壳聚糖温敏凝胶及其在口腔医学中的应用前景

壳聚糖（Chitosan,CS）/甘油磷酸钠（Glycerophosphate salt,GP）温敏凝胶具有在生理体温发生溶胶-凝胶相变的特性,加之良好的生物相容性、制备工艺简单等优点,已经逐渐被应用于生物载药、组织工程等领域。近年来,CS/GP温敏凝胶体系的研究主要表现在对其性能的改进及其在相关医学领域中的应用。本文对CS/GP温敏凝胶体系的研究进展及其在口腔医学领域的应用前景作一综述。     

两种消毒方式对壳聚糖水凝胶温敏性能及模型蛋白体外缓释性能的影响

目的探索两种消毒方式对壳聚糖水凝胶温敏性能及缓释性能的影响,为壳聚糖水凝胶临床应用前消毒方式的选择提供依据。 方法在制备壳聚糖温敏水凝胶前,采用两种方式进行消毒处理。（1）传统组：高压蒸汽消毒壳聚糖-醋酸溶液;（2）改良组：高压蒸汽消毒壳聚糖粉末。检测两组凝胶的成胶时间、旋转粘度;扫描电镜观察表面及截面形貌;傅立叶红外光谱检测特征性吸收峰;采用牛血清白蛋白（BSA）作为模型蛋白,观测体外缓释性能;SDS-PAGE检测缓释后的蛋白完整性。结果采用两独立样本的t检验进行统计。 结果37℃时,传统组成胶时间明显长于改良组（t= 61.677,P= 0.000）;改良组的旋转粘度在37℃时达15 000 mPa.s,传统组37℃时粘度为1560 mPa.s,40℃时上升至11 500 mPa.s;两组凝胶表面致密完整,截面均呈三维立体网状多孔结构,传统组孔隙大于改良组;两实验组与未消毒壳聚糖的吸收光谱基本一致;两组均有良好的缓释性能,改良组缓释性能更佳（t= 61.415,P= 0.000）,且释放出的模型蛋白分子结构完整。 结论采用改良消毒方式的壳聚糖水凝胶成胶时间更短,温敏性能更佳,缓释性能良好,且与传统组一样能保持缓释蛋白结构完整性。     

高温高压对壳聚糖／甘油磷酸钠温敏凝胶释药性能的影响

目的：研究高温高压后的壳聚糖／甘油磷酸钠凝胶温敏、释药性能。方法：观察不同比例的壳聚糖和甘油磷酸钠混合液的凝胶时间、pH值变化。粘度测试比较不同比例壳聚糖／甘油磷酸钠混合液粘度变化。在37℃形成凝胶后,观察该体系作为奥硝唑药物模型载体的释药性能。结果：随着壳聚糖／甘油磷酸钠混合液中甘油磷酸钠的比例增加,溶液pH值增加,在37℃下,壳聚糖／甘油磷酸钠凝胶时间缩短,但当壳聚糖／甘油磷酸比例为2：1、1：1时,溶液不凝胶。粘度实验表明,4种比例（9：1、8：1、7：1、6：1）壳聚糖／甘油磷酸溶液随着时间增加,粘度明显增加,到10 min后粘度基本不变化,9：1比例组粘度最大为（53±0．9）Pa·s。药物释放实验表明,以奥硝唑为释药模型,该凝胶可持续释放200 min以上。结论：改进消毒方法后的壳聚糖／甘油磷酸钠,增加甘油磷酸钠比例可以提高溶液pH值,可在37℃下快速形成凝胶。该凝胶具有温敏性,具有缓慢释放药物能力。     

壳聚糖温敏凝胶负载釉基质蛋白对骨髓基质细胞的作用

目的:探讨在壳聚糖温敏凝胶支架材料中釉基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphate,ALP)活性的影响.方法:合成壳聚糖温敏凝胶并加入适当浓度的EMPs,通过考马斯亮蓝试剂盒检测其对EMPs的缓释作用.用全骨髓培养法获得大鼠BMSCs.含10%胎牛血清的DMEM培养液进行原代培养.含EMPs浓度分别为0、50、100、150μg/mL DMEM培养液培养第3代大鼠BMSCs,MTT法测定各组细胞的增殖活性.MTT法及ALP试剂盒检测大鼠BMSCs在负载100μg/mL EMPs及不负载EMPs的壳聚糖温敏凝胶支架材料中的增殖情况及ALP的活性.采用SPSS11.0软件包对实验数据进行单因素方差分析及两样本t检验.结果:EMPs可在壳聚糖温敏凝胶中持续释放3周以上.DMEM培养液中,50μg/mL EMPs组从实验的第3天开始,显著促进大鼠BMSCs的增殖(P＜0.01).壳聚糖温敏凝胶负载100μg/mL EMPs后.于实验的第3天和第5天明显促进大鼠BMSCs的增殖(P＜0.05)并且在实验的第7天(P＜0.05)和第9天(P＜0.01)显著促进大鼠BMSCsALP水平的提高.结论:壳聚糖温敏凝胶对EMPs具有缓释性,负载EMPs后,可以促进大鼠BMSCs增殖,提高ALP的活性.     

不同组分壳聚糖温敏凝胶材料理化性能评价

目的:评价不同组分壳聚糖温敏凝胶材料的理化性能。方法:先对壳聚糖粉高温高压消毒,然后壳聚糖溶液(0.1mol/L)和β-甘油磷酸钠(β-GP)溶液(1.83 mol/L)分别按照体积比9∶1和7∶1两种配比组分制备壳聚糖温敏凝胶。通过粘度变化、凝胶时间、溶胀率、降解率、微观结构等观察指标比较2种凝胶的性能差异。结果:凝胶时间9∶1组为(6.1±0.68)min,7∶1组为(4.98±0.5)min(P<0.05);初始粘度9∶1组为(9.95±0.40)Paos,7∶1组为(9.90±0.36)Paos(P>0.05),终粘度9∶1组为(50.05±1.06)Paos,7∶1组为(45.25±0.69)Paos(P<0.05);溶胀率9∶1组为(16.6±0.8)%,7∶1组为(16.9±0.7)%(P>0.05);含溶菌酶组的降解率(%)明显高于不含酶组(P<0.05),加酶组和不加酶组7∶1组降解均快于9∶1组(P<0.05)。扫描电镜结果显示9∶1组平均孔径为(1.01±0.62)μm,7∶1组的平均孔径为(0.79±0.44)μm(P>0.05)。结论:9∶1配比的壳聚糖温敏凝胶理化性能优于7∶1比例组。     

石墨烯/壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶的制备及其性能评价

目的:将氧化石墨烯加入壳聚糖/p-甘油磷酸钠温敏凝胶中,制备石墨烯/壳聚糖/β-甘油磷酸钠复合温敏凝胶,表征其基本理化性质并对生物学特性进行初步评价.方法:将氧化石墨烯(graphene oxide,GO)加至壳聚糖/β-甘油磷酸钠(chitosan/β-glycerophosphate,CS/GP)温敏凝胶体系中,根据GO与CS不同的质量分数,制备了1wt％GO/CS/GP和3wt％GO/CS/GP复合温敏凝胶,以CS/GP温敏凝胶为对照,表征了各凝胶成胶时间、化学结构变化、微观结构和吸水率.将小鼠前成骨细胞MC3T3-E1接种于凝胶中,SEM观察细胞接种24h的粘附现象,CCK-8法检测细胞的增殖,并用荧光倒置显微镜观察细胞的生长情况.结果:凝胶的成胶时间随GO含量增加而缩短,CS/GP的平均成胶时间为(9.05±0.21)min,1wt％GO/CS/GP的平均成胶时间为(6.60±0.22)min,3wt％GO/CS/GP平均成胶时间为(4.50±0.18)min;GO和CS可通过酰胺键结合;凝胶均呈现出均一的相互通联的支架结构,1wt％GO/CS/GP复合温敏凝胶具有更大孔径(44.8±4.3μm)和吸水率(527±21％)以及更好的促成骨细胞增殖生长特性.结论:相比于壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶,石墨烯/壳聚糖/β-甘油磷酸钠复合温敏凝胶具有更好的理化性质和生物学特性.     

壳聚糖温敏凝胶膜的制备及其生物活性初步研究

目的：制备壳聚糖/β-甘油磷酸钠（CS/β-GP）温敏凝胶新型可吸收性引导组织再生膜,通过体外细胞培养初步评价其生物相容性。方法：利用（CS/β-GP）体系的温敏相转变特性,合成温敏凝胶膜,并通过FTIR、SEM对膜的结构进行表征。MTT比色法对体外共培养的小鼠成纤维细胞（L929cell）的生长及增殖情况进行初步评价。结果：壳聚糖与β-甘油磷酸钠分子间存在静电作用和化学键结合,最终形成了新的复合生物膜,且具有多孔的表面结构和内部结构。MTT比色法显示与L929细胞体外共培养第3、4、5d,以生物膜为实验组的吸光度（A）值明显高于空白对照组,组间有统计学差异（P〈0.01）。结论：壳聚糖/β-甘油磷酸钠温敏凝胶膜具有多孔结构和良好的生物活性,能促进成纤维细胞的体外增殖,作为一种新型引导组织再膜具有良好的应用前景。     

缓释骨形态发生蛋白-2的壳聚糖温敏凝胶促进牙周组织再生的实验研究

目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白- 2（rhBMP- 2）的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织瓣,然后对空白凝胶组及载药凝胶组区域分别注射先期配制并消毒好的空白凝胶和载药凝胶,术后8周取材行大体及组织学观察。结果载药凝胶组出现明显的牙周组织再生,而空白对照组和空白凝胶组仅有少量的牙周组织再生。载药凝胶组与空白对照组及空白凝胶组均有统计学差异（P<0.05）,空白对照组和空白凝胶组相比,没有统计学差异。结论载rhBMP- 2的壳聚糖温敏凝胶可有效促进牙周组织再生,同时简化手术操作,是一项有潜力的牙周组织再生手段。     

人脐带间充质干细胞在壳聚糖温敏凝胶中增殖和成骨分化的实验研究

目的:研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUCMSCs)在壳聚糖温敏凝胶中的增殖和成骨分化。方法:体外分离培养hUCMSCs。制备壳聚糖温敏凝胶并使用扫描电镜观察其超微结构。用壳聚糖温敏凝胶浸提液培养细胞,MTT法检测细胞增殖情况。使用成骨诱导培养液诱导壳聚糖温敏凝胶中生长的hUCMSCs向成骨方向分化,在诱导过程中进行茜素红法染色钙结节(21 d)。结果:hUCMSCs在壳聚糖温敏凝胶浸提液中的增殖情况与常规培养液中相近,无显著性差异。壳聚糖温敏凝胶中生长的hUCMSCs成骨诱导21d时可见到橘红色的钙结节。结论:hUCMSCs在壳聚糖温敏凝胶中可以正常增殖,经过诱导后可以向成骨方向分化。[关键词] 脐带间充质干细胞 壳聚糖温敏凝胶 增殖 成骨分化     

盐酸多西环素微球温敏凝胶剂的表征及对大鼠牙周炎的药效评价

目的：评价盐酸多西环素（ Doxycycline Hydrochloride,DXY）微球温敏凝胶剂（ DXY-MS-GEL）的体外特性和对大鼠实验性牙周炎的治疗效果。方法：通过胶凝化温度和体外释药曲线评价DXY-MS-GEL的体外特性。采用内毒素隔日注射法建立Wistar大鼠牙周炎动物模型。将大鼠随机分为3组,空白对照组不予处理,实验组给以自制的DXY微球温敏性凝胶,阳性对照组给以盐酸米诺环素（派丽奥）软膏,隔日注射1次×5。末次给药后1 d测定牙龈出血指数、牙周指数、牙周探诊深度、菌斑指数、牙槽骨丧失量,观察组织病理学切片。结果：DXY-MS-GEL在室温下为自由流动的液体,37℃的平均凝胶时间为1.1±0.3 min,可持续释药24 h,体外释药曲线符合Higuchi方程,R2＝0.9948。与空白对照组相比,实验组和阳性对照组各观测指标差异均具有统计学意义（ P＜0.05）,而实验组和阳性对照组之间对比差异无统计学意义。结论：DXY微球温敏性凝胶对牙周炎的局部治疗效果显著。     

3种干燥方法对壳聚糖微球支架物理性能和载药性能的影响

目的 研究干燥方法对壳聚糖微球支架物理性能和载药性能的影响。方法 首先用凝集沉淀法制备湿润的壳聚糖微球,然后选用自然干燥法、慢速冻干法、快速冻干法进行干燥,检测微球的物理性能。最后以牛血清白蛋白（BSA）为模型药物,检测药物在壳聚糖微球中的包封率和释放曲线。结果 与冻干微球比较,自然干燥微球的直径小,孔隙率低,溶胀小,降解慢。冻干温度也能够对支架的性能产生明显影响;与慢速冻干微球比较,快速冻干微球的直径更大,孔隙率更高,比表面积更大。载药实验表明自然干燥微球的包封率最低,释放速度最慢;快速冻干微球的包封率较高,释放速度最快,但存在最明显的突释效应;慢速冻干微球包封率与快速冻干微球类似,释放速度居中。结论 干燥方法会影响支架的物理性能,进一步影响BSA的装载和释放。     

温敏型壳聚糖/甘油磷酸钠缓释胰岛素凝胶系统的制备

目的:初步探讨制备温敏性壳聚糖/甘油磷酸钠载胰岛素凝胶系统.方法:应用壳聚糖与甘油磷酸钠制备具有温敏性的载有胰岛素的凝胶体系,从凝胶体系的pH值、粘度测定、胶凝时间研究不同配比、不同pH值对壳聚糖/甘油磷酸钠(CS/β-GP) 体系凝胶化性能的影响.结果:壳聚糖凝胶在室温(25℃)下呈液态,56% 甘油磷酸钠(β-GP)与3%壳聚糖(CS)在pH值6.8-7.2,37℃下凝胶化时间(GT) 从1h缩短到8-12min,凝胶形态良好,并且在负载胰岛素溶液后C/GP凝胶形态未受影响.结论:一定配比CS/GPS 体系在37℃具有快速凝胶化性能,在加入胰岛素后并未改变其温敏特性,为后续的温敏性壳聚糖/甘油磷酸钠载胰岛素凝胶系统的体外释药实验打下了基础.     

生物型纳米根管封闭剂的生物学性能研究

目的：对磷酸钙骨水泥为原料制备的生物型纳米根管封闭剂进行体外生物学性能研究,为其临床应用提供依据。方法：致敏性实验：依照GB/T16886.10-2005和GB/T16886.12-2005技术标准测定;细胞毒性实验：依照GB/T16886.5-2003技术标准,采用琼脂扩散法测定;鼠伤寒沙门氏杆菌回复突变试验（Ames试验）：依照YY/T0127.10-2001技术标准测定。结果：生物型纳米根管封闭剂无致敏性,不导致染色体畸变,具有轻度细胞毒性。结论：生物型纳米根管封闭剂具有良好的生物学性能。     

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壳聚糖由天然多糖甲壳素经脱乙酰化处理而成,是生物相容性和水解性较好的低聚糖,具有较好的广谱抗菌性。近年来,壳聚糖及其衍生物的抗菌性是医药、保健、食品和化妆品等领域的研究热点,本文就壳聚糖及其衍生物抗菌性能方面研究进行综述。     

重力和粘度因素对标准纸尖吸液性能的影响

目的　研究重力和粘度因素对模拟根管中标准纸尖吸液性能的影响。方法　制作标准纸尖吸液体积与湿润长度关系的标准曲线 ,体外研究重力、液体粘度等因素对模拟根管中标准纸尖湿润长度的影响。结果　标准纸尖吸液体积与湿润长度间有高度相关性 (r2 =0 .996 1) ;纸尖吸取不同粘度液体时的湿润长度差异有显著性意义 (P <0 .0 0 1) ;重力因素不影响纸尖的湿润长度 (P >0 .0 5 )。结论　标准纸尖可用于根管渗出液的定量取样研究 ,纸尖的湿润长度测量不受重力因素的影响 ,但液体的粘度对测量结果有一定影响     

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目的    探讨以壳多糖-胶原凝胶为支架材料,利用口腔黏膜成纤维细胞（oral mucous fibroblast,OMF）在体外构建口腔黏膜人工固有层的可行性。方法    将2 × DMEM培养液、胎牛血清、胶原溶液、壳多糖等按一定比例配置成凝胶溶液,大鼠OMF与上述凝胶溶液迅速混合制成口腔黏膜人工固有层,动态观察细胞生长状况和凝胶收缩情况。结果    成功建立大鼠OMF种子细胞库,原代细胞与传代细胞在形态和生长速度差异无统计学意义。壳多糖-胶原-OMF复合物（FPCCL）体外培养10 d,OMF在支架材料中生长良好,细胞呈长梭形,排列无一定方向。随时间推移,OMF逐渐增多,凝胶颜色变浅,厚度变薄,3 d后发生收缩,7 d后则凝胶人工固有层稳定,无明显收缩。结论    OMF可在壳多糖-胶原凝胶形成的三维空间结构生长并分泌基质,形成类似黏膜固有层的致密结缔组织。壳多糖-胶原凝胶是构建组织工程化口腔黏膜固有层的合适材料。     

The effect of steam sterilization on the properties of set dental gypsum models

The aim of this study was to investigate the viability of autoclave sterilization of set dental gypsum models. The effects of autoclaving on the strength, surface hardness and dimensions of specimens of plaster, stone and diestone were investigated. In addition, sodium succinate was used to minimize any changes produced by autoclaving. It has been shown that dental gypsum casts can be successfully steam sterilized.
The results showed that for fully-dried gypsum products, autoclaving at 132°C for 5 minutes rendered the casts unacceptable for use. Autoclaving at 121°C for 16 minutes had less effect although casts were still not satisfactory, with the main problems being excessive expansion for plaster and significant strength and surface hardness loss for stone and diestone.
The effect of three additional treatment procedures was examined and the least degradation was observed when the casts were soaked in 1 per cent sodium succinate solution and dried prior to autoclaving, then soaked in water immediately after. Using this procedure the averate change in properties for plaster, stone and diestone respectively were: loss of strength 36, 21 and 28 per cent, loss of surface hardness 34, 21 and 33 per cent, and linear expansion 0.05, 0.09 and 0.13 per cent. Further refinement may improve the procedure.