荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的应用

目的 应用染色体特异性探针对尿脱落细胞进行FISH分析膀胱移行细胞癌的染色体畸变.方法 选用3、7、9、17号染色体特异性探针对50例膀胱移行细胞癌患者尿液的脱落细胞进行荧光原位杂交研究,并同时做细胞学检查.结果 膀胱癌患者尿液脱落细胞中3、7、9、17号染色体数目畸变阳性率分别为28%、32%、56%和38%,其中9号染色体畸变率较高,但与膀胱癌的分级无明显相关关系;3、7和17号染色体数日畸变与膀胱癌的分期密切相关.结论 膀胱癌的发生发展与染色体的畸变有关,应用FISH检测膀胱癌患者尿液细胞染色体数目畸变,可以作为膀胱癌诊断、预后判断的一项辅助方法,该方法具有快速、准确、灵敏度高的优点.     

建立非重复序列FISH探针及在21/13三体产前诊断中的应用

目的建立21/13号染色体的非重复序列荧光原位杂交(FISH)探针,比较其与商品化含重复序列的探针在对羊水脱落细胞进行快速产前诊断21/13三体的效能方面的差异。方法分析DSCR区域和RB基因区域DNA序列,剔除重复序列后进行PCR扩增和荧光标记,制备21/13号染色体FISH计数探针,与G显带中期淋巴细胞杂交,鉴定探针的杂交位置。选取50例孕周为18～35周的孕妇,经羊膜腔穿刺取羊水标本,分别在培养前后采用Cytocell的21/13号染色体FISH计数探针和自制的非重复序列FISH计数探针进行杂交,计算探针杂交率,并以核型分析结果作为参考,计算探针的准确率。两组数据间差异采用t检验进行统计学分析。结果非重复序列探针位置准确,荧光信号明确,背景更低;两种探针与培养后细胞杂交的杂交率和准确率无明显差异;但对于未培养的羊水间期细胞,非重复序列探针杂交的准确率明显优于普通探针,杂交率两者相似。结论采用非重复序列PCR方式制备21/13染色体计数探针用于羊水间期细胞杂交能明显改善探针的杂交效率和信噪比,有利于提高检测的准确度。     

荧光原位杂交技术在肾盂肿瘤诊断中的应用

目的 评价荧光原位杂交(FISH)技术在肾盂肿瘤诊断中的应用价值.方法 20例健康人通过FISH技术检测3、7、17号染色体及9号染色体p16位点的变异情况,建立阚值.15例影像学提示肾脏占位的血尿患者留取晨尿,分别进行尿脱落细胞学检查和FISH技术检测.以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性.结果 15例血尿患者经手术及病理证实肾盂尿路上皮癌8例,肾透明细胞癌5例,肾嫌色细胞癌1例,黄色肉芽肿性肾盂肾炎1例.8例肾盂尿路上皮癌FISH技术检测均为阳性,3、7、17号染色体畸变阳性率均为100%(8/8),9号染色体p16位点畸变阳性率为75%(6/8).尿脱落细胞学检查仅1例阳性.7例非肾盂尿路上皮癌6例FISH技术检测阴性,而尿脱落细胞学检查则均为阴性.结论 FISH技术是一种无创快速诊断方法,在肾盂肿瘤诊断中优于尿脱落细胞学检查.     

荧光原位杂交技术在产前诊断染色体疾病中的应用

[目的]探讨荧光原位杂交技术(FISH)应用于羊水间期细胞进行产前诊断可行性。[方法]应用着丝粒探针、特异性序列探针对102例产前诊断孕妇的未培养羊水间期细胞进行FISH分析,对5条染色体(13号、18号、21号、X和Y)进行检测,以羊水细胞培养染色体常规核型分析作为结果对照。[结果]99例羊水间期细胞检测正常,发现3例异常胎儿,分别为21三体,18三体,13三体。FISH检测与常规核型分析结果一致。[结论]FISH技术快速、简便、可靠,达到产前诊断要求,有较大临床应用价值。     

全染色体涂染探针FISH技术在AIH产前诊断唐氏综合征的应用

目的:探讨应用自制的人21号全染色体特异DNA涂染探针FISH技术在AIH产前诊断唐氏综合征的应用价值。方法:对经AIH治疗成功受孕的妊娠16～26周孕妇抽取的未培养羊水细胞采用已制备的人21号全染色体特异DNA涂染探针进行荧光原位杂交,同时进行常规细胞培养及染色体核型分析,并比较两种检测方法的结果。结果:自制探针FISH检测均于24 h内出结果,检测出患儿2例,其中1例为标准21三体,1例为X三体。自制的人21号全染色体特异DNA涂染探针对未培养的羊水细胞核21号染色体的符合率高达99.42%,染色体核型分析为47,XXX的患者FISH结果未见异常。检测结果与染色体核型分析及随访相符。结论:人21号全染色体特异DNA涂染探针FISH技术具有快速、准确的优势,大大提早诊断时间,应用于AIH成功受孕高危孕妇的产前筛查唐氏综合征中具有良好的应用价值。     

hTERC基因异常与HPV感染在宫颈疾病中的关系

目的:应用荧光原位杂交技术(FISH)分析宫颈病变中宫颈脱落细胞的3号染色体hTERC基因异常情况,及其与HPV感染在宫颈癌中的关系。方法:对120例宫颈疾病患者,采用宫颈疾病三阶梯诊断方法,对正常宫颈(20例)、CIN、宫颈鳞癌、腺癌进行诊断,全面了解宫颈细胞形态学、组织病理学及HPV感染情况,并进行分型、分期,以病理检查为金标准;第2部分采用荧光原位杂交技术对其宫颈脱落细胞进行同步分析,了解3号染色体上hTERC基因扩增情况。第2部分采用反向杂交法检测HPV感染情况,对100例宫颈癌及癌前病变患者的宫颈脱落细胞进行HPVDNA的检测。结果:①100例中宫颈鳞癌30例、腺癌6例、CIN64例,FISH检测宫颈癌及癌前病变的hTERC基因在3号染色体长臂26.3区域高频扩增,发生率分别为100.0%、100.0%、76.1%。②100例宫颈疾病患者的HPV总阳性率71.0%。在75例hTERC基因扩增阳性的患者中,HPV阳性所占的比例为89.3%(67/75),而HPV阴性所占比例仅为10.6%(8/75)。结论:3号染色体上hTERC基因在宫颈癌和癌前病变患者的宫颈脱落细胞中有不同程度的扩增。     

细胞遗传学法与荧光原位杂交技术在流产绒毛染色体分析中的应用

目的:通过比较传统的细胞遗传学法与荧光原位杂交技术(FISH)在流产绒毛组织染色体检测中的差异,探讨两种方法在流产绒毛组织染色体分析中的应用价值.方法:选取2010年8月28日～12月2日因自然流产到该院优生遗传门诊、妇科病房行清宫手术的94例患者为研究对象,采用13、16、18、21、22、X和Y染色体特异性DNA探针对94例早期流产绒毛标本进行FISH检测,同时进行细胞培养和染色体核型分析.结果:FISH检测成功率为100.0％(94/94),传统细胞遗传学法检测成功率为91.5％ (86/94).传统细胞遗传学分析成功的86例中,74例结果与FISH结果相符,另外检出12例FISH探针所不能覆盖的染色体异常;培养失败的8例标本中,FISH检出5例异常.FISH异常检出率为48.9％,细胞遗传学法异常检出率为60.5％.结论:FISH与细胞遗传学法均具有其各自的优点和局限性,应根据流产绒毛标本实际情况选择合适的检测方法,确保检测的成功率和结果的准确率.     

18号染色体α-卫星DNA探针与22号染色体杂交

随着染色体特异性探针的发展,荧光原位杂交(FISH)正用于筛选染色体(包括X,Y,13号,18号和21号)数目异常的异常羊膜细胞和绒毛细胞,与13号和21号染色体不同,X,Y和18号染色体α-卫星DNA具有染色体特异性,因此,这些α-卫星DNA被常规用于鉴定它们的拷贝数。本文介绍1例18号染色体α-卫星DNA探针(D18Z1),除了与18号同源染色体着丝点杂交外,还与一个22号同源染色体着丝点杂交。     

荧光原位杂交方法检测口腔黏膜脱落细胞在45,X0嵌合体诊断中的意义

目的应用荧光原位杂交(FISH)方法检测45,X0嵌合体患者口腔黏膜脱落细胞,探讨其诊断意义。方法选择3例45,X0嵌合体及可疑嵌合体患者。其中病例1外周血常规染色体核型方法检测,染色体核型为45,X0/46XX,嵌合比为87.0%/13.0%;病例2染色体核型45,X0/46XX,嵌合比为90.0%/10.0%;病例3染色体核型显示单纯45,X0但可疑嵌合体患者。以上患者均采用无菌拭子分别刮取双侧颊黏膜,采集口腔黏膜脱落细胞。应用北京金菩嘉试剂有限公司生产的18/X/Y着丝粒FISH探针进行荧光原位杂交实验。结果口腔黏膜脱落细胞FISH方法检测的3例患者核型分别显示为X0/XX/XXX、X0/XX/XY和X0/XY嵌合体,嵌合比例为77.5%/17.0%/5.5%、61.0%/29.0%/5.0%和88.0%/12.0%;常规外周血淋巴细胞培养后染色体核型分析方法对其中的XXX和XY核型未能准确检出。结论 45,X0患者应用FISH方法检测口腔黏膜脱落细胞,可以无创、快速检出异常核型,对低比例异常嵌合核型可以做出准确诊断。     

荧光原位杂交在产前诊断中的作用探讨

目的:探讨荧光原位杂交技术(FISH)用于唐氏综合征产前诊断的优势.方法:采集589名孕18～24周妇女的羊水标本,对未培养的羊水间期细胞应用染色体GLP13/21特殊位点的荧光标记探针和CSP 18/X/Y染色体着丝粒荧光标记探针进行FISH实验;同步进行羊水细胞培养,通过染色体核型分析并作为标准,对FISH技术进行评价.结果:FISH分析羊水间期细胞性染色体数目正常者586例(XX 296例、XY 290例),3例数目异常,与染色体核型分析结果一致;FISH和核型分析结果中发现6例21-三体,1例18-三体、1例13-三体、1例47,XXY、1例47,XXX、1例47,XYY;染色体核型分析发现7例染色体结构异常.结论:在产前诊断中同时开展FISH和羊水细胞染色体核型分析可弥补相互间的缺陷,使产前诊断的效能达到最大化.     

用PCR技术对人巨细胞病毒与膀胱癌关系的研究

采用一种新的定量PCR技术，对膀胱癌患者12人及正常对照5人的尿脱落细胞病理涂片标本进行人巨细胞病毒（HCMV）的定量检测，参照常规PCR，初步探讨了膀胱癌与HCMV感染的关系。结果表明，膀胱肿瘤细胞内存在HCMV基因的DNA。提示，HCMV的感染可能与膀胱癌的发生有一定的关系，也可成为判断膀胱癌患者预后的敏感指标。     

Inhibition of Cancer Cell Replication by Inorganic Nitrite

Nitrite has been implicated in carcinogenesis, especially under acidic conditions such as in the stomach or in urine, where it forms nitrosating species that can react with secondary amines to form nitrosamines. Recent studies have shown that nitrite and acid form a variety of other nitrogen oxides in vivo including nitric oxide—a compound with documented antitumor activity. Here we tested the effects of nitrite on bladder tumor cells incubated in mildly acidified urine. Nitrite (50 μM) inhibited thymidine incorporation in human T24 bladder cancer cells. This inhibition required slight acidification (pH 5.5–6), and no effect of nitrite could be observed at pH 7. Nitrite effects were further augmented in the presence of ascorbic acid, whereas ascorbic acid alone had no effect. The effects were paralleled by formation of nitric oxide gas. We here demonstrate an inhibitory effect of nitrite on cancer cell replication at concentrations and acidity commonly found in urine and gastric juice. The inhibitory effect is likely caused by nitric oxide and possibly other reactive nitrogen oxides formed from acidified nitrite.     

尿脱落细胞检查在联苯胺作业工人健康监护中的作用

目的研究通过在职业性膀胱癌高发人群中进行尿脱落细胞检查,以早期发现、早期治疗膀胱肿瘤,说明其在健康监护中的作用.方法对染化行业在职和退休职工,有联苯胺接触史1年以上的男性,进行尿脱落细胞病理学检查.结果对联苯胺作业人群进行20年的尿脱落细胞健康监护工作,并已取得肯定效果.结论通过尿脱落细胞检查可以检出尚无临床症状的早期患者,可使患者早期发现早期治疗膀胱肿瘤,所以尿脱落细胞学检查对于联苯胺作业人群的职业健康监护有着重要的意义.     

膀胱癌患者尿脱落细胞中人巨细胞病毒的定量分析

目的：初步探讨人巨细胞病毒感染与膀胱癌的关系。方法：采用一种新的PCR产物定量测定技术，对12例膀胱癌病人，24例健康人的尿脱落细胞病理标本进行人巨细胞病毒（HCMV）的定量检测，并结合临床资料，探讨膀胱癌与HCMV感染的关系。结果：12例膀胱癌病人中有8例阳性，24例对照人群中无阳性发现，表明膀胱癌细胞内存在有HCMV基因的DNA。结论：膀胱癌病人中有较高的HCMV感染，并可能在膀胱癌的发生和发展中起着重要作用。     

细菌感染对尿液全自动检测的影响

目的 观察分析细菌感染对尿液全自动检测的影响.方法 应用SysmexUF-1000全自动尿沉渣分析仪及其配套试剂,进行尿红细胞及潜血的测定.结果 不同常见种类菌尿对尿红细胞测定结果的影响不同,铜绿假单胞菌影响最大,细菌浓度为104/ml即影响红细胞测定,而细菌浓度为105/ml时对金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌有影响;以镜检法为标准,UF-1000检测尿红细胞比较菌尿组假阳性率为30.83％,高于非菌尿组的10.83％,两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论 UF-1000尿液分析仪操作简单、快速,有较好的重复性和敏感性,菌尿干扰尿液(沉渣\分析仪对尿细胞、尿潜血)的测定.     

医学监护在联苯胺作业膀胱癌高发人群中应用的意义

本文报道了对联苯胺作业膀胱癌高发人群实行医学监护的方法和结果。指出定期进行尿液脱落细胞检查,并对其中巴氏分级Ⅲ级以上者做膀胱镜检查,不但可以早期发现膀胱肿瘤,同时也可以对尿路粘膜上皮组织炎症及增生等病变作出一定的诊断。有利于早期治疗。尿液脱落细胞检查方法简便易行,对病人安全无痛苦,并可重复检验,诊断肿瘤的阳性率较高,可以作为普查和职业人群医学监护的主要手段。     

Effects of cyclamate calcium on the immune response in rabbits.

To determine the effect of cyclamate calcium on the humoral immune response in rabbits, one group was fed a 3% and another a 5% water solution of cyclamate calcium. A third group served as controls. After 150 days, the animals were tested for their ability to respond immunologically to bovine serum albumin (BSA). Other aspects of immunity investigated were the presence or absence of neoplasia of the urinary bladder, spleen, thymus, and lymph nodes, the number of white and red blood cells, and cyclamate conversion and excretion in the urine. The results indicated that the 5% group had a delayed and suppressed response to BSA. No neoplasia was detected. This group had fewer red cells and excreted increased concentrations of cyclohexylamine in the urine.