大剂量硝酸甘油加重大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤

目的:研究大剂量硝酸甘油（NG）对心肌缺血再灌注（MI/R）损伤的影响。方法:SD大鼠30只,制备离体MI/R模型,并将其随机分为2组:NG组和对照组。再灌注开始时NG组给予硝酸甘油（15μg/h,溶剂为950ml/L乙醇,加药速度50μl/h）,对照组给予950ml/L乙醇（50μl/h）,观察心功能指标,检测冠脉流出液中的肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）含量,用伊文氏兰-红四氮唑（TTC）染色和TUNAL法观测再灌注心肌坏死和凋亡程度。结果:大剂量NG抑制了再灌注后心功能的恢复,引起CK、LDH释放增加,促进心肌细胞坏死和凋亡。结论:大剂量NG加重了大鼠离体MI/R损伤。     

硝酸甘油耐受对心肌缺血/再灌注损伤影响的研究

目的验证硝酸甘油(GTN)耐受对耐受产生后的心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法雄性SD大鼠随机分组,分别接受GTN[600μg/(kg.h)]或生理盐水静脉滴注12h。检验耐受的产生,耐受和对照大鼠接受40min缺血和4h再灌注。检测心肌细胞凋亡(TUNEL法)、心肌坏死面积(Evansblue-TTC染色)和血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果与单纯心肌缺血/再灌注相比,硝酸甘油耐受引起了再灌注后心肌凋亡比例、心肌坏死面积和血清心肌酶活性的显著增高,而单纯耐受没有对心脏造成明显损伤。结论实验结果提示除了使心血管对硝酸甘油的敏感性降低外,耐受对再灌注心脏存在一种潜在的损伤作用。     

激活乙醛脱氢酶2抑制硝酸甘油耐受大鼠缺血再灌注心肌损伤

目的:探讨乙醛脱氢酶2（ALDH2）激动剂（Alda-1）对硝酸甘油耐受(NT)大鼠心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)的影响。方法: 24只成年雄性SD大鼠随机分为4组:Con组、Alda-1组、NT组和NT+Alda-1治疗组，每组6只(n=6)。经静脉给予硝酸甘油10 mg/(kg·day)处理7 d，建立NT大鼠模型，治疗组在硝酸甘油给药的第5天起，同时输注Alda-110 mg/(kg·day) 3 d。模型建立后，采用冠脉左前降支结扎缺血30 min再灌注4 h建立在体大鼠急性心肌缺血/再灌注(MI/R)模型。术中监测血流动力学指标，再灌结束后检测血清乳酸脱氢酶(LDH)并取心肌组织检测心肌梗死面积、蛋白质羰基化程度和心肌内活性氧簇(ROS)的水平。结果: 离体血管灌流显示，硝酸甘油连续处理7 d，可导致大鼠血管内皮依赖性和内皮非依赖性舒张能力显著降低，提示出现NT。定量检测心肌ALDH2的活性发现Alda-1可显著改善NT导致的心肌ALDH2活性抑制。在NT情况下，MI/RI较对照组显著加重，表现为心肌收缩舒张速率显著降低，血清LDH的水平显著增加，心肌梗死面积扩大（均P<0.05）。与NT组相比，采用Alda-1治疗，可显著改善NT组大鼠的MI/RI（均P<0.05）。并且，Alda-1治疗可显著抑制NT情况下缺血/再灌注心肌中蛋白质羰基化程度和ROS的含量。结论: 激活ALDH2可显著抑制NT导致的MI/RI加重，其机制可能与减轻心肌蛋白质氧化损伤有关。     

硝酸甘油对持续缺血和缺血再灌注模型犬心肌细胞凋亡的影响

目的探讨硝酸甘油对持续缺血和缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响。方法 取杂种犬30只,随机分为假手术组,持续缺血组,缺血再灌注组,硝酸甘油组和硝酸甘油+持续缺血组。以活结结扎左冠状动脉的前降支,造成持续阻断冠状动脉血流和再灌注。以原位末端标记法标记凋亡细胞。结果 持续缺血组和缺血再灌注组与假手术组比较,心肌细胞凋亡程度明显增加,差异有显著性意义。硝酸甘油组和硝酸甘油+持续缺血组分别与持续缺血组和缺血再灌注组比较,心肌细胞凋亡程度明显降低,差异有显著性意义。结论 持续缺血和缺血再灌注损伤可导致心肌细胞凋亡,硝酸甘油预处理能明显减轻心肌细胞凋亡程度。     

不同剂量硝酸甘油预处理对缺血再灌注心肌的作用

目的 探讨不同剂量硝酸甘油对大鼠血流动力学的影响及对大鼠离体缺血再灌注心肌的影响.方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):缺血再灌注(I/R)组、2μg· kg-1·min-1硝酸甘油预处理(PC1)组、4 μg·kg-1 ·min-1硝酸甘油预处理(PC2)组、6μg· kg-1·min-1硝酸甘油预处理(PC3)组.分别用静脉注射微量泵通过尾静脉持续1h泵入不同剂量的硝酸甘油,实时监测颈动脉血压及离体心功能,检测冠脉流量及心肌组织中cTnI及NO含量.结果 PC1组对大鼠血压无明显影响,但却明显改善心功能,增加冠脉流量,心肌组织中cTnI的含量较其他各组明显降低,NO含量较I/R组明显升高(P＜0.05);PC3组血压及心功能明显降低,心肌组织中cTnI及NO含量极明显升高(P＜0.05).结论 NO对缺血再灌注心肌的作用与剂量有关:静脉持续1h泵入小剂量硝酸甘油(2 μg·kg -1·min -1)对大鼠血流动力学无明显影响,但却能明显减轻心肌组织缺血再灌注损伤,大剂量硝酸甘油(6μg·kg-1·min -1)则加剧损伤.     

慢性缺氧促心肌耐受急性缺血再灌注损伤的研究

目的:探讨慢性缺氧对心肌耐受急性缺血再灌注损伤的影响。方法:将SD大鼠随机分为在体实验组、在体对照组、离体实验组、离体对照组。在体及离体实验组大鼠在模拟海拔5000 m的动物低压低氧舱中生活,舱内条件:大气压54 kPa、氧分压11.33 kPa、温度25℃;在体及离体对照组大鼠在正常氧环境中喂养。分别通过结扎左冠状动脉前降支或Langendorff离体心脏灌流系统建立在体及离体心肌缺血再灌注模型,检测4组大鼠再灌注损伤前后心功能指标、心肌梗死面积和心肌酶变化。结果:在体实验可见,在体实验组缺血再灌注前心率(HR)、左室收缩末期容积(LVESV)均明显大于在体对照组,舒张期室间隔厚度(IVSd)、收缩期室间隔厚度(IVSs)、舒张期左室后壁厚度(LVPWd)、收缩期左室后壁厚度(LVPWs)、左室射血分数(LVEF)、左室缩短分数(LVFS)、左室舒张末期容积(LVEDV)、每搏输出量(SV)均明显小于在体对照组(P均<0.05);缺血再灌注后,在体实验组HR、IVSs、LVPWd、LVPWs、LVEF、LVFS均明显大于在体对照组,IVSd、LVEDV、LVESV、SV均明显小于在体对照组(P均<0.05);缺血再灌注可使在体实验组、在体对照组的心功能出现不同程度的损伤,而对在体对照组的损伤更明显;再灌注损伤后,在体实验组心肌梗死面积明显小于在体对照组,肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性明显低于在体对照组(P均<0.05),两组乳酸脱氢酶(LDH)活性的差异无统计学意义。离体实验可见,缺血再灌注损伤前离体实验组左室发展压(LVDP)、max(dp/dt)、min(dp/dt)均明显低于离体对照组(P均<0.05),两组左室舒张末期压力(LVEDP)的差异无统计学意义;缺血再灌注损伤后离体实验组LVDP、max(dp/dt)、min(dp/dt)均明显高于离体对照组,LVEDP明显低于离体对照组(P均<0.05);再灌注损伤后离体实验组心肌梗死面积明显小于离体对照组,LDH活性明显高于离体实验组(P均<0.05)。结论:慢性缺氧可提升心肌耐受急性缺血再灌注损伤的能力。     

辛伐他汀对缺血再灌注损伤心肌保护机制的实验研究

目的　研究辛伐他汀对心肌缺血再灌注损伤的保护机制。方法　将健康雄性 SD大鼠随机分为假手术组、对照组和辛伐他汀组 ,辛伐他汀组于结扎冠脉前 12小时腹腔注射给药 ,假手术组、对照组注射等量生理盐水 ,八导生理记录仪记录缺血 1、30分钟及再灌注后 1、30分钟心功能 ,以图像分析软件计算缺血和坏死心肌面积。同时对缺血心肌行浸润 PMNs(多形核细胞 )计数。结果　缺血再灌注后与对照组比较 ,辛伐他汀组坏死区面积与缺血区面积之比减少 2 1% ,坏死区面积与左室面积之比减少 2 2 % (P均 <0 .0 5 ) ;左室内压上升段最大变化速率(+dp/ dtm ax)、左室内压下降段最大变化速率 (- dp/ dtmax)、心率 (HR)、心肌纤维缩短速率最大值 (Vmax)分别在再灌注 1分钟和 30分钟明显改善 (P均 <0 .0 5 ) ,缺血心肌 PMNs浸润明显减少。结论　辛伐他汀对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

缺血期补充硝酸甘油对离体大鼠心脏心肌缺血再灌注损伤的作用

目的：观察离体大鼠心脏缺血期补充一氧化氮（ＮＯ）供体对缺血再灌注损伤的影响。　　方法：将２６只离体大鼠心脏缺血３０分，再灌注６０分。分为两组，用药组（１５只）及对照组（１１ 只）。用药组于缺血期给予４．４×１０－ ３ ｍｍ ｏｌ／Ｌ硝酸甘油（ｎｉｔｒｏｇｌｙｃｅｒｉｎ，ＮＴＧ，一种ＮＯ供体），碳酸氢盐缓冲液灌注。对照组仅给予碳酸氢盐缓冲液灌注。全部心脏均测定ＮＯ释放量、肌酸激酶漏出量及（或）心脏功能。　　结果：用药组大鼠心脏，使用ＮＴＧ表现为两种效应。其中部分大鼠心脏（非心室颤动组，ｎ＝ ７），ＮＴＧ增加肌酸激酶漏出量，减弱再灌注期心脏功能的恢复，伴随缺血期ＮＯ释放量的增加。对另一部分大鼠心脏（心室颤动组，ｎ＝ ８），ＮＴＧ减少肌酸激酶的释放，但心脏于再灌注期持续心室颤动，缺血期ＮＯ释放量无明显增加。　　结论：缺血期给予同一剂量ＮＴＧ对心肌缺血再灌注损伤产生双重效应，既可增加心肌损伤，又可减轻心肌损伤。     

脂肪肝缺血再灌注损伤的研究

随着人民生活水平的提高 ,脂肪肝的发病率越来越高。在外科手术及肝移植中 ,脂肪肝的检出率也很高。手术中常因阻断血流而造成缺血再灌注损伤 ,脂肪肝对缺血再灌注损伤比正常肝脏更为敏感 ,其机制可能是多方面的 ,此文主要对脂肪肝缺血再灌注损伤机理作一综述     

肺缺血再灌注损伤机制研究进展

在临床上肺移植、失血性休克、肺栓塞、体外循环、肺袖状切除手术等均会导致肺缺血再灌注损伤(IRI),IRI已成为肺移植术后重要的死因之一.进一步研究发生机制是解决肺IRI的重要环节.本文就肺IRI在分子生物学层面的作用机制:①炎症反应;②氧自由基;③蛋白酶;④脂类介质;⑤钙超载;⑥微循环障碍;⑦能量代谢障碍;⑧肺表面活性物质缺失等作一综述.     

高血糖促进氧化应激加重大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:研究高血糖是否可通过增加大鼠急性缺血/再灌注（I/R）心肌氧化应激而加重心肌损伤,并探讨其机制。方法: 将SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、生理盐水对照组(Vehicle)和高糖组(HG)。通过缺血30 min再灌注6 h,建立大鼠急性心肌I/R模型。通过静脉输注高浓度葡萄糖溶液,建立大鼠急性心肌I/R并发高血糖动物模型。术中监测血糖水平。再灌注结束后,检测血浆心肌酶谱水平,心肌梗死面积（IS）、心肌细胞凋亡指数（AI）和caspase 3的活性,检测心肌组织中氧化应激指标超氧阴离子、gp91phox、MDA、SOD,以及硫氧还蛋白结合蛋白（Txnip）的水平和硫氧还蛋白（Trx）的活性。结果: 与Vehicle组比较,HG组大鼠血糖水平显著升高,肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）的水平和IS增加,AI和caspase 3的活性升高(P<0.05)。HG组I/R心肌组织氧化应激程度显著升高,超氧阴离子、gp91phox和MDA水平增加(P<0.05)。同时,HG组I/R心肌组织的Txnip表达增加而Trx活性降低(P<0.05)。结论: 高血糖可增加大鼠I/R心肌中Txnip的表达,抑制Trx的活性促进氧化应激,这可能是其加重I/R心肌损伤的机制。     

冠心宁注射液对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用研究

目的:探讨冠心宁注射液对大鼠缺血再灌注心肌的影响。方法:40只SD大鼠被随机分为四组,每组10只,分别为:假手术组、梗塞对照组、冠心宁注射液低剂量组、冠心宁注射液高剂量组。采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血再灌注模型,观察大鼠急性心肌梗塞范围、梗塞心肌组织细胞因子白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平。结果:(1)冠心宁注射液低、高剂量组心肌梗塞范围均显著小于梗塞对照组(P0.01),两剂量组之间无显著差异(P0.05);(2)冠心宁注射液低、高剂量组IL-10水平高于梗塞对照组(P0.05),低于假手术组(P0.01);TNF-α水平低于梗塞对照组(P0.05),高于假手术组(P0.01),而两剂量组之间无显著差异(P均0.05)。结论:冠心宁注射液能抑制大鼠坏死心肌TNF-α的表达,促进IL-10的生成,抑制炎症反应,减少心肌梗塞范围,具有较好的心肌保护作用。     

缺血后处理减轻大鼠肥厚心肌缺血再灌注损伤的观察

目的探讨缺血后处理对心肌肥厚大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及其信号机制。方法通过腹主动脉结扎建立大鼠心肌肥厚模型,用Landendorff装置建立心肌肥厚大鼠离体心脏缺血再灌注模型。观察缺血后处理对心肌肥厚大鼠离体缺血再灌注心脏左心室收缩压,冠状动脉流量,肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶释放,心肌梗死范围,心肌组织中蛋白激酶B／Akt（Akt）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的影响。结果与缺血再灌注对照组相比,缺血后处理组心脏左心室收缩压、冠状动脉流量显著高,冠状动脉循环流出液中肌酸磷酸激酶、乳酸脱氢酶含量低,心肌梗死范围减小,心肌组织中磷酸化Akt（Ser473）、磷酸化GSK-3β（Set9）水平高,磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）能够抑制缺血后处理所致的磷酸化Akt（Ser473）、磷酸化GSK-3β（Set9）水平升高,但只能部分消除缺血后处理的心脏保护效应。结论缺血后处理能够减轻心肌肥厚大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,PI3K／Akt／GSK-3信号途径参与介导缺血后处理对离体缺血再灌注肥厚心肌的保护作用。     

小肠移植缺血再灌注损伤的防治策略

小肠对缺血敏感,术后缺血再灌注损伤(I/R)严重,影响临床小肠移植的效果。缺血预处理(IPC)、改善小肠移植保存液、抗炎等多种方法对减轻I/R显示出广阔前景,但均处于实验阶段,结合我们的研究,本文概括介绍了抗小肠I/R的方法及策略。     

MicroRNA-15a/b are up-regulated in response to myocardial ischemia/reperfusion injury

Objective Several studies have indicated that miR-15a, miR-15b and miR-16 may be the important regulators of apoptosis. Since attenuate apoptosis could protect myocardium and reduce infarction size, the present study was aimed to find out whether these miRNAs participate in regulating myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury. Methods Apoptosis in mice hearts subjected to I/R was detected by TUNEL assay in vivo, while flow cytometry analysis followed by Annexin V/PI double stain in vitro was used to detect apoptosis in cultured cardiomyocytes which were subjected to hypoxia/reoxygenation (H/R). Taqman real-time quantitative PCR was used to confirm whether miR-15a/15b/16 were involved in the regulation of cardiac I/R and H/R. Results Compared to those of the controls, I/R or H/R induced apoptosis of cardiomyocytes was significantly increased both in vivo (24.4% ± 9.4% vs. 2.2% ± 1.9%, P < 0.01, n = 5) and in vitro (14.12% ± 0.92% vs. 2.22% ± 0.08%). The expression of miR-15a and miR-15b, but not miR-16, was increased in the mice I/R model, and the results were consistent in the H/R model. Conclusions Our data indicate miR-15 and miR-15b are up-regulated in response to cardiac I/R injury, therefore, down-regulation of miR-15a/b may be a promising strategy to reduce myocardial apoptosis induced by cardiac I/R injury.     

Effects of N-acetylcysteine and pentoxifylline on remote lung injury in a rat model of hind-limb ischemia/reperfusion injury

Objective

: To investigate the effects of N-acetylcysteine (NAC) and pentoxifylline in a model of remote organ injury after hind-limb ischemia/reperfusion (I/R) in rats, the lungs being the remote organ system.

Methods

: Thirty-five male Wistar rats were assigned to one of five conditions (n = 7/group), as follows: sham operation (control group); hind-limb ischemia, induced by clamping the left femoral artery, for 2 h, followed by 24 h of reperfusion (I/R group); and hind-limb ischemia, as above, followed by intraperitoneal injection (prior to reperfusion) of 150 mg/kg of NAC (I/R+NAC group), 40 mg/kg of pentoxifylline (I/R+PTX group), or both (I/R+NAC+PTX group). At the end of the trial, lung tissues were removed for histological analysis and assessment of oxidative stress.

Results

: In comparison with the rats in the other groups, those in the I/R group showed lower superoxide dismutase activity and glutathione levels, together with higher malondialdehyde levels and lung injury scores (p < 0.05 for all). Interstitial inflammatory cell infiltration of the lungs was also markedly greater in the I/R group than in the other groups. In addition, I/R group rats showed various signs of interstitial edema and hemorrhage. In the I/R+NAC, I/R+PTX, and I/R+NAC+PTX groups, superoxide dismutase activity, glutathione levels, malondialdehyde levels, and lung injury scores were preserved (p < 0.05 for all). The differences between the administration of NAC or pentoxifylline alone and the administration of the two together were not significant for any of those parameters (p > 0.05 for all).

Conclusions

: Our results suggest that NAC and pentoxifylline both protect lung tissue from the effects of skeletal muscle I/R. However, their combined use does not appear to increase the level of that protection.     

钾通道开放剂对离体兔心缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察非选择性三磷酸腺苷敏感性钾(KATP)通道开放剂Pinacidil和线粒体型KATP(mitoKATP)通道开放剂Diazoxide预处理对高钾停跳离体兔心缺血再灌注损伤的保护作用,以及mitoKATP通道阻断剂5-hydroxydecanoic acid sodiumsalt(5HD)应用后其心肌保护作用的变化。方法采用离体兔心Langendorff灌注实验模型。离体兔心40只随机等分成5组(n=8):对照组(C组)、Pinacidil组(P组)、Diazoxide组(D组)、5HD Pinacidil组(HP组)和5HD Diazoxide组(HD组)。离体兔心用标准Thomas停搏液(4℃,K 16mmol/L)至心停跳,45min后再灌注20min,于心脏停跳前灌注药物15min,对比观察Pinacidil、Diazoxide及其与5HD合用时对再灌注后心功能及冠状动脉血流的影响以及再灌注末心肌超微结构、蛋白含量、脂质过氧化物丙二醛(MDA)以及腺苷酸含量的变化。结果再灌注后P组、D组、HP组心功能的恢复率均明显高于C组,心肌MDA的含量、蛋白的漏出量明显低于C组,超微结构观察损伤较轻;但HP组心功能的恢复要差于P组,心肌MDA的含量、蛋白的漏出量明显高于P组;HD组与C组各检测指标比较差异无统计学意义。结论Pinacidil(10μmol/L)和Diazoxide(30μmol/L)预处理对离体兔心缺血/再灌注心肌具有保护效果,且其保护效果可以部分被5HD所阻断,提示心肌mitoKATP通道可能是产生心肌保护作用的靶点之一。     

含抑肽酶灌注液减轻缺血再灌注心肌的损伤

目的　观察抑肽酶等药物对缺血再灌注离体兔心的影响。方法　 2 4只家兔随机分为两组 :对照组 (B组 )将离体心脏置于 L angendorfl装置 ,经主动脉逆行灌注克氏液 ,灌注 30 min后 ,用 Thomas灌注停跳 40 min,最后再恢复灌注 30 min。用药组 (A组 )克氏液中加入抑肽酶及山莨菪碱。缺血前及再灌注期记录左心室功能及冠状动脉血管阻力 ,并行心肌超微结构观察。结果　再灌注后 30 min,A组左心室功能明显高于 B组 (P<0 .0 5 ) ;收集的灌注液中肌酸磷酸激酶 (CK)及乳酸脱氢酶 (L DH)较 B组明显减少 ;超微结构改善也优于 B组。结论　抑肽酶对缺血再灌注心肌功能有明显保护作用