卡马西平对离体蛙心心功能的影响

目的:观察卡马西平对离体蛙心心肌收缩力和心率的影响及其初步机制。方法:根据斯氏蛙心插管方法,蛙心插管内液体恒定体积为1ml,以卡马西平溶液100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为10.58μmol·L~(-1)、21.16μmol·L~(-1)、42.32μmol·L~(-1),采用BL-420生物机能实验系统记录第2分钟内离体蛙心心率、心力峰峰值、心肌平均收缩力的变化;以乙酰胆碱100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为1mg·L~(-1)、以艾司洛尔100μl对离体蛙心进行一次加药灌流,使其终浓度为10 mg·L~(-1)、以乙酰胆碱与卡马西平溶液各50μl同时灌流离体蛙心,使乙酰胆碱和卡马西平终浓度分别为1mg·L~(-1)和21.16μmol·L~(-1)1、以艾司洛尔与卡马西平溶液各50μl同时灌流离体蛙心,使艾司洛尔和卡马西平终浓度分别为10 mg·L~(-1)和21.16μmol·L~(-1),记录第2分钟内离体蛙心心力峰峰值的变化。结果:10.58μmol·L~(-1)、21.16μmol·L~(-1)、42.32μmol·L~(-1)浓度的卡马西平溶液对蛙心心率无影响,但是可以增强离体蛙心心肌自发性收缩的心力峰峰值和平均收缩力(P0.01),且具有一定浓度依赖性;21.16μmol·L~(-1)卡马西平可明显拮抗乙酰胆碱抑制蛙心心肌收缩峰峰值的作用(P0.01),同时也可明显拮抗艾司洛尔抑制蛙心心肌收缩峰峰值的作用(P0.01)。结论:卡马西平可以明显增强心肌收缩力,其机制可能与其兴奋β1受体、阻断M2受体有关。     

不同浓度没食子儿茶素没食子酸酯对离体蟾蜍心脏功能的影响

目的:观察不同浓度没食子儿茶素没食子酸脂(Gollatecatechin gallate,GCG)对离体蟾蜍心脏功能的影响。方法:采用斯氏蛙心灌流法制备离体蛙心标本,分为4组,分别用任氏液(川北医学院机能中心配制)和以任氏液为溶剂配制的0.002mg·ml~(-1)、0.02mg·ml~(-1)、0.2mg·ml~(-1)浓度GCG溶液对离体蟾蜍心脏进行灌流,采用BL-420生物机能实验系统记录心率(频率)和心肌收缩力(峰值)的变化。结果:与对照组比较,离体蟾蜍心脏心率明显增加(P0.05,P0.01);心肌收缩力随着GCG溶液灌注浓度的增加明显下降(P0.05,P0.01)。结论:GCG溶液对离体蟾蜍心功能有明显影响。     

LPS诱导HUVEC细胞凋亡最适浓度与时间选择

目的：探讨脂多糖诱导HUVEC细胞凋亡的最适浓度和时间。方法：体外培养人脐静脉血管内皮细胞株（HU—VEC）,将脂多糖（LPS）分为100、10、1、10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5μg·ml^-18个浓度,分别刺激0．5、1、2、6、12、24h后,采用CCK-8法观察细胞活力,荧光显微镜观察Hochest33342／PI双染后细胞形态。结果：同阴性对照组比较,药物浓度≥10^-2μg·ml^-1刺激24h均可引起细胞活力明显下降（P〈0．05）。100μg·ml^-1刺激1h,10μg·ml^-1与1μg·ml^-1刺激6h可引起HUVEC细胞活力下降,但12h与24hHUVEC细胞活力下降更明显（P〈O．05）,10^-1μg·ml^-1刺激12h可引起HUVEC细胞活力下降（P〈0．05）。Hochest33342／PI双染可见明显核浓缩和凋亡小体的产生,甚至出现死亡现象。结论：LPS刺激后引起HUVEC细胞活力下降呈时间与剂量依赖性,综合时间与剂量考虑,10^-1μg·ml^-1刺激12h或24h与10^-2μg·ml^-1刺激24h可致理想的HUVEC细胞凋亡模型。     

法半夏对离体蟾蜍心功能的研究

目的:观察法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏的心率和心肌收缩力的影响。方法:根据斯氏蛙心插管的方法,用0.033g·ml~(-1)、0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心脏灌流,采用BL-420生物实验系统记录心率和心肌收缩力的变化。结果:灌注0.033g·ml~(-1)的法半夏悬浊液对离体蟾蜍心的收缩力和心率影响不大;分别灌注0.067g·ml~(-1)、0.133g·ml~(-1)和0.267g·ml~(-1)的法半夏悬浊液,离体蟾蜍心收缩力明显增强,心率减慢(P0.05)。结论:法半夏可以增强离体蟾蜍心的收缩力,对其心率影响不大。     

同步监测蟾蜍心脏机械和电活动简便而有效的方法

目的: 通过灌流蟾蜍离体原位自发性搏动心脏,同步监测心输出量、心肌收缩力和心电图的变化,为研究心脏活动探索简便、有效和经济的实验方法。方法: 在离体原位心脏左主动脉和后腔静脉插管回流,记录心输出量;在心尖部连接张力换能器,肢体皮下插入针状电极,利用BL-420S生物机能实验系统监测心肌舒缩张力和标准肢体II导联心电图。通过灌注β受体激动药异丙肾上腺素和其拮抗药普萘洛尔,观察各参数的变化,证实该实验方法的可行性。结果: 在灌注任氏液的条件下,能够很好地监测到心脏舒缩张力和心输出量,以及心电图PR间期、QT间期、QRS波群时间和电压,适于分析二者之间的相关性。与给药前相比较,灌注10^-5~10^-4 g/L异丙肾上腺素显著增加了心输出量和心肌舒缩幅度,缩短了心电图PR间期,延长了QT间期(P<0.05, P<0.01)。灌注普萘洛尔能够明显拮抗异丙肾上腺素的强心作用。结论: 本实验方法适于同时监测蟾蜍心脏的收缩能力和心电图。     

荷叶水煎剂对家兔小肠平滑肌的收缩效应及机制研究

目的:观察不同浓度的荷叶水煎剂对离体家兔小肠平滑肌收缩效应的影响及机制.方法:选用体重为2.0～2.5 kg的健康家兔20只,取其小肠平滑肌,置于恒温灌流槽中,用37℃的台氏液灌流,待小肠收缩波形稳定后,依次用含有不同浓度(0.1,0.2,0.4,0.6及0.8 g?kg-1)荷叶水煎剂的灌流液作用于小肠平滑肌,观察小肠平滑肌的收缩张力及收缩频率;并用阿托品(5 g?kg-1)、乙酰胆碱(0.5 g?kg-1)、维拉帕米(5 g?kg-1)、多巴胺(2 g?kg-1)等药物探讨荷叶水煎剂引起小肠平滑肌收缩张力变化的机制.结果:灌流浓度在0.2 g?kg-1至1g?kg-1范围内,小肠平滑肌的收缩张力增强,并有剂量依赖性;而收缩节律无明显变化;且荷叶水煎剂可改善阿托品对小肠平滑肌收缩的抑制作用.结论:荷叶水煎剂可兴奋小肠平滑肌,其作用机制可能主要与兴奋小肠平滑肌M受体有关.     

生鱼胆汁对离体蟾蜍心脏功能的影响

目的：观察不同浓度的生鱼胆汁对蟾蜍离体心脏心率和收缩力的影响。方法：采用离体蟾蜍心脏灌流,取生鱼胆汁1m1,用任氏液分别稀释20、40、80及160倍,利用BL-410智能生物信号系统记录不同浓度的生鱼胆胆汁对离体蟾蜍收缩力和心率的影响。结果：不同浓度生鱼胆汁均可显著减少离体蟾蜍心脏心率（P〈0．01）,具有统计学意义,尤其稀释20倍时,心率几乎为零。同时,当稀释浓度小于40倍时,生鱼胆汁也可相应地降低其心肌收缩力（P〈0．05）。结论：生鱼胆汁溶液对离体蟾蜍心脏功能有抑制作用,具有剂量依赖性。     

参附注射液对离体乳头肌收缩力的作用

目的：探讨参附注射液对心脏舒缩功能的影响。方法：采用了豚鼠立体乳头肌电刺激试验，观察参附注射液对心肌收缩力的作用和药物对心肌细胞动作电位的影响。结果：参附注射液在一定浓度下能够增加离体乳头肌的收缩力．降低心肌细胞胞内静息电位的绝对值并且延长动作电位第3期平台期的时间。结论：参附注射液能够提高心脏的兴奋性和自律性。     

普鲁托品对豚鼠离体心房生理特性的影响

目的:观察普鲁托品(protopine,Pro)对豚鼠离体心房生理特性的影响,并探讨其作用机制。方法:利用豚鼠离体心房测定其自动节律、收缩力和功能性不应期,并观察普鲁托品对正阶梯现象和静息后增强的影响。结果:测定右心房自动节律和收缩力作为药前对照,给予普鲁托品(0.1～300μmol·L~(-1))可浓度依赖性地明显抑制心房的自律性,但较低浓度时Pro对心房收缩力无明显影响,在较高浓度时(大于10μmol·L~(-1))才明显抑制右心房的收缩力。Pro 300μmol·L~(-1)时对上述两项指标原抑制率为65％±15％和79.56％±961％。Pro 50μmol·L~(-1)可使左心房的功能性不应期A     

红毛毡提取物体外抗肿瘤的实验研究

目的：探讨红毛毡提取物的体外抗癌作用。方法：用MTT法检测红毛毡提取物对13种肿瘤细胞株体外生长的抑制作用。结果：红毛毡提取物对所试肿瘤细胞株的体外生长均具有较强的抑制作用,其中对急性T细胞白血病细胞Jurkat、人肾癌细胞OS-RC-2、人慢性髓质白血病细胞K562、人肺癌细胞A549和人乳腺导管癌细胞MDA-MB-435s的作用强,半数抑制浓度（IC50）分别为9．25±3．68、10．75±2．40、10．90±3．74、11．21±3．07和12．66±1．19μg·ml^-1,其次是对人食管癌细胞Eca-109、人胰腺癌细胞PANC-1、人黑色素瘤细胞A375、人肝癌细胞QGY-7703和人胃癌细胞SGC-7901,半数抑制浓度（IC50）分别为14．36±2．26、15．36±6．73、15．48±1．98、17．21±10．32和19．01±5．95μg·ml^-1。结论：红毛毡提取物具有广谱抗肿瘤作用。     

积雪草苷通过抑制NF-κB核转移影响糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的：观察积雪草苷是否通过抑制核因子-κB（NF-κB）核转移而影响糖尿病大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖。方法：通过连续喂养高脂饮食8w后一次性腹腔注射链脲佐菌素40mg.kg^-1建立2型糖尿病大鼠模型,取模型成功大鼠胸主动脉中膜血管平滑肌细胞进行培养,倒置显微镜下观察细胞形态,SMA免疫组化染色鉴定细胞后给予40、80、160、320μg·ml^-1积雪草苷干预,计数法描绘血管平滑肌细胞生长曲线,共聚焦显微镜下观察积雪草苷对NF-κB核转移影响,CCK-8法测定积雪草苷IC50。结果：与正常组对比,糖尿病组VSMC生长速度快;同模型组比较,积雪草苷40μg.ml-1以上剂量组能明显抑制糖尿病VSMC中NF-κB从胞浆转移到胞核。积雪草苷抑制糖尿病血管平滑肌细胞增殖IC50为209.26μg·ml^-1。结论：积雪草苷抑制糖尿病VSMC增殖可能与NF-κB核转移有关。     

胰岛素促进体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖

目的：研究胰岛素对体外培养的小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响，探讨胰岛素的促增殖作用是否与浓度相关。方法：未成熟小鼠卵巢颗粒细胞原代培养，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定颗粒细胞增殖指数，观察不同浓度胰岛素对颗粒细胞增殖的影响。结果：与对照组相比，5ng·ml^-1。胰岛素对颗粒细胞没有促增殖作用（P〉0.05），10ng·ml^-1有促增殖作用（P〈0.05），100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1的促增殖作用更强（P〈0.01），100ng·ml^-1、1000ng·ml^-1作用无明显差异（P〉0.05）。结论：生理浓度的胰岛素能促进颗粒细胞增殖，高浓度胰岛素促增殖作用更强，本实验为进一步研究高胰岛素血症在多囊卵巢综合症（PCOS）的卵泡发育停滞机制奠定基础。     

Hepcidin对小鼠脑组织中铁沉积及运动行为能力的影响

目的：观察hepcidin对小鼠脑组织铁沉积及运动行为能力的影响,并探讨其作用机制。方法：将雌雄各半的昆明小鼠随机分为7组,分别为空白对照组、铁负荷组（2mg·ml^-1、1mg·ml^-1、0.5mg·ml^-1）、hepcidin 5μg＋铁负荷组（2mg·ml^-1、1mg·ml^-1、0.5mg·ml^-1）,以不同浓度的右旋糖酐铁隔日大腿肌肉注射建立铁过载模型。8周后,血细胞计数仪检测血液中血红蛋白含量,全自动生化分析仪检测血清铁含量,试剂盒检测血清中转铁蛋白（Tf）和总铁结合力（TIBC）;原子吸收光谱法检测测定脑组织中铁的含量;ROS试剂盒检测脑组织中活性氧簇（Reactive oxygen species,ROS）含量;Morris水迷宫实验观察小鼠运动行为的改变。结果：与空白对照组比较,铁负荷组小鼠血清铁及血红蛋白含量明显增加,转铁蛋白（Tf）和总铁结合力（TIBC）明显减少,小脑、中脑和纹状体中铁含量和ROS明显升高,且呈剂量依赖性;Morris水迷宫实验结果显示,铁负荷组小鼠与空白对照组比较,平均逃逸时间明显增加,而靶象限活动时间明显下降（p〈0.05）;而hepcidin组均出现相反方向变化：hepcidin组小鼠平均逃逸时间明显下降,而靶象限活动时间明显增加。结论：铁过负荷对小鼠小脑、中脑和纹状体造成明显毒性损害,并引起脑的氧化应激,认知行为和空间记忆力下降;而hepcidin可抑制铁负荷引起的脑铁沉积和运动行为能力变化。     

重组人表皮细胞生长因子对人皮肤细胞增殖作用的研究

目的：观察重组人表皮生长因子（recombinant human epidermal growth factor，rhEGF）对人表皮细胞增殖的变化。方法：运用包皮环切术后收集培养角质细胞，不同浓度的重组人表皮细胞生长因子处理细胞，MTT法测细胞生长率；流式细胞仪检测细胞周期以及蛋白的表达。结果：5～10ng·ml^-1重组人表皮细胞生长因子可促进人表皮细胞细胞生长。流式细胞仪检测10ng·ml^-1重组人表皮细胞生长因子处理后细胞增殖明显，S和G2／M期细胞数明显增加。结论：重组人表皮细胞生长因子可促进细胞生长以及切口愈合。     

蛇床子提取液对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的:研究蛇床子提取液对蟾蜍离体坐骨神经动作电位传导阻滞作用。方法:观察3种浓度蛇床子提取液(1g·ml-1、0.5g·ml-1、0.2g·ml-1)对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的振幅和传导速度的影响。结果:3种浓度的蛇床子提取液均可使坐骨神经复合动作电位的振幅变小(P0.01),传导速度变慢(P0.01)并最终使坐骨神经动作电位消失。结论:蛇床子提取液能阻滞神经动作电位的传导。     

鲎试验测定注射用头孢雷特中细菌内毒素的方法学研究

目的：检测注射用头孢雷特中的细菌内毒素。方法：供试品干扰试验后,采用凝胶鲎试验对样品中细菌内毒素进行检测。结果：三批注射用头孢雷特浓度为2mg·ml^-1对细菌内毒素的检测无干扰作用,所测样品的头孢雷特细菌内毒素含量均小于0.5EU.mg-1。结论：所建立方法检查注射用头孢雷特中的细菌内毒素可行。     

PVC/PE液体复合硬片中HDI单体残留量考察

目的:检测样品中使用的粘合剂中HDI单体残留量。方法:样品提取后,与1,2-吡啶哌嗪溶液衍生化后采用反相高效液相色谱法测定。色谱柱:Waers Xterra(C184.6×250 mm5μm;流动相:乙腈-水-冰醋酸(58∶42∶0.15)用三乙胺调节pH至4.0;流速:0.9 ml.min-1;柱温:35℃;检测波长:310nm。结果:线性范围0~0.8208μg.ml-1(r=0.9998,n=7);精密度:0.4%;阴性回收率平均值:99.88%。结论:本方法专属性强、灵敏度高、准确、可靠、简便,可用于HDI残留量检测。     

表皮细胞生长因子对角质形成细胞体外增殖作用的研究

目的：观察重组人表皮生长因（Recombinant human epidermal growth factor,rhEGF）对人角质形成细胞的细胞周期以及促切口愈合作用。方法：运用包皮环切术后收集培养角质细胞,不同浓度的重组人表皮细胞生长因子处理细胞,MTT法、↑3HtdR掺入法测细胞生长率;流式细胞仪检测细胞周期。结果：体外实验表明5～100ng·ml^-1重组人表皮细胞生长因子可促进人角质形成细胞生长,其中浓度为10ng·ml^-1促进细胞生长作用最为显著。流式细胞仪检测10ng·ml^-1重组人表皮细胞生长因子处理后细胞增殖明显,S和G2／M期细胞数明显增加。结论：重组人表皮细胞生长因子可促进细胞生长。     

高效液相色谱法研究复尔康注射液在家兔体内的药动学特征

目的:建立一种快速的高效液相色谱法(HPLC)同时测定复尔康注射液中维A酸和甘草酸铵的血药浓度,利用3P97药动学软件计算药动学参数,并与维A酸注射液比较其药动学特征。方法:色谱柱:Dikma Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:分段变波长测定,0～23 min为252 nm,23～40 min为355nm;柱温:30℃;进样量:20μl。结果:复尔康注射液中维A酸和甘草酸铵及维A酸注射液在家兔体内均符合开放二室动力学模型特征。复尔康注射液中维A酸的t1/2α=10.61 min,t1/2β=99.44 min,K10=0.02 min-1,AUC=257.14μg.min.ml-1,CL=0.02mg.kg-1.min-1;维A酸注射液的t1/2α=8.61 min,t1/2β=54.05 min,K10=0.03 min-1,AUC=174.86μg.min.ml-1,CL=0.03 mg.kg-1.min-1;复尔康注射液中甘草酸铵的t1/2α=5.50 min,t1/2β=129.06 min,K10=0.02 min-1,AUC=28611.23μg.min.mL-1,CL=0.01 mg.kg-1.min-1。结论:HPLC简便、快速、精确,可同时检测复尔康注射液中维A酸和甘草酸铵的血药浓度和药动学参数。