595nm Vbeam激光对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：观察595nmVbeam激光照射对增生性瘢痕动物模型伤口愈合中成纤维细胞增殖的抑制作用。 方法：实验于2004-10／2005—06在哈尔滨医科大学附属第二医院激光美容中心完成。成年大耳白兔20只，建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型，上皮化后切取一组瘢痕8处，然后将瘢痕随机分为激光治疗组和对照组，激光治疗组在创面上皮化后按一定参数进行激光照射，开始时每周照射1次，1个月后改为每两周照射1次，共两个月。对照组不进行治疗。在上皮化后1，2，4，6，8周分别切除两组增生性瘢痕各8处，每次取材前用游标卡尺测量瘢痕厚度，对切取组织进行苏木精一伊红和Masson染色，并对上皮化后4周组织进行电镜观察，对上皮化和上皮化后4周组织进行增殖细胞核抗原蛋白测定，对比研究在瘢痕形成过程中595nmVbeam激光照射对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的影响，观察成纤维细胞超微结构的改变，检测增殖细胞核抗原蛋白表达变化。 结果：实验大耳白兔20只全部进入结果分析。兔耳增生性瘢痕经595nmVbeam激光照射后，按不同时间段取材与对照组比较，①瘢痕厚度明显变薄：创面上皮化后即出现增生块高出于皮面，且不断增厚，在上皮化后4周时最高，以后逐渐下降。激光照射（即上皮化后）2，4，6周后激光治疗组瘢痕增生厚度显著小于对照组[激光治疗组：（1．95&;#177;0．08），（2．16&;#177;0．09），（1．53&;#177;0．08）mm；对照组：（2．04&;#177;0．09），（2．37&;#177;0．11），（1．68&;#177;0．09）mm，P〈0．05]。②苏木精-伊红染色显示不同时间取材的兔耳增生性瘢痕组织对照组真皮层明显增厚，为周围正常真皮厚度的三四倍。而激光治疗组真皮层较对照组变薄。Masson染色显示瘢痕胶原纤维呈蓝色，对照组可见蓝染较深的胶原纤维，外形粗大，排列杂乱无章。而经激光照射的瘢痕虽然也可见蓝染的胶原纤维，但与对照组比较蓝染变浅且纤细，胶原排列也趋于一致。③高倍镜下成纤维细胞计数在上皮化后随时间逐渐增多，在上皮化后4周时达到高峰，以后又下降，但在上皮化后1，2，4，6，8周激光治疗组成纤维细胞数量与对照组比较未见明显减少（P〉0．05）。④透射电镜观察显示经595nmVbeam激光照射4周后成纤维细胞核变小、畸变，胞质中细胞器减少，细胞功能不活跃，线粒体空泡变性，细胞周围的胶原呈溶解状态。⑤增殖细胞核抗原蛋白表达激光治疗组较对照组明显减弱（增殖细胞核抗原阳性细胞反应率上皮化后为18．33％，上皮化后4周，激光治疗组为41．93％，对照组为64．26％，P〈0．05）。 结论：595nmVbeam激光照射可抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞的增殖过程，应用595nmVbeam激光预防和治疗瘢痕可行。     

缺氧内皮细胞培养液对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

目的：观察缺氧条件下脐静脉内皮细胞培养液对增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)的作用。方法：电镜观察细胞形态，流式细胞仪测定细胞周期，同位素放射测定。H胸腺嘧啶核苷(^3H—TdR)摄取量。结果：单纯缺氧可使HSF G0／G1期数目增多，^3H-TdR摄取量降低；缺氧的脐静脉内皮细胞培养液能促使HSF从G0／G1期进入S期，^3H—TdR含量增高。结论：瘢痕形成过程中缺氧的内皮细胞能分泌某些活性物质促进瘢痕成纤维细胞增殖。     

辣椒素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力和胶原合成的影响

目的：探讨辣椒素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力和胶原合成的影响，以期为辣椒素在瘢痕防治的临床应用方面提供实验依据。方法：取增生性瘢痕10例，采用组织块培养法获得原代成纤维细胞。选用4代细胞为实验模型，将辣椒素(2～100mg／L)加入细胞培养体系中进行干预并与对照组比较，用^3H-TdR和^3H-脯氨酸参入法分别检测成纤维细胞增殖能力和胶原合成水平的变化。结果：辣椒素对成纤维细胞的作用表现为剂量和时间依赖性。高含量的辣椒素(&;gt;50mg／L)对成纤维细胞有直接的损伤作用。作用24h后可导致细胞死亡；2和10mg／L低含量的辣椒素在不杀伤细胞的同时，能够显著抑制增生性瘢痕成纤维细胞^3H-TdR和^3H-脯氨酸参入，仅为未用药组的50％和30％。结论：辣椒素可以导致培养的增生性成纤维细胞功能发生明显改变，细胞增殖能力和胶原合成能力受到显著抑制。结合同期临床观察表明，辣椒素在瘢痕防治的临床应用方面具有潜在的价值。     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK/NF-kB通路的影响

目的:观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK/NF-kB信号通路的影响.方法:培养增生性瘢痕成纤维细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、[3H]-TdR掺入率测定不同浓度Tet对细胞增殖的抑制作用;免疫沉淀法纯化蛋白并ERK<,1/2>试剂盒测定ERK活性;Western-blot测定P-ERK<,1/2>、NF-kB(p65)及NF-kB抑制物(I-kBα)的表达.结果:Tet作用下,细胞胞体收缩、变圆,间隙增宽,药物浓度高时,细胞碎裂、浮起.MTT实验、[3H]-TdR掺入率均显示Tet明显抑制细胞增殖,Western-blot显示Tet明显抑制p-ERK<,1/2>及NF-kB(p65)表达及增强I-KBα表达.结论:Tet可抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖,其途径与下调ERK/NF-kB信号通路有关.     

不同浓度富硒温泉水对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

背景:临床研究证实,富硒温泉水对增生性瘢痕有明显的抑制作用。目的:观察富硒温泉水对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法:组织块法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取第3~5代细胞,用含10%,20%,30%富硒温泉水及自来水和蒸馏水的培养基培养48h,测细胞增殖情况。结果与结论:富硒温泉水培养的人增生性瘢痕成纤维细胞数量减少,突起不同程度的变短或者缺失,细胞质及胞核浓缩。不同浓度的富硒温泉水、自来水、蒸馏水均对成纤维细胞的增殖有抑制作用,以富硒温泉水培养基的抑制作用最明显(P<0.05),且随浓度的升高,抑制率增大。说明富硒温泉水可以剂量依赖性地抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。     

辣椒素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力和胶原合成的影响

目的探讨辣椒素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖能力和胶原合成的影响,以期为辣椒素在瘢痕防治的临床应用方面提供实验依据.方法取增生性瘢痕10例,采用组织块培养法获得原代成纤维细胞,选用4代细胞为实验模型,将辣椒素(2～100 mg/L)加入细胞培养体系中进行干预并与对照组比较,用3H-TdR和3H-脯氨酸参入法分别检测成纤维细胞增殖能力和胶原合成水平的变化.结果辣椒素对成纤维细胞的作用表现为剂量和时间依赖性.高含量的辣椒素(＞50 mg/L)对成纤维细胞有直接的损伤作用,作用24 h后可导致细胞死亡;2和10 mg/L低含量的辣椒素在不杀伤细胞的同时,能够显著抑制增生性瘢痕成纤维细胞3H-TdR和3H-脯氨酸参入,仅为未用药组的50%和30%.结论辣椒素可以导致培养的增生性成纤维细胞功能发生明显改变,细胞增殖能力和胶原合成能力受到显著抑制.结合同期临床观察表明,辣椒素在瘢痕防治的临床应用方面具有潜在的价值.     

不同浓度富硒温泉水对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响

背景：临床研究证实,富硒温泉水对增生性瘢痕有明显的抑制作用。目的：观察富硒温泉水对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法：组织块法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取第3~5代细胞,用含10%,20%,30%富硒温泉水及自来水和蒸馏水的培养基培养48h,测细胞增殖情况。结果与结论：富硒温泉水培养的人增生性瘢痕成纤维细胞数量减少,突起不同程度的变短或者缺失,细胞质及胞核浓缩。不同浓度的富硒温泉水、自来水、蒸馏水均对成纤维细胞的增殖有抑制作用,以富硒温泉水培养基的抑制作用最明显（P〈0.05）,且随浓度的升高,抑制率增大。说明富硒温泉水可以剂量依赖性地抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖。     

粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERK/NF-kB通路的影响

目的：观察粉防己碱（tetrandrine,Tet）对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及ERIC／NF—κB号通路的影响。方法：培养增生性瘢痕成纤维细胞。四甲基偶氮唑蓝（MTY）比色法、[^3H]-TdR掺入率测定不同浓度Tet对细胞增殖的抑制作用；免疫沉淀法纯化蛋白并ERK1/2试剂盒测定ERK活性；Western-blot测定p-ERK1／2、NF-κBp65）及NF—κB制物（I-κBα）的表达。结果：Tet作用下，细胞胞体收缩、变圆，间隙增宽，药物浓度高时，细胞碎裂、浮起。MTT实验、[^3H]-TdR掺入率均显示Tet明显抑制细胞增殖，Western-blot显示Tet明显抑制p-ERK1／2及NF-κB（p65）表达及增强I-κB表达。结论：Tet可抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖，其途径与下调ERK／NF-κB号通路有关。[著者文摘]     

三氧化二砷对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及细胞外基质代谢的影响

[目的]探讨三氧化二砷(ATO)对增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)增殖及细胞外基质代谢的影响.[方法]0 μmol/L(对照组)、2 μmol/L、4 μmol/L、8 μmol/L的ATO作用HSF 24、48、72 h后,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,酶联免疫吸附(ELISA)法检测Ⅰ型胶原蛋白(CoLⅠ)和CoL Ⅲ含量,western blot检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-13及基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达.[结果]与对照组比较,2、4、8 μmol/L的 ATO显著降低HSF细胞活力(P<0.01),提高细胞早期凋亡率及晚期凋亡率,使细胞周期阻滞在G1期(P<0.01),降低细胞中CoLⅠ、CoL Ⅲ含量(P<0.01),下调TIMP-1表达,上调MMP-1,MMP-13表达(P<0.01);与2 μmol/L 比较,4、8 μmol/L的ATO能显著显著降低HSF细胞活力(P<0.01),提高细胞早期凋亡率及晚期凋亡率,使细胞周期阻滞在G1期(P<0.01),降低细胞中CoLⅠ、CoL Ⅲ含量(P<0.01),下调TIMP-1表达(P<0.01),上调MMP1及MMP13表达(P<0.01);与4 μmol/L 比较, 8 μmol/L的ATO能显著降低HSF细胞活力(P<0.01),提高细胞早期凋亡率及晚期凋亡率,使细胞周期阻滞在G1期(P<0.01),降低细胞中CoLⅠ、CoLⅢ含量(P<0.01),下调TIMP-1表达(P<0.01),上调MMP1及MMP13表达(P<0.01).[结论]ATO能显著的抑制HSF增殖及细胞外基质合成,促进细胞外基质降解.     

苦参碱对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增生活性抑制作用

目的 研究苦参碱（matrine,Mat)对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性的影响。方法 利用兔耳腹侧面增生性瘢痕模型，采取免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原的表达（proliferation cell nuclear antigen,PCNA)及嗜银核仁组织区染色法（AgNORs)统计NORs颗粒数，对比研究苦参碱在治疗兔耳增生性瘢痕过程中对纤维细胞增殖活性的影响。结果 局部注射苦参碱后，兔耳膜侧面增生性瘢痕中的成纤维细胞增生活性受到明显抑制，PCNA表达明显减弱，AgNORs记数明显减少，用药12周后对照组／苦参碱组PCNA标记指数和AgNORs分别为0．87／0．35，2．31／1．07（P＜0．05）。结论 苦参碱明显抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增生活性，对兔耳用腹侧面增生性瘢痕有明显的治疗作用。     

595nm脉冲染料激光治疗皮肤血管性疾病研究进展

脉冲染料激光(Pulsed dye laser,PDL)是基于选择性光热作用原理设计的液体激光器,其以氧合血红蛋白为靶组织,是国际上治疗血管性皮肤疾病的一线方法 .595nm波长是脉冲染料激光最常用的波长之一,具备长脉宽及表皮冷却技术的595nm脉冲染料激光目前在鲜红斑痣、浅表性血管瘤、毛细血管扩张等皮肤血管性疾病的激...     

羟基喜树碱与人病理性瘢痕成纤维细胞的增殖

背景:课题组前期实验表明病理性瘢痕成纤维细胞中拓扑异构酶Ⅰ存在高表达,实验以此设想作为拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的羟基喜树碱能否抑制体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞的增殖?目的:探讨羟基喜树碱对人病理性瘢痕成纤维细胞增殖的影响.方法:体外培养人病理性瘢痕成纤维细胞.选取羟基喜树碱2～1 000 μg/L共10个药物质量浓度梯度,分别选取给药后24,48和72 h时间点,采用MTT法检测羟基喜树碱对成纤维细胞生长的抑制作用.结果与结论:低质量浓度(2～8 μg/L)下羟基喜树碱对成纤维细胞的增殖有抑制作用,质量浓度8～125 μg/L时出现平台期,质量浓度125～500 μg/L时抑制作用进一步增强,说明羟基喜树碱对成纤维细胞的增殖的抑制作用具有明显的剂量依赖性.药物作用质量浓度和成纤维细胞抑制率呈正相关(r=0.87,P＜0.05).随着作用时间延长,细胞抑制率无明显增加,药物作用24,48和72 h后,半数抑制率(IC50)分别为233,176及103 μg/L.因此实验推论羟基喜树碱能够抑制体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞的增殖.     

马兜铃酸对兔耳增生性瘢痕组织的影响

目的　观察马兜铃酸 (aristolochicacid ,AA)对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法　建立兔耳增生性瘢痕动物模型 ,2 1天后瘢痕局部注射不同浓度的马兜铃酸或生理盐水 ,4 9天后观察药物对瘢痕增生指数 (HypertrophicIndex ,HI)的影响及光镜下瘢痕变化情况。结果　瘢痕增生指数 (HI)与药物浓度呈负相关 ,光镜下见明显抑制成纤维细胞增殖及降低胶原纤维的含量。结论　马兜铃酸可抑制兔耳增生性疤痕组织增生 ,有望成为防治增生性瘢痕的新药物。     

苦参碱对兔耳皮肤增生性瘢痕形成的抑制

目的：观察使用苦参碱预防兔耳创面增生性瘢痕形成的作用.方法：实验于2004-04/11在南方医科大学附属珠江医院心内科实验室及病理科完成.在10只兔耳作80个创面建立增生性瘢痕的动物模型.随机分为苦参碱组和生理盐水组,每组5只兔,40个创面.在做兔耳创面后的第2天起,开始使用药物,每次取0.5 mL液体点至创面,3次/d.苦参碱组使用苦参碱贮液,生理盐水组使用生理盐水.在第3周切除兔两耳增生性瘢痕,做苏木精-伊红染色、Masson染色,苦味酸天狼猩红染色.观察两组兔耳创面中不形成增生性瘢痕的创面愈合时间及形成增生性瘢痕的数量;胶原纤维的面密度比、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的面密度比值.结果：10只大白兔、80个创面均进入结果分析.①大体观察：苦参碱组未形成增生性瘢痕有12个创面（30%）,平均愈合时间为（10.6&;#177;1.7）d,形成增生性瘢痕块有28个创面（70%）.生理盐水组未形成增生性瘢痕有9个创面（22.%）,平均愈合时间为（10.1&;#177;1.1）d,形成的增生性瘢痕块有31个创面（77.5%）,两组间无统计学差异（P＞0.05）.②光镜观察：苦参碱组平均胶原纤维面密度比明显较生理盐水组低（0.481&;#177;0.048,0.604&;#177;0.040,P＜0.001）;苦参碱组平均Ⅰ/Ⅲ型胶原的面密度比值显著高于生理盐水组（2.574&;#177;1.006,2.286&;#177;0.416,P＜0.001）.结论：苦参碱不影响兔耳创面的正常愈合,也不能预防兔耳创面增生性瘢痕的形成,但可以减轻所形成的增生性瘢痕的增生程度.     

苦参碱对兔耳皮肤增生性瘢痕形成的抑制

目的:观察使用苦参碱预防兔耳创面增生性瘢痕形成的作用。方法:实验于2004-04/11在南方医科大学附属珠江医院心内科实验室及病理科完成。在10只兔耳作80个创面建立增生性瘢痕的动物模型。随机分为苦参碱组和生理盐水组,每组5只兔,40个创面。在做兔耳创面后的第2天起,开始使用药物,每次取0.5m L液体点至创面,3次/d。苦参碱组使用苦参碱贮液,生理盐水组使用生理盐水。在第3周切除兔两耳增生性瘢痕,做苏木精-伊红染色、M asson染色,苦味酸天狼猩红染色。观察两组兔耳创面中不形成增生性瘢痕的创面愈合时间及形成增生性瘢痕的数量;胶原纤维的面密度比、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的面密度比值。结果:10只大白兔、80个创面均进入结果分析。①大体观察:苦参碱组未形成增生性瘢痕有12个创面(30%),平均愈合时间为(10.6±1.7)d,形成增生性瘢痕块有28个创面(70%)。生理盐水组未形成增生性瘢痕有9个创面(22.%),平均愈合时间为(10.1±1.1)d,形成的增生性瘢痕块有31个创面(77.5%),两组间无统计学差异(P>0.05)。②光镜观察:苦参碱组平均胶原纤维面密度比明显较生理盐水组低(0.481±0.048,0.604±0.040,P<0.001);苦参碱组平均Ⅰ/Ⅲ型胶原的面密度比值显著高于生理盐水组(2.574±1.006,2.286±0.416,P<0.001)。结论:苦参碱不影响兔耳创面的正常愈合,也不能预防兔耳创面增生性瘢痕的形成,但可以减轻所形成的增生性瘢痕的增生程度。     

595nm波长激光采用不同能量与脉宽对表浅血管的作用

目的:利用兔耳血管探讨595nm波长激光在选择不同能量与脉宽时对血管性疾病表浅血管的作用以及周围组织的变化。方法:美国康奥公司(Candela)生产V-Beam595nm波长激光治疗机,和雌性大耳白白兔12只。实验共分4组,每组3只,第1组:能量13J,脉宽40ms;第2组:能量13J,脉宽20ms;第3组:能量13J,脉宽10ms;第4组:未治疗,对照组。结果:术后1d,第1组大、中血管数量明显减少,第1,2,3组中等血管数量明显减少。术后3周血管数量有所回升。结论:在适当脉宽的基础上选择适当的(不要过大)能量对血管性疾病不同管径的血管有选择性作用,且不会导致皮肤的损害,同时可以通过严格控制治疗周期,缩短疗程。     

氦氖激光抑制培养瘢痕成纤维细胞生长的实验研究

目的　探讨氦氖激光体外照射对培养的瘢痕成纤维细胞生长的抑制作用。方法　以6 32 .8nm波长氦氖激光 (功率密度 5 0mW /cm2 ) ,3J/cm2 ,30J/cm2 ,90J/cm2 ,180J/cm2 剂量 ,分别照射培养的人瘢痕成纤维细胞 1次 ,3次和 5次 ,每日 1次 ,然后进行细胞计数和细胞周期分析。结果180J/cm2 重复照射 3次和 5次 ,细胞总数都明显少于同期对照组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。细胞周期分析表明 ,180J/cm2 照射细胞 3次和 5次后 ,S期细胞数从 5 1%降低到 2 0 %和 14% ,G0 /G1期细胞从 2 8%分别上升到 5 5 %和 6 0 % ,Sub -G2 期细胞百分比分别为 6 .7%和 9.8%。结论　一定剂量 (180J/cm2 )氦氖激光重复照射能抑制培养的瘢痕成纤维细胞生长 ,原因可能是由于氦氖激光引起G0 /G1期细胞停滞和细胞凋亡所致     

瘢痕疙瘩及周围皮肤成纤维细胞生长差异的生物学研究

目的探讨正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩周边部和中央部及瘢痕疙瘩周围皮肤(距瘢痕疙瘩边缘0.5cm范围内)的成纤维细胞呈现不同生物学性状的细胞生物学机理。方法取手术切除的正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织及周围皮肤各6例为标本,通过细胞培养6～10代后,应用流式细胞仪不同来源的成纤维细胞细胞周期的分布,同时比较它们在无血清培养条件下和在不同浓度FasMcAb作用下的细胞凋亡率。MTT比色法比较其细胞增殖活性。结果正常皮肤成纤维细胞增殖及凋亡正常。增生性瘢痕增殖活跃且细胞凋亡状况不良,瘢痕疙瘩中央部成纤维细胞处于低增殖—不凋亡状况;瘢痕疙瘩周边部成纤维细胞处于高增殖—无凋亡状况;瘢痕疙瘩周围正常皮肤大量细胞也处于高增殖及低凋亡状况。结论病理性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡状况的异常可能是导致其不同生长特性的细胞生物学机理之一。     

芦荟大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的量效影响

目的：观察天然药物芦荟大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用。方法：实验于2001—06／2004—12在广东医学院整形外科研究所完成。成纤维细胞取自广东医学院附属医院整形外科患者手术切除的增生性瘢痕组织，瘢痕组织经处理后进行成纤维细胞原代及传代培养至第3—8代细胞。用剂量为40mg／L的芦荟大黄素分别处理对数生长期成纤维细胞[0（为对照组），24，48，72h]，以流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率；观察加入不同浓度（0，20，40，60，80mg／L）芦荟大黄素后24h对成纤维细胞凋亡的影响，采用特异性荧光染色和原位末端标记技术分别检测凋亡指数。结果：①芦荟大黄素作用不同时间对成纤维细胞周期和凋亡的影响：流式细胞术检测发现，用药24h出现“亚二倍体峰”即凋亡峰，凋亡指数为（10．81&;#177;1．43）％，到48和72h凋亡指数为（16．02&;#177;1．30）％和（21．58&;#177;1．56）％。随着作用时间的延长，DNA合成前期细胞百分数增多，DNA合成期的细胞含量逐渐减少，亚二倍体峰百分数增多（F=122．514，225．552，105．346，P〈0．05）。②芦荟大黄素对成纤维细胞凋亡的量效影响：荧光染色和原位末端标记法检测凋亡指数，均呈剂量依赖性增高[荧光染色：0mg／L为（4．52&;#177;1．22）％，20mg／L为（25．56&;#177;1．12）％，40mg/L为（56．20&;#177;2．20）％，80mg／L为（80．05&;#177;2．12）％，F=1350．737；原位末端标记法：0mg／L为（3．85&;#177;1．15）％，20mg／L为（11．66&;#177;1．20）％，40mg／L为（23．12&;#177;1．06）％．80mg／L为（40．31&;#177;1．43）％．F=511．487，P〈0．011。结论：芦荟大黄素以时间依赖性的方式调节细胞周期并诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡，还可呈量效关系促进成纤维细胞发生凋亡。     

芦荟大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的量效影响

目的:观察天然药物芦荟大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用。方法:实验于2001-06/2004-12在广东医学院整形外科研究所完成。成纤维细胞取自广东医学院附属医院整形外科患者手术切除的增生性瘢痕组织,瘢痕组织经处理后进行成纤维细胞原代及传代培养至第3～8代细胞。用剂量为40mg/L的芦荟大黄素分别处理对数生长期成纤维细胞[0(为对照组),24,48,72h],以流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;观察加入不同浓度(0,20,40,60,80mg/L)芦荟大黄素后24h对成纤维细胞凋亡的影响,采用特异性荧光染色和原位末端标记技术分别检测凋亡指数。结果:①芦荟大黄素作用不同时间对成纤维细胞周期和凋亡的影响:流式细胞术检测发现,用药24h出现“亚二倍体峰”即凋亡峰,凋亡指数为(10.81±1.43)%,到48和72h凋亡指数为(16.02±1.30)%和(21.58±1.56)%。随着作用时间的延长,DNA合成前期细胞百分数增多,DNA合成期的细胞含量逐渐减少,亚二倍体峰百分数增多(F=122.514,225.552,105.346,P<0.05)。②芦荟大黄素对成纤维细胞凋亡的量效影响:荧光染色和原位末端标记法检测凋亡指数,均呈剂量依赖性增高[荧光染色:0mg/L为(4.52±1.22)%,20mg/L为(25.56±1.12)%,40mg/L为(56.20±2.20)%,80mg/L为(80.05±2.12)%,F=1350.737;原位末端标记法:0mg/L为(3.85±1.15)%,20mg/L为(11.66±1.20)%,40mg/L为(23.12±1.06)%,80mg/L为(40.31±1.43)%,F=511.487,P<0.01]。结论:芦荟大黄素以时间依赖性的方式调节细胞周期并诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,还可呈量效关系促进成纤维细胞发生凋亡。