bcl—2基因表达在慢性粒细胞白血病急变中的意义

目的探讨ｂｃｌ２基因表达在慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）急变中的生物学意义。方法采用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶免疫复合物方法和地高辛标记探针原位杂交技术检测各期ＣＭＬ患者６０例新鲜骨髓标本中ＢＣＬ２蛋白和ｂｃｌ２ｍＲＮＡ的表达,并对其中１９例标本进行流式细胞术分析骨髓细胞凋亡率及细胞周期。结果初诊和治疗后ＣＭＬ中ｂｃｌ２基因表达相近,但明显低于急变时。ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达与蛋白表达基本一致。ｂｃｌ２基因高表达与ＣＭＬ患者外周血血红蛋白、血小板、幼稚细胞及骨髓不成熟细胞比例相关。加速／急变期ＣＭＬ细胞凋亡率明显低于慢性期,但细胞周期无明显变化。结论ＣＭＬ急变时ｂｃｌ２基因表达增高,骨髓细胞凋亡率降低,这些现象部分地阐明了ＣＭＬ急变预后不良的机制,也为ＣＭＬ急变的早期诊断和治疗提供了实验依据。     

再生障碍性贫血患者骨髓T淋巴细胞Fas抗原表达与凋亡

T淋巴细胞是细胞免疫反应中的主要效应细胞 ,其数量和功能异常所造成的造血抑制在再生障碍性贫血 (再障 )的发病中起着极为重要的作用。我们检测了再障患者骨髓T淋巴细胞表面Fas抗原的表达水平以及T细胞的凋亡情况。病例和方法1　病例　所有患者均来自山东大学齐鲁医院门诊及血液科住院患者。 2 6例再障患者均符合 1987年第四届全国再障会议修订的诊断标准[1] 。其中慢性再障 (CAA) 18例 ,重型再障(SAA)Ⅰ型 5例 ,Ⅱ型 1例 ,纯巨核细胞再障 2例 ;男 15例 ,女11例 ;年龄 12～ 6 7岁 ,中位年龄 35 .5岁。所有患者取标本前3个月内均未用免…     

急性白血病患者bcl-2、bax基因表达与预后和耐药的关系

近年来研究发现,细胞凋亡受抑不仅在肿瘤发生中起重要作用,而且是肿瘤化疗、放疗中产生多药耐药的机制之一。ｂｃｌ2基因是一种抑制凋亡基因,可使细胞免于多种凋亡刺激信号所致的凋亡。ｂａｘ基因具有促进凋亡的作用,是ｂｃｌ2基因的拮抗基因,ｂａｘ蛋白可以和ｂｃｌ2蛋白形成异二聚体,从而抑制ｂｃｌ2的功能。我们采用ＲＴＰＣＲ方法,研究ｂｃｌ2家族中的这对作用相反的基因在急性白血病(ＡＬ)的ｍＲＮＡ水平表达,并了解其与ＡＬ的预后和耐药的关系。对象和方法1　研究对象　55例初治ＡＬ患者,为1998年8月～1999年2月我院住院患者,均符合Ｆ…     

DCC基因在白血病及骨髓增生异常综合征患者中的表达

ＤＣＣ基因位于人类染色体 1 8ｑ2 1 .3 ,在 88%结肠癌、直肠癌患者中 ,ＤＣＣ基因的表达明显减少或缺失。为了评价ＤＣＣ基因在白血病发病及骨髓增生异常综合征 (ＭＤＳ)转化为白血病的作用 ,我们检测了 3 1例白血病患者和 8例ＭＤＳ患者的ＤＣＣ基因表达情况。病例和方法1　病例　所有病例均来自本院儿科、血液内科。白血病患者 3 1例 ,年龄为 6个月至 73岁 ,其中 6个月～ 1 4岁 1 0例 ,1 5～ 73岁 2 1例 ;急性髓系白血病 (ＡＭＬ) 1 4例 ,急性淋巴细胞白血病 (ＡＬＬ) 1 0例 ,慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ) 7例。ＭＤＳ 8例 ,均按ＦＡＢ诊断…     

阿糖胞苷诱导HL—60细胞凋亡中bcl—2,c—myc基因表达水平的变化

阿糖胞苷诱导ＨＬ－６０细胞凋亡中ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ基因表达水平的变化仇志根马伴吟杨毅吴王月现已证明，阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。我们采用Ａｒａ－Ｃ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡，并观察了凋亡调控基因ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ表达...     

再生障碍性贫血患者HLA-DR B1*1501检测

我们检测了再生障碍性贫血 (再障 )患者ＨＬＡ ＤＲＢ1 1 50 1 ,并探讨其临床意义。病例和方法1　病例　慢性再障患者 45例 ,男 2 8例 ,女 1 7例 ,年龄 8～ 55岁 ,中位年龄 2 2岁 ,均符合国内诊断标准[1 ] ,接受环胞菌素Ａ(ＣｓＡ)治疗的患者 2 6例 ,均用 6ｍｇ·ｋｇ- 1 ·ｄ- 1 共 1 0ｄ ,3ｍｇ·ｋｇ- 1 ·ｄ- 1 持续治疗 3个月以上 ,并合用雄激素。对照组为同区域健康人 2 4名 ,均无血缘关系。2　ＣｓＡ治疗再障有效标准　参照国内疗效标准[1 ] ,持续用药 >3个月 ,血红蛋白较治疗前升高≥ 30ｇ/Ｌ及持续 3个月不需要输血液制品者为有效…     

紫外线照射充氧自血回输对银屑病患者淋巴细胞凋亡及T细胞亚群的影响

资料和方法　　银屑病患者组 4 0例 ,男 2 8例 ,女 12例 ;年龄16～ 6 4岁 ,平均 39.4岁 ;病程 2周～ 32年 ,平均7.8年 ;健康对照组 2 0名 ,均为健康查体者 ,其性别、年龄与银屑病组无统计学差异。　　采用北京产ＷＬ - 2型光量子血液治疗仪 ,紫外线波长 2 53.7ｎｍ ,照射剂量 2 4 .5ｍＪ/ｃｍ2 ,具体操作步骤同参考文献 [1]。隔日 1次 ,10次为 1个疗程。治疗前及疗程结束后取外周血备检。　　凋亡基因 - 1(Ｆａｓ)、白血病基因 - 2 (Ｂｃｌ - 2 )的蛋白表达及Ｔ细胞ＣＤ4 抗原 (ＣＤ4 )的单克隆抗体均采用异硫氰酸荧光素标记 (ＦａｓＦＩＴ…     

营养性贫血中bcl-2、bax、bax/bcl-2、细胞周期分布及凋亡表达的临床意义

营养性贫血是血液病中的常见病、多发病 ,我们应用流式细胞仪 (ＦＣＭ)检测营养性贫血骨髓中单个核细胞ｂｃｌ 2、ｂａｘ等参数及细胞凋亡率 ,以研究细胞凋亡在营养性贫血中的作用及临床意义。对象和方法1　研究对象　病例组 5 8例 ,其中缺铁性贫血 2 5例、巨幼细胞贫血 12例、混合性贫血 2 1例 ,为 2 0 0 0年 7月～ 2 0 0 2年 1月我院血液科住院及门诊随访患者。所有病例按照张之南主编的第 2版《血液病诊断及疗效标准》确诊。对照组 2 1例 ,其中特发性血小板减少性紫癜 12例 ,过敏性紫癜 7例 ,健康志愿者 2名。2　主要试剂　Ｂｃｌ 2 Ｆ…     

SLE患者淋巴细胞Bcl-2蛋白的检测与临床意义

系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)是一种全身性多器官受累的自身免疫疾病 ,其发病机制与细胞凋亡异常有密切的关系[1] 。ｂｃｌ 2基因是人们在研究Ｂ细胞淋巴瘤中发现的一种异常表达的原癌基因 ,位于染色体 18ｑ 2 1.3上 ,在细胞凋亡中起作调节作用[2 ] 。ｂｃｌ 2过度表达的转基因鼠中 ,Ｂ细胞生存和记忆均延长 ,自身反应性Ｂ细胞克隆消除功能受抑制 ,产生许多自身抗体 ,形成免疫复合物肾炎[2 ] 。本文旨在探讨检测ＳＬＥ病人外周血中淋巴细胞Ｂｃｌ 2蛋白的临床意义。1　材料和方法1 1　检测对象　 4 1例住院和门诊病例均符合美国风湿病学会 (ＡＲ…     

急性白血病患者和白血病细胞系的bcl-2及bax基因表达

为了进一步研究ｂｃｌ2和ｂａｘ基因在急性白血病(ＡＬ)发病和治疗中的作用,我们检测了ＡＬ患者36例和白血病细胞系6株的ｂｃｌ2基因表达,现报告如下。对象和方法1　病例资料　ＡＬ36例均为我科住院患者。男26例,女10例,均符合ＦＡＢ诊断标准并经免疫分型确诊,除2例外,其余34例检测时骨髓或外周血中原始和幼稚细胞数均>06。急性髓系白血病(ＡＭＬ)23例,急性淋巴细胞白血病(ＡＬＬ)13例。初治22例,复发或难治14例。白血病细胞系ＨＬ60、Ｕ937、Ｒａｊｉ、ＫＧ1、ＣＥＭ和Ｋ562由军事医学科学院基础医学研究所提供。正常骨髓3份取自骨髓移植正…     

神经酰胺在诱导HL-60细胞凋亡中的作用研究

目的：观察神经酰胺对ＨＬ６０细胞凋亡产生的影响、凋亡相关基因ｂｃｌ２变化及与蛋白激酶Ｃ（ＣＰＫ）途径的关系,探讨其在细胞凋亡过程中可能的调节作用。方法：采用ＤＮＡ凝胶电泳、细胞荧光染色、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）等技术对细胞进行凋亡鉴定及ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达分析。结果：外源性及内源性神经酰胺类药物可诱导ＨＬ６０细胞产生典型的凋亡改变,明显下调ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达,且与刺激药物呈时间、剂量上的依赖性;ＣＰＫ途径激活剂佛波酯（ＰＭＡ）、二酰基甘油单独作用无诱凋作用,但加入内源性ＣＰＫ抑制剂神经鞘氨醇,即可产生凋亡特有的ＤＮＡ梯形降解。结论：神经酰胺类药物诱导的ＨＬ６０细胞凋亡信号,可通过调节抑凋基因ｂｃｌ２表达降低而产生效应,且与ＣＰＫ途径的抑制密切相关     

逆转录病毒介导的反义bcl-2序列促进足叶乙甙诱导的白血病细胞凋亡

目的：探讨逆转录病毒介导的反义ｂｃｌ２序列对细胞凋亡的诱导作用。方法：ＰＡ３１７细胞包装逆转录病毒，病毒转导Ｊｕｒｋａｔ细胞后用ＲＴＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法检测ｂｃｌ２ｍＲＮＡ及蛋白表达水平；用流式细胞仪计数及ＤＮＡ电泳检测细胞凋亡。结果：转染反义ｂｃｌ２序列可使内源性ＢＣＬ２蛋白表达下降，提高白血病细胞株对足叶乙甙（Ｖｐ１６）的敏感性，促进细胞凋亡。结论：反义ｂｃｌ２序列能促进Ｖｐ１６诱导的白血病细胞凋亡，为ｂｃｌ２反义技术治疗白血病的临床应用提供了实验依据。     

抗凋亡基因bcl－2在急性白血病骨髓与细胞株中的转录水平表达

采用原位杂交方法检测了急性白血病骨髓活检标本及细胞株中ｂｃｌ－２基因表达水平。结果２２例白血病患者骨髓中２１例（包括髓系和淋巴系）存在ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ高表达；６种白血病细胞株中５种ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ阳性（Ｍｏｌｔ－４例外），它们分别为ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２。表明造血系统肿瘤中广泛存在ｂｃｌ－２基因转录水平激活，其基因产物可能通过抑制细胞凋亡过程而影响急性白血病细胞的生物学特性。     

34例小儿再生障碍性贫血骨髓CD34+细胞的检测

再生障碍性贫血 (再障 )的确切病因及发病机制目前尚不十分清楚。骨髓造血干 /祖细胞的质和 (或 )量的改变可能是再障发病的重要环节。有关小儿再障患者骨髓造血干 /祖细胞的变化情况文献报道不多。我们用流式细胞术 (ＦＣＭ)检测 34例初诊再障患儿骨髓ＣＤ34 + 细胞的数量 ,并与 2 1例对照组患儿骨髓ＣＤ34 + 细胞的数量进行比较 ,现报告如下。病例和方法1　再障病例　 34例再障患儿均系本院 1 999年 2月～ 2 0 0 1年 5月住院初诊患儿 ,再障诊断标准参照文献 [1 ] ,其中 :男2 0例 ,女 1 4例 ,年龄 4～ 1 5岁 ,中位年龄 9岁。重型再障(ＳＡ…     

抗凋亡基因bcl—2在急性白血病骨髓与细胞株中的转录水平表达

采用原位杂交方法检测了急性白血病骨髓活检标本及细胞株中ｂｃｌ－２基因表达水平。结果２２例白血病患骨髓中２１例存在ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ高表达；６种白血病细胞株中５种ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ阳性（Ｍｏｌｔ－４例外），它们分别为ＣＥＭ、Ｒａｊｉ、ＨＬ－６０、Ｕ９３７及Ｋ５６２。表明造血系统肿瘤中广泛存在ｂｃｌ－２基因转录水平激活，其基因产物可能通过抑制细胞凋亡过程而影响急性白血病细胞的生物学特性。     

HLA不全相合外周血造血干细胞移植治疗三例急性淋巴细胞白血病

我们用ＨＬＡ不全相合外周血造血干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ) ,治疗 3例急性淋巴细胞白血病患者。报告如下。病例与方法1　病例　 3例患者均经临床及实验室检查确诊为急性淋巴细胞白血病 ,临床资料见表 1。表 1　 3例急性淋巴细胞白血病患者临床资料例号性别年龄(岁 )诊断至移植时间(月 )移植时状态移植细胞数ＭＮＣ(× 10 8/ｋｇ)ＣＤ34 (× 10 6 /ｋｇ)目前状态1男 2 1　　 4ＣＲ1 3 .0　 10 .0ＣＣＲ3 5个月2男 14 2 4ＣＲ2 6.610 .0ＣＣＲ 2 3个月3男 15 12 2次复发 7.0 5 .2死亡2　供者　例 1为患者同胞姐姐 ,例 2及例 3均为患者母亲 ,供…     

rhGM—CSF对VP—16诱导的HL—60细胞凋亡的影响

为探讨ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对ＶＰ－１６诱导的ＨＬ－６０细胞凋亡的影响,我们观察了预先应用ｒｈＧＭ－ＣＳＦ孵育的ＨＬ－６０细胞由ＶＰ－１６诱导的凋亡的过程及凋亡相关基因ｂｃｌ－２和ｆａｓ的表达变化,应用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形 和超微结构变化,凝胶电泳检测ＤＮＡ的碎片,流式细胞术检测细胞凋亡率、ｂｃｌ－２和ｆａｓ的表达,实验结果显示,ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可抑制ＶＰ－１６诱导的ＨＬ－６０细胞的凋亡,它加强了ＶＰ－１６对ｂｃｌ－２表达的下调作用,抑制了ＶＰ－１６对ｆａｓ表达的上调作用,由此推测,ｒｈＧＭ－ＣＳＦ可能是通过下调ｆａｓ表达降低ＨＬ－６０细胞对ＶＰ－１６的敏感性。     

bcl—x和bcl—2基因在急性白血病患者的表达及其临床意义

观察凋亡调控基因ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在急性白血病患中的表达,探索ＡＬ的病理和化疗反应的分子机制。方法应用半定量逆转录－聚合酶链反应技术检测ｂｃｌ－ｘ和ｂｃｌ－２在３４例ＡＬ患中ｍＲＮＡ水平的表达。结果抑凋亡基因ｂｃｌ－ｘＬ和ｂｃｌ－２在ＡＬ细胞中的表达比在完全缓解和正常对照组骨髓细胞中的表达明显增高（Ｐ〈０．０１）,同时在复发患ＡＬ细胞中的表达水平分别是初治患的１．８倍和１．９倍（Ｐ〈０     

bcl-X_L在急性髓系白血病细胞的表达及与化疗敏感性的关系

目的：探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞凋亡径路的特征及调控模式。方法：运用流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、ＤＮＡ电泳、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术，观察了化疗药物足叶乙甙（Ｖｐ１６）作用于原代ＡＭＬ细胞前后，ｂｃｌ－ＸＬ表达与凋亡的敏感性、临床特征、预后的关系。结果：绝大部分ＡＭＬ高表达ｂｃｌ－ＸＬｍＲＮＡ病例经Ｖｐ１６处理后，其ｂｃｌ－ＸＬ虽然下调，但仍维持较高水平，并对凋亡诱导不敏感，与高白细胞数、髓外浸润等不良预后特征相关，化疗后不易缓解，处于长期缓解中的病例经Ｖｐ１６处理后，ｂｃｌ－ＸＬ亦表达下调，但凋亡率远低于ＡＭＬ细胞。结论：ｂｃｌ－ＸＬ高表达与ＡＭＬ的发生、维持和化疗耐药性相关，ｂｃｌ－ＸＬ高表达下调是凋亡启动的基础，但本身不足以引致凋亡。     

雷公藤红素对人肥大细胞白血病细胞系HMC-1作用的实验研究

目的探讨雷公藤红素对人肥大细胞白血病的作用及机制。方法以人肥大细胞白血病细胞系ＨＭＣ１细胞为靶细胞,观察雷公藤红素对ＨＭＣ１细胞凋亡的诱导作用。结果①０．１２～１．００μｍｏｌ／Ｌ雷公藤红素可以引起ＨＭＣ１细胞凋亡,表现为细胞呈凋亡形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳出现梯形条带,流式细胞仪分析ＨＭＣ１细胞在Ｇ１期前出现凋亡峰;②凋亡率随药物浓度的增加及作用时间的延长而递增;③促进Ｇ１期细胞进入Ｓ期,使Ｓ期细胞比例升高,随后凋亡率升高,Ｓ期细胞下降,两者呈负相关（Ｐ＜０．０１）;④雷公藤红素可使ＨＭＣ１细胞ｂａｘ、ｃｍｙｃ表达增加,ｂｃｌ２表达下降。结论雷公藤红素可有效地诱导ＨＭＣ１细胞凋亡,凋亡主要发生在Ｓ期,凋亡的发生与其上调促进凋亡基因ｂａｘ、ｃｍｙｃ和下调抑凋亡基因ｂｃｌ２的表达有关。