基于下丘脑-垂体-卵巢轴探讨藏药二十五味鬼臼丸对绝经后骨质疏松症大鼠的干预作用

目的基于下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA)探讨藏药二十五味鬼臼丸对去卵巢大鼠骨质疏松的影响。方法将40只SD雌性未孕大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、二十五味鬼臼丸组,每组10只。除假手术组仅摘取卵巢旁同样大小的脂肪块,其余3组大鼠均摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)大鼠模型。手术1周后开始给药处理,雌二醇组ig0.1mg/kg戊酸雌二醇,二十五味鬼臼丸组ig441mg/kg二十五味鬼臼丸,假手术组和模型组ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周后,ELISA法检测血清雌二醇、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)水平;RT-PCR检测下丘脑、垂体、左侧股骨远端雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)m RNA表达;免疫荧光染色法检测下丘脑、垂体和右侧股骨远端ERα、ERβ蛋白表达;HE染色法观察大鼠右侧股骨远端组织形态变化;Micro-CT检测右侧股骨远端微结构的改变。结果藏药二十五味鬼臼丸能显著降低大鼠体内血清LH、FSH、GnRH水平(P0.05、0.01),并在HPOA轴中显著性上调下丘脑及垂体ERαm RNA及蛋白表达(P0.01),同时显著性上调股骨ERβm RNA及蛋白表达(P0.01),并能显著回调大鼠股骨密度及骨微结构参数(P0.01)。结论藏药二十五味鬼臼丸可有效防治PMOP,其机制可能与药物直接作用骨组织雌激素受体或作用HPOA轴靶器官相关雌激素受体后,通过改变体内性激素的水平间接调控骨代谢有关。     

功血宁对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响

目的 :观察功血宁对下丘脑 -垂体 -卵巢轴功能的影响。方法 :以未成年雌性大鼠为对象 ,采用放免方法检测功血宁大、小剂量组、阳性对照组和空白对照组大鼠血清 FSH、L H、E2 和 P水平 ;各组大鼠卵巢、子宫称重 ,进行组织形态学观察及卵泡成熟总数测定 ,并作比较。结果 :功血宁大剂量血清 FSH、L H、E2 水平显著增高 ,卵巢和子宫重量明显增重 ,卵泡成熟总数增加 ,组织形态学观察有明显改变。结论 :功血宁能提高大鼠生殖激素水平 ,改善卵巢功能 ,促进排卵。说明功血宁对下丘脑 -垂体 -卵巢轴功能有整体调节作用。     

痛经宁颗粒对痛经大鼠中枢及外周β-EP含量的影响

[目的]探讨痛经宁颗粒的镇痛机制及卵巢激素在原发性痛经中的发病机制.[方法]全部大鼠被随机分为正常对照组、模型对照组、西药对照组(给予阿司匹林)和中药痛经宁组.观察4组大鼠30、60 min扭体发生率;并以放免法检测4组动物血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、以及下丘脑、垂体、卵巢、子宫、血浆β-EP含量.[结果]痛经宁组扭体反应发生率明显低于模型组.E2水平与β-EP含量成负相关,P水平与β-EP含量成正相关,(P＜0.01).痛经宁组大鼠下丘脑、垂体、卵巢、子宫、血浆β-EP含量显著高于模型组和西药对照组(P＜0.01).[结论]痛经宁有明显抑制子宫痉挛,缓解子宫肌收缩,解痉镇痛作用;卵巢激素参与了原发性痛经的病理发生;中药痛经宁颗粒通过调节卵巢激素调节β-EP含量,显示了其中枢性、外周性镇痛作用的可能.     

痈经宁颗粒对痛经大鼠中枢及外周β-EP含量的影响

[目的]探讨痛经宁颗粒的镇痛机制及卵巢激素在原发性痛经中的发病机制。[方法]全部大鼠被随机分为正常对照组、模型对照组、西药对照组 (给予阿司匹林)和中药痛经宁组。观察4组大鼠30、60min扭体发生率 ;并以放免法检测4组动物血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、以及下丘脑、垂体、卵巢、子宫、血浆β-EP含量。[结果]痛经宁组扭体反应发生率明显低于模型组。E2 水平与β-EP含量成负相关 ,P水平与β-EP含量成正相关 ,(P<0.01)。痛经宁组大鼠下丘脑、垂体、卵巢、子宫、血浆β-EP含量显著高于模型组和西药对照组(P<0.01)。[结论]痛经宁有明显抑制子宫痉挛 ,缓解子宫肌收缩 ,解痉镇痛作用 ;卵巢激素参与了原发性痛经的病理发生 ;中药痛经宁颗粒通过调节卵巢激素调节β-EP含量 ,显示了其中枢性、外周性镇痛作用的可能。     

更年乐颗粒剂对12月龄大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的调节作用

目的:通过检测内分泌激素的水平,下丘脑雌激素受体(ER)表达,考察更年乐对下丘脑-垂体-卵巢轴(HPO)的调节作用。方法:采用12-15月龄SD大鼠,同时设青年鼠作对照,灌胃给药30 d后,放免法检测血清E2、P、Te、FSH、LH水平,免疫组化法检测下丘脑GnRH,垂体和下丘脑ER表达。结果:与更年组比,12月龄组可以升高12月龄大鼠血清中E2,P(P<0.05或P<0,01)水平,有降低LH水平的趋势(P>0.05),明显降低下丘脑GnRH的表达(P<0.05),上调下丘脑ER表达。结论:更年乐能改善因体内雌激素水平降低导致的下丘脑、垂体功能的相对亢进状态,上调下丘脑ER表达,增强雌激素效应,调节HPO轴的失调。     

中药复方对下丘脑-垂体-卵巢轴作用机理实验研究概况

目的：综述中药复方对下丘脑-垂体-卵巢轴的作用机理。方法：通过中药复方的实验研究，对下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节的影响进行综合分析。结果：中药复方可调节紊乱的植物神经功能、生殖内分泌系统和免疫功能，从而对女性神经内分泌免疫系统发挥双向调节作用。结论：脑（心）肾-冲任-胞宫轴与大脑皮层-下丘脑-垂体-卵巢轴相对应，为中医药治疗、研究妇科疾病提供理论依据。     

补肾健脾方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响

目的:观察补肾健脾方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响。方法:以未成年雌性大鼠为对象,采用放免法检测补肾健脾方高、中、低剂量组、阳性对照组和空白对照组大鼠血清FSH、LH、E2和P水平;各组大鼠卵巢、子宫称重,并作比较。结果:补肾健脾方组血清FSH、LH、E2、P水平显著增高,卵巢和子宫重量明显增重。结论:补肾健脾方能提高大鼠生殖激素水平,改善卵巢功能以促进排卵。说明本方对下丘脑-垂体-卵巢轴功能有整体调节作用。     

经前舒颗粒对经前期综合征肝气郁证大鼠下丘脑和海马雌激素受体α,β mRNA表达的影响

目的:研究中药复方经前舒颗粒对经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑和海马中雌激素受体α(ERα)和β(ERβ)mRNA表达的影响.方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气郁证大鼠模型,使用中药复方经前舒颗粒进行干预治疗,采用RT-PCR法检测大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达变化.结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达量高于正常组(P＜0.05);与模型组大鼠相比,经前舒颗粒给药组大鼠下丘脑和海马中ERα和ERβ mRNA表达量则显著降低(P＜0.05),与正常组无差异.结论:经前舒颗粒可下调下丘脑和海马中ERα和ERβmRNA表达水平,这可能是其治疗PMS肝气郁证的作用机制之一.     

针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的影响

目的：观察针刺对病经大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴（HPOA）的影响，并初步探讨其作用机制。方法：观察了针刺对痛经大鼠β-内啡肽（β-EP）、下丘脑激素（促性腺激素释放激素GnRH）、垂体激素（促性腺激素释放激素受体GnRH-R、卵泡刺激素FSH、黄体生成素LH）和卵巢激素（雌激素E2、雌激素受体ER、孕激素P及孕激素受体（PR）的影响。结果：针刺治疗后，β-EP、GnRH、GnRH—R、FSH、LH、E2、ER、P和PR的水平改变，因此针刺对痛经大鼠HPOA的有调节作用。结论：针刺对痛经大鼠HPOA的作用机制可能与针刺调节HPOA的性激素及其受体的表达有关。     

补肾调冲方对去卵巢大鼠性激素水平及下丘脑雌激素受体α、雌激素受体β mRNA表达的影响

[目的]探讨补肾调冲方对去卵巢大鼠血清性激素水平及下丘脑雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)mRNA表达的影响。[方法]以假手术组为对照,将去卵巢大鼠随机分为去卵巢空白组,补肾调冲方高、中、低剂量组,已烯雌酚组。采用放射免疫分析法测定血清雌二醇(E2)、促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)水平,采用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)检测下丘脑ERα、ERβmRNA表达。[结果]去卵巢大鼠血清FSH、LH水平升高,E2及下丘脑ERα、ERβmRNA水平降低,补肾调冲方大鼠血清E2有升高趋势,FSH有降低趋势,补肾调冲方能降低去卵巢大鼠血清LH水平,升高下丘脑ERα、βmRNA的表达。[结论]补肾调冲方在改善去卵巢大鼠性激素水平同时,可能通过影响ERα、ERβmRNA的表达,提高ER的生物效应,从而降低更年期综合征的发生。     

针刺对痛经大鼠神经-内分泌影响的机制初探

目的:探讨针刺对痛经大鼠下丘脑-垂体-卵巢功能活动的影响。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组、益母草膏组,每组10只,己烯雌酚灌胃12 d建立痛经模型。针刺组取"关元",双侧"地机"三阴交"穴,留针30 min;益母草膏组采用益母草膏(每日80 g/kg)灌胃治疗。两组均在灌服己烯雌酚的第5天开始治疗,每日1次,连续7 d。末次给予己烯雌酚1 h后,腹腔注射催产素,观察各组大鼠的扭体反应潜伏期和30 min内扭体数;放射免疫法检测血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平;RT-PCR检测各组大鼠下丘脑、卵巢促性腺激素释放激素(GnRH),垂体促性腺激素释放激素受体(GnRH-R),子宫雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)mRNA表达的差异。结果:①针刺组和益母草膏组的大鼠扭体次数明显低于模型组,潜伏期高于模型组(P<0.05);②针刺组和益母草膏组与模型组比较,FSH、LH、E2含量显著降低(P<0.05),P含量明显升高(P<0.05);③针刺组和益母草膏组下丘脑、卵巢GnRH,垂体GnRH-R,子宫ER mRNA表达水平均低于模型组(P<0.05),子宫PR mRNA表达水平高于模型组(P<0.05)。结论:针刺治疗原发性痛经的神经-内分泌机制可能与针刺调节大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴的性激素及其受体表达有关。     

“调更汤”对自然衰老雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴瘦素水平的影响

目的：观察中药调更汤对16～18月龄雌性大鼠生殖轴瘦素分布的影响．从而探明调更汤治疗围绝经期综合征的部分作用机理。方法：60只16-18月龄SD大鼠随机分为模型组和中药组,30只5～6月龄大鼠作为青年对照组．中药组予调更汤灌胃。每组动物再随机分为3批,分别于实验的第4、8、12周精确称重后处死,取下丘脑、垂体、卵巢组织测定瘦素含量及其受体mRNA表达,同时测定血清瘦素水平．结果：血清瘦素浓度模型组最高,16～18月龄SD大鼠下丘脑、垂体的瘦素含量均随月龄增加而减少．下丘脑、垂体、卵巢组织瘦素mRNA表达无明显差异。结论：中药调更汤治疗围绝经期综合征的部分作用机理可能在于改善周围组织瘦素抵抗．中枢瘦素浓度降低是衰老的标志之一。     

二丁二仙汤对去势反复尿路感染大鼠模型肾组织TGF—β1、α-SMA和雌激素受体表达的影响

摘要目的：基于去势反复尿路感染大鼠模型,观察中药二丁二仙汤对肾组织TGF—β1及α—SMA和雌激素受体表达的作用,从而探讨二丁二仙汤对去势反复尿路感染大鼠肾组织纤维化的作用机制。方法：采用卵巢次切术后膀胱内多次灌注大肠埃希氏茵制作反复尿路感染模型,建立大鼠去势后反复尿路感染动物模型。取47只雌性大鼠随机分组：生理组7只,去卵巢组10只,模型组10只,西药组（倍美力）10只,中药组（二丁二仙汤）10只共5组,ELISA法检测治疗后各组血清雌二醇水平,光镜下观察肾组织Masson染色,免疫组化方法检测肾组织TGF—β1和α—SMA表达,运用Realtime—PCR方法检测肾组织雌激素受体ERa和ERβ表达。结果：中药组血清雌激素水平表达明显高于西药组,与生理组持平;光镜下观察肾组织Masson染色,各组无明显纤维化变化;免疫组化检测发现,较去势组,模型组肾组织TGF-β1和α—SMA表达增多,中药组和西药组肾组织TGF—β1和α—SMA表达较模型组减少。运用RealTime—PCR法检测肾组织雌激素受体mRNA表达发现,中药组ERβmRNA较模型组下降。结论：二丁二仙汤能提高去势后反复尿路感染大鼠血清雌激素水平,下调肾组织ERβmRNA,抑制肾纤维化指标TGFβ1和α—SMA表达。表明中药二丁二仙汤可能通过上调雌激素水平及下调肾组织局部雌激素受体表达,从而抑制肾组织纤维化。     

针刺对佐剂性关节炎模型大鼠迟发期不同组织β-内啡肽影响的实验观察

目的:旨在通过观察针刺对AA模型大鼠淋巴结、下丘脑、垂体不同组织中β-内啡肽水平变化的影响及其作用规律,探明大鼠免疫功能失调状态下β-内啡肽水平变化的特点,以揭示针刺免疫调控的机理。方法:以佐剂性关节炎模型作为研究对象,电针刺激任脉六穴及关元穴,采用放免法测定β-内啡肽水平。结果:与正常组比较,AA模型组淋巴结β-内啡肽含量呈升高趋势,无显著性差异;AA模型组垂体、下丘脑β-内啡肽均升高,呈显著性差异。与AA模型组比较,AA六穴组淋巴结β-内啡肽含量无明显变化,AA关元组β-内啡肽含量明显升高,呈显著性差异;AA六穴组和AA关元组垂体、下丘脑β-内啡肽含量均降低,除关元组下丘脑呈显著性差异,其他组无显著性差异。结论:(1)针刺能降低AA模型组大鼠垂体、下丘脑β-内啡肽含量,对机体的免疫功能进行调节;(2)关元穴的作用明显。     

疏肝益肾方剂对子宫内膜癌Ishikawa细胞株的作用研究

目的:研究疏肝益肾方剂对体外Ishikawa细胞的作用及意义.方法:采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益.肾方剂血清(含药血清组),并体外作用Ishikawa细胞,同时设正常细胞组(阴性对照组)、大鼠阴性血清对照组(阴性血清组)、顺铂组(阳性对照组)和疏肝益.肾方剂联合顺铂组(联合用药组),MTT检测各组对Ishikawa细胞株的抑制率、RT-PCR检测各组雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)、雌激素受体β(estrogen:recepto βERβ)的转录水平.结果:MTT结果显示含药血清组、联合用药组与阴性对照相比均对Ishikawa细胞株有抑制作用(P＜0.05),而与阳性对照组相比无统计学差异.RT-PCR结果显示含药血清组与阴性对照相比可轻微升高Ishikawa细胞株中ER卢的转录水平,对ERα的转录水平无明显影响;联合用药组则降低ERα的转录水平(P＜0.05)、降低ERβ作用不明显;而阳性对照组降低ERα,ERβ作用均显著(P＜0.05).结论:中药疏肝益肾方剂对体外Ishikawa细胞株有抑制作用,并轻微提升ERβ的表达,但几乎不影响ERα的表达.     

壮医药线点灸对脾虚大鼠垂体、下丘脑、胃、肠生长抑素和β-内啡肽的影响

目的观察壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠垂体、下丘脑、胃、肠生长抑素(somatostatin,SS)和β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)的影响,并探讨其可能的作用机制。方法用耗气破气加饥饱失常法建立大鼠实验性脾虚模型,通过放射免疫分析法检测壮医药线点灸治疗大鼠前后脑垂体、下丘脑、外周血、胃、肠组织中SS和β-EP的含量,并设立空线点灸对照组、中药四君子汤治疗对照组、模型自然恢复对照组及正常健康对照组,对比分析各组治疗前后的变化。结果脾虚大鼠脑垂体、血、胃、肠组织中的SS含量明显高于同期正常健康对照(P<0.01),而下丘脑的SS含量则明显低于同期正常健康对照(P<0.01);胃、肠组织中的β-EP含量明显高于同期正常健康对照(P<0.01),而垂体、下丘脑和血浆中的β-EP含量明显低于同期正常健康对照(P<0.01)。壮医药线点灸治疗后,脑垂体、血、胃、肠组织中的SS含量下降,下丘脑的SS含量上升;胃、肠β-EP含量下降,垂体、下丘脑和血浆β-EP含量上升,且治疗后与模型组比较差异有显著性(P<0.05);与中药治疗组比较差异无显著性(P>0.05)。结论壮医药线点灸对实验性脾虚大鼠脑垂体、下丘脑、胃、肠SS和β-EP有双向调整作用。     

更年健对老年雌性大鼠下丘脑、垂体和卵巢雌激素受体mRNA的影响

目的:观察中药复方更年健对老年雌性大鼠下丘脑、垂体和卵巢雌激受体(ER)和 ER mRNA 的影响。方法:建立自然衰老的雌性大鼠模型,用放射配体结合分析法检测 ER,用 Norther blot 分析 ER mRNA 的改变。结果:雌性大鼠性减退期下丘脑,垂体和卵巢ER 和 ER mRNA 水平随血清雌二醇(E_2)水平的下降较性成熟期显著下降,而更年健则使下降了的 ER 和 ER mRNA 水平明显提高。结论:本结果提示更年健在临床上治疗更年期综合征的机理可能是在不改变 E_2水平的情况下,提高下丘脑、垂体和卵巢 ER 和 ER mRNA 水平,从而增强雌激素的生物学效应,改善临床症状和体征。     

经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑ERα、ERβ mRNA表达的研究

目的：检测经前期综合征（PMS）肝气逆证模型大鼠下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达,观察经前平颗粒对PMS肝气逆证的干预作用。方法：以情志刺激多因素法复制PMS肝气逆大鼠模型,以经前平颗粒干预治疗,采用RT-PCR法检测模型大鼠下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达。结果：与正常组相比,PMS肝气逆证组下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达降低,PMS肝气逆给药组下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达无差异。结论：肝气逆证模型下丘脑ERαmRNA、ERβmRNA表达显著性升高,经前平颗粒对PMS肝气逆证的异常变化具有调节作用。     

"肾藏精生髓主骨"藏象理论研究——肾虚骨质疏松症大鼠转化生长因子相关基因及蛋白表达的异常

目的:依据中医学"肾藏精生髓主骨"、骨的生长发育与肾精-脑髓-骨髓密切相关的藏象理论,研究肾虚骨质疏松症大鼠的相关病理机制以及补肾益髓中药调控作用机制.方法:采用去卵巢造模方法建立肾虚骨质疏松症大鼠模型,随机分为正常组、假手术组、模型空白组、补肾益髓中药低剂量组、补肾益髓中药高剂量组、补脾中药对照组、盖天力钙片对照组、骨疏康颗粒对照组;给予补肾益髓中药干预12w;以双能X线骨密度分析仪进行骨密度(BMD)检测,以RT-PCR法检测大鼠股骨、肾、下丘脑组织TGF-β1、TIEG1mRNA的表达,以Western Blot法检测股骨、肾、下丘脑组织TGF-β1、TIEG1蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型空白组骨、肾组织TGF-β1、TIEG1mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.01),而下丘脑组织明显升高(P＜0.01).用药12w后,与模型空白组比较,补肾益髓中药高剂量组可明显提高股骨头骨密度,明显优于补脾组中药(P＜0.01).补肾益髓高、低剂量组、盖天力组、骨疏康组可明显上调骨、肾组织TGF-β1 mRNA、蛋白以及TIEG1mRNA及蛋白表达水平(P＜0.01;P＜0.05);补肾益髓高、低剂量组、补脾组、盖天力组、骨疏康组均可明显下调下丘脑组织TGF-β1 mRNA、蛋白以及TIEG1mRNA及蛋白表达的表达水平(P＜0.01,P＜0.05).结论:肾虚骨质疏松症病理机制之一在于TGF-β1与TIEG1mRNA及蛋白表达异常,并可能存在下丘脑-肾-骨的反馈调节机制,揭示骨的生长发育与肾精-脑髓-骨髓密切相关的部分生物学依据;补肾益髓中药可以有效地防治该病症,对下丘脑-肾-骨反馈机制具有明显的调控作用,从而阐明中医学"肾藏精生髓主骨"藏象理论对临床实践的指导意义.     

益肾更宁合剂对围绝经期大鼠血清E_2、FSH及卵巢ER影响的研究

目的:探讨益肾更宁合剂治疗围绝经期综合征的作用机理。方法:选取15～18月龄SPF级雌性SD大鼠为围绝经期大鼠,分为5组,模型组、尼尔雌醇组、益肾更宁合剂高、中、低剂量组。另取4～6月龄SD雌性大鼠为青年对照组。观察药物对各组大鼠血清E2(雌二醇)、FSH(卵泡刺激素)及卵巢ER(雌激素受体)的影响。结果:益肾更宁合剂能够显著升高实验大鼠血清E2含量(P0.01),明显降低大鼠血清FSH含量(P0.01);益肾更宁合剂组ER水平显著升高(P0.01、P0.05)。结论:益肾更宁合剂治疗围绝经期综合证的作用机制主要是调节垂体、卵巢内分泌功能及增强卵巢雌激素效应。