高效液相色谱法测定HbF的临床实验评价

目的对高效液相色谱法(HPLC)测定HbF进行临床实验评价。方法用日本TOSOH公司生产的HLC723G7(简称G7)全自动糖化血红蛋白分析仪(分析原理为HPLC)的β模式测HbF,与抗碱变试验法测得HbF含量进行比较;并对该方法精密度、线性、抗干扰性等指标进行实验。结果共测定标本77份,其中成人及儿童标本42份,检出HbF高于正常值(含量>3.1%)的标本17例。该方法精密度测定CV在1.9-3.2%之间;线性良好,回归方程y=0.9915x-0.03704,与碱变性试验的相关性良好γ=0.9900;HbF的线性范围可达35.8%;胆红素浓度在250μmol/L,甘油三脂浓度在22.0mmol/L以下时对测定结果无影响。但是对35例新生儿标本的检测表明,HbF与碱变性试验结果不符,仪器测定结果均为0,碱变性试验结果为65.02±11.69%。结论高效液相层析法测定HbF,对成人及儿童β地中海贫血检查有良好的效果,能很好地分辨出增高的HbF,重复性好,不受脂浊、黄胆标本的干扰,且检测速度快。但G7对新生儿HbF的测定尚存在不足之处,如果对仪器分析软件进行调整,则对新生儿的HbF含量也可以定量。     

全自动血红蛋白电泳在诊断地中海贫血中的应用

目的:探讨全自动血红蛋白电泳在诊断地中海贫血中的价值.方法:使用法国Hydrasyscs电泳系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血,同时采用HbF碱变性试验对同一标本进行HbF含量测定,比较两种方法的检测结果.结果:351例标本中,应用全自动血红蛋白电泳检出α地中海贫血表型阳性19例,阳性率为5.26%;β地中海贫血表型阳性65例,阳性率为18.52%.全自动血红蛋白电泳可以分辨出HbF区带,并且能进行定量扫描,与HbF碱变性试验测得HbF含量基本一致.结论:全自动血红蛋白电泳电泳区带清晰,扫描定量准确,可以为地中海贫血的诊断提供重要依据.     

胶乳凝集法检测糖化血红蛋白

目的探讨在全自动生化分析仪上用胶乳凝集法检测糖化血红蛋白(HbA1c)的可靠性。方法收集糖尿病患者和健康体检者标本共40份,分别在全自动生化分析仪上用胶乳凝集法,在糖化血红蛋白分析仪上用高效液相色谱(HPLC)法检测HbA1c,以HPLC为参比方法,与胶乳凝集法进行比对。计算在全自动生化分析仪上采用胶乳凝集法检测HbA1c的精密度、准确度、线性试验、回收试验。结果胶乳凝集法批内平均变异系数(CV)为3.43%,批间平均CV为4.19%,平均回收率为99.58%,胶乳凝集法与HPLC法回归方程为Y=0.976 2 X+0.023 5,r2=0.998 3。结论胶乳凝集法精密度能满足临床需要,与HPLC法相关性较好,适用于临床常规自动分析。     

高效液相色谱法与胶乳凝集法测定糖化血红蛋白的比对分析

目的比较HPLC法与胶乳凝集免疫比浊法测定糖化血红蛋白的结果差异。方法使用HPLC法全自动糖化血红蛋白仪与日立7170A全自动生化分析仪用胶乳凝集免疫比浊法分别测定糖化血红蛋白，对结果进行分析比较。结果HPLC法G7糖化血红蛋白仪与胶乳凝集免疫比浊法生化分析仪测定糖化血红蛋的结果有非常显著的差异（P〈0．01），胶乳凝集免疫比浊法较HPLC法结果明显偏高，两法的批内不精密度和日间不精密度分别〈5％，均有较好的精密度。以HPLC法为参考，胶乳凝集免疫比浊法结果的偏倚为17．26％。结论HPLC法与胶乳凝集免疫比浊法测定糖化血红蛋的方法均有较好的精密度，但要注意两方法之间有一定的差异。应以HPLC法作为参考方法，对胶乳凝集免疫比浊法的结果进行校准。     

高效液相色谱法检测糖化血红蛋白的方法学评价

目的采用高效液相色谱法(HPLC),评价全自动糖化血红蛋白分析仪HLC-723G8性能。方法根据美国国家实验室标准委员会EP5-A、EP9-A文件要求,通过对不同浓度糖化血红蛋白(HbA1c)样品含量的测定,对仪器精密度、准确度、携带污染率、线性进行评价。结果批内CV均小于1.0%,批间CV均小于1.3%;准确度满足判断标准;携带污染率小于2%;HbA1c在4.6%～18.1%范围内线性良好(a值在0.95～1.05,r2≥0.98)。结论该仪器主要指标精密度高、重复性好、结果准确、交叉污染小、线性范围宽,完全能满足临床检测要求。     

HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪性能的评价及其在糖尿病筛查的应用

目的评价HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪的临床应用性能,并建立深圳地区健康人群糖化血红蛋白（HbA1c）的参考区间及用于糖尿病筛查的＂cut-off＂值。方法对HLC-723 G7测定HbA1c的精密度、准确度、线性、携带污染进行评价;并检测482例健康体检者和150例糖尿病患者HbA1c。结果HLC-723 G7测定HbA1c高、低两水平批内精密度的CV分别为0.69%、0.94%,总精密度的CV分别为1.25%、1.79%;HLC-723 G7与VARIANTⅡ测定HbA1c结果呈明显相关（r=0.996,Sy.x=0.28,P〈0.001）,在6.0%、7.0%、9.0%的相对偏倚分别为-0.40%-、0.14%、0.20%;HLC-723 G7测定HbA1c在3.1%-15.9%范围内线性良好（r=0.999,P〈0.001）,高值标本对低值标本的测定结果无明显携带污染;深圳地区健康人群HbA1c总体参考区间为4.5%-6.1%;HbA1c用于糖尿病筛查受试者工作（ROC）曲线下面积为0.934,＂cut-off＂值5.9%处灵敏度为82.0%,特异性为91.3%。结论HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c性能良好,可用于糖尿病的早期筛查。     

两种糖化血红蛋白测定方法的相关性分析

目的探讨在全自动生化分析仅上用胶乳凝集法测定糖化血红蛋白（HbAlc）与糖化血红蛋白分析仪上用高效液相色谱法测定HbAle的可比性。方法收集糖尿病患者和健康体检者标本共柏例,分别在全自动生化分析仪上用胶乳凝集法、在糖化血红蛋白分析仪上用高效液相色谱法（HPLc）测定糖化血红蛋白,以HPLC为比对方法,对胶乳凝集法进行精密度试验、回收试验、干扰试验;对两种方法结果进行分析。结果胶乳凝集法批内平均CV为3．33％,批闻平均CV为4．02％,平均回收率为99．6％,胶乳凝集法与高效液相色谱法比较Y=0．998X-0．0813,r2=0．998。结论胶乳凝集法与HPLC法相关性较好,精密度能满足临床需要适用于临床常规自动分析。     

HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪的精密度和准确度性能评价

目的用实验评价日本TOSOH公司HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪的精密度和准确度性能。方法使用厂家配套的正常值质控品和异常值质控品测定HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪的批内精密度和批间精密度,同相应的标准进行比较。利用病人新鲜标本参照EP-15A2文件进行方法学比较,评估待评检测系统与目标检测系统检测结果的偏倚是否可接受。结果待评检测系统批内精密度<1/4允许总误差(TEa),待评检测系统批间精密度"1/3TEa,待评检测系统与目标检测系统检测结果偏倚<1/2 TEa。结论 HLC-723 G7糖化血红蛋白分析仪的精密度和准确度性能较好,能满足临床使用要求。     

高效液相色谱法与酶法检测糖化血红蛋白的比较

目的:对高效液相色谱法(HPLC)与酶法检测糖化血红蛋白的结果进行比较,为糖尿病的正确治疗提供可靠依据。方法:取新鲜抗凝全血,使用西门子Dimension RxL全自动生化分析仪和MQ-2000 HPLC法全自动糖化血红蛋白仪检测HbAlc数据,进行线形范围、精密度及相关性分析,以探讨酶法检测糖化血红蛋白结果的准确性和可靠性。结果:HPLC法与酶法的批内、批间变异系数(CV)均<5%,均小于卫生部临检中心允许误差范围(±20.0%)的1/2;以HPLC法为参考,酶法结果的偏倚为11.26%。结论:HPLC法与酶法测定糖化血红蛋白均有较好的精密度,但两种方法之间存在一定的差异,应以HPLC法作为参考方法,对酶法的结果进行校准。     

全自动电泳分析系统在地中海贫血筛查中的应用价值

目的探讨全自动电泳分析系统在地中海贫血筛查中的应用价值。方法对2080份疑似地贫患者标本应用法国公司HYDRASYS全自动电泳分析系统进行血红蛋白电泳,检测血红蛋白(Hb)各组成分的含量,同时采用HbF碱变性试验对同一标本进行HbF含量测定,比较两种方法的检测结果。结果在送检2080例中筛出α地中海贫血表型阳性316例,阳性率15.2%;β地中海贫血表型阳性616例,阳性率29.6%。其它血红蛋白病6例,阳性率0.3%,经基因分析确诊α地中海贫血291例,准确度92.3%,β地中海贫血591例,准确度95.9%。结论全自动血红蛋白电泳分析系统电泳区带清晰,扫描定量准确,可以定量检测HbA,HbF,HbA2的含量,将地中海贫血进行初步分类为α地中海贫血或β地中海贫血,准确度高,有效地筛查出高危患者,为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供基础。     

两种糖化血红蛋白分析方法的评价

目的对离子交换高压液相层析法与金标免疫渗滤法检测糖化血红蛋白进行方法学分析。方法用离子交换高压液相层析法(X)和金标免疫渗滤法(Y)测定糖化血红蛋白进行线性范围、回收率、精密度、干扰因素、相关性及参考范围的分析。结果离子交换高效液相色谱法(HPLC法)与金标免疫渗滤法(金标法)的线性范围分别为4.3%~17.0%和3.6%~12.5%,两种方法的回收率均为101.3%,批内、批间的变异系数(CV)均<5%;10.2%mmol/L三酰甘油、684μmol/L总胆红素和HbF对两种方法均无干扰。金标法测定糖化血红蛋白的结果较HPLC法明显偏低(P<0.01);回归方程Y=0.89X 0.24(r=0.94,P<0.01);HPLC法与金标法的参考范围分别为4.2%~6.7%和4.1%~6.4%。结论金标法与HPLC法相比,糖化血红蛋白检测结果明显偏低。     

TOSOH HLC-723 G8全自动糖化血红蛋白分析仪性能评价

目的对以离子交换高效液相色谱法（HPLC）为原理的TOSOHHLC-723G8全自动糖化血红蛋白分析仪（简称HLC-723G8）检测全血糖化血红蛋白（HbA1c）的性能进行评价。方法对HLC-723G8测定HbA1c的精密度、相关性、线性、携带污染进行评价,并检测54例健康体检者的HbA1c进行参考区间验证。结果HLC-723G8测定HbA1c低、高水平批内变异系数（cv）分别为0．00％、0．47％,批间CV分别为0．76％、0．31％;HLC-723G8与HLC-723G7全自动糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c的结果呈明显相关（F2=0．999,P〈0．001）,预期偏倚为0．06,相对偏倚值为0．83％,偏差符合率为100％;在5％～12％范围内线性良好（r2=0．9996,P〈0．001）;高值标本对低值标本的结果无明显携带污染（携带污染率为1．12％）;54名健康人群的HbA1c测定结果为4．7％-6．3％,在厂家提供的参考区间内。结论HLC-723G8测定HbA1c的性能良好,可在临床使用。     

HbF变异体对三种不同HbA1c检测系统的干扰评价

目的 评价血红蛋白变异体F(HbF)对三种糖化血红蛋白(HbA1c)检测系统测定结果的干扰。三种方法分别为离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和免疫抑制比浊法。方法 分别用三种检测系统检测血红蛋白结构正常标本及含有胎儿血红蛋白(HbF)的标本,依据美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)的判定标准,对检测结果进行比对分析和偏倚评估。结果 以Primus Ultra2(AC-HPLC)为比较系统,IE-HPLC和免疫比浊法为检测系统,两种检测系统与比较系统检测正常样品HbA1c值的相关性良好。当HbF≤8.75%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差<6%; HbF为17.50%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差>6%; 当HbF浓度达35.00%～70.00%时IE-HPLC无法检测出结果。免疫比浊法测定不同HbF浓度HbA1c值与比较系统偏差均<6%,测试几乎不受HbF的干扰。结论 HbF对不同HbA1c检测系统的干扰程度不同,临床实验室在进行HbA1c检测时,应注意血红蛋白变异体的存在,必要时选用替代指标或者合适的方法进行HbA1c测定以防止干扰的发生。     

HbF变异体对三种不同HbAlc检测系统的干扰评价

目的评价血红蛋白变异体F(HbF)对三种糖化血红蛋白(HbA1c)检测系统测定结果的干扰。三种方法分别为离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和免疫抑制比浊法。方法分别用三种检测系统检测血红蛋白结构正常标本及含有胎儿血红蛋白(HbF)的标本,依据美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)的判定标准,对检测结果进行比对分析和偏倚评估。结果以Primus Ultra2(AC-HPLC)为比较系统,IE-HPLC和免疫比浊法为检测系统,两种检测系统与比较系统检测正常样品HbA1c值的相关性良好。当HbF≤8.75%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差6%;HbF为17.50%时,IE-HPLC测定结果与比较系统偏差6%;当HbF浓度达35.00%~70.00%时IE-HPLC无法检测出结果。免疫比浊法测定不同HbF浓度HbA1c值与比较系统偏差均6%,测试几乎不受HbF的干扰。结论 HbF对不同HbA1c检测系统的干扰程度不同,临床实验室在进行HbA1c检测时,应注意血红蛋白变异体的存在,必要时选用替代指标或者合适的方法进行HbA1c测定以防止干扰的发生。     

三种检测系统测定糖化血红蛋白相关性分析及偏倚评估

目的比较三种检测系统测定糖化血红蛋白（HbA1c）结果的差异并评价其偏倚度。方法分别使用Bio-Rad D-10糖化血红蛋白分析仪应用高压液相层析法（HPLC）、Roche Cobas全自动生化分析仪以免疫法、Afinion AS100分析仪以亲和色谱法测定HbA1c,对64例血液样本作比对测定,评估各检测系统之间测定结果的相关性和偏倚;应用高低两个水平质控品分别测定三种检测系统的不精密度。结果三种不同检测系统测定糖化血红蛋白的结果有良好的相关性（P〈0.01）,HPLC和亲和色谱法的总不精密度〈2.0%,免疫法总不精密度接近4.0%,符合临床测定的性能要求。以D-10 HPLC为参考检测系统,Afinion亲和色谱法和Roche免疫法测定结果的相对偏倚分别为0.17%和0.13%。结论 D-10 HPLC法、Afinion亲和色谱法和Roche免疫法测定糖化血红蛋白的准确度、精密度和偏倚符合临床要求,Roche免疫法测定HbA1c结果变异系数较大,应以HPLC法作为参考检测系统定期作比对分析。     

全自动Hb琼脂糖凝胶电泳与Hb-F碱变性试验对Hb-F含量测定的比较分析

目的 :比较全自动Hb电泳法与Hb F碱变性试验法对Hb F含量的检测结果 ,探讨全自动电泳法对Hb F定量检测的意义。方法 :采用全自动Hb琼脂糖凝胶电泳与Hb F碱变性试验分别同时对同一标本进行Hb F含量测定 ,比较二种方法对Hb F含量的检测结果。结果 :采用全自动Hb电泳法进行Hb F测定 ,对于6个月以内的婴儿 ,完全可以分辨出清晰的Hb F区带 ,且扫描定量与Hb F碱变性试验相符。对于成人 ,如Hb F碱变性试验Hb F测定稍高者 (含量 >3 1% ) ,电泳仍隐约可辨Hb F区带 ,扫描定量Hb F含量与Hb F碱变性试验基本一致 ;如Hb F碱变性试验测定Hb F含量在正常范围者 (1 0 %～ 3 0 % ) ,电泳便分辨不出Hb F区带 ,与Hb A一起组成Hb (A F)区带。结论 :全自动Hb琼脂糖凝胶电泳法能够分辨出Hb F含量异常者 ,为地中海贫血的诊断提供重要数据。     

BIO-RAD D-10血红蛋白检测仪在地中海贫血筛查中的应用

目的:评价BIO-RADD-10血红蛋白(Hb)检测仪在地中海贫血筛查中的应用。方法:对BIO-RADD-10血红蛋白检测仪进行性能评价,并测定我院门诊及住院病人HbA2及HbF含量,同时采用法国Sebia全自动电泳仪进行血红蛋白琼脂糖电泳,比较两种方法对HbA2及HbF含量的检测结果。结果:BIORADD-10血红蛋白检测仪检测HbA2及HbF批内精密度为4.8%、2.77%和1.42%、1.7%,批间精密度为4.91%、3.97%和2.87%、2.73%。共检测了1026例临床标本,并通过全自动琼脂糖凝胶电泳进行定量扫描,得出BIO-RADD-10测定灵敏度为HbF88.3%、HbA297.7%,特异性为HbF96.7%、HbA2为95.6%,阳性预测值为HbF97.4%、HbA296.9%,阴性预测值为HbF85.4%、HbA296.6%。但如果有其他异常血红蛋白条带或血红蛋白H、Bart’s,D-10血红蛋白检测仪不能识别,只能分辨出未知峰。结论:BIO-RADD-10血红蛋白检测仪能够分辨出HbA2及HbF异常增高者,为β地中海贫血的初筛提供快速的诊断依据。     

分析前标本不同处理方法对HLC-723G8测定糖化血红蛋白结果的影响

目的 探讨分析前标本不同处理方法对HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪测定糖化血红蛋白(HbA1c)结果的影响.方法 选取EDTA抗凝全血标本100份(HbA1c 3.8%～15.0%),每份标本分别按5 μL原血+2.5 mL溶血剂、5 μL原血+0.6 mL溶血剂进行稀释,对稀释标本进行检测.结果 100份不同处理方法检测结果差异无统计学意义(P＞0.05).结论 分析前标本不同处理方法对HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c结果无影响.     

抗凝剂和保存时间不同对糖化血红蛋白检测结果的影响分析

目的:探讨采用肝素钠与乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝的全血样本检测糖化血红蛋白(HbA1c)结果间的差异及样本保存时间对检测糖化血红蛋白(HbA1c)结果的影响。方法:先对TOSOH HLC-723 G7全自动高压液相糖化血红蛋白分析仪(简称G7)校准后进行精密度试验,在测定样品前先对质控品进行测定,必须在室内质控在控的前提下进行样品检测,以确保实验结果的可靠性。然后用G7分别检测肝素钠与EDTA-K22种不同的抗凝剂抗凝的全血样本在即刻及4℃保存1 d、2 d、8 d的HbA1c结果,将检测结果进行统计学分析,并以肝素钠即刻结果为参比,比较2种不同的抗凝剂抗凝的全血样本在不同时间点的检测结果的相对偏差。结果:仪器低浓度样品批内精密度CV为0.55%,高浓度样品批内精密度CV为0.36%,达到美国国家临床生物化学研究院(NACB)2007年草案质量要求(批内CV<5%,理想的CV     

标本保存条件对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定结果稳定性的影响

目的探讨不同温度、不同贮存时间保存标本对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定糖化血红蛋白A1c(HbA1c)结果稳定性的影响。方法收集5例HbA1c水平不同的全血标本,用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪于当日3 h内测定结果,然后将各标本充分混匀后分装成4小管,分组贮存在室温(20~22℃)、冷藏(4~6℃)、冷冻(-18~-20℃)和低温冷冻(-74~-76℃)条件下,分别在贮存的第1、2、5、6、7、14、20、21、60和180天进行测定。以低温冷冻保存标本所测结果为标准,每个标本的HbA1c结果在低温冷冻组x珋±0.2%范围内为可接受结果。当每组5个标本的结果都在可接受范围内,说明标本在特定时间、特定温度下稳定。结果标本用Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定的稳定性分别为:室温和-18~-20℃可稳定5 d,4~6℃可稳定20 d;-74~-76℃至少可稳定180 d。结论不同温度、不同贮存时间对Tosoh G7糖化血红蛋白分析仪测定HbA1c结果稳定性有影响。