胃癌组织中MMP-9、CD44v6和VEGF的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）、黏附分子CD44拼接变异体v6（CD44v6）和血管内皮生长因子（VEGF）表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测80例胃癌组织及癌旁组织中MMP-9、CD44v6和VEGF。结果胃癌组织中MMP-9、CD44v6和VEGF表达显著高于癌旁组织,且有淋巴结转移者均高于无淋巴结转移者,Ⅲ～Ⅳ期者高于Ⅰ～Ⅱ期（P均〈0.05）;胃癌组织中MMP-9、CD44v6与VEGF的表达呈正相关（r=0.331、0.421,P均〈0.05）。结论胃癌组织中MMP-9、CD44v6、VEGF表达水平明显上调,其表达与胃癌淋巴结转移和临床分期有关;三者在胃癌的发生发展过程中可能起协同作用。     

骨桥蛋白及 CD44 v6在肺腺癌侵袭转移中的作用

目的：探讨骨桥蛋白（ OPN）及其受体CD44v6在肺腺癌侵袭转移中的作用。方法应用免疫组化方法检测129例癌旁组织、肺原位腺癌（AIS）、伏壁样生长为主型腺癌（LPA）患者手术切除标本中OPN、CD44v6的表达情况。检测H358细胞（原位癌细胞系）和A549细胞中OPN、CD44v6蛋白及mRNA的表达,Transwell 试验观察OPN、CD44 v6对H358细胞、A549细胞侵袭力的影响。结果 OPN、CD44 v6在LPA组织中的表达阳性率显著高于AIS及癌旁组织,AIS高于癌旁组织,OPN与CD44v6的表达呈显著正相关（ P＜0．05）。 OPN、CD44v6及OPN mR-NA、CD44v6 mRNA在A549细胞中的表达水平高于H358细胞。 Transwell试验提示OPN对A549细胞的趋化作用高于H358细胞。使用OPN抗体阻断OPN对两种细胞的趋化作用,两种细胞穿过数均减少;阻断CD44 v6受体通道后,OPN对两种细胞的趋化作用明显减弱。结论 OPN-CD44 v6复合体对肺腺癌的侵袭能力具有重要作用,OPN有望成为评估肺腺癌进展及预测肿瘤转移潜能的指标。     

骨桥蛋白及相关肿瘤基因表达与胰腺癌临床病理特征的关系

胰腺癌极易发生浸润、转移，预后极差，5年存活率小于5％^[1]。骨桥蛋白（（）PN）、CD44v6、基质金属蛋白酶（MMP）-2、血管内皮牛长因子（VEGF）与肿瘤的侵袭转移密切相关。我们用免疫组化法检测人胰腺癌中OPN、CD44v6、MMP-2、VEGF的表达状况，探讨它们与胰腺癌临床病理特征的关系，为寻找胰腺癌转移标志物提供线索。     

乳腺癌细胞中E1AF、MMP-2、VEGF的表达及意义

目的探讨乳腺癌发生侵袭和转移的分子机制。方法应用免疫细胞化学技术检测雌激素受体阳性（ER＋）乳腺癌细胞MCF-7和雌激素受体阴性（ER-）乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435s中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、血管内皮生长因子（VEGF）表达,采用RT-PCR法检测细胞株中E1AF mRNA表达。结果 MDA-MB-231中E1AF mNA、MMP-2及VEGF表达水平均明显高于MCF-7和MDA-MB-435s,且E1AF表达与MMP-2、VEGF呈正相关。结论 MMP-2、VEGF与E1AF在肿瘤细胞侵袭和转移过程中发挥重要作用,其机制可能在转录水平调节基因表达,增加肿瘤侵袭性。E1AF可能是乳腺癌侵袭转移的重要因子。     

胃癌组织中COX-2、CD44v6和MMP-9蛋白表达及意义

目的探讨胃癌组织中环氧化酶-2（COX-2）、CD44v6和MMP-9蛋白表达在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化Envision法检测104例胃癌患者癌组织中COX-2、CD44v6和MMP-9蛋白表达,并与28份健康胃黏膜组织比较。结果胃癌组织中COX-2、CD44v6、MMP-9蛋白阳性表达率分别为57．7％（60／104）、59．6％（62／104）和63．5％（66／104）,正常胃组织中均呈低表达或不表达,两者有显著性差异（P〈0．001）;三者表达均与肿瘤浸润深度、临床分期及淋巴结转移呈明显正相关（P〈0．05）,而与患者性别、年龄及肿瘤分化程度无明显相关性;COX-2表达与CD44v6和MMP-9表达呈明显正相关。结论COX-2、CD44v6和MMP-9的过表达可促进胃癌的浸润、转移,三者具有正协同作用;COX-2、CD44v6和MMP-9联合检测可用于判断胃癌生物学行为。     

食管癌中淋巴结转移与VEGF,CD44v6,MMP-2水平变化的相关性

目的研究食管癌患者的癌组织发生淋巴结转移与病变组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),细胞黏附分子(cell adhesion molecule,CAM)变异体v6(CD44v6)及基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的水平的关系.方法 2016-03/2017-09经浙江省长兴县人民医院确诊为食管癌的患者纳入104例,根据良恶性分为食管癌组83例和良性组21例,比较两组患者中VEGF,CD44v6及MMP-2三者的阳性水平,并对不同表达食管癌组织患者的淋巴结是否发生转移进行分析.结果食管癌组VEGF,CD44v6及MMP-2阳性表达率分别为77.11%,73.49%,59.04%,良性组织的阳性表达率分别为14.29%,23.81%,14.29%,三者在食管癌组中的阳性表达情况显著高于良性组,差异具有统计学意义P0.05;VEGF,CD44v6及MMP-2在发生淋巴结转移的食管癌患者中阳性率依次为85.48%,82.26%,66.13%,而未发生淋巴结转移的患者粘膜组织中的阳性率为52.38%,52.38%,38.10%,发生淋巴结转移的食管癌组织标本中三者阳性表达率显著高于未发生转移组织,差异显著P0.05.结论 EGF,CD44v6及MMP-2在食管癌患者癌变组织中的水平与其淋巴结是否发生转移具有一定关系,对食管癌患者的早期正确诊断,治疗以及预后效果评估具有重要意义.     

胃癌组织中CD_（44）v6和VEGF的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中黏附分子CD44拼接变异体v6（CD44v6）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测60例胃癌组织及30例正常胃组织中的CD44v6和VEGF。结果胃癌组织中CD44v6和VEGF表达高于正常胃组织;胃癌组织中CD44v6和VEGF表达与胃癌临床分期、淋巴结转移及浸润深度有关;胃癌组织中CD44v6和VEGF表达呈正相关（r=0.402,P〈0.05）。结论胃癌组织中CD44v6和VEGF呈高表达,二者可能参与了胃癌的发生、发展过程。     

变异型CD44分子和癌细胞的侵袭及转移

变异型CD44（CD44v）对癌细胞侵袭及转移有着密切的关系,本文拟从侵袭、转移癌组织中CD44v的表达情况和CD44v在癌细胞侵袭、转移中的机理两个方面,结合国内外有关研究的结果对CD44v和癌细胞侵袭、转移的关系作进一步综述。     

非小细胞肺癌中MMP-2、CD44V6的表达及其临床意义

目的 探讨细胞黏附因子（CD44V6）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与肺癌浸润、转移和预后的关系。方法 回顾性分析43例术前未进行放、化疗的肺癌患者的切除标本,采用免疫组化SP法检测肺癌组织中的CD44V6和MMP-2的表达。结果 肺鳞癌与肺腺癌中CD44V6的阳性表达率分别为58．33％（14／24）和68．42％（13／19）;MMP-2的阳性表达率分别为54．16％（13／24）和84．21％（16／19）。CD44V6与MMP-2的阳性表达与淋巴结转移、肺癌病理分期以及术后血行转移显著相关（P〈0．05）,CD44V6阳性表达者的3年生存率为25．62％,5年生存率为6．41％;阴性表达者的3年生存率为64．71％,5年生存率为56．82％,两者差异显著（P=0．000）。MMP-2阳性者的3年生存率为18．8％,5年生存率为8．67％;阴性表达者的3年生存率为66．30％,5年生存率为42．66％,两者差异显著（P=0．0067）。CD44V6和MMP-2的阳性表达呈显著性相关（P：0．007）。结论CD44V6和MMP-2对于肺癌的侵袭、淋巴结转移、术后血行转移以及预后有一定作用。     

CO2气腹对结肠癌细胞表面粘附分子表达影响的研究

目的 探讨不同压强持续性CO2气腹对结肠癌细胞表面粘附分子表达的影响.方法 建立体外气腹模型,选用人结肠癌细胞株SW1116,分别在不同压强医用CO2气体下暴露1 h,使用流式细胞技术和实时荧光定量PCR检测粘附分子E-cadherin,ICAM-1,CD44,CD44v6,E-selectin的表达.结果 荧光定量PCR结果显示SW1116经6 mm Hg压强的持续CO2气体处理后,ICAM-1和CD44v6出现表达增高;9 mm Hg及12 mm Hg CO2气体处理后,E-cadherin,CD44和CD44v6表达增高;15 mm Hg CO2气体处理后CD44v6表达增高,与处理前表达水平的差异均有统计学意义（P＜0.05）,上述粘附分子的表达在处理后72 h内均会降至处理前水平（P＞O.05）,或低于处理前水平（P＜0.05）.E-cadherin、CD44v6和ICAM-1随着压强增高,其表达量逐渐降低.结论 不同压强CO2气腹能对肿瘤细胞表面的粘附分子表达产生一过性双向影响,随CO2气腹压强的增高,可抑制粘附分子的表达.     

Expression and correlation of CD44v6, vascular endothelial growth factor, matrix metalloproteinase-2, and matrix metalloproteinase-9 in Krukenberg tumor

AIM: To explore the expression and correlation of CD44v6, vascular endothelial growth factor (VEGF), matrix metalloproteinase (MMP)-2 and matrix metalloproteinase (MMP)-9 in Krukenberg and primary epithelial ovarian carcinoma. METHODS: The expressions of CD44v6, VEGF, MMP-2 and MMP-9 were detected by immunohistochemical method in 20 cases of normal ovarian tissues, 38 cases of Krukenberg tumor and 45 cases of primary epithelial ovarian carcinoma. RESULTS: The expression of CD44v6 (primary epithelial ovarian carcinoma tissue vs normal ovarian tissue: x2 = 4.516, P= 0.034; Krukenberg tumor tissue vs normal ovarian tissue: x2 = 19.537, P= 0.001) and VEGF (primary epithelial ovarian carcinoma tissue vs normal ovarian tissue: P = 0.026; Krukenberg tumor tissue vs normal ovarian tissue: x2 = 22.895, P= 0.001) was significantly higher in primary epithelial ovarian carcinoma tissue and Krukenberg tumor tissue than in normal ovarian tissue. The positive expression rate of MMP-2 and MMP-9 was 0% in the normal ovarian tissue. The positive expression rate of CD44v6 (x2 = 10.398, P= 0.001), VEGF (x2 = 13.149, P= 0.001), MMP-2 (x2= 33.668, P= 0.001) and MMP-9 (x2 = 38.839, P = 0.001) was remarkably higher in Krukenberg tumor than in primary epithelial ovarian carcinoma. The correlation of CD44v6, VEGF, MMP-2, and MMP-9 was observed in primary epithelial ovarian carcinoma and Krukenberg tumor. CONCLUSION: CD44v6, VEGF, MMP-2, and MMP-9 are involved in ovarian carcinoma, gastric cancer and Krukenberg tumor. Detection of CD44v6, VEGF, MMP-2 and MMP-9 may contribute to the diagnosis of ovarian carcinoma, gastric cancer, and Krukenberg tumor.     

明胶酶、CD44v6在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨明胶酶在结直肠癌中的表达及其CD44v6在结直肠癌侵袭转移过程中的关系。方法采用明胶酶谱（gel zymography）和S-P免疫组化对50例结直肠癌癌组织和相应正常组织中的明胶酶、CD44v6进行检测。结果明胶酶在结直肠癌中的表达水平显著高于正常组织（P〈0．05）；明胶酶与结直肠癌的Duke’s分期呈同步的正相关（P〈0．05）；明胶酶在CD44v6强阳性组中表达量升高显著（P〈0．05）。结论明胶酶与结直肠癌的侵袭转移性有着密切的关系，不仅在癌细胞的酶解，而且在癌细胞的黏附、运动过程中有可能发挥着重要作用。     

新辅助化疗后大肠癌患者癌组织中CD44v6、p27的表达及意义

目的探讨新辅助化疗后大肠癌患者癌组织中CD44v6、p27的表达及意义。方法免疫组化法测定42例未化疔（对照组）及44例新辅助化疗后（观察组）大肠癌患者癌组织、癌旁组织和正常组织中CD44v6、p27的表达。结果两组癌组织中p27的表达低于癌旁和正常组织（P〈0．05）。p27表达与肿瘤分化程度密切相关（P〈0．05）。观察组癌组织中p27表达明显高于对照组（P〈0．05）。两组癌组织中CD44v6表达高于癌旁和正常组织（P〈0．05）。CD44v6异常表达与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Duke’s分期密切相关（P〈0．01）。观察组中CD44v6表达显著低于对照组（P〈0.05）。结论新辅助化疗能有效降低大肠癌细胞的侵袭与转移,检测CD44v6和p27蛋白表达水平有助于判断病变性质、复发转移潜能、评估患者预后及术后治疗方案的合理选择。     

过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响

目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建.采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组.显著升高(P0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达CD44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P0.05).结论:CD44v6基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.     

蚯蚓纤溶酶降低胃癌细胞与血管内皮细胞粘附性及CD44v6表达

目的研究蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803的增殖抑制作用以及对胃癌细胞与血管内皮细胞粘附性和粘附分子CD44v6表达的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测蚯蚓纤溶酶对人胃癌细胞株MGC803增殖的影响；体外粘附实验观察蚯蚓纤溶酶对胃癌细胞MGC803与血管内皮细胞ECV304粘附性的影响；流式细胞术观察蚯蚓纤溶酶作用于MGC803细胞后CD44v6蛋白表达的变化；RT—PCR法检测蚯蚓纤溶酶对MGC803细胞CD44v6mRNA表达的影响。结果蚯蚓纤溶酶各用药组（2、4、8uku／ml）对MGc803细胞均有抑制生长作用（P〈0．01），且在一定浓度范围内呈剂量依赖关系。蚯蚓纤溶酶4、8uku／ml作用于MGC803细胞48h后，与对照组相比，胃癌细胞与血管内皮细胞的粘附性明显下降（P〈0．01）。2、4、8uku／ml蚯蚓纤溶酶作用后，CD44v6蛋白表达水平呈剂量依赖性下降，平均荧光强度分别为84．80±2．14、30．69±3．66、21．75±2．25，与对照组相比，差异均有统计学意义（P〈0．05或0．01）。DNA半定量分析表明，各实验组CD44v6 mRNA表达也明显减少（P〈0．01）。结论蚯蚓纤溶酶有抑制胃癌细胞增殖的作用，并可降低胃癌细胞与血管内皮细胞的粘附性、降低胃癌细胞粘附分子CD44v6的表达，提示蚯蚓纤溶酶可能具有潜在抗肿瘤转移作用。     

瘦素、纤连蛋白、基质金属蛋白酶-9对人绒毛细胞滋养细胞侵袭性的影响

目的探讨瘦素、纤连蛋白（FN）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）对人绒毛细胞滋养细胞侵袭性的影响。方法取孕6-10周人工流产妊娠绒毛,分离、培养细胞滋养细胞（CTB）并经光镜、免疫细胞化学鉴定;应用体外培养侵袭模型检测瘦素、FN、MMP-9及瘦素＋FN对CTB侵袭能力的影响。结果瘦素、FN、MMP-9及瘦素＋FN作用后,浸润穿过基底膜的CTB数均显著多于对照组（P均〈0．01）,尤其是瘦素＋FN。结论瘦素、FN、MMP-9能增强CTB的侵袭能力;瘦素与FN有协同作用。     

非小细胞肺癌组织中CD44s、CD44v6、Fas的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌组织中CD44s、CD44v6、Fas的表达及临床意义.方法 采用SP免疫组化法检测CD44s、CD44v6及Fas基因蛋白在58例非小细胞肺癌、18例癌旁正常组织中的表达变化,分析其表达与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移关系.结果 Fas基因蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达低于癌旁肺组织,CD44s和CD44v6在癌旁正常肺组织未见表达;CD44s在鳞癌和腺癌中的表达阳性率分别为83.3％及45.5％,CD44v6,在鳞癌和腺癌的表达阳性率分别为86.1％及40.9％,CD44s、CD44v6在鳞癌中的表达均高于腺癌（P均＜0.05）.Fas、CD44s和CD44v6的表达均与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移相关.结论 非小细胞肺癌通过CD44分子的构型改变,降低Fas表达,逃逸Fas-FasL介导的细胞凋亡.非小细胞肺癌CD44s、CD44v6及Fas蛋白的检测可能为评价肿瘤预后的重要指标,也为非小细胞肺癌的治疗提供新的靶点.     

黏附分子CD44的表达及其糖基化与肝癌转移的相关性

目的 探讨CD44S及其变异体CD44v分子的表达和其糖基化与肝癌细胞侵袭转移的关系. 方法 用免疫组织化学法、量子点、RT-PCR、Western blot、细胞免疫荧光染色、甲基化特异性聚合酶链反应等技术检测转移与非转移性肝癌组织、不同转移潜能人肝癌细胞株中CD44S及其变异体CD44v的定位与表达;并应用多重凝集素印迹法检测这些细胞株中CD44v6的糖基化差异.组间均数比较应用方差分析及t检验,多组间等级资料的比较采用Wilcoxon秩和检验,各组间率的比较采用x2检验.结果 免疫组织化学结果显示,CD44S蛋白定位以细胞质为主; CD44v3、CD44v4/5蛋白定位于细胞膜与细胞质;而CD44v6主要定位于细胞膜.组织芯片结果显示,相对于CD44S及其他CD44v,CD44v6在转移组的表达水平高于非转移组(阳性率为75％与46％),差异具有统计学意义(x2=8.828,P＜0.05);量子点检测(t=2.392,P＜0.05)与血清学检测(t=2.56,P＜0.05)也证实这一结果.Western blot结果显示,CD44v6的表达与肝癌细胞转移潜能呈正相关.此外,在MHCC97L、MHCC97H肝癌细胞中CD44v6基因启动子发生不完全甲基化,而在Hep3B细胞中则发生完全甲基化.而且,相对于Hep3B细胞,MHCC97L及MHCC97H细胞中CD44v6蛋白对朝鲜槐凝集素、黑接骨木凝集素及麦胚凝激素的亲和力较高. 结论 在CD44S及其变异体CD44v中,CD44v6蛋白的高表达与肝癌转移潜能的增强呈正相关;其高表达可能与基因启动子低甲基化有关.此外,CD44v6蛋白唾液酸寡糖链的增加可能与肝癌细胞转移潜能增高有关.     

NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭作用的影响及机制

目的探讨NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制。方法应用NF-κB基因小于扰RNA（siRNA）转染处理人胰腺癌PANC-1细胞,采用Westernblot方法检测NF-KB蛋白水平,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞侵袭能力。收集转染48h的癌细胞,采用包含有96个转移相关基因的芯片检测基因表达情况;根据基因芯片结果,随机抽取3个表达明湿变化的基因采用荧光实时定量PCR（RT—PCR）验证基因芯片结果。结果转染组癌细胞NF-κB蛋白水平下调（P〈0．05）,且与时间和浓度相关。与对照组比较,转染组细胞的穿膜细胞数减少（P〈0．05）,且呈浓度依赖关系。基因芯片检测发现,96个基因中有11个基因表达出现明显变化,其中9个基因明显下调,包括基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-7和血管内皮生长因子（VEGF）,有2个基因出现明显上调。采用荧光RT—PCR方法检测MMP-2、MMP-7、VEGF基因表达,结果也发现这3个基因表达下调,且下调幅度与基因芯片结果一致。结论NF-κB基因siRNA转染可明昆抑制胰腺癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7和VEGF有关。     

CD44s和CD44v6在肺癌组织中的表达及意义

采用免疫组化法检测107例肺癌组织中标准型CD44（CD44s）和变异型CD44（CD44v）6的表达,结果，17例小细胞肺癌（SCLC）中，CD44v6和CD44s均无表达;非小细胞肺癌（NSCLC）中，CD44v6和CD44s在鳞癌中的阳性表达率（81．0％和83．3％）均高于腺癌（39．6％和54．2％），P均〈0．05;无淋巴结转移的NSCLC中，CD44v6阳性表达率（34．0％）低于CD44s（78．0％）。P〈0．05；有淋巴结转移的NSCLC中．CD44v6阳性表达率（90．0％）高于CD44s（55．0％），P〈0．05。NSCLC的CD44v6和CD44s表达与其病理类型、临床分期、肿瘤分级及淋巴结转移均有关（P均〈0．05）。认为CD44v6和CD44s可以作为鉴别SCLC与NSCLC及判断肺癌病理类型、临床分期、肿瘤分级及淋巴结转移的参考指标。