肝细胞癌miR-449a表达及临床意义

目的探讨miR-449a在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织中的表达与预后的关系。方法选取2012年1月至2013年10月在我院接受手术根治切除治疗的HCC患者289例,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-449a在HCC患者癌组织中的表达,并随访其生存状况。绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)并评价miR-449a对HCC预后的预测价值。采用Kaplan-Meier并Log-rank检验进行单因素生存分析,将单因素有意义的因素引入Cox多因素回归模型。结果 289例患者中,男性231例,女性58例。平均年龄(53.1±10.3)岁(范围:32～74岁)。根据Chid-Pugh分级,肝功能A级者258例,肝功能B级者31例。感染肝炎病毒者256例,未感染肝炎病毒者33例。miR-449a表达水平为1.84±0.78。截至2018年10月,289例HCC患者中,失访21例,随访率92.7%。平均随访时间(38.5±17.9)个月。在随访到的268例患者中,死亡146人。miR-449a预测HCC死亡的最佳临界点为1.2。当miR-449a为1.2时, miR-449a预测HCC死亡的灵敏度为63.0%,特异度为60.7%;AUC曲线下面积为0.63。多因素Cox回归分析显示:Child-Pugh B级[HR(95%CI):1.11(1.07～1.15)]、较高ALT水平[HR(95%CI):1.58(1.26～1.97)]、较高AST[HR(95%CI):1.73(1.31～2.28)]、ALP[HR(95%CI):1.36(1.05～1.76)]、AFP[HR(95%CI):2.09(1.85～2.12)]、较大肿瘤[HR(95%CI):1.14(1.06～1.18)]、较低ALB[HR(95%CI):1.38(1.37～1.52)]、miR-449a表达[HR(95%CI):2.17(1.68～2.28)]是HCC患者死亡风险增加的独立危险因素。结论 miR-449a表达是HCC患者预后独立危险因素,miR-449a表达下调者预后更差。     

iNOS在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

肝细胞癌(HCC)是我国常见恶性肿瘤之一,其死亡率占消化系统恶性肿瘤第3位.它的发生、发展是多种癌相关基因协同作用的结果.一氧化氮(NO)是体内重要的生物活性分子和信号分子,它作为血管扩张因子、神经递质、抗微生物效应分子和免疫调节剂具有多种生理和病理功能.诱导型一氧化氮合酶(iNOS)主要在病理情况下,如炎症和肿瘤诱导下生成NO,参与血管生成、肿瘤的发生和发展等过程[1].本研究通过检测HCC癌组织中的iNOS的表达情况及其与临床生物学特点之间的关系,探讨iNOS与HCC的关系.     

miR-181a在脑缺血神经损伤与神经康复中的作用

目的探讨miR-181a在脑缺血损伤与神经康复中的作用机制。方法构建脑缺血大鼠模型和miR-181a过表达载体,通过尾静脉注射促进脑缺血大鼠脑组织中miR-181a的表达。RT-PCR检测24 h后脑组织miR-181a的表达水平。Tunel检测海马区细胞凋亡情况。对脑缺血大鼠模型进行神经功能评分。Western印迹检测大鼠脑组织中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6的表达水平。结果脑缺血处理的大鼠缺血组、对照组、促进组的miR-181a水平均明显高于正常组,促进组高于对照组和缺血组(P<0.01),对照组和缺血组无显著差异(P>0.05)。尾静脉注射的r AAV-miR-181a载体可以有效促进大鼠脑组织中miR-181a的表达。Tunel结果显示,促进组中脑组织海马区的阳性细胞比例高于对照组。促进脑缺血大鼠miR-181a的表达,脑组织中细胞凋亡率增高。促进组大鼠神经功能评分明显高于对照组(P<0.05),大鼠脑组织中IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.01)。结论 miR-181a在脑缺血组织中过表达,可以促进脑组织细胞凋亡和炎症的发生,加重神经损伤的严重程度。     

血管内皮生长因子在肝细胞癌中的表达及其临床意义

本文对肝细胞癌(HCC)中血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况进行观察. 1 对象与方法 1.1 研究对象 收集我院2004年3月至2007年3月住院病例50例,其中男36例,女14例,年龄51～86岁,平均77岁.     

HNF4a基因在肝细胞癌中的表达及其与预后的相关性

目的探讨肝细胞癌患者组织中HNF4a蛋白表达与无病生存期和总生存期的关系。方法免疫组化检测肝癌组织中HNF4a蛋白,观察172例患者肝细胞癌组织中HNF4a的表达情况;HNF4a蛋白表达水平与各临床病例参数间的关系、患者无病生存期和总生存期的关系,建立回归模型。结果 HNF4a阳性率为81.98%(141/172),HNF4a基因表达与患者性别、年龄、HBsAg、肝硬化、肿瘤大小、TNM分期以及转移复发无相关性(P0.05),与AFP、肿瘤病理分级存在相关性(P0.05)。HNF4a蛋白高表达患者中无病生存期为22个月,HNF4a低表达患者无病生存期为4个月,差异有统计学意义(P0.05)。总生存期分析显示,HNF4a蛋白表达是其风险因素(P0.05)。结论 HNF4a蛋白低表达肝癌患者生存期降低的风险显著升高,HNF4a表达与肝细胞发生发展密切相关,有可能是肝细胞癌转移复发以及预后的参考指标。     

死亡相关蛋白激酶在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与HCC临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测DAPK在50例HCC组织及其癌旁组织和5例正常肝脏组织中的表达。结果 DAPK在HCC组织中的阳性率为36%,明显低于癌旁组织62%及正常肝组织100%(P<0.05);DAPK低表达与HCC组织分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 DAPK表达下调在HCC的发生发展中可能起重要作用。     

miR-181a调控海马神经元突触生长在癫痫发生中的作用及机制

目的探讨miR-181a调控海马神经元突触生长在癫痫发生中的作用及机制。方法从出生24 h内的SD大鼠分离海马神经元进行原代培养,将miR-181a-mimic、miR-181a-inhibitor及scramble miRNA转染到神经元细胞内,未转染组作为对照组,各组细胞培养24 h后,免疫荧光检测突触的长度及数目;将后续实验分为对照组、无镁组及无镁+miR-181a-mimic组,脱氧核苷酸转移酶介导三磷酸脱氧乌苷-生物素刻痕末端标记法(TUNEL)检测阳性细胞率;乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞毒性;根据标准曲线计算培养液中的NAD~+含量;Western印迹检测蛋白激酶B(Akt)和糖原合酶激酶(GSK3β)磷酸化蛋白及总蛋白的表达。结果 miR-181a-mimic组海马神经元细胞突触的长度及分支数均显著低于对照组,而miR-181a-inhibitor组海马神经元细胞突触的长度及分支数均显著高于对照组(P<0.01)。scramble miRNA不影响突触的生长;无镁+miR-181a-mimic组在1 h和24 h的阳性细胞率均显著低于无镁组(P<0.01)。无镁24 h组和无镁+miR-181a-mimic组细胞漏出率均显著高于对照组,NAD~+含量显著低于对照组(P<0.01),而无镁+miR-181a-mimic组细胞漏出率显著低于无镁24 h组,NAD~+含量显著高于无镁24 h组(P<0.01);无镁24 h组Akt和GSK3β磷酸化蛋白表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05),无镁+miR-181a-mimic组Akt和GSK3β磷酸化蛋白表达显著高于对照组及无镁24 h组(P<0.01);Akt和GSK3β总蛋白表达在三组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-181a影响海马神经元突触生长,并通过调控PI3K/Akt/GSK3β信号通路降低神经元细胞的凋亡及细胞漏出率,提高NAD~+含量对癫痫起保护作用。     

p73基因在肝细胞癌组织中的表达与临床意义

本文通过检测35例原发性肝细胞癌与相对应的癌旁组织中p73基因的表达及突变情况,结合临床资料,探讨肝细胞癌组织中p73基因的表达与临床预后的关系。     

c-myb在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 研究c-myb基因在HCC组织中的表达,探讨其在HCC发生、发展中的作用及临床意义.方法 应用免疫组织化学法检测55例HCC组织、55例癌旁组织、12例肝硬化组织和11例正常肝组织中c-myb蛋白表达情况.结果 癌组织相对于正常的肝组织,癌旁组织相对于肝硬化组织,c-myb蛋白的表达明显增高(P=0.000).结论 提示,c-myb过表达是HCC发病中的早期事件,在HCC的发生、发展中可能起重要作用,检测c-myb的表达具有一定的临床意义.     

miRNA-181a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及其机制

目的:探讨miRNA-181a（miR-181a）对非酒精性脂肪性肝病的影响及其可能的机制。方法:使用棕榈酸处理HepG2细胞构建非酒精性脂肪性肝病细胞模型,检测细胞内miR-181a的表达及脂质沉积。用转化生长因子-β处理细胞检测其对miR-181a表达的影响。通过调控HepG2细胞miR-181a的表达水平,分别检...     

NSCLC患者血清miR-181a的表达变化及其与铂类药物化疗敏感性的关系

目的观察微小RNA（miR）-181a在早期非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中的表达变化,并分析其与铂类药物化疗效果的相关性。方法采用茎环结构的逆转录实时定量PCR方法,检测40例早期NSCLC患者（NSCLC组）术前及其中30例铂类药物化疗前后血清miR-181a水平,同时设40例健康体检者为对照组;分析血清miR-181a水平与NSCLC临床病理特征及铂类药物化疗效果的关系。结果NSCLC组术前和对照组血清miR-181a表达量分别为0．00259、0．00729（P〈0．0001）,前者与肿瘤临床病理特征问无统计学相关性（P均〉0．05）;NSCLC组30例患者化疗前后血清miR-181a相对表达量分别为0．00279、0．00625（P=0．0001）,其中化疗无效、有效者分别为0．00456、0．00793,化疗无效者显著低于化疗有效者及对照组（P分别为0．015、0．005）,后两者比较无显著差异（P=0．806）。结论miR-181a在早期NSCLC患者血清中的水平降低,并与铂类药物化疗敏感性相关;可能作为潜在的生物标记物用于NSCLC的早期诊断及化疗敏感性预测。     

慢性乙型肝炎和肝硬化患者血浆miR-181a水平变化*

目的 探讨慢性HBV感染者血浆微小RNA(miRNA)-181a的变化。方法 采用实时荧光定量PCR法检测20例乙型肝炎病毒携带者（ASC）、20例慢性乙型肝炎（CHB）患者、20乙型肝炎肝硬化（LC）患者和20例健康人血浆miR-181a水平,常规检测血清HBV DNA。结果 NC组、ASC组和LC组血浆miR-181a水平分别为（1.01±0.03）、（0.97±0.02）、（0.91±0.02）,而CHB组患者为（0.74±0.03）,显著低于前三组（P<0.001）;ASC组和LC组血清HBV DNA（3.86±2.89）lg copies/ml和（2.47±3.26）lg copies/ml,而CHB组患者为（8.96±1.63）lg copies/ml（P<0.001）;CHB患者血浆miR-181a水平与HBV DNA水平呈负相关（r=0.76,P<0.001）,ASC组和LC组血浆miR-181a水平与HBV DNA水平无显著相关性。结论 CHB患者血浆miR-181a水平降低,其意义还需要进一步探讨。     

STAT3基因在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨STAT3基因在肝癌发生发展中的作用及意义。方法应用RT-PCR检测STAT3基因及相关基因c-myc、p53、survivin、VEGF的mRNA水平的表达,应用Western Blot法及免疫组化法检测STAT3基因的蛋白水平及定位表达。结果肝癌组织及癌旁组织中STAT3基因mRNA的表达均明显高于正常肝组织(P<0.05),肝癌及癌旁组织中c-myc、survivin、VEGF基因mRNA的表达上调,p53基因mRNA的表达下调,肝癌组织及癌旁组织中STAT3基因蛋白水平的表达均高于正常肝组织(P<0.05)。结论STAT3基因的持续激活在肝癌的发生发展中起重要作用,可作为早期诊断的指标及治疗的新靶点。     

microRNA-145在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

[目的]探讨肝细胞肝癌中microRNA-145(miR-145)水平的变化及其临床意义。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测30例肝癌组织、癌旁组织及3例正常肝组织中miR-145表达量,以及Hep G2肝癌细胞、L-O2胎肝细胞中miR-145表达量并计算miR-145相对表达量。结合采集组织的性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度等临床病理参数分析miR-145表达水平有无明显差异。[结果]肝癌组织中miR-145表达明显低于正常肝组织,差异有统计学意义(P0.05),癌旁组织与正常肝组织及肝癌组织之间表达差异无统计学意义(均P0.05),Hep G2细胞中miR-145表达明显低于L-O2细胞,差异有统计学意义(P0.05)。miR-145在肝癌中的表达异常与性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度无相关,差异无统计学意义。[结论]miR-145在肝癌患者中低表达,在肿瘤发生发展过程中可能担任了抑癌基因的角色,对肝细胞肝癌的临床诊断有意义。     

人肝癌组织中原癌基因Pokemon的表达及其临床意义

目的 探讨肝癌组织中Pokemon基因的表达,并分析其与肿瘤的大小、分化程度、TNM分期等临床资料的相关性.方法 收集30例原发性肝癌患者的肿瘤及其癌旁组织,用逆转录酶聚合链反应(RT-PCR)及免疫印迹(Western blot)的方法分别从核酸及蛋白水平检测标本中Pokemon基因的表达,并对其与患者的性别、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤的TNM分期等临床资料进行统计分析.结果 RT-PCR检测肝癌和癌旁组织mRNA表达的相对强度分别为0.71±0.03、0.17±0.01.Western blot检测蛋白水平的相对表达强度分别为10.64±0.92、1.06±0.18,两者比较有统计学意义(P<0.05),肝癌组织中Pokemon的表达与肿瘤的大小有关,而与患者的年龄、肿瘤的分化程度、淋巴结转移及肿瘤TNM分期等无关.结论 Pokemon的表达上调在肝癌的增殖中可能发挥重要作用.     

IQGAP2在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的:认识肝细胞肝癌中含IQ模体的GTP酶活化蛋白2(IQ motif containing GTPase activating protein 2,IQGAP2)的亚细胞定位和表达,及其在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的作用.方法:分别通过Western blot、免疫荧光和免疫组织化学染色分析IQGAP2在7种人肝癌细胞与正常肝细胞系中的表达、定位,及其在HCC组织样本中的表达与分布.结果:IOGAP2在Bel-7402、Bel-7404、SMMC-7721、SK-HEP-1、HLE和HL-7702等肝癌和正常成人肝细胞系中不表达,仅在HepG2和Hep3B等2种甲胎蛋白(AFP)表达阳性的人肝癌细胞系中表达,IQGAP2主要分布于细胞质,此外,在HepG2细胞中还具有明显的核膜和核仁定位,IQGAP2在HCC组织中表达降低(56.9%,29/51).其中,19例配对HCC组织的IQGAP2表达与肿瘤大小,AJCC分期和血清AFP水平相关(P=0.020,P=0.017,P=0.002);38例配对组织IQGAP2在肿瘤和癌旁正常肝组织中主要定位于胞质,部分细胞伴有胞核和胞膜定位,但是,IQGAP2的表达与肿瘤大小、分化程度、AJCC分期以及血清AFP表达水平无相关性.结论:IQGAP2蛋白可能参与细胞黏附、信号转导等过程,在肝癌的发生发展中发挥重要作用,是一种潜在的抑癌基因.