褪黑素对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物及其受体表达的影响

目的研究褪黑素(MT)对糖尿病大鼠视网膜中糖基化终产物(AGE)和其受体(RAGE)表达的影响。方法清洁级雄性Wistar大鼠80只,体重180~200 g,随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组。模型对照组、低剂量MT组和高剂量MT组给予高脂高糖饮食配合链尿佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型。造模成功后,低剂量(10 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))和高剂量(20 mg·kg~(-1)体重·d~(-1))MT灌胃16 w。HE染色观察大鼠视网膜病理学改变,免疫组化(SABC)法检测各组大鼠视网膜中AGE和RAGE表达的变化。结果 16 w后,HE染色观察,低剂量和高剂量MT组视网膜病理改变程度均较模型对照组轻。与模型对照组比较,免疫组化法检测低剂量和高剂量MT组AGE和RAGE蛋白阳性表达量明显降低(P0.05)。结论 MT可改善糖尿病大鼠视网膜形态变化,并可下调AGE和RAGE在糖尿病大鼠视网膜中的表达。     

糖尿病大鼠阴茎组织糖基化终产物含量的变化和糖基化终产物受体的表达情况

目的研究糖尿病阴茎组织糖基化终产物(AGEs)含量的变化和糖基化终产物受体(RAGE)的表达情况。方法用葡萄糖和血红蛋白(Hb)在体外孵育形成Hb-AGEs,免疫新西兰兔,制备AGEs抗血清,建立竞争性ELISA法,测定大鼠阴茎组织AGEs含量。应用RT-PCR研究RAGEmRNA表达。结果各组糖尿病大鼠未经治疗时阴茎组织AGEs水平均较对照(NC)组明显升高(P<0.01),8周时糖尿病用胰岛素治疗(DMI)组及糖尿病用胰岛素和二氨基酚嗪(DAP)治疗(DMID)组的AGEs水平较糖尿病未治疗(DM)组降低(P<0.05～0.01),至16周DMID组上述指标较DMI组明显降低(P<0.01)。RAGEmRNA在DM组大鼠阴茎组织的表达明显高于NC组(P<0.01)。结论糖尿病大鼠阴茎组织AGEs水平明显升高,RAGEmRNA高表达,胰岛素和DAP治疗可降低AGEs水平。     

晚期糖基化终产物受体与疾病

晚期糖基化终产物受体(RAGE)是晚期糖基化终产物(AGEs)的一种特征性细胞表面受体，为免疫球蛋白超家族成员，活化后可引起细胞内氧化应激，调节蛋白激酶和核因子的活性。已知RAGE是多配体受体，在糖尿病并发症、神经系统疾病、透析相关疾病、心血管疾病中起了重要作用，晚近还发现其可能介导了肿瘤的生长、浸润和转移。     

局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体的动态表达

目的 探讨局灶性脑缺血大鼠海马Nogo-A受体(Nogo-recepter,NgR)的动态表达.方法 电凝右侧大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血模型,免疫组织化学染色检测脑缺血后不同时间点缺血侧海马CA1、CA2和CA3区NgR表达.结果 缺血侧海马CA1和CA2区在脑缺血后第1天NgR表达上调,CA3区在第2天表达上调;第5天CA1、CA2和CA3区NgR表达均降至最低;第28天CA1、CA2和CA3区NgR表达再次上调.结论 缺血侧海马NgR表达在不同区域呈现不同的变化特点,但总体变化趋势呈现出“两峰一谷”的现象,提示NgR在脑缺血后不同时期可能具备不同的功能.     

局灶脑缺血大鼠脑源性神经营养因子及其受体的表达

目的：探讨脑缺血损伤与脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体TrkB之间的关系。方法：用线栓法制备大鼠脑缺血模型，采用免疫组织化学方法及图像分析测定不同缺血时间额叶和顶叶BDNF及TrkB阳性神经元数目。结果：与假手术组相比，在额叶BDNF及TrkB阳性神经元数目于缺血开始增加（P＜0．05），缺血3d达到高峰（P＜0．001），缺血7d降至正常水平（P＞0．05）；在顶叶BDNF及TrkB阳性神经元数目于整个缺血过程均明显增加（P＜0．001）。结论：脑缺血损伤后，BDNF和TrkB表达同时增强，可能对脑缺血损伤有保护作用。     

糖尿病骨质疏松大鼠AGEs的表达及其与TGF-β1的相关性

目的探讨糖尿病骨质疏松大鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)的表达情况及其与组织生长因子(TGF)-β1的相关性。方法以Sprague-Dawley(SD)大鼠作为实验材料,在实验前大鼠适应性喂养1 w,然后将其随机分为正常对照组(n=12)和糖尿病组(n=12),其中糖尿病组大鼠通过腹腔内注射STZ诱导建立糖尿病骨质疏松动物模型;测定两组大鼠血清中AGEs和TGF-β1的含量。结果糖尿病组大鼠造模后,血清AGEs含量为(5.81±1.20)U/ml,对照组大鼠血清AGEs含量为(1.28±3.37)U/ml,两组比较差异具有统计学意义(t=6.57,P<0.05)。正常对照组大鼠骨组织TGF-β1蛋白表达强且广泛,糖尿病组的TGF-β1表达均散而且淡染,而且糖尿病组的TGF-β1蛋白表达染色平均光密度明显低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。血清AGEs与TGF-β1呈显著负相关,相关系数为-0.693(P<0.05)。结论糖尿病大鼠血清AGEs含量较对照组明显升高,而且与TGF-β1呈显著负相关,这表明通过抑制AGEs而引起TGF-β1的过表达在糖尿病中起到骨保护的作用。     

糖基化终产物及其受体在糖尿病血管并发症中的作用

高血糖记忆现象可能与糖尿病患者体内高水平的糖基化终产物（AGEs）有关,现就AGEs及其晚期糖基化终末产物受体（RAGE）在糖尿病血管并发症中的作用综述如下。     

厄贝沙坦灌服对早期糖尿病肾病大鼠血清、肾组织AGEs表达水平及肾功能的影响

目的观察厄贝沙坦对早期糖尿病肾病(DN)大鼠血清、肾组织终末糖基化产物(AGEs)和肾功能的影响,并探讨其意义。方法应用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立大鼠DN模型,将其随机分为模型组和厄贝沙坦组各16只,厄贝沙坦组预厄贝沙坦50 mg/(kg.d)灌服,连续8周。另设正常对照组(9只大鼠)。8周后收集各组大鼠24 h尿液,测定24 h尿量、尿蛋白。大鼠麻醉后股静脉采血,分离血清,测定糖化血红蛋白(GHb)、血尿素氮(BUN)及内生肌酐清除率(Ccr)。用考马斯亮蓝法检测血清及肾组织AGEs。结果模型组24 h尿蛋白定量、GHb、BUN、Ccr均明显高于正常对照组(P均<0.01),厄贝沙坦组24 h尿蛋白定量、GHb、BUN、Ccr均明显低于模型组(P均<0.05)。模型组大鼠血清及肾组织AGEs均明显高于正常对照组(P均<0.01),厄贝沙坦组大鼠血清及肾组织AGEs均明显低于模型组(P均<0.05)。模型组和厄贝沙坦组大鼠肾组织AGEs与24 h尿蛋白定量、GHb、BNU呈正相关(r分别为0.781、0.753、0.820,P均<0.01),与Ccr呈负相关(r为-0.665,P<0.01)。结论厄贝沙坦可以减少AGEs的生成,抑制AGEs在肾脏的聚集,改善肾功能,延缓DN的发展。     

晚期糖基化终产物受体及其基因多态性与免疫相关性疾病关系研究进展

晚期糖基化终产物(advanced glycation end product,AGE)是指蛋白质、核酸、脂质等大分子物质的游离氨基端在无酶参与条件下,在生理环境中,自发与葡萄糖或其他还原糖的醛基或酮基反应生成稳定、不可逆的共价化合物。AGE受体(RAGE)是AGE的信号转导受体,是细胞表面免疫球蛋白超家族中的一种多配体受体,在多种细胞中表达。     

晚期糖基化终产物受体在肝细胞癌患者中的表达

目的 研究晚期糖基化终产物受体(RAGE)在原发性肝细胞癌(PHC)中的表达.方法 收集10例PHC患者的肝癌组织、癌旁组织、血清及正常人的血清;用RT-PCR及Western blot分别检测组织中RAGE基因及蛋白的表达;用ELISA检测血清RAGE表达,同时用化学发光法检测血清中甲胎蛋白(AFP)表达.结果 RA...     

2型糖尿病对急性ST段抬高型心肌梗死患者血清可溶性晚期糖基化终产物受体水平的影响

目的 观察2型糖尿病(T2DM)伴急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平的变化。方法 选择60例STEMI患者,其中伴T2DM者为Ⅰ组,无糖尿病者为Ⅱ组,每组30例;并选取30例T2DM无并发症者为Ⅲ组;选取30例健康体检者为Ⅳ组。均测定血清sRAGE及心肌肌钙蛋白(cTNI)水平。结果 sRAGE_Ⅰ组为(1149.0±188.6)ng/L,sRAGE_Ⅱ组为(926.6±165.4)ng/L,sRAGE_Ⅲ组为(509.4±78.9)ng/L,sRAGE_Ⅳ组为(696.8±101.8)ng/L,差异有统计学意义(P=0.000);sRAGE曲线下面积(AUC_sRAGE)为0.967±0.014(P=0.000,95%CI：0.940~0.994), AUC _cTNI为0.875(P=0.000,95%CI：0.807~0.944);sRAGE截断点取761.550 ng/L时,灵敏度(Se)为91.7%,特异度(Sp)为83.0%,约登指数(YI)为83.4%;cTNI截断点取0.060 μg/L时,Se为76.7%,Sp为98.3%,YI为75.0%。结论 急性ST段抬高型心肌梗死伴2型糖尿病患者血清sRAGE水平增高,sRAGE对急性ST段抬高型心肌梗死可能有早期诊断价值。     

晚期糖化终产物受体与糖尿病慢性并发症

晚期糖化终产物（ＡＧＥ）对糖尿病慢性并发症（ＤＣＣ）的发生有重要作用。ＡＧＥ和其受体（ＲＡＧＥ）的结合是ＡＧＥ引起ＤＣＣ的主要和关键途径。ＲＡＧＥ的致病机理包括：ＡＧＥ配体的结合、内吞、降解；引起氧化应激；白细胞趋化；产生细胞因子；受体调节；细胞的增殖和基质增生。ＡＧＥ的形成及其与ＲＡＧＥ结合后产生的效应可能是ＤＣＣ、衰老等的共同通路。目前正在研究可溶性ＲＡＧＥ（ｓＲＡＧＥ）与抗ＲＡＧＥ抗体在ＤＣＣ防治中的作用。     

C反应蛋白增加人内皮细胞糖基化终产物受体表达

目的 探讨C反应蛋白(CRP)及其单体(mCRP)对人脐静脉内皮细胞晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白表达及mRNA的影响.方法 将人脐静脉内皮细胞用不同浓度(5、25、50、100 μg/mL) 的CRP孵育24 h及同一浓度(50 μg/mL)CRP不同时间孵育0、6、12 、24 、48 h,采用流式细胞仪及RT-PCR方法检测RAGE蛋白及mRNA的表达水平.分析50 μg/mL CRP和mCRP孵育0 、6、24 h后对RAGE 蛋白表达的影响.结果 (1) 与对照组比较,5 μg/mL的CRP培养内皮细胞24 h显著增高RAGE蛋白的表达(175.2%±8.1%,P＜0.05),50 μg/mL时达到顶峰(527.3%±5.8%,P＜0.01);50 μg/mL CRP孵育不同时间,RAGE蛋白的表达从6h明显增高(179.8% ± 29.1%,P＜0.05 ).(2) 与对照组比较,5 μg/mL CRP即可升高RAGE的mRNA表达(135.4%±11.1%,P＜0.05),并在50 μg/mL时达到峰值(186.6%±29.0%,P＜0.05);6 h时可以检测到RAGE mRNA的升高(134.3%±22.8%,P＜0.05),在12 h为最高(214.2%±33.1%,P＜0.05).(3)mCRP也会升高RAGE蛋白表达,与CRP组没有差别(P＞0.05). 结论 C反应蛋白以时间及剂量依赖的方式促进内皮细胞RAGE蛋白及mRNA的表达.CRP与其单体(mCRP)作用相似.     

C反应蛋白增加人内皮细胞糖基化终产物受体表达

目的探讨C反应蛋白(CRP)及其单体(mCRP)对人脐静脉内皮细胞晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白表达及mRNA的影响。方法将人脐静脉内皮细胞用不同浓度(5、25、50、100μg/mL)的CRP孵育24h及同一浓度(50μg/mL)CRP不同时间孵育0、6、12、24、48h,采用流式细胞仪及RT-PCR方法检测RAGE蛋白及mRNA的表达水平。分析50μg/mLCRP和mCRP孵育0、6、24h后对RAGE蛋白表达的影响。结果(1)与对照组比较,5μg/mL的CRP培养内皮细胞24h显著增高RAGE蛋白的表达(175.2%±8.1%,P<0.05),50μg/mL时达到顶峰(527.3%±5.8%,P<0.01);50μg/mLCRP孵育不同时间,RAGE蛋白的表达从6h明显增高(179.8%±29.1%,P<0.05)。(2)与对照组比较,5μg/mLCRP即可升高RAGE的mRNA表达(135.4%±11.1%,P<0.05),并在50μg/mL时达到峰值(186.6%±29.0%,P<0.05);6h时可以检测到RAGE mRNA的升高(134.3%±22.8%,P<0.05),在12h为最高(214.2%±33.1%,P<0.05)。(3)mCRP也会升高RAGE蛋白表达,与CRP组没有差别(P>0.05)。结论C反应蛋白以时间及剂量依赖的方式促进内皮细胞RAGE蛋白及mRNA的表达。CRP与其单体(mCRP)作用相似。     

大鼠局灶性脑缺血Activin A及其受体ActRⅡA表达变化及意义

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血激活素A(Act A)及其受体ⅡA(ActRⅡ)的表达变化规律及意义.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,采用光镜、免疫组化方法检测大鼠局灶性脑缺血后梗死体积、病理变化,免疫组化染色观察Act A、ActRⅡA免疫阳性表达. 结果正常组织有极低水平的Act A、ActRⅡA表达,免疫组化显示缺血3 h后在周边区Act A、ActRⅡA阳性细胞数量显著高于假手术组(P<0.05),并随缺血时间延长而逐渐增高,于24 h达高峰.结论 局灶脑缺血损伤可诱导内源性神经元Act A高表达,并可能通过特异性跨膜信号受体ActRⅡA发挥靶源性作用.     

AGEs与糖尿病肾病

糖尿病肾病（DN）目前提出的有氧化应激学说、RAS学说等。大量研究表明高级糖基化终产物（AGEs）在DN的发生发展过程中起了重要作用。现将近年来关于AGEs与糖尿病肾病的研究作一综述。     

sRAGE胞外段—IgG Fc融合蛋白对大鼠糖尿病肾病的作用

目的探讨可溶性人晚期糖基化终末产物受体胞外段—IgG Fc（sRAGE-IgG Fc）融合蛋白对糖尿病（DM）大鼠的肾脏保护作用。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病（DN）组、洛汀新组、sRAGE-IgGFc 4 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 6 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 9 mg/kg组各10只。以左肾切除、高糖、高脂饲养及注射链脲佐菌素方法 ,建立DN模型。检测各组非空腹血糖（FPG）、胰岛素（INS）、血脂、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAER）等,观察其肾组织变化。结果与DN组比较,sRAGE-IgG Fc用药组、洛汀新组的Scr、BUN、Ccr、UAER等指标均明显降低,肾脏病变不同程度地减轻（P均〈0.01）;除正常对照组外,其他组间FPG、INS、血脂改变无统计学意义（P均〉0.05）。说明sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏保护作用具有剂量依赖性。结论 sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏有明显保护作用,其功能与洛丁新相当。     

糖尿病冠状动脉粥样硬化与外周血单个核细胞糖基化终产物受体表达的关系及他汀类药物对其影响的研究

目的观察糖尿病冠状动脉粥样硬化程度与外周血单个核细胞(PBMC)上糖基化终产物受体(RAGE)的相关性,以及他汀类药物对其的影响。方法选择行冠状动脉造影患者188例,采用RT-PCR和Western blot检测PBMC上RAGE的表达,根据糖代谢状态和他汀类药物使用情况进行分组后,与冠状动脉的病变支数和Gensini积分行相关性分析。结果与常规组比较,他汀组PBMC上RAGE mRNA表达量、RAGE蛋白水平、冠状动脉病变支数及Gensini积分均降低,差异有统计学意义。常规组中,糖尿病患者PBMC上RAGE mRNA表达量和RAGE蛋白的水平高于非糖尿病患者(P=0.020,P=0.000)。回归分析结果表明,PBMC上RAGE mRNA表达量是冠状动脉多支病变和严重程度的独立危险因素。结论 PBMC上RAGE的表达与糖尿病冠状动脉粥样硬化密切相关,而他汀类药物可能通过下调RAGE的表达而改善冠状动脉粥样硬化。     

血管内皮细胞生长因子在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的表达

糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后各时间点血管内皮细胞生长因子在缺血中心区、半暗带区神经元和微血管的表达均明显低于非糖尿病大鼠。