自然流产患者绒毛滋养层细胞PCNA和caspase-3的表达

目的从细胞增殖与细胞凋亡的角度探讨自然流产的发生机制。方法取正常早孕流产和自然流产病例各20例的绒毛组织,光镜观察绒毛形态学变化;免疫组织化学SP法检测增殖细胞核抗原(PCNA)及凋亡蛋白酶caspase-3在滋养层细胞中的表达。结果自然流产绒毛组织均出现不同程度的退行性改变,细胞滋养层的增殖指数较对照组降低,而细胞滋养层、合体滋养层的凋亡指数却明显升高。结论凋亡蛋白酶caspase-3可能参与自然流产的发生机制。     

CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达

目的研究CXCR2在不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学染色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者（病例组）和正常人工流产者（对照组）绒毛及蜕膜组织中的表达情况;HE染色后光镜下观察不明原因自然流产患者绒毛与蜕膜组织的形态学变化。结果免疫组化染色结果显示：两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层、蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均强于对照组,两组比较,有显著性差异（P〈0.01）。病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性;HE染色可见不明原因自然流产患者绒毛组织的滋养层变薄、滋养层细胞变性甚至坏死、滋养层嗜酸性增强、绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞连接松散、蜕膜细胞空泡化、蜕膜组织中有大量炎细胞浸润。结论 CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程。     

早期自然流产患者母胎界面E-钙黏素与β-连环素的异常表达

目的探讨早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织E-钙黏素（E—cadherin）与β-连环素（β-catenin）的异常表达。方法采用免疫组化sP法和显微图像分析系统，检测20例早期自然流产（自然流产组）及24例正常早期人工流产（正常妊娠组）绒毛和蜕膜组织内E—cadherin、β-catenin表达的平均光度及积分光度。结果E—cadherin、β-catenin．在自然流产组和正常妊娠组绒毛与蜕膜组织中均有表达。自然流产组绒毛细胞滋养细胞和蜕膜细胞表面E—cadherin、β-catenin表达平均光度及积分光度均明显高于正常妊娠组，P〈0．001，差异有统计学意义。结论E—cadherin及β-catenin对妊娠维持起一定的作用。蜕膜及绒毛组织E—cadherin与β-catenin的高表达可能是导致早期自然流产的原因之一。     

复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8的表达

目的:研究复发性自然流产患者绒毛及蜕膜组织中白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)的表达。方法:应用免疫组化法及图像分析技术,对30例复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-8的蛋白表达进行定位及半定量分析;H- E染色后光镜下观察绒毛及蜕膜组织的形态学变化。结果:在绒毛组织中,IL-8蛋白定位于绒毛上皮细胞的细胞质内,且病例组的表达明显高于对照组;在蜕膜组织中,病例组蜕膜细胞的胞质内可见IL-8蛋白表达,且高于对照组;H- E染色可见病例组绒毛组织的滋养层变薄,细胞变性甚至坏死、嗜酸性增强,绒毛中轴纤维化程度增强;蜕膜组织中蜕膜细胞失去细胞间连接,部分蜕膜细胞解体、核消失。结论:病例组绒毛及蜕膜组织中IL-8蛋白表达的增强与复发性自然流产有关,IL-8可能参与复发性自然流产的病理过程。     

体外受精-胚胎移植术后早期自然流产蜕膜组织中Livin的表达

目的研究体外受精-胚胎移植（IVF-ET）术后早期自然流产与正常妊娠人工流产蜕膜组织中细胞凋亡与凋亡抑制蛋白Livin的表达,分析并探讨细胞凋亡及Livin与IVF-ET术后自然流产的关系。方法对30例IVF-ET术后早期自然流产患者（研究组）和22例正常妊娠要求人工流产患者（对照组）的蜕膜组织进行研究。应用TdT介导的dUTP缺口原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡情况;应用免疫组化SP法检测Livin的表达。结果研究组蜕膜组织细胞凋亡指数（AI）（42.07±8.26%）明显高于对照组（17.86±7.40%）,差异有统计学意义（P〈0.05）;研究组蜕膜组织中Livin的表达（2.33±1.40分）明显低于对照组（5.64±1.94分）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 IVF-ET术后早期自然流产患者蜕膜组织中Livin蛋白表达下降导致细胞凋亡过度,可能在自然流产的发生发展中起重要作用。     

survivin和Ki-67在自然流产小鼠模型绒毛滋养细胞的表达与相关研究

目的 通过比较正常妊娠与自然流产小鼠模型绒毛滋养细胞中survivin和Ki-67表达,从细胞和分子水平探讨自然流产的发病机制,为临床防治自然流产提供依据.方法 建立正常妊娠小鼠模型CBA×Balb/c和自然流产小鼠模型CBA×DBA/2,采用免疫组化SP法测定两组模型孕13 d绒毛滋养细胞中survivin和Ki-67的表达.结果 与正常妊娠模型相比,自然流产模型绒毛滋养细胞中survivin和Ki-67的表达均显著降低(P<0.01).结论 早孕期绒毛滋养细胞增殖和凋亡失衡是导致自然流产的机制之一,绒毛滋养细胞中survivin和Ki-67表达低下可能是引起绒毛滋养细胞增殖和凋亡失衡的重要因素.     

Expression of CXCR2 in villous tissues and decidua tissues of patients with spontaneous abortion

目的:研究不明原因自然流产患者绒毛及蜕膜组织中CXCR2在mRNA水平和蛋白质水平的表达情况.方法:应用半定量RT-PCR、免疫组织化学显色和图像分析技术,观察CXCR2在不明原因自然流产患者(病例组)和正常人工流产者(对照组)绒毛及蜕膜组织中的表达情况.结果:CXCR2 mRNA在对照组和病例组的绒毛及蜕膜组织中均有表达,且2组CXCR2mRNA的表达并无差异；两组CXCR2蛋白主要表达于绒毛的滋养层,蜕膜组织中的腺体,病例组绒毛滋养层和腺体CXCR2蛋白表达均显著强于对照组.病例组蜕膜细胞CXCR2蛋白呈阳性表达,对照组呈阴性.结论:CXCR2可能通过与其配体白细胞介素-8结合而参与不明原因自然流产的病理过程.     

自然流产中的早孕期蜕膜细胞Bcl-2 /Bax 比例异常

探讨早孕期蜕膜细胞细胞凋亡异常与妊娠失败的关系。应用TUNEL法测定凋亡的发生及凋亡细胞的定位，免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达和相互关系。结果发现：（1）正常早孕40d蜕膜组织细胞大量凋亡，Bcl-2蛋白表达量较低，Bax蛋白有较强表达。（2）正常早孕50d，凋亡细胞明显减少，Bcl-2的表达显著增强，Bax蛋白表达减弱。（3）早孕50d自然流产组，蜕膜组织大量凋亡，与同时期正常蜕膜组织相比，P＜0．01。Bcl-2蛋白表达明显降低，Bax蛋白表达明显增强，Bcl-2/Bax比例降低。早孕期蜕膜组织凋亡异常可能是自然流产的机制之一，Bcl-2/Bax途径可能是诱导早孕期蜕膜细胞凋亡的重要因素。     

Fas、Survivin、PCNA、Ki-67在胎盘绒毛滋养细胞生存活性评价中的作用

近年来,随着胎盘免疫学、胎盘病理学的发展,人们逐渐认识到胎盘的免疫保护是妊娠得以建立和维持的机制之一,这种机制的形成是以胎盘滋养细胞的正常发育为基础[1]。正常早孕绒毛滋养细胞迅速增生,并分化为内外两层,其中内层的细胞滋养细胞分裂活跃,核内DNA合成旺盛[2]。与此同时,部分滋养细胞发生凋亡。增殖和凋亡活性的对比,决定了滋养细胞的生存活性。细胞增殖活性降低或细胞凋亡能力增强,可能导致自然流产;而细胞增殖活性增强或     

CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织的表达

目的:分析CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织中的表达水平,并探讨其生物学功能。方法:收集人早孕期正常和不明原因自然流产妇女的绒毛组织,采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting法检测CD147的表达,比较CD147在正常早孕与不明原因自然流产妇女绒毛组织的表达差异。体外分离纯化获得正常人早孕期滋养细胞,采用免疫细胞化学验证CD147在滋养细胞的表达,引入抗CD147中和性抗体处理人滋养细胞,采用Brd U增殖实验和Transwell侵袭实验分析滋养细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:正常早孕期绒毛组织和滋养细胞高表达CD147,不明原因自然流产绒毛组织CD147的mRNA和蛋白表达水平均低于正常早孕期绒毛组织。抗CD147中和性抗体处理原代人滋养细胞后,滋养细胞的增殖能力未发生明显变化,侵袭能力下降。结论:人绒毛组织CD147的异常低表达可能与不明原因早期妊娠失败相关,CD147通过调控滋养细胞的侵袭能力参与正常妊娠的维持。     

半乳糖凝集素-3在复发性流产子宫蜕膜及绒毛组织中的表达

目的检测复发性流产患者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3（galectin-3）表达，为进一步探讨不明原因复发性流产提供理论依据。方法对41D例不明原因复发性流产患者及32例正常妊娠行人工流产患者，采用RT—PCR、免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶链接法（sp法）检测其子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达。结果复发性流产者子宫蜕膜及绒毛半乳糖凝集素-3的表达明显低于正常妊娠组。结论半乳糖凝集素-3与妊娠早期绒毛及子宫蜕膜发育相关，其表达降低可能是导致复发性流产的原因之一。     

Morphological changes in the placenta and decidua after induction of abortion by extra-amniotic prostaglandin

Seventeen placentae from second trimester abortions induced by the injection of extra-amniotic prostaglandin have been examined. The extraplacental membranes, the chorionic plate of the placenta, the placental intervillous space and the placental villi were normal in all cases. In all but one specimen lesions were, however, noted in the decidua, these including focal decidual necrosis, intradecidual haemorrhage, thrombosis of maternal vessels and dilatation and congestion of the maternal vasculature. Similar decidual lesions were also seen in placentae from spontaneous and surgical second trimester abortions and it is concluded that prostaglandins do not produce any specific lesions in the placenta or decidua. It is suggested that the negative findings of this study indicate that prostaglandins do not induce abortion by either direct injury to the placenta or by provoking utero-placental ischaemia.     

Twin pregnancy with both complete hydatiform mole and coexistent alive fetus: report of a non-antenatal diagnosed case

Twin pregnancy with both complete hydatiform mole and coexistent fetus is a rare situation and a challenging diagnosis. We report an unusual case of twin pregnancy with complete mole diagnosed after pathological examination of the placenta. A 30-year-old woman, 14 weeks gestation, presented with vaginal bleeding. The abdominal ultrasound examination revealed an heterogeneous aspect of inferior placenta, which was interpreted as a hematoma, and, a multilacunar placental aspect with an oligoamnios respectively at initial follow-up and 22 weeks gestation. The karyotype from chorionic villi was normal (46 XY). At 25 weeks, after a spontaneous abortion, she delivered a 950g newborn who died quickly. On placental gross examination two distinct but connected masses were identified: one exhibited a normal placental aspect and the other vesicular villi with necrotic and hemorrhagic fragments. On microscopic examination, the normal placenta showed well-developed chorionic villi and the multicystic placenta showed molar villi. Immunohistochemical study and fluorescence in situ hybridization confirmed a complete hydatiform mole. No persistent gestational trophoblastic neoplasia was observed during the follow-up.     

药流绒毛中波形蛋白的免疫荧光和免疫电镜研究

目的：观察米非司酮对人孕早期绒毛组织中波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法：应用间接免疫荧光和胶体金标记免疫电镜技术，检测正常早孕人流电吸组和米非司酮组绒毛组织中波形蛋白的表达。结果：对照组绒毛中轴间质细胞、血管内皮细胞波形蛋白阳性表达，药流组荧光着色细胞则明显减少，表达强度显著降低；对照组绒毛间质细胞波形蛋白中间丝沿细胞的长轴呈良好的丝状排列，整齐、致密，胶体金颗粒成簇或散在分布于细胞核与细胞质之间除细胞器以外的细胞质所有部位，胞核呈阴性；药流组间质细胞中间丝明显辣少，出现断裂、排列紊乱，金颗粒分布明显稀疏。结论：米非司酮显著降低绒毛中波形蛋白表达水平并影响绒毛间质细胞的细胞骨架成分。     

miR-150在胎盘表达与复发性流产的关系研究

目的探讨miR-150通过靶向血管内皮生长因子(VEGF)表达调控胎盘血管生成参与复发性流产的关系。方法选择华中科技大学同济医学院附属梨园医院妇产科单胎晚期妊娠分娩的产妇40例为对照组(年龄23~29岁,平均年龄26.72岁),同期选择于该院妇产科3次或更多次自然流产的妇女40例为病例组(年龄23~29岁,平均年龄26.18岁)。测定两组胎盘组织miR-150 mRNA表达水平及VEGF表达水平。设立HTR-8/SVNEO细胞组、miR-150mimics组、miR-150 inhibitor组,测定3组细胞活力、凋亡水平、血管形成水平、miR-150 mRNA表达水平及VEGF表达水平。建立正常小鼠组、miR-150 mimics小鼠组、miR-150 inhibitor小鼠组模型,测定3组小鼠平均流产数、胎鼠质量、胎盘质量、胎盘毛细血管数目、miR-150 mRNA及VEGF表达水平。结果病例组胎盘组织miR-150 mRNA表达水平高于对照组胎盘组织,VEGF表达水平低于对照组胎盘组织(P <0.05)。miR-150 mimics组光密度(OD)值、细胞存活率、相对总血管长度、相对总血管数目、VEGF表达水平低于HTR-8/SVNEO细胞组(P <0.05);miR-150 inhibitor组OD值、细胞存活率、相对总血管长度、相对总血管数目、VEGF表达水平高于HTR-8/SVNEO细胞组和miR-150 mimics组(P <0.05)。miR-150 mimics组细胞凋亡率、miR-150 mRNA表达水平高于HTR-8/SVNEO细胞组(P <0.05),miR-150 inhibitor组细胞凋亡率、miR-150 mRNA表达水平低于HTR-8/SVNEO细胞组和miR-150 mimics组(P <0.05)。miR-150 mimics小鼠组平均流产数、miR-150 mRNA水平高于正常小鼠组(P <0.05),胎鼠质量、胎盘质量低于正常小鼠组(P <0.05)。miR-150inhibitor小鼠组平均流产数、miR-150 mRNA水平低于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05),胎鼠质量、胎盘质量高于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05)。miR-150 mimics小鼠组平均胎盘毛细血管数目水平、VEGF表达水平低于正常小鼠组(P <0.05),miR-150 inhibitor小鼠组平均胎盘毛细血管数目、VEGF表达水平高于正常小鼠组和miR-150 mimics小鼠组(P <0.05)。结论复发性流产患者胎盘组织中miR-150表达水平升高,VEGF表达水平降低;miR-150靶向抑制胎盘中VEGF表达水平进而抑制胎盘中血管的生成可能是复发性流产的发病机制之一。     

自然流产模型小鼠蜕膜细胞凋亡及相关基因的表达

目的 通过比较正常妊娠模型小鼠及自然流产模型小鼠蜕膜细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Fas、FasL蛋白的表达,从细胞及分子水平探讨自然流产的发病机制.方法建立正常妊娠模型CBAXBALB/c和自然流产模型CBAXDBA/2.用免疫组化SABC法测定两组模型孕13 d蜕膜细胞Bcl-2、Bax、Fas、FasL蛋白的表达,并通过MIAS-2000医用彩色病理图像免疫组化测量系统对其表达进行半定量分析,其结果用平均灰度值表示;同时应用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)测定两组模型孕13天蜕膜细胞凋亡情况.结果与正常妊娠模型相比,自然流产模型蜕膜细胞Bcl-2蛋白的表达降低(P＜0.01);Bax蛋白的表达明显升高(P＜0.01);FasL的表达明显升高(P＜0.01);Fas的表达两组比较无明显差异(P＞0.05).蜕膜细胞凋亡指数(AI),自然流产模型明显高于正常妊娠模型(P＜0.01).结论 早孕期蜕膜组织细胞凋亡异常是自然流产的机制之一,Bcl-2/Bax,Fas/FasL途径可能是诱导早孕期蜕膜细胞凋亡的重要因素.     

IL-10在反复自然流产人绒毛组织的表达及意义

目的:通过研究白细胞介素-10 (IL-10)在反复自然流产和正常流产人绒毛组织和血清中的表达比较来探讨IL-10与不明原因反复自然流产的相关性及其临床意义.方法:采用免疫组织化学技术和逆转录-聚合酶链反应技术检测35例反复自然流产者(实验组)和35例正常流产者(对照组)人绒毛组织中IL-10的细胞学定位以及在mRNA水平的表达;ELISA法定量分析IL-10在两组血清中的表达.结果:免疫组织化学检测结果显示两组组织中均有IL-10阳性表达,实验组IL-10在人绒毛组织中的阳性表达率低于对照组(P＜0.05).RT-PCR结果显示实验组和对照组均有IL-10表达,对比显示实验组IL-10表达低于对照组.ELISA测定结果显示IL-10在实验组的表达低于对照组.结论:IL-10的表达在实验组早孕绒毛组织细胞学定位及mRNA水平检测均较对照组降低,在血清中的表达量也是实验组低于对照组,提示自然流产妊娠妇女存在IL-10细胞因子表达异常,IL-10可能在维持正常妊娠过程中起到重要作用.     

1389例稽留流产绒毛细胞染色体核型分析

目的探讨在早期稽留流产病例中胚胎绒毛染色体核型分析的意义。方法对1389例稽留流产胚胎绒毛组织进行细胞培养,培养成功的病例进行染色体核型分析,统计学分析。结果 1389例稽留流产胚胎绒毛,培养成功1294例,成功率为93.2%。经染色体核型分析,正常核型为596例,男女比为1：2.19（187/409）;异常核型为698例（54%）,其中三体型为427例,多倍体型为114例,45,X型为89例,染色体结构异常为20例,嵌合体为17例。结论胚胎染色体核型异常是导致稽留流产的重要原因;对流产绒毛组织细胞进行染色体核型分析可以为再次妊娠提供指导依据。     

自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达

目的通过检测自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9表达,探讨二者与自然流产发生的关系。方法采用免疫组化SABC法测定30例自然流产与20例同期正常早孕要求行人工流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达。结果流产组蜕膜组织中TNF-α,MMP-9阳性表达率分别为86.7%,83.3%,高于对照组(13.3%,P=0.006;16.7%,P=0.005),两组蜕膜组织中二者的表达有显著性差异,P0.05。结论自然流产患者蜕膜组织中TNF-α,MMP-9的表达增高,提示TNF-α,MMP-9在自然流产的发生中起重要作用。