氟对软骨细胞与成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响

目的：研究氟对体外培养的软骨细胞、成骨细胞凋亡及H2O2、SOD、NO的影响。方法：采用流式细胞仪对细胞周期进行分析及测定凋亡细胞的百分比；化学方法检测细胞培养液中的H2O2、SOD、NO；透射电镜观察软骨细胞超微结构。结果：软骨细胞：(1)不同剂量的氟均诱导细胞凋亡，培养基中的H2O2、NO均水平高于对照组，加SOD可使H2O2、细胞凋亡百分率明显下降，NaF2O、160μmol／L可使G2／M期细胞升高。(2)NaF320μmol／L．可使细胞超微结构损伤，加SOD可拮抗氟的损伤作用。成骨细胞：与对照组相比(1)加入不同剂量NaF，培养基中的SOD活性降低。但仅在加入160、240μmol/L，培养基中H2O2升高，NO亦同时升高。(2)NaF400μmol／L可诱导成骨细胞凋亡，同时使G0／G1期细胞增多，240、400μmol／L可使G2/M期细胞减少。结论:(1)低、中剂量的氟可促进软骨细胞、成骨细胞凋亡，损害细胞超微结构。与此同时培养物中H2O2升高，SOD活性降低，表明细胞凋亡及损伤与氧化应激有关。此外，NO也升高，可能也起一定作用。氟对细胞周期的影响：对软骨细胞主要作用于G2／M期，对成骨细胞可同时作用于G0／G1及G2／M期；(2)一定量的SOD可明显拮抗氟促进的H2O2释放及细胞凋亡，对细胞有保护作用。(3)一定剂量的氟促使软骨细胞、成骨细胞凋亡，同时也促进成骨细胞增殖。可能细胞凋亡产物刺激细胞增殖过程，是氟骨症增殖病变发生机制之一，NO可能也在其中起一定作用。     

慢性氟中毒大鼠肾组织细胞凋亡的实验研究

目的：观察细胞凋亡在氟中毒肾脏损害发生机制中的作用。方法：经饮水投氟复制氟中毒模型。采用原位末端标记法（TUNEL）测定了慢性氟中毒大鼠肾脏组织细胞凋亡的情况，应用全自动生化分析仪检测大鼠尿液乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、γ－谷胺酰转移酶（γ－GT）、N－乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性。结果：TUNEL检测显示，在慢性氟中毒大鼠肾脏中，可见到明显的NBT／BCIP着染阳性的凋亡细胞，而且这种表达具有选择性，多出现在肾皮髓质交界处。氟中毒大鼠尿液LDH、ALP、γ－GT、NAG的活性变化不明显。投氟组与对照组比较无明显差异。结论：在慢性氟中毒大鼠肾脏细胞凋亡明显，凋亡发生部位与病理改变明显的部位吻合，慢性氟中毒大鼠肾损害过程中很可能有细胞凋亡机制参与。     

氟致离体人肝细胞凋亡及硒的保护作用研究

目的 研究硒、氟对离体人肝细胞周期和凋亡的影响。方法 体外培养的人肝细胞接触氟和（或）硒12h后,用流式细胞仪检测肝细胞凋亡百分率和细胞周期构成比。结果 氟可使肝细胞凋亡百分率明显升高,S期细胞数增加,但G0／G1期和G2／M期细胞数无明显改变;加硒可明显拮抗氟的这种影响。结论 氟对人肝细胞的损害与氟诱导细胞凋亡和改变细胞周期分布有关,一定 量的硒可明显拮抗氟诱导的肝细胞凋亡及其对细胞周期的影响。     

氟对体外骨器官培养长骨细胞周期和细胞凋亡的影响

为了探讨氟对体外骨器官培养长骨细胞周期分布和细胞凋亡的影响，我们采用体外骨器官培养的方法，流式细胞术检测长骨细胞周期分布、ＤＮＡ含量和细胞凋亡。结果发现１．染氟２．５￣５．０μｇ／ｍＬ，对体外培养长骨细胞ＤＮＡ含量和细胞周期分布影响不大。染氟１０．０μｇ／ｍＬ．Ｓ期细胞数增加，但Ｇｏ／Ｇ１期和Ｇ２／Ｍ期细胞无明显改变。染氟２０．０μｇ／ｍＬ，Ｓ期细胞数增加，Ｇ２／Ｍ期细胞数减少，但Ｇ０／Ｇ１期细胞     

重型乙型肝炎肝组织Fas/Fas配体表达与肝细胞凋亡的研究

近年证明，肝细胞凋亡参与乙型和丙型肝炎的发病机制，介导肝细胞凋亡的效应细胞主要是细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ），引发凋亡的途径主要是穿孔素／颗粒酶Ｂ、Ｆａｓ／Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）受体／ＴＮＦα系统［１］；但肝细胞凋亡在重型肝炎病变中的状况研究较少。本研究旨在探讨Ｆａｓ／ＦａｓＬ介导肝细胞凋亡在重型乙型肝炎发病机制中的作用。一、资料与方法研究对象为我科近年收治的病人，试验组为重型乙型肝炎病人２４例，男２１例，女３例，年龄２１～５５岁；对照组为慢性乙型肝炎病人５５例，男４…     

氟对原代培养大鼠海马细胞氧化应激及凋亡的影响

目的观察氟诱导的大鼠原代培养海马细胞氧化应激损伤和凋亡及活性氧在细胞凋亡中的作用。方法采用原代细胞培养的方法,将大鼠海马细胞暴露于20、40、80 mg／L氟化钠中,24 h后检测海马细胞存活率、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)及细胞凋亡。结果与对照组比较,各染氟组细胞存活率降低(9．1％、 12．2％、25．0％),但组间比较差异无统计学意义(F=106．8．P>0．05)。各染氟组MDA(5．06、7．66、 9_82 nmol／mg Pr)明显高于对照组(2．34 nmol／mg Pr),组间比较差异有统计学意义(F=7．151,P<0．05)。氟对海马细胞的损伤呈明显的剂量-效应关系,染氟40、80 mg／L组细胞内ROS和细胞凋亡率高于20 mg／L组和对照组,细胞凋亡率与ROS水平存在明显正相关关系(r=0．913,P<0．05)。结论氟可引起大鼠海马细胞发生氧化应激反应及凋亡,活性氧可能在氟诱导细胞凋亡中起重要作用。     

氟中毒大鼠肝肾细胞凋亡与p53的关系

目的 研究氟中毒大鼠肝、肾细胞凋亡与相关基因p53的关系。方法 用流式细胞术检测氟中毒大鼠及氟加硒大鼠肝、肾细胞凋亡百分率及相关基因p53。结果 氟中毒大鼠组及氟加硒组肝、肾细胞凋亡率明显高于对照组（P＜0.01）且相关基因p53的表达也明显高于对照组（P＜0.01)。并且加硒组肝、肾细胞凋亡率明显低于氟中毒组。结论 氟可以导致细胞凋亡，加硒可保护细胞减少细胞凋亡。p53参与并介导细胞凋亡。     

氟中毒大鼠心脏毒性病变及其可能机制

<正>近年来,氟对心血管系统、免疫系统功能、神经系统的功能影响成为研究重点。心肌细胞凋亡相关诱发因子导致心脏毒性的信号传递通路,可通过激活相关基因来调控心肌细胞的凋亡,引起心脏毒性。本研究通过建立氟中毒模型观察大鼠心脏毒性病变情况,并探讨氟中毒相关心脏毒性机制。1资料与方法1.1材料与方法 Wistar大鼠40只,3~4周龄,雄性,体重在70~110 g之间,购置北京华阜康动物实验     

慢性氟中毒鼠神经元与细胞凋亡相关基因的研究

目的研究慢性氟中毒对神经细胞损伤的作用机理及与细胞凋亡的关系。方法利用RT—PCR方法观察细胞凋亡相关基因B细胞淋巴瘤／白血病-x(Bcl-x)和白细胞介素-1β转换酶(ICE)在慢性氟中毒鼠脑组织中的表达水平。结果慢性氟中毒时脑组织中的Bcl—x表达未受明显影响；ICE则明显高于正常对照组。结论慢性氟中毒所致的神经细胞凋亡可能与激活G蛋白或氧化应激有关。当发生慢性氟中毒时，无明显证据表明Bcl—x参与了此过程，但也不除外Bcl—x在参与慢性氟中毒对神经细胞的损害过程中发挥作用并调节其表达水平达到平衡的可能性；ICE则可能参与了神经细胞发生凋亡的过程，并可能在此过程中起主要作用。     

过量摄氟对大鼠脑组织氧化侵袭与细胞凋亡的影响

目的研究过量摄入氟对大鼠神经系统损伤过程脑细胞氧化应激相关指标和脑细胞周期变化与细胞凋亡率的关系。方法应用饮水加入氟化钠进行大鼠染毒实验,测定大鼠脑细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)产生水平以及脑细胞周期变化及细胞凋亡率。结果过量氟可使脑细胞氧化应激能力发生改变,SOD活力水平投氟实验组与对照组相比差异不明显(P>0.05),在投氟实验组MDA生成与对照组相比差异不明显(P>0.05),慢性氟中毒大鼠GSH-Px活力增高,在低钙投氟组高于低钙对照组差异显著(P<0.05);低钙饲养组脑细胞增殖能力普遍降低,S期细胞比例降低,脑细胞凋亡率高钙投氟组与高钙对照组相比差异不明显(P>0.05),低钙投氟组明显高于低钙对照组差异显著(P<0.001);低钙投氟组大鼠GSH-Px活力增高与脑细胞凋亡率呈正比。结论过量氟所致的大鼠脑细胞增殖能力下降和脑细胞凋亡率增高,与氟神经毒性作用机制有关,低钙营养可加重氟的神经毒性作用;过量氟可引起脑细胞抗氧化酶类发生不同程度的变化,其中抗氧化酶类活性增强可能是脑神经细胞对氧化侵袭的自身保护性生理调节作用的表现;氧化侵袭对神经系统损伤的确切机制尚需进一步研究。     

双苯氟嗪对拟痴呆大鼠和老龄大鼠的脑保护作用研究

目的观察双苯氟嗪对拟痴呆大鼠和老龄大鼠的脑保护作用。方法选用雄性SD大鼠，按体煎随机分为正常对照组、模型对照组、尼莫地平5．0mg／kg刚性对照药组、双苯氟嗪3．0mg／kg组和双举氟嗪10．0mg／kg组。除对照组大鼠腹腔内注射生理盐水外，其他各组均腹腔注射氯化铝致痴呆模型，并分别给予生理盐水、双萃氟嗪或尼莫地平。测定血清中超氧化歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）的含量，并观测脑细胞胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达量；另选用21月龄的老龄大鼠，随机分为模型对照组、尼莫地平5．0mg／kg组和双苯氟嗪5．0mg／kg组，同时选用3月龄成年雄性大鼠作为正常对照组。观察灌胃给予双苯氟嗪对神经细胞内游离钙离子浓度（Ca^2＋）及细胞凋亡百分率的影响。结果双苯氟嗪可以显著升高拟痴呆大鼠血清中SOD、降低血清中MDA及增加海马和皮层两脑区ChAT的表达量，并且降低老龄大鼠海马和皮层两脑区细胞（Ca^2＋）。及细胞凋亡百分率。结论双苯氟嗪对痴呆大鼠具有脑保护作用，其作用机制可能与提高机体抗氧化能力、增强胆碱能神经功能、抑制细胞钙担载及细胞凋亡有关。     

三苯氧胺在肝癌化疗中作用机制的实验研究

目的 研究三苯氧胺在肝癌化疗中的作用效果，并对其作用机制进行初步探讨。方法 通过阿霉素（ADM）浓度梯度递增诱导法，建立人肝癌多药耐药细胞株Hep-3B／ADM。MTT法检测细胞对化学疗法药物的敏感性；流式细胞仪检测细胞表面多药耐药基因（MDRI）表达产物P-170及分析细胞内Rhdaming123（Rh123）相对荧光强度；流式细胞仪及电镜观察TAM对ADM诱导Hep-3B／ADM细胞凋亡的影响。结果 TAM预处理组ADM对Hep-3B／ADM细胞的IC50下降为非预处理组的1／7；TAM（2．5μmol／L）处理前后，Hep-3B／ADM细胞表面P-170表达及细胞内Rh123相对荧光强度均无明显变化；TAM（2．5μmoL／L）可明显增强ADM诱导Hep-3B／ADM细胞凋亡的效果。结论 TAM（2．5μmol／L）具有增强ADM对Hep-3B／ADM细胞的毒性作用，其作用机制与逆转MDR无关，而是增强了ADM诱导耐药细胞凋亡的作用。     

氟致人胎肝细胞氧化应激与细胞凋亡关系的研究

目的：研究氟致人胎肝细胞氧化应激和细胞凋亡之间的关系。方法：体外培养的人胎肝细胞接触不同浓度的氟化钠24h后，检测人胎肝细胞凋亡百分率、细胞周期构成比、脂质过氧化物(LPO)、还原型谷胱甘肽(GSH)和培养液中LPO水平以及乳酸脱氢酶（LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的活性。结果：氟染毒组培养液中LDH和AST活性均显著高于对照组；细胞内和上清液中LPO水平升高，细胞内GSH则明显下降，并且二者均与氟浓度呈现明显的剂量一效应关系；氟可使人胎肝细胞凋亡百分率明显升高，S期细胞数增多。结论：氟可致人胎肝细胞氧化应激，诱导细胞凋亡，一定浓度范围内的氟所诱导的氧化应激与细胞凋亡之间呈现明显的正相关关系。     

病毒性肝炎与肝细胞凋亡

病毒性肝炎与肝细胞凋亡骆抗先，朱幼芙一、Ｆａｓ／ＦａｓＬ与细胞凋亡肝炎病变主要是细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）介导的细胞毒效应，可以基于Ｆａｓ的凋亡或者基于穿孔素的坏死，都可经特异抗原激发［１］。ＣＴＬ介导的两种细胞毒效应是各自独立的：表达Ｆａｓ的靶细胞凋...     

Fas/FasL系统与心肌细胞凋亡

心肌细胞凋亡是许多心血管疾病发生发展的重要机制。Fas／FasL系统作为细胞凋亡的信号传导系统也参与了心肌细胞凋亡。当表达Fas的靶细胞和活性细胞的FasL交联后，启动Fas／FasL死亡信号传导系统，分别激活神经鞘磷脂途径蛋白酶途径和DAxx途径而引起Fas表达阳性的靶细胞凋亡。大量研究表明，Fas／FasL系统参与了急性心肌梗塞、病毒性心肌炎、扩张型心肌病、风湿性心脏病、心律失常、心脏移植排斥反应和心力衰竭等心肌细胞凋亡。因此对Fas／FasL系统某一环节的干预为心血管疾病的防治开辟一个新的涂释。     

脂代谢紊乱与β细胞凋亡

随着对2型糖尿病研究的深入，现已明确β细胞的丢失是2型糖尿病发生的决定因素。因此，保护β细胞，防止其凋亡是防治2型糖尿病之根本。2型糖尿病时，高糖和并行存在的脂代谢紊乱均可导致β细胞的丢失和功能障碍，称为糖脂毒性，因而减弱糖脂毒性毋庸置疑是保护β细胞的关键。近年来，脂质增多促进β细胞凋亡在2型糖尿病发生机制中的作用已引起越来越多的关注，而且不少的研究已显示β细胞内增高的脂质可能从多条途径诱导细胞凋亡，是2型糖尿病β细胞功能障碍和衰竭的重要原因。     

Bcl-xl阻断肿瘤坏死因子α诱导的caspase 8活化及细胞凋亡

目的探讨BCl-xl对肿瘤坏死因子α(TNFα)介导的细胞凋亡信号通路以及细胞凋亡的影响。方法将iκBα负性突变体质粒pmiκB与绿色荧光蛋白(GFP)表达质粒pEGFP-Cl，pmiκB、DBcl-xl／HA与pEGFP-Cl分别共转染HeLa细胞；将pBcl-xl／HA转染核因子κB(NFκB)／p65基因敲除的p65／MEF细胞，并用嘌呤霉素筛选及westernblot鉴定获得稳定表达Bcl-xl的细胞系p65／／Bcl-xlMEF。用TNFα处理HeI。a／miκB、IteLa／miκB／Bcl-xl细胞以及p65／MEF、p65／／Bcl-xlMEF细胞，并在冠微镜下观察细胞形态变化、台盼蓝染色计算死亡细胞以检测各组细胞凋亡情况；采用western blot检测凋亡信号通路中caspase8活化及腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)裂解情况。结果单独转染pmiκB的HeLa细胞，TNFα诱导的细胞凋亡明显，表现为细胞变圆、脱落、死亡，而PBCl-xl／HA与PmiκB共转染的HeLa细胞，TNFα处理后未见细胞凋亡。P65／MEF细胞经TNIrα处理发生凋亡，该作用在TNFα处理后4h即可出现，处理12h后绌胞死亡率为90％，而在表达Bcl-xl的p65／／Bcl-xlMEF细胞，TNFα处理24h也未见细胞凋亡或死亡发生。Westernblot检测表明单独转染pmiκB的HeLa细胞，TNFα诱导了caspase8裂解活化及PARP裂解，而pBcl-xl／HA与pmiκB共转染、表达Bcl-xl的HeLa细胞，TNFα诱导的caspase8裂解活化及PARP裂解被阻断。结论在NFκB被抑制的实验细胞系统，Bcl-xl能阻断TNFα介导的细胞凋亡信号通路以及细胞凋亡，这对于进一步研究TNFα相关疾病发生机制及治疗措施有重要价值。     

NK细胞TRAIL 信号通路在病毒性肝炎发病中的作用研究进展

NK细胞的细胞杀伤及促凋亡作用主要通过胞吐作用释放穿孔素和颗粒酶等毒性物质，导致靶细胞穿孔及其后的Fas CD95/FasL、TNF-R1/TNF和TRAIL-R/TRAIL系统活化，诱导细胞凋亡，其中TRAIL-R /TRAIL途径是近年来研究的热点，因为它们能选择性诱导病毒感染细胞或肿瘤细胞凋亡，而不会对正常组织细胞造成伤害。     

细胞凋亡在肾脏疾病中的研究进展

细胞凋亡（apoptosis）又称程序化细胞死亡（programmed cell death，PCD），是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定，由基因控制的细胞主动死亡过程。细胞内外的凋亡诱导因素通过多种信号转导机制来调控细胞凋亡过程，其中Fas／FasL信号系统是重要的凋亡信号转导系统之一，Fas是细胞表面Ⅰ型跨膜蛋白，Fas配体（Fas ligand，FasL）为Ⅱ型跨膜蛋白，FasL或特异性Fas抗体与Fas相互作用可导致细胞凋亡。大量事实表明，细胞凋亡参与了肾脏正常发育及肾疾病发生等多个过程，在肾脏疾病的发生发展过程中发挥着有益或有害的作用。     

氟对骨髓基质细胞增殖和成骨能力的影响

目的探讨氟对体外培养的大鼠骨髓基质细胞（MSCs）增殖能力与成骨能力的影响。方法体外培养大鼠MSCs。噻唑蓝（MTT）比色法分析不同染氟水平下MSCs的增殖能力；光、电镜下观察不同染氟水平下MSCs成骨转化能力和相应超微结构变化。结果与对照组比较，低水平染氟（0．02mg／L）96h后促进MSCs增殖（P〈0．05）；较高水平染氟（0．05～1．00mg／L）72h即可促进MSCs增殖（P〈0．05或〈0．01）；高水平染氟（10．00、20．00mg／L）对MSCs具有抑制增殖和促细胞凋亡作用（P〈0．01）。较高水平染氟（2．00～20．00mg／L）时MSCs成骨转化受抑（P〈0．01），较低水平染氟（0．01～1．00mg／L）时MSCs成骨转化增强（P〈0．01）。结论低水平染氟促进MSCs增殖。成骨转化能力增强；高水平染氟抑制MSCs增殖，促进细胞凋亡，抑制MSCs成骨转化能力。