SYBRGreen实时荧光RT-PCR检测痰脱落细胞中MAGE mRNA的表达

目的 探讨肺癌患者痰液中黑色素瘤抗原基因MAGE mRNA的表达及其对肺癌早期诊断的意义.方法 建立以MAGE基因A1-A6亚型通用引物进行SYBRGreen实时荧光RT-PCR的检测方法,并应用其检测14例肺癌病人和11例肺良性疾病病人痰液中MAGE基因mRNA的表达.结果 14例肺癌病人中6例检测到痰液脱落细胞中有MAGE基因mRNA表达,检出率42.9%(6/.14);在对照组肺良性病变者中未检测到MAGE基因mRNA的表达,两组差异有统计学意义(P＜0.05).另外,该法检出率大于痰液脱落细胞的细胞学检查检出率21.4%(3/14),但无统计学差异(P＞0.05).结论 MAGE A1-A6亚型基因的mRNA可作为检测肺癌患者痰液的肿瘤标记物,SYBRGreen实时荧光RT-PCR检测痰脱落细胞中MAGE mRNA可能有助于提高肺癌的检出率.     

应用MAGE A1～6普通引物的逆转录巢式聚合酶链反应技术检测肺癌Sanghoon Jheon, et al. Lung cancer

背景由于肺癌患者的死亡率仍在很高水平，开发敏感的检测方法仍是一项迫切的任务。本文作者设计了普通黑素瘤抗原基因(MAGE)引物用以同时检测出MAGE A1-6亚型。这些引物应用于经痰标本检测肺癌。方法这一研究包括了53例癌症患者组和3个非癌症组(193位健康人，     

纤维支气管镜活检病变组织标本和痰标本Survivin基因的检测对肺癌的诊断价值

目的明确纤维支气管镜(以下简称纤支镜)活检病变组织和痰标本中SurvivinmRNA的检测在肺癌诊断中的意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测41例肺癌手术标本癌组织、癌旁组织和9例良性肺疾病病变组织手术标本,80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检病变组织标本及所有(160例)患者痰标本SurvivinmRNA表达情况,并与病理组织学、刷检细胞学和痰细胞学检查结果比较。结果肺癌手术切除标本癌组织SurvivinmRNA的阳性率为70.7%(29/41),高于癌旁组织[17.1%(7/41)]和良性肺疾病组织(1/9),差异有统计学意义(χ2值分别为23.97和10.93,P均<0.05),而癌旁组织与肺良性疾病组织相比,差异无统计学意义(χ2=0.20,P>0.05);纤支镜活检肺癌组织标本SurvivinmRNA的阳性率为63.8%(51/80),高于良性肺疾病的13.3%(4/30,χ2值为22.18,P<0.05);肺癌患者癌组织SurvivinmRNA表达与否及表达水平与患者年龄、性别及肿瘤的病理分型、分级、部位及转移情况均无明显相关性(P均>0.05)。肺癌患者痰标本SurvivinmRNA的阳性率是59.5%(72/121),癌细胞的检出率是47.1%(57/121);痰Survivin mRNA检测联合痰细胞学检查诊断肺癌的敏感性为80.2%(97/121),高于单独痰细胞学及单独痰SurvivinmRNA检测的敏感性(P均<0.05)。手术标本、纤支镜活检标     

痰液脱落细胞k-ras基因检测对肺癌诊断的临床价值

目的通过痰脱落细胞k-ras基因点突变的检测探讨其对肺癌诊断的临床应用价值。方法应用多聚合酶链反应结合限制性长度片段多态性分析法(PCR-RFLP),检测50例肺癌(其中腺癌22例,鳞癌24例,小细胞癌4例)和48例肺部良性疾病患者痰标本中k-ras基因第12密码子的突变情况,检测结果进行对比分析。结果k-ras基因在肺癌组的突变检出率为24.00%(12/50),非肺癌组突变检出率为2.08%(1/48),二者有显著性差异(P<0.01)。其中腺癌突变率40.90%(9/22),鳞癌突变率12.50%(3/24),小细胞癌未检出突变。在肺癌早期(Ⅰ期和Ⅱ期)中,k-ras基因突变明显高于肺良性病变组,且肺癌组中,吸烟者k-ras基因突变率34.48%(10/29)高于非吸烟者9.52%(2/21),两者有统计学差异(P<0.05)。k-ras基因突变与年龄、性别和临床分期无明显关系。结论k-ras基因突变与肺癌的发生存在一定的相关性,痰液脱落细胞中R-ras基因检测突变有助于肺癌的临床诊断,对早期诊断亦有一定的意义。     

MAGE mRNA和LUNX mRNA在非小细胞肺癌淋巴结的表达

目的 了解黑色素瘤抗原基因(MAGE mRNA)和肺特质性X蛋白基因(LUNX mRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者纵膈淋巴结中的阳性率.方法 利用RT-PCR方法检测26例患者的123组淋巴结MAGE mRNA和LUNX mRNA的表达.结果 LUNX mRNA表达在NSCLC淋巴结微转移阳性率分别为42.3％ (52/123)和34.1％ (42/123),差异无显著性(P＞0.05).非MAGE肺癌患者淋巴结四种LUNX mRNA未见表达.常规病理检查和RT-PCR检测MAGE和LUNX mRNA在淋巴结微转移阳性表达率为30.1％ (37/123)和44.7％ (55/123),差异有显著性(P＜0.05).结论 MAGE mRNA是应用RT-PCR法检测NSCLC淋巴结微转移的较好的分子标志物,与LUNX mRNA联合检测可能有助于早期诊断肺癌淋巴结微转移.     

肺癌患者肺组织和痰标本p53基因突变检测及其临床意义

目的　探讨肺癌患者支气管肺活检组织和痰标本中p5 3基因突变检测在肺癌诊断中意义。方法　应用聚合酶链反应 (PCR) 单链多肽性 (SSCP) 银染法检测 12 0例肺癌和 40例良性肺疾病支气管肺活检组织和痰标本p5 3基因第 5～ 8外显子突变情况。结果　 60例肺癌患者癌组织、癌旁组织和对侧支气管组织p5 3基因突变检出率分别为 60 % (3 6/ 60 )、17% (10 / 60 )和 5 % (3 / 60 ) ,三组间比较差异有显著性 (P <0 .0 0 5 )。 2 0例良性肺疾病支气管肺组织p5 3基因突变检出率为 5 %。故活检组织p5 3基因突变检出肺癌的敏感性为 60 % ,特异性为 95 % ;另外 60例肺癌痰标本p5 3基因突变检出的敏感性为 43 % (2 6/ 60 ) ,特异性为 10 0 %。肺癌痰标本p5 3基因突变联合细胞学检测使肺癌的诊断率从单纯细胞学的 48% (2 9/ 60 )提高到 68% (41/ 60 )。结论　痰标本p5 3基因检测联合细胞学检查可提高肺癌的诊断率     

痰液中survivin、p53蛋白检测对肺癌的诊断价值

目的 探讨检测痰液中survivin、p53蛋白在肺癌诊断中的应用价值。方法 采用改良Saccomanno法收集40例肺癌患者、11例肺良性病变者和9名健康者痰液，用流式细胞技术检测痰液中survivin、p53蛋白的表达水平。结果 ①肺癌患者组痰液survivin、p53蛋白的表达量显著高于肺良性病变组和健康对照组（P〈0．05）；肺良性病变组和健康对照组痰液间无显著性差异（P〉0．05）；②痰液中p53蛋白的表达与吸烟指数有关。③痰液中survivin的表达与p53相关（r=0．575，P〈0．01）。结论 ①survivin、p53蛋白表达增高在肺癌的发生中起着重要作用。②痰或诱导痰中survivin、p53蛋白检测有可能为肺癌的诊断提供一个新的无创、安全的辅助方法。     

非小细胞肺癌患者癌组织、外周血中hnRNP A2/B1 mRNA的表达变化

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织与外周血中异质性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)mR-NA表达变化,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR法检测57例NSCLC患者(肺癌组)癌组织与外周血单个核细胞中的hnRNP A2/B1 mRNA,以30例肺部良性病变患者(良性组)为对照。结果肺癌组癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA分别为(0.82±0.49)、(0.69±0.48)μg/μL,良性组分别为(0.16±0.25)、(0.13±0.20)μg/μL;两组比较,P均<0.05。NSCLC患者TNM分期Ⅰ～Ⅱ期者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA分别为(0.68±0.45)、(0.57±0.47)μg/μL,均低于Ⅲ～Ⅳ期的(0.93±0.49)、(0.78±0.4)μg/μL,P均<0.05。NSCLC患者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA的表达呈正相关(r=0.941,P<0.05)。结论 NSCLC患者癌组织与外周血单个核细胞中hnRNP A2/B1 mRNA表达增加,且二者呈正相关关系;外周血单个核细胞hnRNP A2/BmRNA检测有助于NSCLC的诊断及病理分期。     

p16基因甲基化联合检测在肺癌诊断中的意义

目的 探讨检测外周血血浆、痰液、支气管肺泡灌洗液(BALF)、胸腔积液以及活检组织中p16基因启动子异常甲基化对肺癌诊断的临床意叉.方法 利用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测2007年4月至2008年5月柳州市第三人民医院收治的67例怀疑肺癌患者的外周血血浆、痰液、BALF、胸腔积液以及活检组织中p16基因的甲基化状态.结果 42例确诊肺癌患者p16基因异常甲基化阳性例数在胸腔积液、活检组织、BALF、血浆和痰液中依次为10例(71.4%)、26例(61.9%)、25例(59.5%)、22例(52.4%)和20例(47.6%),各个标本的阳性率差异无统计学意义(P>0.05);25例确诊良性病变患者中除在血液、活检标本和胸腔积液中各检测到1例异常甲基化外,其余标本中均未检测到p16基因的异常甲基化,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).联合不同标本检测p16基因甲基化能提高肺癌的诊断阳性率,以3～4个标本联合检测较好(P<0.05).结论 MSP方法检测外周血血浆、痰液、BALF、胸腔积液以及活检组织中p16基因启动子的甲基化状态,对肺癌具有辅助诊断价值;联合不同标本检测p16基因甲基化能提高肺癌诊断的敏感性.     

肿瘤-睾丸抗原MAGE-1、MAGE-3、SSX-2及NY-ESO-1在胃癌中的表达

目的　检测肿瘤 睾丸 (cancer testis ,CT)抗原MAGE 1、MAGE 3、NY ESO l及SSX 2基因mRNA在胃癌组织中的表达 ,探索其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法　用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法对胃癌患者癌组织、相应癌旁组织和对照组织(慢性胃炎和正常胃组织 )中的MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因mRNA进行检测 ,结合临床指标进行分析 ,随机选取RT PCR阳性扩增产物进行序列测定。结果　在在检测的 5 0例胃癌组织中 ,MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因mRNA阳性率分别是 48% (2 4/5 0 )、42 % % (2 1/5 0 )、11% (6/5 0 )和 8% (4 /5 0 ) ;多个CT抗原基因mRNA在胃癌中同时表达 ,至少表达一种CT抗原者达76% (3 8/5 0 ) ,表达两种或两种以上者为 40 % (2 0 /5 0 ) ,表达三种或三种以上者为 10 % (5 /5 0 ) ,同时表达四种者为 6% (3 /5 0 )。而相应的癌旁组织和对照组织中均未检测到四种目的基因的表达。DNA测序结果表明RT PCR产物确为这四种基因的目的片段。MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2基因的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、浸润深度和淋巴结转移等无显著相关性 (P >0 .0 5 )。结论　CT抗原 (MAGE 1、MAGE 3、NY ESO 1及SSX 2 )基因在胃癌组织中呈高特异表达 ,这使得以这些基因编码的蛋     

青少年高血压的研究进展

随着人们生活和行为方式的改变,高血压发病明显呈年轻化趋势。在青少年时期识别高血压病高危人群有助于早期进行有效干预和治疗,降低未来高血压的发生率及其严重性。现试从青少年高血压的诊断、发病因素、特点、治疗策略等方面的研究进展作一综述。     

Morbidity in cardiovascular diseases in immigrants in Sweden

INTRODUCTION: Although immigration to Sweden has increased in the last few decades, the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease in immigrants are unknown. The aim of the present study is to estimate whether place of birth affects the incidence rates of cardiovascular disease and coronary heart disease. MATERIAL AND METHODS: The study was designed as a follow-up study on morbidity in cardiovascular disease and coronary heart disease between 1 January 1997 and 31 December 1998, including three and a half million persons with age range 35-64 years, of whom 550 000 were born abroad, from the database MigMed consisting of the whole Swedish population. Incidence rates and relative risks were estimated by indirect standardization and a proportional hazard model. RESULTS: The age-adjusted risk of coronary heart disease was higher in most foreign-born groups than in Swedes. For example, in nine of 12 male groups, the relative risks varied between 1.1 and 2.2, and in seven of 12 female groups, the relative risks varied between 1.4 and 2.5. When also adjusting for level of education and employment status, the risks were still high, but on a lower level. CONCLUSIONS: Foreign-born people possess an over-risk of cardiovascular or coronary heart disease(CVD/CHD) compared with Swedish-born persons, also when level of education and employment status are taken into account.     

C·肉毒杀鼠素(冻干剂)应用研究

目的为研究C·肉毒杀鼠索对杀灭达乌尔黄鼠(简称黄鼠)的大面积应用情况和对家畜、家禽的毒害作用,进行了C·肉毒杀鼠素的应用研究.方法大面积投毒采用ES-2药饵撒播机[1],间隔约80m进行条投.羊、鸡采用直接灌胃.结果大面积应用的灭鼠率为83.72%.对羊、鸡最高剂量分别为500万MLD、150万MLD,均未出现中毒现象.结论 C·肉毒杀鼠素是较为理想的草原大面积杀灭黄鼠的理想、首选药物.     

Pulmonary sporotrichosis in Oklahoma in susceptibilities in vitro

Six cases of pulmonary sporotichosis were observed in 2 institutions in Oklahoma City, Okla. Three of the patients were treated with iodides with or without surgery. Although one patient required a second course of iodides, the patients have remained well after at least 34 months of follow-up. Three patients treated with amphotericin B, single course as well as multiple courses, and other antifungal agents (hydroxystilbamidine and miconazole) have all relapsed. These cases and a reviewed of more than 40 cases of pulmonary sporotrichosis susceptibilities of Sporothrix schenckii that we observed in vitro suggest that amphotericin B is not an effective agent for the treatment of pulmonary sporotrichosis. It is our opinion that the treatment of choice for pulmonary sporotrichosis is a supersaturated solution of potassium iodide. If the patient is allergic to the medication or fails to respond, then a combination of amphotericin B plus flucytosine may be tried.     

高龄老年高血压的临床研究进展

随着社会老龄化进程的加快,80岁以上高龄老人的绝对数量以及占总人口的比例均在增加,如何提高高龄老年高血压的防治水平备受关注。现试从高龄老年高血压的临床特点、治疗策略等方面的临床研究进展作一综述。