水杨酸钠抗庆大霉素耳毒性作用机理研究

观察水杨酸钠预防庆大霉素(ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ ,ＧＭ)耳毒性作用。一、材料及方法1 实验动物 :耳廓反射正常的杂色豚鼠 36只 ,体重 2 5 0～ 35 0ｇ,分为 4组 ,每组 9只。ＧＭ组 :硫酸庆大霉素 1 2 0ｍｇ/ｋｇ体重皮下注射 ,每日 1次 ;水杨酸组 :水杨酸钠 1 1 6ｍｇ/ｋｇ体重皮下注射 ,每日 2次 ;ＧＭ 水杨酸组 :ＧＭ和第一次水杨酸钠同时注射 ,剂量同上。对照组 :生理盐水等量皮下注射 ,每日 1次。 4组均连续注射 1 9ｄ。2 实验程序 :用药前及用药后 9、1 9、2 8和 42ｄ检测ＡＢＲ。1 9ｄ检测听性脑干反应 (ａｕｄｉｔｏｒｙｂｒａｉ…     

水杨酸盐预防庆大霉素耳毒性的试验研究

目的 探讨大剂量应用庆大霉素时,观察水杨酸钠是否仍有预防耳毒性的作用。方法 选33只健康雄性豚鼠。随机分为A(11只)、B(11只)、C(11只)三组。A组腹腔注射药物庆大霉素+水杨酸钠;B组腹腔注射庆大霉素;C组腹腔注射生理盐水。每组动物用药前、用药后第2、4、6、8、10天分别行双耳ABR的阈值测试。耳蜗铺片光镜下毛细胞记数,分别用SPSS软件进行统计学处理。结果 体重:A组体重平均增加10.2克,B组体重平均减少5.2克,对照组体重平均增加16.5克,A组与B组比较差异有显著性(P<0.01)。ABR检查:第10天A组平均阈值为43.15±6.96,较B组平均83.93±19.33有显著改善(P<0.01),A组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。毛细胞计数:A组比B组损伤毛细胞数减少有显著性差异(P<0.01),B组毛细胞损伤明显增加,与对照组相比有显著性差异,A组与对照组无显著性差异。结论 提示在临床上为了在短期内控制细菌感染采用大剂量的庆大霉素时,仍可用水杨酸来预防其耳毒性。     

水杨酸钠中耳灌注对庆大霉素耳毒性的防护作用

目的 观察水杨酸钠经中耳局部灌注给药对庆大霉素耳毒性的防护作用。方法 24只健康杂色豚鼠均接受圆窗置管术，然后随机分成3组：Ⅰ组为生理盐水对照组；Ⅱ组为庆大霉素组，腹腔注射庆大霉素，经听泡灌注生理盐水；Ⅲ组为庆大霉素加水杨酸钠组，腹腔注射庆大霉素，经听泡灌注水杨酸钠。观察各组给药前后听性脑干反应阈的变化和给药后4周毛细胞损失情况。结果 听泡置管术后ABR反应阈无明显改变；给药后2周和4周，庆大霉素组ABR反应阈较庆大霉素加水杨酸组显著增高（P〈0．01），对照组ABR反应阈无显著变化。耳蜗铺片、毛细胞计数显示庆大霉素组外毛细胞严重缺失，以底回最明显，庆大霉素加水杨酸钠组外毛细胞损失较庆大霉素组轻（P〈0．05）。对照组无明显外毛细胞缺失。结论 水杨酸钠经中耳局部给药途径可减轻庆大霉素所致听功能损害和毛细胞缺失，可在一定程度上有效预防庆大霉素的耳毒性。     

银杏叶提取物对顺铂耳蜗毒性的拮抗作用

目的 研究银杏叶提取物对顺铂耳毒性的拮抗作用。方法 杂色健康豚鼠27只，随机分为生理盐水组、顺铂（CDDP）组、银杏叶提取物（Egb CDDP）组，动态观察动物听阈变化及耳蜗外毛细胞形态学改变，并在损伤6天后，观察外毛细胞损伤率、耳蜗毛细胞凋亡情况。结果 CDDP组听阈及外毛细胞损伤率显著性升高，凋亡现象明显；Egb CDDP组外毛细胞的损伤率及听阈损伤均明显减轻，仅出现早期凋亡表现；生理盐水组各项指标均无明显变化。结论 Egb对顺铂所致的耳毒性具有明显拮抗作用。     

水杨酸钠对噪声性听力损失影响的实验观察

目的　观察水杨酸钠能否减轻噪声引起的听力损失。方法　将 3 6只健康且耳廓反射正常的花色豚鼠随机分为水杨酸钠实验组、生理盐水对照组、水杨酸钠对照组和噪声暴露组。噪声暴露采用 10 5dBSPL的 4kHz窄带噪声下暴露 2h ,连续 5d。水杨酸钠给药为每天 0 5g/kg体重连续10d。由短声诱发听性脑干反应 (auditorybrainstemresponse ,ABR) ,连续测试其阈值 ;而后取动物双侧耳蜗荧光染色后光镜下行毛细胞计数和形态学观察。结果　ABR阈值测试显示 ,实验组动物在噪声暴露结束后 2 4h的听力略好于对照组 ;形态学观察表明 ,实验组细胞核异常数据低于对照组。结论　水杨酸钠可能在一定程度上具有拮抗噪声引起的听力损失及保护耳蜗毛细胞的作用     

用耳鸣动物模型评价药物治疗耳鸣效果

目的 建立动物耳鸣的行为学模型,确认动物是否感觉到了耳鸣,并用该模型评价药物治疗效果。方法 雄性健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠６０只,平均分为１０组：第Ⅰ、Ⅱ组为水杨酸组,皮下注射水杨酸钠每日３５０ｍｇ／ｋｇ体重;第Ⅲ、Ⅳ组为生理盐水对照组;第Ⅴ、Ⅵ组为纯音组,用８ｋＨｚ、６５ｄＢ ＳＰＬ的纯音代替水杨酸;第Ⅶ、Ⅷ组为尼莫地平组,注射水杨酸后再皮下注射尼莫地平每日１ｍｇ／ｋｇ体重;第Ⅸ、Ⅹ组为骨参舒耳片组,     

水杨酸类药物耳毒性机理的研究进展

几十年来众多学者对水杨酸类药物引起听觉系统的生理学、组织学、形态学等改变进行了大量的研究 ,水杨酸类药物耳毒性的发生可能与耳蜗可逆性生化或代谢改变有关。但其对内耳影响的确切机理仍不清楚。1　形态学研究包括人和动物颞骨组织病理研究以及柯替器、特别是耳蜗毛细胞的超微结构研究。形态学研究的结果不一致 ,但普遍认为水杨酸盐可使外毛细胞超微结构改变。六十年代有学者报道接受过大剂量阿司匹林治疗者尸检颞骨组织末见明显的病理改变。动物组织病理学研究显示少数、并且通常是可逆性的耳蜗结构的镜下改变。Ｓｐｏｎｇｒ等[1] 报…     

硫普罗宁对顺铂所致耳毒性的保护作用

目的探讨硫普罗宁对顺铂耳毒性的保护作用。方法将48只豚鼠随机等分为四组,每组12只:生理盐水对照组:生理盐水腹腔注射2ml/d共7天;硫普罗宁组:腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-1共7天;顺铂组:腹腔注射顺铂4mg·kg-1·d-1共4天;顺铂加硫普罗宁组:先腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-13天,从第4天起先腹腔注射硫普罗宁0.3g·kg-1·d-1,再腹腔注射顺铂4mg·kg-1·d-1共4天。动物用药前后行听性脑干反应检查。每组半数动物做耳蜗基底膜铺片硝酸银染色,在光镜下观察毛细胞形态,半数动物取耳蜗组织匀浆测局部丙二醛(malonaldehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量。结果顺铂应用后可使(auditory brainstem response,ABR)反应阈上升,波I潜伏期延长,耳蜗组织匀浆内MDA含量增多,SOD活性下降,与生理盐水对照组相比差异具有显著统计学意义(P<0.01)。硫普罗宁可改善顺铂的耳毒性,使ABR反应阈下降,波I潜伏期缩短,局部MDA含量减少,SOD活性提高,与顺铂组相比差异具有显著统计学意义(P<0.05)。光镜下见应用顺铂后外毛细胞明显损伤,而硫普罗宁可减轻上述损伤。结论硫普罗宁可能通过抗自由基原理来改善顺铂的耳毒性。     

跳台反射法耳鸣动物行为学模型的建立

目的 建立跳台反射法耳鸣动物行为学模型,丰富动物耳鸣的建模方法.方法 Wistar大鼠20只,随机平均分为2组:水杨酸组和对照组(每日分别经腹腔注射10%水杨酸钠350 mg/kg/天和生理盐水).动物于隔音室内进行条件反射训练.经10～14天的强化训练后,动物形成"声刺激-跳台逃避"的条件反射.条件反射建立后动物给药,分别记录两组动物在给声期间及刺激间期跳上跳台的次数.结果 水杨酸组动物给药后每10次刺激间期中出现的跳台动作为(3.9±1.6)次,经方差分析,与对照组存在显著性差异(P＜0.05),说明大鼠经注射水杨酸钠后有耳鸣的产生.结论跳台法耳鸣动物模型可有效验证水杨酸动物耳鸣的产生,可为耳鸣的基础研究提供一种理想模型.     

水杨酸钠作用后大鼠耳蜗K-Cl协同转运体家族mRNA表达研究

目的 研究水杨酸钠作用后大鼠耳蜗K-Cl协同转运体家族(K - Cl- cotransporter ,KCC)成员KCC1～4mRNA的表达情况,探讨KCC在水杨酸盐耳毒性中的作用及意义.方法 选用30只正常大鼠,随机分成五组,每组6只:第一组为预实验组,未给予任何处理,采用逆转录PCR技术检测大鼠耳蜗中KCC1～4mRNA表达情况;第二、三、四、五组分别为对照组(不用药)、慢性组(肌肉注射水杨酸钠175 mg/kg,2次/天,连用14天后处死观察)、急性组(一次肌肉注射水杨酸钠400 mg/kg后处死观察)、恢复组(水杨酸钠用量及用法同慢性组,停药14天后处死观察),运用荧光定量PCR技术比较各组大鼠耳蜗内KCC1～4mRNA表达情况. 结果 KCC1～4mRNA在正常成年大鼠耳蜗中均有表达;在对照组及水杨酸钠作用后大鼠耳蜗KCC1～4mRNA表达均有变化,急性组KCC1mRNA、慢性组和恢复组KCC2mRNA、恢复组KCC4mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),急性组KCC2mRNA、急性组、慢性组和恢复组KCC3mRNA以及急性组、慢性组KCC4mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 KCC1～4mRNA在正常大鼠耳蜗中均有表达,提示其可能共同参与耳蜗内淋巴液Cl-浓度的维持;在水杨酸钠作用后KCC1～4mRNA表达的不同变化,破坏了耳蜗内淋巴液Cl-浓度平衡,影响外毛细胞能动性.     

DPOAE监测一次性大剂量顺铂致豚鼠耳毒性的实验研究

目的观察一次性大剂量顺铂注射后豚鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和内耳形态学的依时性改变,探讨应用耳声发射监测顺铂耳毒性的最佳时机。方法将豚鼠随机分为对照组(A组)及实验组(B、C、D组),每组6只,A组皮下注射生理盐水,B、C、D各组一次性皮下注射顺铂(10mg/kg),分别于给药前及给药后第3(B组)、5(C组)、10(D组)天检测DPOAE,比较给药前、后DPOAE的幅值的变化,并行耳蜗铺片,观察毛细胞缺失率及耳蜗形态学的改变。结果给药后第3天,DPOAE的幅值仅8kHz处有明显改变(P<0.05);给药后第5、10天DPOAE幅值明显降低(P<0.01)。给药后第3、5、10天,耳蜗外毛细胞缺失率分别为4.34%±3.20%、16.14%±9.15%、18.25%±9.04%。在第5、10天后尚可见血管纹充血以及螺旋神经节细胞肿胀缺失。结论顺铂的耳毒性主要作用于耳蜗底回、中回的外毛细胞,用药后第3~5天应用畸变产物耳声发射检查能早期发现其耳毒性损伤。     

丹参对庆大霉素耳毒性的减毒作用

目的　为探讨丹参对庆大霉素耳毒性的减毒作用。方法　将 2 4只沙鼠分为 4组 ,每组 6只 ,①生理盐水对照组。②丹参组 (SA)。③庆大霉素加丹参组 (GM SA)。④庆大霉素组 (GM)。所有药物均经肌肉注射 ,GM组和GM SA组每天注射庆大霉素 15 0mg/kg ,共 10d ;GM SA组和SA组同时注射丹参 2 g/kg ,共 10d ;生理盐水组每天注射生理盐水 2ml/kg ,共 10d。在注射前和注射后 4周和 8周进行CAP检测 ,第 8周听力测定后处死动物行扫描电镜检查。结果　 4周和 8周GM组高频CAP阈明显上升 ,而GM SA组听阈明显低 ,统计学处理有显著差异 (P <0 .0 1,t检验 ) ;GM组毛细胞损伤率底圈和第二圈分别为 35 %和 30 % ,GM SA组分别为 9%和 7% ,差异非常显著 (P <0 .0 1,χ2 检验 )。结论　丹参能明显降低庆大霉素对沙鼠的耳毒性作用 ,且不降低血液中庆大霉素的浓度。电生理检测结果与形态学变化一致。     

神经生长因子减轻噪声性阈移的透射电镜观察

目的　探讨神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)对豚鼠噪声性听力损伤的防治作用。方法　豚鼠每天暴露 115dB(A)白噪声连续 6d (45min/d) ,在暴露全部结束后不同时间 (1h、1d、2d、3d和 6d)分别测试皮层反应阈 ,并用透射电镜观察耳蜗螺旋器细胞内变化。结果　A(每日肌内注射NGF 10 0 0U/kg体重 )、B(每日肌内注射NGF 2 0 0 0U /kg体重 )和C(每日肌内注射NGF 30 0 0U/kg体重 ) 3个实验组动物听反应阈偏移幅度均小于生理盐水对照组 (每日肌内注射 1ml/kg体重 ) ,差异有非常显著性意义 (方差分析 ,P值均 <0 0 1) ;实验B、C两组动物在噪声暴露后 3d听反应阈已基本恢复 ,而对照组动物在噪声暴露后 6d仍有 (16 43± 6 91)dB( x±s)的阈移。透射电镜观察显示 ,对照组耳蜗病变在 3排外毛细胞 ,以底回末段损伤最重 ,主要有纤毛内微丝解聚、线粒体肿大和毛细胞轻度水肿 ;外毛细胞表面下池和传出神经末梢也有轻度肿胀的表现。实验A组耳蜗病变程度比对照组轻 ,多局限在第 3排外毛细胞。而实验B、C两组动物内耳损伤甚微。结论　在慢性声损伤中 ,外源性NGF能够减轻噪声对耳蜗毛细胞的损害 ,对噪声性听力损伤具有较明显的保护作用。     

水杨酸对耳蜗生理功能的影响

水杨酸类制剂有水杨酸钠、乙酸水杨酸（阿司匹林）和苯基水杨酸等，均具有解热、镇痛、抗风湿、抗炎及抗血栓等作用，一直是临床和家庭的常用药。随着水杨酸制剂的广泛应用，其耳毒性也渐渐受到关注。早在1881年Kirchner就发现耳蜗和迷路内出血，1903年Wittmaack发现螺旋神经节内Nissel小体的出现，1983年Deuek等报道毛细胞（haircell，HC）内平滑内质网的空泡形成等。此后的临床资料表明，水杨酸可引起可逆性的耳鸣和听力减退。从60年代中期开始就其耳毒性作用机理和部位作了大量的研究，研究对象也从一般的临床观察到动物实验[1]。1水…     

水杨酸钠急性注射对清醒豚鼠畸变产物耳声发射的影响

目的研究急性注射水杨酸钠对清醒豚鼠畸变产物耳声发射（DPOAE）的影响及其特征，探讨其对外毛细胞（OHC）的毒性作用。方法采用CELESTA 503型耳声发射分析仪在清醒豚鼠上记录DPOAE（包括DP听力图及DP输入／输出函数曲线）来监测水杨酸钠对耳蜗及毛细胞功能的影响；急性水杨酸钠实验组及生理盐水对照组分别在注药前及注药后2、4、8h进行DPOAE测试；测试结果采用SPSS10．0统计软件进行分析。结果急性水杨酸钠注射主要引起DPOAE幅值和I／O斜率分别可逆性下降和升高，注射后2h变化最大，8h基本恢复；某些频率或强度的DPOAE幅值、I／O斜率在注药后与注药前结果有统计学差异（P〈0．01或P〈0．05），特别是8kHz。结论DPOAE幅值和I／O斜率分别叮逆性下降和升高表明OHC能动性下降，即耳蜗OHC功能改变为其耳毒性作用之一。     

长期注射水杨酸钠对大鼠下丘GAD67和GABAAα1、c-fos表达的影响

目的 通过观察长期注射水杨酸钠对大鼠听性脑干反应(ABR)及下丘GAD67和GABAAα1、c-fos表达的影响,探讨大鼠下丘GAD67、GABAAα1、c-fos表达的改变在水杨酸钠耳毒性中的可能机制。 方法 将24只成年健康Wistar大鼠随机分为2组:水杨酸钠组(肌肉注射10%水杨酸钠175 mg/kg,2次/d,连续28 d)、对照组(每天相同时间注射等量生理盐水,连续28 d)。两组大鼠在处死前进行ABR检测并观察ABR反应阈及波Ⅲ潜伏期的变化,然后将大鼠断头处死并迅速剥离下丘,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)、蛋白质印迹(Western blot)方法检测下丘GAD67、GABAAα1、c-fos mRNA及蛋白表达的变化。 结果 ①药物注射28 d后,水杨酸钠组较注射前以及对照组ABR反应阈明显升高,波Ⅲ潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P<0.01);②水杨酸钠组GAD67、GABAAα1、c-fos mRNA及其蛋白表达水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 GAD67、GABAAα1、c-fos均不同程度参与了水杨酸钠耳毒性的发生发展过程, c-fos表达的上调则可能与水杨酸钠作用于机体后引起听觉中枢神经活动增强有关。     

应用行为学模型研究水杨酸致大鼠耳鸣的主要产生部位

目的通过建立跳台反射法耳鸣动物行为学模型,探讨水杨酸致大鼠耳鸣的主要产生部位。方法 40只健康Wistar大鼠,随机分为实验组和对照组,每组20只。两组动物分别建立跳台反射行为学模型后,实验组经腹腔注射水杨酸钠完成耳鸣动物造模,对照组腹腔注射等量生理盐水;造模成功的实验组动物行双侧听神经切断术后,再次腹腔注射水杨酸钠,通过动物跳台反射行为测试再次判断实验组动物是否仍有耳鸣产生;对照组动物不行双侧听神经切断术,其余实验步骤同实验组;比较两组动物平均每10次刺激间隔期出现假阳性反应的次数。结果与对照组相比,实验组动物双侧听神经切断、注射水杨酸钠2小时后,在无声音刺激条件下单位时间内出现跳台动作频数明显减少,平均每10次刺激间隔期出现的假阳性反应为1.59±0.12次,与对照组(2.69±0.78次)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论双侧听神经切断术后水杨酸钠注射不能使大鼠产生耳鸣,说明听觉外周是水杨酸导致大鼠产生耳鸣的关键部位。     

α—硫辛酸对庆大霉素所致大鼠耳毒性损害的保护作用

目的 探讨高效抗氧剂α-硫辛酸是否对庆大霉素所致的大鼠耳蜗毒性有防护作用.方法 将30只Wistar大鼠随机分成庆大霉素(GM)组、α-硫辛酸(α-LA)+庆大霉素(GM)组及正常对照组,GM组每日腹腔注射GM100mg/kg;GM+α-LA组每日同时腹腔注射GM100mg/kg和α-LA注射液10mg/kg;正常对照组每日腹腔注射生理盐水100mg/kg.3组皆连续用药10d,用药前后测试DPOAE.最后将动物处死,取听泡,观察毛细胞形态.实验数据进行统计学分析.结果 DPOAE停药后,GM+α-LA组DPOAE幅值有轻度降低;GM组DPOAE幅值明显降低; 2组用药前后比较有显著性差异(P<0.01).GM+α-LA组大鼠听功能受损程度明显轻于GM组.正常对照组大鼠用药前后DPOAE幅值及形态学无明显变化.形态学观察:给药后GM组耳蜗底回外毛细胞均有较重损伤,前庭毛细胞空泡样改变,纤毛倒伏缺失明显.GM+α-LA组耳蜗底回外毛细胞损伤明显减轻,前庭毛细胞散在缺失.正常对照组耳蜗底回外毛细胞和前庭毛细胞基本正常.结论 在使用GM的同时联合应用α-LA可有效减少GM对大鼠的内耳毒性.     

水杨酸钠对豚鼠耳蜗单离外毛细胞游离钙浓度影响及其调控机制研究

目的　观察水杨酸钠对豚鼠耳蜗外毛细胞 (outerhaircells,OHC)内游离钙浓度 [Ca2 ]i的影响 ,并对钙通道调控药物的拮抗作用进行观察 ,以深入探讨水杨酸钠耳毒性的分子生物学机制。方法　豚鼠全身麻醉后断头活杀 ,酶 机械法分离获得耳蜗单离OHC。 10 μmol/L的Fluo 3/AM负载30min后用ACASUltima型激光扫描共聚焦显微镜观察不同药物灌流下OHC[Ca2 ]i的变化。结果　OHC在标准细胞外液灌流过程中 [Ca2 ]i保持稳定。 1mmol/L水杨酸钠灌流致 8/ 10个细胞的 [Ca2 ]i明显升高。无钙细胞外液中灌流亦有 10 / 10个细胞 [Ca2 ]i明显的升高。经 3mmol/L利多卡因作用1h后 ,水杨酸钠灌流不能使细胞 [Ca2 ]i升高 (n =10 )。盐酸氟桂嗪可以明显阻断水杨酸钠导致的OHC[Ca2 ]i升高效应 (3/ 12细胞的 [Ca2 ]i升高 ) ,而尼莫地平无此效应 (7/ 7细胞的 [Ca2 ]i升高 )。结论　水杨酸钠可以导致OHC[Ca2 ]i明显增加 ,OHC[Ca2 ]i升高来源于细胞内钙库的动员和释放。使细胞内 [Ca2 ]i升高可能是水杨酸钠的耳毒性机制之一。     

铅暴露对豚鼠耳蜗毛细胞损害的定量分析

目的研究铅暴露浓度与豚鼠耳蜗毛细胞形态学改变和对听觉系统损害程度的量化关系。方法50只豚鼠分为对照组和实验组。对照组(10只)豚鼠腹腔注射生理盐水1ml,隔日一次。实验组分为两组:高铅组(20只):豚鼠腹腔注射0.25%醋酸铅溶液40mg/kg;低铅组(20只):豚鼠腹腔注射0.25%醋酸铅溶液20mg/kg,分别于停药后7、14、28天采血。断头后行全耳蜗铺片的光学和电镜检查。结果腹腔注射醋酸铅后,血清中铅含量迅速升高。低铅组铅暴露1周后出现外毛细胞损害;高铅组铅暴露2周后外毛细胞损害程度较重,出现细胞变性、减少、结构不清,电镜观察可见毛细胞缺失明显;高铅暴露4周后毛细胞损害呈进行性加重。结论铅暴露对豚鼠耳蜗毛细胞损害明显,表现为纤毛的散乱、倒伏、部分脱落、大片缺失等,其损害程度与铅暴露浓度呈正相关性。