正常及内毒素休克时胆囊收缩素的肺内清除

应用＾１２５Ｉ标记８肽的胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）和＾５１Ｃｒ标记兔红细胞一次通过肺循环的方法，研究了正常和内毒素性休克（ＥＳ）家兔肺对ＣＣＫ的清除作用，结果表明，ＥＳ组肺循环时间延长，心输出量减少，肺对ＣＣＫ－８的清除率正常组平均为３８．９５±３．４０％，ＥＳ组为３０．８６±６．２４％（ｘ±ｓ）有非常显著性差异（Ｐ〈０．０１），提示在ＥＳ时家兔肺清除ＣＣＫ减少。     

正常及内毒素性休克时胆囊收缩素的肺内清除

应用￣（１２５）标记８肽的胆囊收缩素（ＣＣＫ一８）和￣（５１Ｃｒ标记兔红细胞一次通过肺循环的方法，研究了正常和内毒素性休克（ＥＳ）家兔肺对ＣＣＫ的清除作用。结果表明，ＥＳ组肺循环时间延长，心输出量减少，肺对ＣＣＫ一８的清除率正常组平均为３８．９５±３．０％，ＥＳ组为３０．８６±６．２４％（ｘ＋ｓ），有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示在ＥＳ时家兔肺清除ＣＣＫ减少。     

内毒素肺损伤肺淋巴变化的实验研究

本实验应用清醒绵羊内毒素肺损伤模型对内毒素致伤后肺淋巴液的变化作了研究。内毒素致伤后,肺动脉压(Ppa)、肺微血管压(PMV)、肺淋巴流量(QL),淋巴白蛋白/血浆白蛋白比值(LA/PA)、淋巴胶体渗透压(π_(i))和肺微血管滤过系数(Kf)均明显增加。压力和通透性变化对QL的影响之比,在Ⅰ期(0～2h)和Ⅱ期(2～6h)分别为1∶0.53和1∶2.31。提示了PMV增高为Ⅰ期肺水肿形成的主要因素,通透性增加为Ⅱ期的主要因素。     

氨基胍对内毒素诱发的兔急性肺损伤的影响

目的:观察氨基胍(AG)对内毒素(ET)诱发的兔急性肺损伤(ALI)血流动力学及肺血管壁通透性的影响。方法:24只健康成年兔被均分为4组,生理盐水组、ET组、AG组和ET+AG组。ET+AG组先静脉注射ET,复制ALI模型,再以25mg/kg的剂量静脉滴注AG,共维持3h,观察不同时点平均动脉压(MAP)、平均肺动脉压(MPAP)和动脉血液气体参数的变化。实验结束后行支气管肺泡灌洗,测肺湿重/干重比率并常规留取肺标本。结果:ET组MAP下降,MPAP明显升高,动脉血氧分压下降;持续静滴AG后MAP无明显变化,但MPAP明显降低,血红蛋白氧合状况明显改善;AG可减少支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数量;虽然BALF中蛋白含量无显著变化,但BALF电泳分析表明AG可明显减少小分子量蛋白的渗出;ET+AG组肺湿重/干重比率较ET组明显小;病理组织化学观察表明ET+AG组兔肺内炎症细胞渗出较少,肺水肿较ET组减轻。结论:AG可改善兔ALI血流动力学,减轻肺损伤。     

内毒素肺损伤时肺淋巴液中淋巴细胞化学发光的变化

中性粒细胞活化在急性肺损伤中的作用受到广泛重视，但淋巴细胞与肺损伤的关系则报道较少。本文应用内毒素肺损伤和化学发光技术，观察肺淋巴液中的淋巴细胞的活性，以探讨淋巴细胞在肺损伤中的可能作用。方法（一）绵羊肺淋巴瘘的制备和肺损伤模型复制：健康无孕雌性绵羊...     

内毒素和过氧化氢对肺血管内皮细胞的损伤作用

观察内毒素、中性粒细胞弹性蛋白酶、中性粒细胞组织蛋白酶Ｇ和过氧化氢对肺血管内皮细胞释放５１Ｃｒ的影响，结果表明，体外培养的肺动脉内皮细胞经５１Ｃｒ标记后，内毒素和Ｈ２Ｏ２可使内皮细胞释放５１Ｃｒ明显增多；中性粒细胞弹性蛋白酶和组织蛋白酶的作用不明显。内毒素和Ｈ２Ｏ２增加内皮细胞内之５１Ｃｒ的释放，表明内皮细胞受到了损伤。     

心脉灵对内毒素血症大鼠肺血管通透性及肺组织脂质过氧化物…

心脉灵以中医四逆汤为基础经剂型变化而得，具有回阳救逆之功效。以往的实验提示心脉灵有良好的抗内毒素休克作用。本实验用异硫氰酸荧光素右旋糖酐，分子量４０，０００（ＦＤ－４０Ｓ）观察发现：内毒素血症大鼠在给内毒素（ＥＴ）ｉ．ｖ后，１、３ｈ血浆荧光素下降率比对照组明显增加，支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）中荧光素增长率相应地明显升高，同时发现血浆及肺组织脂质过氧化物也显著增高。事先给予心脉灵（ＸＭＬ），血浆荧光     

利多卡因对兔内毒素性肺损伤晚期的治疗效应

目的：观察利多卡因对兔注射内毒素２４ｈ后的治疗效应。方法：用日本大耳白兔随机分为对照组、大肠杆菌内毒素（ＥＴ）组和ＥＴ注入后２４ｈ＋利多卡因组。用酶联免疫法和硫代巴比妥酸反应法测量血浆和支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＴＮＦα和ＭＤＡ含量。结果：免静脉ＥＴ后２４ｈ再静注利多卡因,于静注利多卡因后３、５ｈ,血浆和ＢＡＬＦ中ＴＮＦα和ＭＤＡ含量显著降低,血中性粒细胞数目明显回升。肺湿干重比值和ＢＡＬＦ中     

用cDNA微阵列研究内毒素休克小鼠肺组织基因表达谱的改变

目的利用cDNA微阵列研究小鼠在内毒素休克早期及晚期肺组织基因表达谱(Gene expression profile)的改变,从基因组水平阐明内毒素休克的发生机制,并试图发现某些未知的内毒素休克相关基因.方法BALB/c小鼠经腹腔注射大肠杆菌内毒素0111B4(15mg/kg)2h及20h后摘取心、肝、肺、肾、脑等组织,Trizol提取总RNA,经反转录及a-32P-dATP掺入合成cDNA探针,与Clontech公司产含1176个基因的cDNA微阵列膜进行杂交并放射自显影,X光胶片经透射扫描仪扫描后用本科室开发的密度分析软件分析微阵列中各点阵杂交密度.结果1.注射内毒素后小鼠死亡率为59%,其中44%在24h内死亡.2.内毒素处理2h小鼠肺组织有128个基因表达明显上调(上调＞10倍者33个,5-10倍者24个,2-5倍者71个),并有4个基因表达明显下调.3.内毒素处理20h小鼠肺组织有51个基因表达明显上调(上调＞10倍者16个,5-10倍者7个,2-5倍者28个),并有21个基因表达明显下调.4.内毒素处理20h与处理2h小鼠肺组织相比有13个基因表达明显上调(上调5-l0倍者1个,上调2-5倍者12个),有105个基因表达明显下调.5.在内毒素处理2h表达明显上调的128个基因中,内毒素处理20h后有93个明显恢复或下调;有36个仍然上调.6.内毒素处理2h表达明显下调的4个基因中,内毒素处理20h后有2个明显恢复或上调;有2个仍然下调.7.为证实cDNA微阵列分析结果的可靠性,从休克20h表达增加的基因中选出4个进行RT-PCR检测,发现检测结果与cDNA微阵列分析结果相符.讨论内毒素休克的发病机制十分复杂,涉及多种组织、细胞的激活及大量炎症介质的表达.以往的研究常限于测定单个或几个炎症介质的表达或分析单一的细胞内信号转导途径的作用,忽略了多种炎症介质及信号传导途径的同时存在及相互作用,难以全面揭示内毒素休克的分子机制.本研究采用cDNA微阵列技术,首次发现内毒素休克2h有128个基因表达上调,表明内毒素休克早期是基因表达的活跃期,这些基因改变可能启动和维持了后续的病理生理变化.在休克20h有51个基因表达上调及21个基因下调,这些基因表达的变化可能是内毒素休克转入不可逆期的分子基础.目前本室正对上述基因表达变化的意义及内毒素休克小鼠其它组织中基因表达的改变做进一步的分析.本研究有助于从基因组水平阐明内毒素休克的分子机制,可能为进一步探讨内毒素休克的干预措施提供实验依据.     

心脉灵对内毒素血症大鼠肺血管通透性及肺组织脂质过氧化物的影响

心脉灵以中医四逆汤为基础经剂型变化而得，具有回阳救逆之功效。以往的实验提示心脉灵有良好的抗内毒素休克作用。本实验用异硫氰酸荧光素右旋糖酐，分子量４０，０００（ＦＤ－４０Ｓ）观察发现：内毒素血症大鼠在给内毒素（ＥＴ）ｉ．ｖ后，１、３ｈ血浆荧光素下降率比对照组明显增加，支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）中荧光素增长率相应地明显升高，同时发现血浆及肺组织脂质过氧化物也显著增高。事先给予心脉灵（ＸＭＬ），血浆荧光素下降曲线明显抬高，ＢＡＬ中荧光素上升曲线显著下移，血浆及肺组织脂质过氧化物也明显降低。提示内毒素血症大鼠肺血管通透性增加与脂质过氧化的增加有密切的关系，而心脉灵可能抑制肺脂质过氧化物的产生，从而改善了肺血管通透性。     

白细胞介素8和一氧化氮在家兔内毒素性急性肺损伤中的作用

目的和方法：采用间隔２４ｈ两次注射大肠杆菌内毒素（ＥＴ）的方法，复制家兔内毒素性急性肺损伤模型，探讨肺损伤的机理。结果：ＥＴ组血浆、肺组织匀浆及支气肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素８（ＩＬ－８）、亚硝酸／硝酸根离子（ＮＯ２－／ＮＯ３－）水平显著增高（Ｐ＜００１），血浆补体Ｃ５ａ活性明显增高（Ｐ＜００１），ＢＡＬＦ内中性粒细胞明显增多，肺系数、肺水含量及通透指数升高。ＩＬ－８、ＮＯ２－／ＮＯ３－水平以及血清和ＢＡＬＦ中酸性磷酸酶活性变化高度相关。结论：ＩＬ－８、一氧化氮（ＮＯ）参与内毒素性急性肺损伤，而ＩＬ－８是造成肺损伤的重要中间环节。     

牛珀至宝微丸对内毒素休克肺组织核转录因子-κB表达的调控

目的观察牛珀至宝微丸对内毒素休克肺损伤时核转录因子-κB表达的影响。方法静脉注射内毒素(LPS)1.5mg/kg、腹腔注射D-氨基半乳糖(D-GalN)100mg/kg造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸作预治疗处理,免疫组化方法检测NF-κB在肺组织内的表达。结果LPS组阳性表达部位在细胞核,牛珀至宝微丸组表达部位主要在细胞质。牛珀至宝微丸降低NF-κB表达,肺损伤减轻。结论证实牛珀至宝微丸能降低内毒素休克时肺组织NF-κB表达,改变其表达部位,提示牛珀至宝微丸对内毒素休克造成的肺损伤的保护作用可能是通过调控肺组织NF-κB而产生的。     

Identification of endotoxin-positive cells in the rat lung during shock

Summary Following an intravenous administration into rats of a shock-inducing dose of endotoxin (2 mg) the lipopolysaccharide (LPS) was demonstrated immunohistochemically (light and electron microscopy) and determined quantitatively (radio-labelled LPS) in the lung tissue and in isolated alveolar macrophages. At different times after LPS injection morphological investigations of the pulmonary tissue and alveolar macrophages were carried out.One hour after endotoxin treatment 3% of the alveolar macrophages were already LPS-positive. The maximum extent of the immunoperoxidase reaction for endotoxin (100% cells involved) was observed on day 3, the vast majority (98%) of the alveolar macrophages being LPS-positive still on day 14. 0.9% of the injected radio-labelled LPS preparation was found to be associated with lung tissue on day 3. By this time 0.173 µg LPS/10⁶ alveolar macrophages was detected. During the time of ultrastructural investigation endotoxin appeared in the lung only within cells. By their high capacity for storing endotoxin and their numerical superiority the mononuclear phagocytes are the leading LPS-positive cells in the lung, although granulocytes, endothelial cells, and alveolar epithelial cells were sometimes also involved.The accumulation of a high percentage of activated macrophages in the lung seen in the late stage of shock could represent at least one of the main factors leading to damage of pulmonary tissue. The correlation between appearance of LPS-positive macrophages and histological signs of lung tissue injury in the present investigation is striking.     

产黑普氏菌内毒素脂多糖的免疫生物学活性研究

目的在体外细胞培养系统和小鼠模型中检测产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖对内源性细胞因子的介导活性。方法采用Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法和胸腺细胞增殖法测定内毒素脂多糖对肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ）、白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１,ＩＬ－１）的诱导活性以及局部皮肤斯氏反应（ＳＰＤ５０）。结果产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素可显著地诱导ＴＮＦ、ＣＳＦ和ＩＬ－１的产生,在一定剂量范围内呈剂量依赖型。并可导致家兔典型的皮肤局部斯氏反应。结论产黑普氏菌ＡＴＣＣ２５８４５内毒素脂多糖在动物模型中具有显著的炎症性细胞因子诱导活性     

T cell-derived TNF down-regulates acute airway response to endotoxin

Acute and chronic airway inflammations caused by environmental agents including endotoxin represent an increasing health problem. Local TNF production may contribute to lung dysfunction and inflammation, although pulmonary neutrophil recruitment occurs in the absence of TNF. First, we demonstrate that membrane-bound TNF is sufficient to mediate the inflammatory responses to lipopolysaccharide (LPS). Secondly, using cell type-specific TNF-deficient mice we show that TNF derived from either macrophage/neutrophil (M/N) or T lymphocytes have differential effects on LPS-induced respiratory dysfunction (enhanced respiratory pause, Penh) and pulmonary neutrophil recruitment. While Penh, vascular leak, neutrophil recruitment, TNF, and thymus- and activation-regulated chemokine/CCL17 (TARC) expression in the lung were reduced in M/N-deficient mice, T cell-specific TNF-deficient mice displayed augmented Penh, vascular leak, neutrophil influx, increased CD11c+ cells and expression of TNF, TARC and murine CXC chemokines KC/CXCL1 in the lung. In conclusion, inactivation of TNF in either M/N or T cells has differential effects on LPS-induced lung disease, suggesting that selective deletion of TNF in T cells may aggravate airway pathology.     

前列腺素E1对内毒素致家兔急性肺损伤的治疗效应

本实验以一次性静注大肠杆菌内毒方法复制家兔急性肺损伤模型，在实验过程中观察动物血压、血气变化及肺组织病理学改变，结果前列腺素Ｅ１治疗组轻于发病组，采用ＰＧＥ１治疗内毒素所致的急性损伤有一定疗法。