。结论化合物Ⅷ、Ⅺ和ⅩⅡ为首次从苍术属植物中分离得到。     

白术内酯I对免疫性肝损伤的保护作用

目的:研究白术内酯Ⅰ对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其可能的机制。方法:昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照药联苯双酯组和白术内酯Ⅰ低、中、高剂量组(60,120,240mg.kg-1),每组12只。BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤,比较各组小鼠的肝脏、脾脏系数,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬酸氨基转移酶(AST)的含量、肝匀浆液中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的含量以及血浆和肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α),NO,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量,HE染色切片观察肝组织病理学变化。结果:白术内酯Ⅰ与联苯双酯均可显著降低免疫性肝损伤小鼠增加的肝脏指数、脾脏指数(P<0.05),改善肝脏组织病理学变化和肝脏组织病理学分级,减轻BCG联合LPS所致肝损伤的炎症反应;对免疫性肝损伤中肝匀浆MDA产生和GSH-px水平有明显改善作用。结论:白术内酯I对免疫性肝损伤具有显著的保护作用,并且在实验剂量范围内呈显著的剂量依赖性。抑制NO,iNOS,TNF-α等炎症介质的释放或过强表达可能是其主要的作用机制。