戊四氮点燃致发育期癫(疒间)大鼠海马神经元突触结构的改变

目的 观察戊四氮(PTZ)点燃后发育期癫(疒间)大鼠海马神经元海马突触素(P38)和突触后致密物质(PSD95)及电镜超微结构的变化.方法 21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS)和实验组(PTZ),用戊四氮建立点燃模型,免疫组化检测大鼠P38及 PSD95阳性细胞的数量及分布,电镜观察海马CA3区超微结构的变化.结果 PTZ组大鼠海马区P38及PSD95免疫反应产物表达量较NS组明显减少(P<0.05);电镜下NS组海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常,PTZ组大鼠神经元细胞及突触结构均有改变.结论 戊四氮点燃所致癫(疒间)对发育期大鼠海马神经元的突触结构有明显损害.     

β-细辛醚对阿尔茨海默病大鼠海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨石菖蒲挥发油主要成分β-细辛醚对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元突触可塑性的影响.方法 以雄性Sprague-Dawley大鼠为研究对象,建立AD动物模型,用不同剂量β-细辛醚[12.5、25、50 mg/(kg·d)](分别为β-细辛醚低、中、高剂量组),连续灌胃4周;生理盐水组予等量生理盐水灌胃,正常对照组不予任何造模处理.Morris水迷宫检测动物的空间记忆能力;JC-1法检测海马组织线粒体膜电位;利用透射电镜观察海马CA1区突触数量及结构的变化;实时定量PCR比较各组生长相关蛋白43(GAP-43)、突触素(SYP)、突触后致密蛋白95(PSD-95) mRNA表达水平的差异.结果 水迷宫结果显示β-细辛醚高剂量组大鼠逃避潜伏期明显比生理盐水组要短.AD大鼠海马线粒体膜电位较正常对照组明显降低;而β-细辛醚处理组大鼠海马线粒体膜电位均增加,β-细辛醚高剂量组增加最明显.透射电镜结果证实β-细辛醚处理组大鼠海马CA1区突触数量增多,尤其是β-细辛醚高剂量组.PCR结果表明,与生理盐水组相比,β-细辛醚中、高剂量组中SYP mRNA表达量明显增加;而β-细辛醚处理组GAP-43和PSD-95 mRNA表达量明显降低,尤其是β-细辛醚高剂量组.结论 β-细辛醚通过影响海马神经元的突触可塑性,从而改善Aβ1-42导致的大鼠认知功能障碍.     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后神经元突触超微结构的影响

目的：研究川芎嗪(TMD)对大鼠脑缺血再灌注后皮质神经元突触结构的影响。方法：采用四血管结扎法制作大鼠脑缺血再灌注模型，运用透射电镜观察假手术组、模型组和川芎嗪组大鼠顶叶皮质突触的变化。结果：模型组神经毡内突触数目减少；突触结构模糊、线粒体肿胀，突触小泡数量减少、破裂甚至融合与假手术组比较均有显著改变；川芎嗪组突触结构较清晰、结构相对完整，与模型组比较有显著改善．．结论：缺血后大鼠顶叶皮质神经元突触结构遭破坏，川芎嗪可能是通过保护神经元突触结构的基本完整，抑制脑缺血后神经毒性作用，从而起到脑保护作用.     

慢性捆绑应激致大鼠学习记忆受损及海马神经元突触素和突触后致密物95表达的变化

目的　了解慢性捆绑应激对大鼠学习记忆能力的影响及可能的神经解剖学机制。方法　将大鼠分为应激组和正常对照组 ,应激组大鼠每天捆绑 6h共 2 1d ,然后用Y迷宫对 2组大鼠进行行为检测 ,运用免疫组织化学方法 ,观察 2组大鼠海马突触素和突触后致密物 95 (PSD 95 )的表达 ,并用计算机图像分析仪对免疫反应结果进行处理。结果　应激组大鼠学习记忆能力明显受损 (P <0 0 5 ) ;其海马CA3 区突触素和PSD 95免疫阳性产物较对照组明显减少 (P <0 0 1)。结论　慢性捆绑应激致大鼠学习记忆受损可能与其海马神经元突触素和PSD 95的表达减少有关。     

通络救脑口服液对AD大鼠学习记忆能力及突触素蛋白表达的影响

目的通过研究通络救脑口服液对老年性痴呆(AD)模型大鼠学习记忆能力及突触素(SYP)表达的影响,探讨通络救脑口服液抗AD的可能机制。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、盐酸多奈哌齐组以及通络救脑口服液低、中、高3个剂量(12、24、48mg/kg)组,采用海马立体定向注射凝聚态β-淀粉样蛋白1-40制备AD动物模型。药物干预4周后,采用Morris水迷宫测试大鼠寻找平台所需时间和通过原平台次数。应用免疫印迹法检测海马区SYP蛋白的表达,电镜观察海马组织超微结构的变化。结果与假手术组比较,模型组平均逃避潜伏期显著延长,跨越原平台位置次数明显减少(均为P0.01);与模型组比较,通络救脑口服液3组平均逃避潜伏期均显著缩短,跨越原平台位置次数均明显增加(均为P0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠海马区SYP蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,通络救脑口服液3组SYP蛋白表达均显著升高(P0.05)。电镜观察结果显示:模型组大鼠海马神经元变性,通络救脑口服液能改善大鼠海马神经元病理改变。结论通络救脑口服液对AD大鼠的学习记忆功能减退具有改善作用,可能与其上调SYP蛋白的表达有关。     

Z_n~(2+)对AD大鼠海马微管相关蛋白-2表达的影响

目的研究锌离子（Zn^2＋）对阿尔茨海默病（AD）大鼠海马微管相关蛋白-2（MAP-2）表达的影响。方法大鼠60只分4组：正常组、模型组和AD前补锌组、AD后补锌组。采用β-淀粉样肽（amyloid，Aβ）大鼠侧脑室注射制作AD动物模型，行为学检测和大鼠海马组织电镜切片观察检测动物模型。用免疫荧光染色和Westem blot法检测大鼠海马组织MAP-2的表达。结果Aβ脑室内灌注造成Aβ沉积的AD模型在行为学和病理改变上一定程度地模拟了AD。模型组和AD后补锌组大鼠海马区MAP-2蛋白表达与正常组大鼠相比显著下降，MAP-2蛋白荧光检测发现模型组和AD后补锌组大鼠海马区MAP-2阳性神经元数量明显减少，AD前补锌组大鼠海马区MAP-2蛋白表达和MAP-2阳性神经元数量与正常组相比差异无显著性。结论在AD形成期间适量补锌可显著改善海马受损神经元细胞结构和细胞骨架蛋白的结构及含量。而在AD形成之后，补锌已不能引起细胞结构的改善。     

神经元-突触丢失与老年痴呆

阿尔茨海默病（AD）的基础和临床研究表明,老年斑和神经纤维缠结与痴呆程度无显著相关。在AD、血管性痴呆、额颞叶痴呆、路易体痴呆脑内均有明显突触丢失。神经元-突触丢失或突触丢失被认为是老年痴呆的主要原因。已发现Aβ和tau磷酸化过程中产生的寡聚体、突触外NMDA受体、含于突触后致密区的shank蛋白可导致突触丢失。因此,AD治疗的新方案包括：①用免疫治疗来清除Aβ寡聚体;②调节mTOR（一种使细胞存活的激酶）和UPS（泛素蛋白酶系统）活性,以维持突触蛋白的正常稳态平衡;③选择性激动突触NMDA受体或选择性拮抗突触外NMDA受体;④增加海马神经发生和增加突触新生。我们最近研究证明人参皂苷Rg1及其代谢产物Ppt能提高突触效能和结构可塑性,以及增加海马神经发生。提示该化合物有望成为防治神经元-突触丢失的药物。     

大鼠海马CA3区突触素的增龄性变化

目的探讨海马CA3区突触素P38免疫反应产物的分布及增龄性变化的规律。方法SD大鼠分为幼年组（1～2月龄）、青年组（4～5月龄）、 中年组（11～12月龄）和老年组（≥24月龄），常规石蜡海马连续冠状切片，尼氏染色、突触素P38免疫组织化学染色，图像分析仪测量其免疫反应阳性产物的光密度值。结果海马CA3区P38免疫反应阳性产物呈板层分布，主要分布在辐射层，其平均光密度（AOD）值以青年组最大，与之比较成年组、老年组均减少，以老年组减少最显著，各组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论大鼠海马CA3区辐射层突触素P38含量随增龄而逐渐减少。     

β-淀粉样蛋白与载脂蛋白E4对大鼠海马突触素的影响

目的观察β-淀粉样蛋白（Ap）和载脂蛋白E（apoE）4对大鼠海马突触素（synaptophysin,SYN）的影响以及二者是否具有协同作用。方法将24只雄性Wistar大鼠分为4组：对照组海马注射生理盐水,n13组注射Aβ1-40,apoFA组注射apoE4,Aβ＋apoFA组注射Aβ1-40＋apoFA。15d后水迷宫检测各组大鼠的学习记忆能力,之后免疫组化法检测CA1区突触素的表达。结果apoE4组、Ap组与对照组比较大鼠第5天的逃避潜伏期明显延长,跨台次数明显减少（P〈0．01）;AB组与apoE4组比较,大鼠第5天的逃避潜伏期明显延长,跨台次数明显减少（P〈0．01）;AB与apoFA之间存在交互作用（F=7．098,P〈0．01）。apoE4组、A13组比对照组突触素OD值下降明显（P〈0．01）;Ap组比apoFA组下降明显（P〈0．05）;Aβ＋apoE4组比对照组、apoFA组及Ap组均下降明显（P〈0．01）;Aβ与apoFA具有交互作用（P〈0．05）。结论Aβ及apoE4均可损伤海马突触结构;A13对海马突触结构损伤比apoE4严重。Aβ与apoFA对海马突触结构的损伤具有协同作用。     

丰富环境对缺氧缺血性脑损伤大鼠海马突触超微结构及突触素表达的影响

目的探讨早期丰富环境干预对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马CA1区神经元突触超微结构和突触素(p38)表达的影响.方法按Rcie法制作HIBD新生动物模型,共计20只,随机分为干预组和非干预组.同时设假手术对照组10只.干预组大鼠于术后第2天开始给予丰富环境刺激,持续20 d.干预结束后用透射电镜观察各组海马CA1区锥体神经元超微结构,免疫组化和图像分析技术检测p38的表达.结果与对照组比较,非干预组海马CA1区锥体细胞见部分核膜消失、线粒体嵴模糊、神经元突触数量减少,突触间隙增宽,突触囊泡减少,突触后致密物变薄;干预组神经元和突触无明显异常.非干预组海马CA1区突出素光密度值明显低于干预组和对照组(P<0.01),而干预组和对照组之间无显著差异(P>0.05).结论阻止或减轻HI后突触超微结构的损伤、促进突触的重建可能是丰富环境发挥作用的物质基础.     

参乌胶囊及其有效成分二苯乙烯苷对老年大鼠海马神经元突触体素表达的影响

目的观察由首都医科大学宣武医院药物研究室自行研制的抗老年性痴呆中药新药参乌胶囊(Shen-wu capsule,SW)及其有效成分何首乌二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucoside,TSG)对于老年大鼠海马神经元突触结构和突触体素表达的影响,阐明其防治神经元退行性变的机制。方法选用老年SD大鼠,从21月龄始,分别灌胃给予SW(0.8 g/kg、1.6 g/kg)和TSG(0.03 g/kg、0.06 g/kg)至24月龄。以6月龄大鼠为青年对照,未给药24月龄大鼠为老年对照。应用通道式水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力,用电子显微镜观察脑海马神经元突触超微结构,用免疫组织化学染色检测海马神经元突触体素(synaptophysin,SYP)的表达。结果与6月龄青年对照组大鼠相比,24月龄老年大鼠通道式水迷宫试验错误次数明显增多(P<0.01);给予SW和TSG的老年大鼠在高剂量组可见水迷宫错误反应次数显著减少,与老年对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。电子显微镜结果显示,24月龄老年大鼠神经元突触数量明显减少;而给予TSG大剂量灌胃组突触数量增多,并可见类似于突触球的结构。免疫组织化学染色结果可见24月龄大鼠SYP染色明显变浅,累积光密度值低(P<0.01);而灌胃给予SW和大剂量TSG组大鼠SYP表达量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论参乌胶囊及其有效成分二苯乙烯苷对于老年大鼠的神经元突触靶位具有较好的疗效,本结果为其在临床用于延缓衰老、改善认知功能提供了实验基础。     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型大鼠TGF-β1表达的影响

目的 探讨脑灵汤对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠TGF-β1(转化生长因子β1)表达的影响.方法 采用向大鼠海马内注射Aβ1-42(β淀粉样蛋白)建立AD模型,通过Y-电迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力;行HE染色观察海马CA3区神经元形态;采用刚果红染色检测Aβ的沉积;用免疫组化SP法检测TGF-β1的表达情况.结果 脑灵汤能改善模型大鼠的学习记忆能力,减少Aβ的沉积,且脑灵汤组TGF-β1的表达较AD模型大鼠的表达增加,差异有统计学意义(P<0.05).HE染色结果,脑灵汤组大鼠海马CA3区细胞排列较整齐、均匀,结构较清晰,形态、排列、数目较模型组明显改善;刚果红染色结果,正常组、假手术组大鼠脑组织切片中未见A13沉积;模型组大鼠脑组织切片在CA1区与齿状回之问可见明显Aβ1沉积;脑灵汤组未发现明显的Aβ沉积.结论 脑灵汤能增强AD大鼠海马区域TGF-β1的表达,可能通过此机制减少海马AB蛋白的沉积,从而改善模型大鼠学习记忆能力.     

海马注射β-淀粉样肽对学习记忆和MK2及白细胞介素-6表达的影响

目的探讨β-淀粉样肽（AB）诱导阿尔茨海默病（AD）大鼠模型中海马丝裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶2（MK2）和白细胞介素-6（IL-6）的表达及其与老年性记忆力减退的关系,研究炎性机制及信号转导在AD中的作用。方法采用立体定向下双侧海马注射Aβ1-42建立AD动物模型,通过Y-迷宫测试、HE染色、免疫组化染色及Westernblot等方法,观测大鼠学习记忆能力、海马组织结构的病理改变及MK2和IL-6的表达情况。结果模型组大鼠Y-迷宫学习记忆能力较对照组明显受损（P〈0．05）,HE染色显示,模型组大鼠海马神经元变性、缺失,胶质细胞浸润;免疫组化结果显示模型组大鼠海马CA1区MK2和IL-6免疫阳性细胞表达多见（P〈0．05）;Westemblot显示模型组海马组织MK2条带增宽表达强度高于对照组（P〈0．05）,差异有统计学意义。结论MK2信号转导通路在AD的炎症反应机制中可能具有重要的作用。     

氯胺酮对SD幼鼠海马神经元细胞凋亡和突触素表达的影响

目的观察氯胺酮对7d龄SD幼鼠海马神经元细胞凋亡和突触素(P38)表达的影响。方法7d龄SD幼鼠共30只,随机分成3组,分别注射氯胺酮25mg/kg(K1组)、50mg/kg(K2组),对照组注射生理盐水50ml/kg(K0组),24h后取材,采用Tunel法检测神经元细胞凋亡,免疫组化染色和Westernblot技术检测SD幼鼠海马突触素的表达,进行图像分析。结果注射氯胺酮后24h,海马神经元细胞凋亡计数K0组(5.3±1.7)、K1组(9.5±4.2)、K2组(23.4±7.6),免疫组化染色突触素灰度值:K0组为(174.11±4.68),K1组为(181.36±4.17),K2组为(198.25±3.06)。Westernblot突触素蛋白电泳条带积分光密度值K0组为(4007±758),K1组为(2621±465),K2组为(987±183)。结论注射氯胺酮后24h,SD大鼠海马神经元细胞大量凋亡,突触素表达减少可能和氯胺酮神经毒性有关。     

电针对AD模型大鼠海马神经干细胞bFGF及学习记忆能力的影响

目的探讨电针对β淀粉样肽（β-AP）所致阿尔茨海默病（AD）模型大鼠的脑内bFGF蛋白表达的影响。方法取健康的SD大鼠40只,随机分为正常组,假手术组,模型组和电针组。采用Aβ1-40微量注射至大鼠双侧Meynert基底核,建立AD模型,用电针进行治疗,于治疗后用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用免疫组化染色法检测bFGF阳性神经细胞数的表达。结果①学习记忆观察：电针组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,大鼠在原平台象限游泳时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过原平台所在位置的次数明显增加（P〈0.01）。②bFGF免疫组化检测：电针组大鼠海马bFGF阳性神经元数量表达最强,与模型组相比具有显著性差异（P〈0.01）。结论电针疗法能增强AD模型大鼠海马神经干细胞bFGF的表达,提高AD大鼠的学习记忆能力。     

注射Aβ25-35后大鼠海马超微结构及caspase-3表达的改变

目的探讨大鼠双侧海马注射Aβ25-35后海马组织形态、超微结构及caspase-3表达的改变.方法采用Aβ25-35双侧海马注射的阿尔茨海默病(AD)大鼠模型,光镜及透射电镜观察海马组织结构,免疫组化法观察caspase-3蛋白的表达.结果苏木素伊红(HE)染色显示,模型组大鼠海马CA1-CA4区及齿状回神经元数量较对照组明显减少,可见较多的神经细胞胞质浓染,核固缩;透射电镜下,模型组海马CA1区神经元较少,可见部分神经细胞膜皱缩,胞体缩小,核膜完整,核染色质电子密度增强;海马区Caspase-3蛋白的表达明显增加.结论Aβ25-35可在体内诱导大鼠海马神经元凋亡.     

注射Aβ25-35后大鼠海马超微结构及caspase-3表达的改变

目的：探讨大鼠双侧海马注射Aβ25-35后海马组织形态、超微结构及caspase-3表达的改变.方法：采用Aβ25-35双侧海马注射的阿尔茨海默病（AD）大鼠模型,光镜及透射电镜观察海马组织结构,免疫组化法观察caspase-3蛋白的表达.结果：苏木素伊红（HE）染色显示,模型组大鼠海马CA1-CA4区及齿状回神经元数量较对照组明显减少,可见较多的神经细胞胞质浓染,核固缩;透射电镜下,模型组海马CA1区神经元较少,可见部分神经细胞膜皱缩,胞体缩小,核膜完整,核染色质电子密度增强;海马区Caspase-3蛋白的表达明显增加.结论：Aβ25-35可在体内诱导大鼠海马神经元凋亡.     

新生鼠脑缺血再灌注后海马CA1区突触素的表达及意义

目的 :观察新生Wistar大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区突触素的表达 .探讨中枢神经系统的可塑性 .方法 :应用免疫组化方法观察新生鼠脑缺血再灌注后不同时点脑组织突触素的表达 .结果 :缺血再灌注 3d突触素表达开始增高 ,7d达高峰 ,1 4d时免疫活性仍高 ,其矫正吸光度值与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) .结论 :新生Wistar大鼠脑神经细胞损伤后具有修复的可塑性 ,其时间持续至缺血再灌注后 1 4d .突触素检测能较好地反映神经元和轴突的代偿再生情况     

复方地黄防治AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的实验研究

目的 研究复方地黄对AD大鼠海马CA1区神经元突触超微结构改变的影响。方法 在腹腔注射D-半乳糖造成大鼠衰老的基础上，海马注射Aβ1-40造成拟老年性痴呆学习记忆损害模型，灌胃复方地黄水溶液，观察突触超微结构变化。结果 Morris水迷宫筛选模型，统计复方地黄对老年性痴呆大鼠海马神经元突触超微结构的影响。结论 复方地黄能够保护神经元突触超微结构，对老年性痴呆大鼠学习记忆能力有增强和提高作用。     

染料木素对AD大鼠海马CaM-CREB信号转导通路相关蛋白的影响

目的:通过观察染料木素对Aβ25-35致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠CaM-CREB信号转导通路相关蛋白的影响,探讨染料木素预防阿尔茨海默病的作用机制。方法:SD雌性老龄大鼠120只,随机分为空白组、模型组、染料木素高、中、低剂量组、雌激素阳性对照组,每组20只。预给药7 d后,采用β-淀粉样肽(Aβ)双侧海马注射建立阿尔茨海默病大鼠模型,继续给药21 d。采用Morris水迷宫实验观察大鼠学习记忆能力的变化,HE染色观察大鼠海马组织形态学变化,ELISA法检测大鼠海马钙调蛋白(CaM)含量,免疫组化SP法检测大鼠海马环腺苷酸反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB的表达。结果:与模型组比较,染料木素各剂量组AD大鼠的学习记忆能力提高(P0.01),海马CaM含量、CREB和p-CREB的表达降低(P0.05)。结论:染料木素可能通过影响海马CaM-CREB信号转导通路相关蛋白表达起到预防AD的作用。