首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到19条相似文献,搜索用时 93 毫秒
1.
目的 比较人脐带Wharton's Jelly来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived fromWharton's Jelly,WJ-MSCs)与骨髓来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from bone marrow,BM-MSCs)对心肌梗死(myocardial infarction,MI)的治疗效果.方法分离鉴定人WJ-MSCs和BMMSCs;小鼠随机分为MI组、WJ-MSC组、BM-MSC组,每组10只,通过结扎冠状动脉左前降支造成心肌梗死模型,于心肌梗死3h后分别静脉注射磷酸盐缓冲液1×10^6 WJ-MSCs和1×10^6 BM-MSCs ;另设假手术组(Sham组,n=8),分离但不结扎冠状动脉,术后3h静脉注射磷酸盐缓冲液.超声心动图检查评价小鼠心功能;天狼猩红染色评价心肌纤维化程度.结果 与MI组相比,WJ-MSC组左室短轴缩短率升高,左室收缩末内径下降,肺重/体重比下降,心重/体重比下降,心肌间质胶原沉积减少,且差异均有统计学意义(P<0.05); WJ-MSC组上述疗效与BM-MSC组相比无统计学差异(P均>0.05).结论 静脉移植WJ-MSCs能够改善心肌梗死后心功能,抑制心脏重塑,其疗效与BM-MSCs相当.  相似文献   

2.
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对心肌梗死大鼠脾脏淋巴细胞体外杀伤效应的影响。方法:复制大鼠急性心肌梗死(AMI)模型,采用心外膜注射方法移植MSCs或PBS液,另取正常组、假手术组作对照。分别于手术后第1周、第2周和第4周末提取脾脏淋巴细胞,并与乳鼠心肌细胞共培养,采用结晶紫法检测淋巴细胞的杀伤效应。结果:手术后第2和4周末,AMI加PBS组脾脏淋巴细胞杀伤效应分别为(32.31±7.23)%、(47.20±5.13)%,较正常组[(21.95±4.65)%,(22.13±5.08)%]和假手术组[(22.21±5.43)%,(24.21±5.40)%]明显增强(均P<0.05)。相对于AMI加PBS组,AMI加MSCs组第2、4周末在一定程度上抑制了淋巴细胞的杀伤效应,分别为(26.14±5.15)%、(34.28±6.13)%,与AMI加PBS组的同时间比较,均P<0.05。结论:MSCs移植可抑制心肌梗死大鼠脾脏淋巴细胞对心肌细胞的杀伤效应。  相似文献   

3.
人脐带间充质干细胞是一种非常有潜力的干细胞资源,在一定条件下可分化为骨、软骨、脂肪、神经、肝、心肌等多种组织细胞。因与其他来源干细胞相比,其资源丰富,不存在伦理道德问题,免疫原性弱,并已应用临床移植研究。现就人脐带间充质干细胞向心肌细胞的定向分化及其临床移植应用研究做简要综述。  相似文献   

4.
罗明雄  魏玲 《心脏杂志》2012,24(6):769-772
心肌纤维化作为心脏组织异常重构的主要病理改变,是各种心血管疾病发展的终末阶段,最终将导致心功能的不可逆性改变。目前的治疗方法对此毫无办法,而骨髓间充质干细胞(MSCs)移植作为一种新型的治疗方法,能在调节胶原成分、减缓纤维化进程及再生心肌细胞等多方面改善心脏组织重构,从而为逆转心脏功能提供了可能,可能是治疗心肌纤维化的一种重要途径。  相似文献   

5.
田涛  马宾 《心脏杂志》2012,24(1):117-119,137
溶栓、经皮冠状动脉介入治疗及常规药物治疗可挽救许多急性心肌梗死患者的生命,但不能从根本上恢复心肌细胞数量。骨髓间充质干细胞(BM-MSCS)是骨髓中一种具有多向分化潜能的细胞,可被诱导分化为心肌样细胞,改善梗死区的血液供应及心肌重构,为心肌梗死的治疗带来了新的希望。本文就BM-MSCS移植治疗心肌梗死的方式,移植的时机及临床应用等方面作一综述。  相似文献   

6.
间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的成体干细胞,在体内、体外可以被诱导分化为心肌细胞。心肌梗死造成大量的功能心肌细胞丧失,引起心室重构和功能失常,导致心脏功能衰竭。间充质干细胞心肌梗死后体内移植可以“归巢”到梗死区,定向分化为心肌细胞,改善受损心脏功能,被认为是细胞移植的理想种子细胞。本文综述间充质干细胞生物学特性及其体内移植心肌再生治疗心肌梗死的最新研究进展。  相似文献   

7.
目的 探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSC)对Graves病(GD)模型小鼠的治疗作用.方法 将48只18周龄雌性GD小鼠随机分为G0、G1、G2、G3组各12只,G1组和G3组给予丙硫氧嘧啶(PTU)50 mg×60 d灌胃,同时G2组和G3组于经尾静脉移植人MSC 1次,G0组不治疗.定期称取小鼠体质量,常规测定血象与谷丙转氨酶(GPT),化学发光法测定血清游离甲状腺素(FT4),酶联吸附法(ELISA)法测定血清甲状腺刺激抗体(TSAb),HE染色观察甲状腺病理改变.结果 26周龄时体质量G2组(28.6±2.8)g、G3组(29.4±3.1)g,高于G0组的(25.3±2.8) g、G1组的(25.6±3.4)g,P均<0.05.26周龄时,白细胞G2组(6.7±1.4)×109/L、G3组(7.3±1.2)×109/L,高于G0组的(4.2±0.6)×109/L、G1组的(4.3±1.1)×109/L,P均<0.05;GPT G2组(34.8±12.5) U/L、G3组(36.7±14.7) U/L,低于G0组的(57.2±13.5) U/L、G1组的(59.0±11.6) U/L,P均<0.05.26周龄时,血清FT4及TSAb水平G2组分别为(6.2±1.2) pmol/L、(4.7±0.8) U/mL,G3组分别为(5.9±1.3) pmol/L、(3.4±0.7)U/mL,低于G0组的(10.0±1.8) pmol/L、(8.4±1.0)U/mL,P均<0.05.甲状腺滤泡上皮增生与新生滤泡G2组和G3组较G0组明显减少.结论 UC-MSC对Graves病模型鼠有显著疗效,安全且无排斥反应.  相似文献   

8.
目的:探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)与胰岛细胞联合移植对胰岛活性与功能促进作用.方法:50只链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的SD大鼠随机分为4组移植于肾包膜下,(1)500个胰岛移植组;(2)1×106个UCMSCs与500个胰岛细胞联合移植组;(3)1×106个UCMSCs组;(4)假手术(空白)对照组,仅于肾包膜下注入0.3mL生理盐水;术后测血糖水平、葡萄糖耐量试验(glucose tolerance test,GTT)、血清胰岛素水平以及达正常血糖水平率(以血糖浓度≤11.1mmol/L标准为正常)至28d.结果:联合移植组术后血糖水平最低,血清胰岛素水平更高,达正常血糖浓度率优于其他3组,在术后14d GTT较其他3组好,血清胰岛素水平较其他3组好,血糖水平、血清胰岛素水平、GTT水平UCMSCs组与对照组间均无统计学差异,单纯UCMSCs组无1例动物血糖水平达正常.结论:间充质干细胞与胰岛联合移植能有效提高胰岛细胞活性与功能.  相似文献   

9.
目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)经冠脉移植对急性心肌梗死后心功能的影响。方法24只日本大耳白兔,随机分为MSCs移植组(n=12)和培养液对照组(n=12)。从兔股骨抽取骨髓,体外培养MSCs。通过结扎左冠前降支建立急性心肌梗死模型。冠脉结扎后7d,细胞移植组和对照组直接经冠脉注入MSCs和培养液。于心肌梗死前、细胞移植前、细胞移植后1、2和4周对兔进行超声心动图检查。移植后4周处死动物,进行BrdU和第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测。结果移植后2周,MSCs移植组在射血分数(LVEF)和左室收缩末直径(LVESD)方面与移植前和对照组相比有显著改善(P<0.05);移植4周后,LVEF、LVESD和左室舒张末直径(LVEDD)在MSCs移植组与移植前及对照组相比均有显著改善(P<0.05)。免疫组化检测发现,MSCs移植组BrdU染色阳性,血管计数较对照组明显增多(P<0.01)。结论经冠脉移植的MSCs可在梗死区心肌内存活并逐渐分化成心肌样细胞,促进毛细血管生成,显著改善心功能。  相似文献   

10.
孙洞箫  王志奇  周盾 《山东医药》2012,52(26):36-38
[目的]观察人脐带间充质干细胞移植对IgA肾病小鼠肾功能及肾组织的影响,并探讨其可能机制.[方法]SPF级雄性昆明小鼠60只,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,各20只.模型组和治疗组用牛血清白蛋白灌胃、CCI4皮下注射、脂多糖尾静脉注射的方法制作IgA肾病模型.造模成功后,治疗组经尾静脉注射人脐带间充质干细胞0.5 mL(含5 ×105个间充质干细胞),对照组、模型组经尾静脉注射生理盐水0.5mL.于治疗前及治疗后第7、21、56天,检测小鼠肾功能指标(血Cr、BUN、总蛋白及24h尿蛋白);处死小鼠取肾组织,行Masson染色观察肾组织病理变化,用免疫组化法检测肾组织中的VEGF.[结果]模型组小鼠均出现蛋白尿和血尿(15只小鼠出现镜下血尿,5只出现肉眼血尿);治疗组于第21天小鼠血尿有所消失.与模型组治疗后比较,治疗组肾组织Masson染色显示纤维化程度明显减轻、VEGF表达增强.治疗后第7、21、56天,治疗组SCr、24h尿蛋白较模型组明显改善(P<0.05或0.01),在治疗后第56天治疗组BUN较模型组明显下降(P<0.01).[结论]人脐带间充质干细胞移植对IgA肾病小鼠肾功能具有保护作用,其机制可能与上调肾组织中VEGF表达有关.  相似文献   

11.
目的 观察自体骨髓间充质干细胞(MSC)移植对小型猪心肌梗死后心律失常的影响,并研究其作用机制.方法 利用介入方法制作小型猪心肌梗死模型并进行自体MSC移植.MSC移植组12头和心肌梗死对照组10头,分别于移植2 h及4周后通过电生理程序刺激,观察室性心动过速(室速)的发生情况.于建模4周后,通过膜片钳技术研究移植后MSC在心肌环境下的离子通道表达和梗死区域心电异质性变化.结果 (1)建模后2 h MSC移植组9头(75%)、对照组9头(90%)诱发出室速,两组间差异无统计学意义(P=0.445).术后4周MSC移植组3头(25%)、对照组8头(80%)可诱发出持续性单形性室速(P=0.012).(2)MSC移植组的心外膜细胞(Epi)、心内膜细胞(Endo)和中层细胞(M)INa峰值电流密度分别为(-12.43±3.04)pA/pF、(-14.04±3.82)pA/pF和(-29.26±5.70)pA/pF,对照组梗死边缘区的Epi、Endo和M层INa峰值电流密度分别为(-8.47±3.34)pA/pF、(-9.71±3.38)pA/pF和(-18.98±4.05)pA/pF;MSC移植组在三层心肌的表达具有异质性,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).(3)MSC移植未室速组MSC的Epi、Endo和M层INa失活半数电压分别为(-93.1±13.8)mV、(-95.2 ±15.5)mV和(-103.4±8.7)mV,MSC移植室速组分别为(-126.2±10.9)mV、(-106.7±11.9)mV和(-105.4±11.0)mV,心肌梗死室速组分别为(-129.1±10.9)mV、(-112.2±9.9)mV和(-109.7±9.3)mV,MSC移植室速组和心肌梗死室速组相比各层差异无统计学意义(P>0.05),和MSC移植未室速组相比各层差异有统计学意义(P<0.05).(4)多元logistic回归分析表明INa失活半数电压(RR=1.449,95%CI1.276~2.079,P=0.029)、INa峰值密度(RR=1.092,95%CI1.008~1.917,P=0.012)是影响心肌梗死室性心律失常的独立危险因素.结论 自体MSC移植致心律失常可能性较小,且有抑制梗死后心律失常发生的作用.自体MSC在心肌内可分化成为具有心肌细胞离子通道特性的类心肌细胞,其离子通道分化程度可能是影响室性心律失常发生的主要机制.  相似文献   

12.
郑盛  殷芳  肖琼怡  郭致平 《肝脏》2014,(12):918-923
目的:探讨脐带间充质干细胞(hUCMSC)移植对急性肝功能衰竭大鼠的治疗作用,并优化移植治疗途径。方法采用组织块贴壁法收集 hUCMSC,流式细胞术检测细胞表面标志物。将 SD 大鼠随机分为经尾静脉注射移植治疗组,经肝叶注射移植治疗组,模型对照组,空白对照组。急性肝衰竭动物模型采用一次性腹腔注射2.5 mL/kg CCl4橄榄油(1∶1)混合溶液建立,24 h 后移植治疗组分别经尾静脉和肝叶注射 hUCMSC 细胞悬液;治疗后0 h、24 h、48 h、72 h、96 h和1周收集血清分析肝功能恢复情况;治疗后3 d、1周、2周留取肝脏标本,观察病理学恢复情况,用 Real-time PCR 检测鼠肝中人 CK8、CK18和 AFP 基因 mRNA 转录水平,免疫组化法检测人 CK18的表达。结果移植治疗组 TBil 和 ALT 含量较模型对照组有明显恢复(P <0.05),肝细胞再生程度提高,炎细胞减少,肝脏病理学修复作用增强。在造模后1周、2周时,经尾静脉移植治疗组和经肝叶注射移植治疗组的肝组织中,CK8、CK18和 AFP 基因 mRNA 的相对转录量与模型对照组相比差异有统计学意义(P <0.05)。经尾静脉注射移植治疗组和经肝叶移植治疗组中,移植后的 hUCMSC 在鼠肝中诱导分化后表达人肝细胞相关蛋白 CK18。经尾静脉和经肝叶注射移植治疗组的肝功能、移植细胞分化程度比较差异无统计学意义(P >0.05)。结论采用 hUCMSC 移植治疗急性肝衰竭大鼠模型后,能促进肝功能和肝脏病理学修复。移植后的 hUCMSC 自身能分化为具有肝细胞功能的类肝样细胞。经尾静脉与经肝叶注射移植疗效相似。  相似文献   

13.
目的研究单次与多次经静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠急性心肌梗死的影响。方法选择60只SD大鼠随机分为A组(单次移植MSCs)、B组(多次移植MSCs)、C组(单次移植MSCs对照)和D组(多次移植MSCs对照),每组15只。A组在心肌梗死后第1天、B组在心肌梗死后第1、4、7、10、13天经尾静脉移植MSCs 5×10~6个,C组和D组注射等量培养液。大鼠心肌梗死后4周测定左心功能,并行免疫组织化学检测。结果心肌梗死后4周A组和B组大鼠梗死心肌中均可以观察到4’,6二脒基-2-苯吲哚标记阳性细胞存在。与C组和D组比较,A组和B组大鼠左心功能均明显改善,心肌梗死面积减小,毛细血管密度增高(P<0.05)。与A组比较,B组改善作用更加明显(P<0.05)。结论经静脉单次与多次移植MSCs对大鼠急性心肌梗死均有效,但多次移植效果更好。  相似文献   

14.
15.
目的探讨静脉移植缺血预处理的间充质干细胞(MSCs)对梗死心肌的修复作用。方法选择纯种大白兔46只制作心肌梗死模型,分为缺氧预处理MSCs移植组(A组)、非缺氧预处理MSCs移植组(B组)和对照组,于心肌梗死后30d分别检测心功能、梗死心肌的形态学变化以及新生毛细血管密度。结果与对照组比较,A、B组左心室收缩末期内径、舒张末期内径降低,心功能提高,室壁厚度增加,心肌梗死面积缩小,梗死区和梗死边缘区新生毛细血管密度增加(P〈0.05)。结论MSCs移植治疗兔心肌梗死可改善心功能、缩小梗死面积、增加梗死心肌新生毛细血管密度,经缺氧预处理的MSCs移植治疗更有优势。  相似文献   

16.
人脐血单个核细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
目的探讨人脐血单个核细胞(HUCBC)移植治疗急性心肌梗死(AMI)的可行性及疗效。方法雄性Wistar大鼠45只随机分为:心肌梗死(MI)对照组、MI+细胞移植组和正常组(每组各15只)。结扎冠状动脉左前降支制作大鼠AMI模型,以HES沉淀加Ficoll密度梯度离心的方法制备HUCBC,并以BrdU标记细胞。移植组大鼠模型制作成功后即刻在梗死区周边注射经分离并标记的HUCBC混悬液,在MI对照组相同位置注入等量DMEM培养液,正常组不做任何处理。移植4周后用超声评价心功能和左心导管检测血流动力学改变,并取心脏组织行HE染色、抗血管性血友病因子(vWF)和BrdU组化染色,观察心肌病理改变、毛细血管增生及移植细胞成活情况。结果在移植组显示移植的单个核细胞可在梗死心肌内存活并参与梗死心肌修复。超声心动图见移植组各项心功能指标改善。血流动力学检查显示移植组与MI对照组相比,左心室舒张末压明显降低[LNEDP (21.08±8.10)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)比(30.82±9.59)mm Hg,P<0.05],左心室内压力最大上升速率明显增快[+dp/dtmax(4.29±1.27)mm Hg/ms比(3.24±0.75)mm Hg/ms,P< 0.05],最大下降速率亦显著提高[-dp/dtmax(3.71±0.79)mm Hg/ms比(3.00±0.49)mm Hg/ms, P<0.05]。免疫组化染色发现移植组梗死区周边毛细血管数显著增加(P<0.01)。结论HUCBC在未使用免疫抑制剂的条件下可成功移植到大鼠MI区,并提示能改善MI大鼠心功能,促进新生血管形成。  相似文献   

17.
目的 探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对急性肝功能衰竭大鼠的治疗效果.方法 腹腔注射D-氨基半乳糖(D-gal)和脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肝功能衰竭.将造模成功的大鼠经腹腔或尾静脉移植hUCMSCs,同时将注射0.9%氯化钠溶液的大鼠作为对照组.在第0、1、2、3、5、7天分别检测ALT、TBil和Alb,第7天处死大鼠,观察其肝脏组织病理学改变.统计学方法采用Fisher确切概率法、非配对t检验和Mann-Whitney U检验.结果 腹腔或尾静脉移植hUCMSCs组大鼠存活率与对照组相比,差异均无统计学意义(Fisher确切概率法,均P=1.00).腹腔移植hUCMSCs组大鼠移植后2 d ALT、TBil、Alb分别为(804.9±88.0)U/L、(17.4±2.7)μmol/L、(20.9±0.8)g/L,对照组分别为(1294.3±171.4)U/L、(32.3±5.5)μmol/L、(16.1±0.9)g/L(t=2.640,P=0.020;r=2.529,P=0.025;t=-3.833,P=0.002).尾静脉移植hUCMNCs组肝功能指标改善情况与腹腔移植组相似.腹腔和尾静脉移植hUCMSCs组肝组织损伤程度比对照组轻(U=4.500,P=0.005;U=4.500,P=0.008),肝细胞分裂相指数也有显著提高(U=4.000,P=0.005;U=5.500,P=0.013).结论 经腹腔或尾静脉移植hUCMSCs均可促进急性肝功能衰竭大鼠ALT、TBil、Alb等指标恢复正常,新生肝细胞增殖活跃,同时明显改善肝组织损伤病理分级.
Abstract:
Objective To study the therapeutic effects of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUCMSCs) on acute liver failure ( ALF) induced by D-galactosamine (D-gal) and lipopolysaccharide (LPS) in rats. Methods The ALF model was obtained through intraperitoneal injection of D-gal(300 mg/kg)and LPS (20μg/kg)in Wister rats. The hUCMSCs were transplanted after intoxication. All rats were divided into four groups, and each group received either hUCMSCs or 0.9% NaCl solution through intraperitoneal or tail-intravenous injection. To evaluate the liver function of each group, the levels of alanine aminotransferase (ALT), total bilirubin (TBil) and serum albumin (Alb) were measured on the day of hUCMSCs transplantation and the following 1, 2, 3, 5 and 7 days. All rats were then sacrificed to examine the liver histology at day 7. Analyses were done by using Fisher's exact test, unpaired t test and Mann-Whitney U test. Results There were no significant differences of survival rates among four groups (Fisher's exact test, both P = 1. 00). The levels of ALT, TBil and Alb in group receiving hUCMSCs intraperitoneally were (804. 9 ± 88. 0) U/L,(17. 4±2. 7) μmol/L and (20. 9±0. 8) g/L, respectively after 2 days of injection, whereas in the corresponding control group, those were (1294. 3± 171. 4) U/L, (32. 3±5. 5) μmol/L and (16. 1±0. 9) g/L, respectively, which indicated that hUCMSCs transplantation significantly improved the liver function (t = 2. 640, P =0.020;t=2.529, P = 0. 025;t= - 3. 833, P = 0. 002). Both of hUCMSCs-transplanted groups showed no significant differences. Liver histological data showed that transplantation of hUSMSCs through either intraperitoneal or tail-intravenous injection alleviated liver damage (U=4. 500, P = 0. 005;U=4. 500, P = 0. 008) and the mitotic index also increased in hUCMSCs-transplanted groups (U=4. 000, P = 0. 005; U=5. 500, P = 0. 013). Conclusions The levels of ALT, TBil and Alb can rapidly normalize in ALF rats after injected with hUCMSCs either intraperitoneally or tail-intravenously. hUCMSCs application raises the mitotic index, enhances hepatocellular regeneration and improves histological status.  相似文献   

18.
脐血间充质干细胞培养条件的优化   总被引:10,自引:0,他引:10  
目的探讨脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的培养扩增条件。方法取2004-10~2005-02广州华侨医院产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、接种密度、首次换液时间、不同的培养基对脐血中的间充质干细胞原代培养过程的影响,以流式细胞仪对优化条件下培养的间充质干细胞进行细胞周期分析,细胞表面标志检测,多种成分联合诱导其向脂肪、成骨方向分化,细胞化学染色检测诱导后的细胞变化。结果在其他条件不变的情况下,羟乙基淀粉沉淀法优于Ficoll分离法,5×106/cm2是脐血MSC培养的适宜接种密度,首次换液时间为7d。优化条件下培养的间充质干细胞不表达造血细胞系的标志(CD_(34)/CD_(45)/CD_(14))及内皮细胞的标志CD106,强表达CD_(29)、CD_(44)、CD_(13),在适当的诱导条件下可向脂肪及成骨方向分化。结论脐血中含有MSC,可以作为组织工程的种子细胞。  相似文献   

19.
骨髓间充质干细胞静脉移植对心肌梗死大鼠心功能的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨静脉途径移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法雄性SD大鼠20只,分为干细胞移植组(10只)和对照组(10只)。结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型。同种异体大鼠MSCs体外分离、纯化、扩增,4’,6-二脒-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记,并通过尾静脉于心肌梗死后1周移植入AMI大鼠体内,对照组则注射等量培养液。4周后测定心功能,并行免疫组织化学检测。结果心肌梗死4周后,干细胞移植组心肌组织冷冻切片中可以观察到DAPI标记细胞存在,免疫组织化学显示阳性标记细胞a-Actin肌动蛋白检测阳性。干细胞移植组心功能较对照组有明显改善(P<0.05)。结论MSCs经静脉移植可以归巢至梗死心肌处,并能改善受损的心功能。  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号