大肠腺瘤及腺癌细胞凋亡与p53和bcl-2的表达

目的探讨大肠粘膜癌变中细胞增殖和凋亡的特征以及凋亡相关调控基因的表达。方法对60例大肠腺瘤．癌用原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测PCNA增殖指数（proliferative index,PI）及bcl-2和p53蛋白的表达。另选大肠高分化腺癌和正常粘膜20例作为对照检测。结果①正常粘膜、腺瘤和腺癌的p53蛋白表达率为5％、33．3％和70％。三组间有显著的差异（P均〈0．05）。②正常粘膜、腺瘤和腺癌的bcl-2蛋白表达率分别为15％、70％和65％．腺瘤和腺癌组均高于正常对照组（P均〈0．01）,腺瘤与腺癌组间差异不显著（P均〉0．05）。③大肠腺瘤和腺癌细胞的凋亡指数（AI）均高于正常粘膜（P均〈0．01）,bcl-2和p53蛋白的表达率与细胞AI呈显著负相关（rs=-0．66,rs=-0．62）。结论凋亡和增殖在肿瘤的发生、发展、转化中起着重要作用,上述指标的联合检测可以作为临床早期判断人肠腺瘤癌变的重要参考指标。     

SeO2诱导白血病细胞凋亡及对凋亡相关基因Bcl-2和p53表达调控的影响

目的：研究SeO2对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、红白血病细胞K562、急性粒细胞白血病细胞株HL-60的增生、凋亡及Bcl-2和p53表达水平的影响。方法:采用流式细胞术测定细胞的凋亡率及Bcl-2和p53的表达。结果:10和30mmol／L SeO2能抑制3种细胞增生。30mmol／L SeO2作用48h能使54．0％的NB4细胞、46．5％的K562细胞和49．6％的HL-60细胞发生凋亡；能使NB4和K562细胞Bcl-2表达显著下降、促进p53的表达。结论:SeO2对3种白血病细胞均有诱导凋亡作用，在凋亡过程中涉及了细胞内凋亡相关基因Bcl-2和p53表达和调控。     

骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞凋亡的调节

目的研究骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞调亡的调节。方法利用原位脱氧核糖核酸末端转移酶(In situ terminal deoxynucleotide transferase;ISTdT)标记技术和SP免疫组织化学方法分别检测骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中凋亡细胞和p53蛋白的表达。结果骨肉瘤中p53蛋白的阳性率(76.9%,50/65)和阳性表达强度明显高于良性骨肿瘤组织(21.1%,4/19)(分别为P＜0.01和P＜0.05),但4种亚型之间差异无显著性(P＞0.05)。骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织(P＜0.01),但各亚型之间两者亦均无明显差异(P＞0.05);骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中p53蛋白表达与凋亡细胞密度呈明显的线性负相关(r=-0.8954,P＜0.01),其表达增强则凋亡细胞密度逐渐降低。结论在骨肉瘤发生中p53基因突变可能是一种频发事件。突变型p53基因可能是通过其蛋白过度表达抑制肿瘤细胞凋亡,导致骨肉瘤的发生和发展。     

bcl-2,bax和p53在小细胞肺癌中的表达及对细胞凋亡的影响

目的探讨p53基因在小细胞肺癌组织中的表达及其与bcl-2,bax蛋白表达的相互关系及临床意义。方法选择华东医院病历资料完整的小细胞肺癌的患者50例,正常肺组织16例,用免疫组化SP法检测bcl-2,bax及p53蛋白的表达。结果 p53的表达与bcl-2的表达呈正相关(r=0.213,P<0.05)。p53阳性表达与bax表达无显著相关性(P>0.05)。p53阳性表达在高分化肺癌组织阳性率为17.6%,中分化组织为90.9%,低分化组织为72.7%,三者差异显著(P<0.05)。p53阳性表达在TNM分期中,Ⅰ期、Ⅱ期阳性率27.3%明显低于Ⅲ期、Ⅳ期阳性率89.3%(P<0.05)。结论p53基因的阳性表达对小细胞肺癌的恶性程度和不良预后有明显的临床意义,p53基因与bcl-2通过作用于细胞凋亡的不同阶段,或是bcl-2参与到p53诱导的线粒体介导的细胞凋亡信号通路上,从而在促进肺癌的发生、发展中共同促进,协同作用。     

凋亡抑制蛋白Survivin在脑星形细胞肿瘤中的表达及与p53、bcl-2的相关性研究

目的 :探讨凋亡抑制蛋白 Survivin在人脑星形细胞肿瘤中的表达及其与 p5 3和 bcl- 2蛋白表达的相关性。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 Survivin、p5 3、bcl- 2在 4 5例人脑星形细胞肿瘤中的表达。结果 :4 5例脑星形细胞肿瘤标本中 33例表达 Survivin蛋白 ,阳性率为 73.3% ,并随星形细胞肿瘤的恶性程度而增高 (P<0 .0 5 ) ;其中星形细胞瘤阳性率为 36 .4 % ,间变性星形细胞瘤为 81.2 % ,胶质母细胞瘤为 88.9%。而 p5 3蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 5 8.3% (14 /2 4 )、90 .5 % (19/2 1)。两者比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;bcl- 2蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 76 .5 % (13/17)、71.4 % (2 0 /2 8)。两者比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。Survivin蛋白表达阳性率与脑星形细胞肿瘤中 p5 3蛋白表达密切相关 ,与 bcl- 2蛋白表达无相关性。结论 :(1) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞肿瘤的组织学分级相关 ,提示 Survivin蛋白表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关。 (2 ) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞瘤中 p5 3蛋白异常表达密切相关。     

SeO2诱导白血病细胞凋亡及对凋亡相关基因Bcl-2和p53表达调控的影响

目的 研究SeO₂对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4、红白血病细胞K562、急性粒细胞白血病细胞株HL-60的增生、凋亡及Bcl-2和p53表达水平的影响。方法 采用流式细胞术测定细胞的凋亡率及Bcl-2和p53的表达。结果 10和30mmol/LSeO2能抑制3种细胞增生。30mmol/LSeO₂作用48h能使54.0%的NB4细胞、46.5%的K562细胞和49.6%的HL-60细胞发生凋亡;能使NB4和K562细胞Bcl-2表达显著下降、促进p53的表达。结论 SeO₂对3种白血病细胞均有诱导凋亡作用,在凋亡过程中涉及了细胞内凋亡相关基因Bcl-2和p53表达和调控。     

皮肤鳞状细胞癌中p53、bcl-2和c-myc的表达及意义

目的 研究p53、bcl—2和c—myc在皮肤鳞状细胞癌中的异常表达及其与癌分化程度的关系。方法 应用免疫组织化学S-P法检测58例皮肤鳞状细胞癌中p53、bcl—2和c—myc的表达水平。结果 58例皮肤鳞状细胞癌中p53、bcl-2和c—myc的阳性表达率分别为48．3％、67．2％和32．8％。结论 p53、bcl—2和c—myc异常表达在皮肤鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用，并与皮肤癌的恶性程度有关。     

肾细胞癌中p53蛋白的表达

目的 :探讨肾癌 (RCC ,renalcellcarcinoma)组织中p5 3蛋白的表达及其与RCC生物学行为的关系。方法 :应用单克隆鼠抗 -p5 3抗体通过免疫组化SP法研究RCC中p5 3蛋白的表达。结果 :60例RCC组织中 2 9例 (4 8.3 % ) p5 3蛋白阳性。p5 3蛋白表达与组织学分级 (P <0 .0 5 )和TNM分期 (P <0 .0 5 )均明显相关。结论 :p5 3蛋白表达与RCC的发生发展密切相关 ,p5 3蛋白表达可认为是低分化、高浸润性RCC的有用标记。     

胃癌细胞凋亡、增殖和p53蛋白表达的研究

目的　研究胃癌细胞凋亡和细胞增殖状态的变化以及p5 3基因蛋白表达 ,探讨其在胃癌恶性转化进程中的作用。方法　采用脱氧核糖核酸转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术和免疫组织化学S -P法分别检测 5 8例胃癌及癌旁粘膜组织凋亡和增殖状态及 p5 3基因的表达。结果　胃癌组织细胞凋亡指数显著低于癌旁对照组织 (2 .8± 0 .8、6 .9± 0 .3,P <0 .0 1) ;前者细胞增殖指数明显高于后者 (6 5± 16 .2、11± 1.0 1、P<0 .0 1) ,且凋亡 /增殖比率呈递减趋势 (0 .0 5±0 .0 1、0 .6 4± 0 .0 3,P <0 .0 1)。胃癌p5 3基因突变阳性组与阴性组的凋亡指数AI分别为 1.6 1± 0 .4和4 .15± 0 .7;PI分别为 72± 6 .5、5 4± 8.1,差异均有显著性 (P<0 .0 1)。结论　在胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制 ,细胞凋亡、增殖状态和 p5 3基因表达的改变是胃癌发生的重要因素之一。     

胃癌组织p53、p73蛋白及细胞凋亡的研究

目的 探讨p53、p73蛋白及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制.方法 选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的p53、p73蛋白表达,同时用TUNEL方法检测组织中的凋亡细胞.结果 胃癌组织p53、p73表达率显著高于胃癌旁组织;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌;有淋巴转移显著高于无转移组;p53、p73高表达的癌组织,细胞凋亡减少,早期胃癌凋亡低于晚期胃癌.结论 胃癌组织p53、p73蛋白高表达,可延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌细胞发生发展的基础.     

非霍奇金淋巴瘤预后相关因素研究

目的探讨非霍奇金淋巴瘤(NHL)的中bcl-2、CD44、p53的表达对患者预后的影响。方法用免疫组化方法检测96例NHL石蜡切中bcl-2、CD44、p53的表达,分析其表达水平对患者生存率和临床特征的影响。结果全组患者4年生存率(4yOS)40.73%,中位生存期(mST)40.0个月。惰性NHL、侵袭性NHL4yOS分别为58.46%、35.49%,获CR、PR者4yOS分别为48.4%、42.6%,治疗无效者4yOS为14.1%。B-NHL和T-NHL4yOS分别为57.12%、7.01%,bcl-2阴性组和阳性组4yOS分别为48.04%、20.88%;p53阴性组4yOS明显高于p53阳性组,分别为48.22%、21.60%;CD44阴性4yOS明显高于CD44阳性组,P均<0.05。T/B细胞表型、bcl-2和p53是独立影响因素。p53和bcl-2阳性表达者治疗缓解率低,CD44与肿瘤分期和结外侵犯相关。结论T细胞型、bcl-2、CD44、p53蛋白的高表达对患者生存有显著的不良影响,T/B细胞表型、p53、bcl-2作为独立的预后分子标志,是IPI的必要补充。     

癌基因及细胞凋亡与涎腺肿瘤的相关性研究

目的探讨涎腺肿瘤与c-myc,p53,bcl-2;PCNA基因及细胞凋亡的关系.方法采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)技术,免疫组织化学染色和HE染色对18例多形性腺瘤和52例恶性涎腺肿瘤中c-myc,p53,bcl-2,PCNA基因及细胞凋亡进行观察,分析c-myc,p53,bcl-2,PCNA基因及细胞凋亡与涎腺肿瘤的相关性.结果p53与bcl-2基因呈正相关(P＜0.05),c-myc与p53,bcl-2,PCNA基因呈正相关(P＜0.05),PCNA基因与细胞凋亡呈正相关(P＜0.05),而细胞凋亡与c-myc,p53,bcl-2基因间无相关性(P＞0.05).Fisher判别分析结果表明,用c-myc,p53,bcl-2,PCNA基因及细胞凋亡对涎腺肿瘤进行判别,判别符合率为84.3%.结论涎腺肿瘤是多种癌基因共同作用的结果,也进一步证实涎腺肿瘤中存在细胞增殖及细胞凋亡的紊乱;c-myc,p53,bcl-2,PCNA基因及细胞凋亡可作为良恶性涎腺肿瘤的诊断指标.     

miR-143-5p对镉致肾细胞凋亡的调控作用及其机制

目的:探讨miR-143-5p对镉诱导LLC-PK1细胞凋亡的调控作用及其机制?方法:通过基因芯片技术筛选出由镉引起的差异表达miRNAs,并用实时定量PCR方法验证基因芯片结果的可靠性;应用Lipofectamine 2000瞬时转染miR-143-5p的模拟物和抑制剂建立miR-143-5p高表达和低表达的模型,并结合qRT-PCR技术验证转染效果;Hoechst 33258染色和Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡;生物信息学分析结合实时定量PCR和Western blot验证miR-143-5p靶基因的表达;Western blot分析miR-143-5p对细胞凋亡相关通路的调控作用?结果:镉可增强LLC-PK1细胞的miR-143-5p表达水平(P < 0.01);转染miR-143-5p模拟物或抑制剂后,与对照组(miR-NC)比较,miR-143-5p表达明显上调或下调(P < 0.01);miR-143-5p的过表达可促进 LLC-PK1细胞凋亡 (P < 0.01);miR-143-5p在AKT3的mRNA和蛋白水平上发挥靶向调控作用;miR-143-5p过表达能抑制p-Akt和p-Bad蛋白表达,促进caspase-9和caspase-3蛋白上调?结论:miR-143-5p可能通过作用于靶基因AKT3,并抑制Akt/Bad信号通路,促进镉诱导LLC-PK1细胞的凋亡?     

p53和bcl-2在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 检测p53和bcl-2蛋白在胰腺癌及其它胰腺疾病组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 应用链霉菌抗生物素过氧化酶免疫组化法对32例原发性胰腺导管腺癌、12例胰腺癌手术切缘经病理证实的正常胰腺组织、10例良性疾病组织进行p53和bcl-2蛋白检测.结果 p53蛋白阳性表达仅见于原发性胰腺导管腺癌,阳性率为43.8%,p53蛋白表达与原发性胰腺导管腺癌临床病理特征无关;bcl-2蛋白在原发性胰腺导管腺癌、正常胰腺组织和良性疾病组织中均表达,阳性率分别为46.9%、25.0%和20.0%,在胰腺癌中表达率较高,但无统计学意义;bcl-2蛋白表达在组织学高、中分化和临床Ⅰ～Ⅱ期显著高于组织学低分化和临床Ⅲ～Ⅳ期(P＜0.05).结论 p53和bcl-2蛋白在胰腺癌的发生中起着重要的作用;bcl-2蛋白的表达能反映胰腺癌的生物学行为.     

生长抑素与大肠癌细胞凋亡及调控基因bcl-2、bax及p53关系的研究

目的　探讨生长抑素 (SS)与大肠癌细胞凋亡指数 (AI)和凋亡调控基因p5 3、bcl 2、bax的关系。方法　采用免疫组织化学SABC法和分子生物学细胞原位凋亡检测技术中的TUNEL法 ,检测 6 2例大肠癌组织中SS、p5 3、bcl 2、bax及细胞凋亡的表达情况。结果　在大肠癌组织SS高表达组、中表达组的AI明显高于SS低表达组 (P <0 .0 1) ;p5 3、bcl 2、bax阳性表达率在SS低表达组、中表达组、高表达组三组间相比较存在着明显差别 (P <0 .0 5 ) ,其中bax在SS高表达组、中表达组的阳性表达率明显高于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;bcl 2与其相反。p5 3在SS高表达组的阳性表达率明显低于低表达组 (P <0 .0 5 ) ;而p5 3在SS中表达组表达的阳性表达率低于低表达组 ,但其统计无明显差别 (P >0 .0 5 )。结论　生长抑素对大肠癌细胞凋亡的调控可能与 p5 3、bcl 2、bax基因的异常表达有关     

Clusterin、bcl-2及p53在前列腺上皮组织中的表达及相关性研究

目的通过检测新的凋亡抑制因子Clusterin在前列腺癌组织中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系及其与bcl-2和p53表达的关系.方法采用免疫组织化学染色法检测Clusterin、bcl-2、p53在10例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织(BPH)、49例前列腺癌组织标本中的表达.结果Clusterin在前列腺正常、增生、癌组织中的阳性及弱阳性表达率分别为10%(1/10)、66.6%(10/15)、91.8%(45/49).前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常组织(P＜0.005)及增生组织(P＜0.005),且在癌组织中与肿瘤临床分期(P＜0.001)、病理分级(P＜0.001)呈正相关.前列腺癌Clusterin表达与bcl-2(P＜0.05)及p53(P＜0.001)表达呈正相关关系.结论Clusterin基因可能通过抑制凋亡在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用,且其表达与bcl-2、p53的异常表达密切相关.     

垂体腺瘤中凋亡抑制基因survivin的表达和bcl-2、p53相关性的研究

目的 :通过检测垂体腺瘤中的凋亡细胞 ,研究新的凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤组织中的表达及其与bcl- 2和 p5 3基因表达的相关性 ,探讨垂体腺瘤的发生与细胞凋亡的关系 ,以及survivin、bcl- 2、p5 3基因在垂体腺瘤AP发生中的调控作用。方法 :应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术 (TUNEL)和免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 -过氧化酶连接法 (SP法 )检测 8例正常垂体组织和 4 8例不同分化程度的垂体腺瘤组织的细胞调亡和survivin、bcl- 2、p5 3基因的表达。统计学分析采用SPSS10 .0软件系统进行处理 ,检验水准取α=0 .0 5。结果 :本组 4 8例垂体腺瘤标本中 ,4 3例有不同程度的凋亡发生 ,凋亡细胞发生率为 89.6 % (4 3/ 4 8)。在非侵袭性垂体腺瘤组织中细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)平均为 12 .6 % ,在侵袭性垂体腺瘤组织中AI为2 .7% ,两者相比差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。survivin基因在正常垂体组织中不表达 ;4 8例垂体腺瘤组织中 ,32例表达阳性 ,占 6 6 .7% ;其中侵袭性垂体腺瘤survivin基因的阳性表达率为 81.5 % (2 2 / 2 7) ,非侵袭性垂体腺瘤为 4 7.6 % (10 / 2 1) ,两者相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。分泌型 (功能性 )垂体腺瘤中survivin基因表达阳性率为     

The Relationship of Expression of bcl-2, p53, and Proliferating Cell Nuclear Antigen （PCNA） to Cell Proliferation and Apoptosis in Renal Cell Carcinoma

To investigate the relationship of bcl-2, p53, proliferating cell nuclear antigen (PCNA) to cell proliferation, apoptosis and pathological parameters, the patterns of cell growth and turnover in renal cell carcinoma (RCC), formalin-fixed and paraffin-embedded tissue blocks from 34 patients with RCC were examined. Cell proliferation activity was detected by PCNA immunostaining and the proliferation index (PI) was expressed as a percentage of the PCNA-positive cells in the tumor cells. Apoptosis was detected by terminal deoxy- nucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL), and the apoptotic index (AI) was expressed as a percentage of the TUNEL-positive cells in the tumor cells. Expressions of bcl-2 and pS3 were assessed immunohistochemically. Our results showed that the PI ranged from 6.0 % to 24.0 % (median 12.3 %) and the AI from 2.0 % to 8.0 % (median 5.4 ~) in RCC. The expression of the bcl-2 protein was demonstrated in 15 cases (44. 1%); the expression of the p53 protein, however, was seen in only 3 case. bcl-2 positivity was not associated with PI or AI or any pathological parameters. There were close associations between PI and tumor grade and stage, and a significant relationship between AI and the tumor grade of RCC. Our study suggests that bcl-2 positivity was not associated with PI or AI or any pathological parameters. There are close associations between PI and AI and tumor grade and stage of RCC. Active cell proliferation may be accompanied by frequent apoptosis in RCC.     

缺血再灌注诱导交界区心肌细胞凋亡与Caspase-3的活化及p53、bcl-2基因表达的关系

目的探讨缺血再灌注(IR)损伤诱导交界区心肌细胞凋亡与Caspase-3的活化及p53、bcl-2基因动态表达的关系。方法建立家兔心肌IR模型,采用半定量RT-PCR技术,原位杂交技术,免疫组化技术等,观察缺血交界区Caspase-3mRNA变化规律,及p53、bcl-2、mRNA动态表达与细胞凋亡的关系。结果(1)IR损伤激发了Caspase-3的活化,交界区Caspase-3mRNA与心肌细胞凋亡在IR损伤8h后开始升高,12h达高峰,二者之间存在着明显的正相关性(r=0.9286,P<0.001)。(2)p53mRNA于IR8h开始升高。bcl-2mRNA在IR8h时开始激活,并持续维持低水平状态。p53mRNA和bcl-2mRNA二者的表达之间存在着明显的负相关性(r=-0.9648,P<0.001)。结论Caspase-3b、cl-2、p53三者之间形成一种网络调控构象,负责凋亡的促进和凋亡的抑制,共同调控着心肌细胞凋亡的发生发展。     

胃肠道间质瘤中bcl-2、p53表达及其意义

目的:探讨bcl-2、p53的表达水平及其与胃肠道间质瘤(gastrointestinal strornal tumor,GIST)的关系。方法:采用免疫组化检测53例GIST组织中bcl-2和p53的表达,并进行统计学分析。结果:性别与bcl-2、p53表达率差异无统计学意义(P>0.05);与GIST的瘤体直径、核分裂象差异亦均无统计意义(P>0.05);GIST的恶性程度与p53表达率差异无统计学意义(P>0.05),GIST的恶性程度与bcl-2的表达阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。GIST恶性程度间与bcl-2表达程度差异有统计学意义(P<0.01);GIST恶性程度间与p53表达程度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:随着GIST恶性潜能的增加,胃肠肿瘤bcl-2过表达可以作为判别GIST恶性程度的参考指标。p53与GIST的形成、发生与发展无关,且其表达率相对较低,特异性不强,作为判断GIST恶性程度的参考价值不大。